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Articles by Megan Wright in JoVE

 JoVE Neuroscience

피하 Muscarinic Antagonists의 관리 및 마우스에 Levator Auris의 Longus 근육의 트리플 - Immunostaining


JoVE 3124 9/08/2011

1Biology Department, Arcadia University, 2Shriners Hospitals Pediatric Research Center, Temple University School of Medicine, 3Shriners Hospitals Pediatric Research Center and Department of Anatomy and Cell Biology, Temple University School of Medicine

우리는 levator auris의 longus (랄) 젊은 성인 마우스의 근육을 muscarinic 신호의 억제제의 반복 관리와 wholemounts 년에 신경근육학 분기점의 후속 immunostaining (NMJs)에 대한 절차를 설명합니다. 랄 근육이 공개에 대해 고유한 장점이 있습니다

Other articles by Megan Wright on PubMed

농촌 지역 사회에서 환자의 우울에 대 한 배려: 일반 실무자의 태도, 요구 및 정신 건강 서비스와의 관계

요구와 농촌 Gps와 우울증된 환자에 게 치료 제공의 특히 지역 급성 정신 건강 서비스와 그들의 관계의 사례 조사.

당뇨병과 장애인된 포도 당 내성-환자는 우울증에 대 한 화면을 실현?

지역 사회 정신 건강 서비스와 GPs 간의 협업을 개선합니다

속눈썹 Neurotrophic 요인 터미널 돋 아 및 신경 근육 학 냅의 보상 Reinnervation 필요 하지 않습니다: CNTF Null 쥐의 재평가

시 냅 스 활동이 나 innervation 손실의 추가 하거나 신경-근육 연결을 복원 하는 그대로 모터 신경 터미널 돋 아 유도 한다. 속눈썹 科 인자 (CNTF) 및 터미널 Schwann 세포 (Tsc) 보상 과정의 분자 및 세포 중재자로 연루 되어. 우리가 궁금해 하는 경우 CNTF null 생쥐에서 터미널 돋 아 이전에 보고 된 부족 Tsc의 비정상적인 반응 때문 이었다. 이 위해, 우리는 신경 터미널 및 tSC 응답 CNTF null 쥐 elicited wildtype 마우스에 돋 아 광범위 한 실험 시스템을 사용 하 여 검사. 이전 보고서 반대로 우리는 null 생쥐에서 모터 신경 터미널 새싹 광범위 하 게 exogenously 적용된 CNTF 등 돋 아 자극을 라기보다는, 주요 응답에서 보 톨 리누스 독 소 elicited 마비 및 부분 denervation L4 척추 루트 transection에 의해 발견. 또한, 터미널 콩나물의 길이 성장 패턴 및 터미널 또는 꾸벅꾸벅 졸 기 콩나물에서 reinnervation 범위 wildtype 및 null 쥐에서 유사 했다. null 쥐에 있는 Tsc 자극에 반응 하 여 돋 아-, 터미널 콩나물 동행 또는 안내 reinnervation denervated 근육 섬유의 세포 프로세스를 구체화 했다. 마지막으로, CNTF 결 석 했다 그대로 wildtype 근육과 약간의 denervated 근육 반응 Tsc에서 발견 되었습니다 어떤 경우에 무부하 Tsc에. 따라서, CNTF 신경 터미널 돋 아의 유도, Tsc의 재 활성화 및 신경 손상 후 보상 reinnervation 필요 하지 않습니다. 우리는 diffusible 요인 보다는 주로 연락처 중재 메커니즘에 의해 유도 되어 성인 근육에 보상 돋 아 개념을 지원 하기 위해 이러한 결과 해석.

모터 신경 터미널 돋 아의 고유 패턴 보 톨 리누스 독 소 대 속눈썹 Neurotrophic 요인에 의해 유도

Diffusible 및 표면 바인딩된 분자 모터 신경 마비에 대 한 응답 단말기의 발 아를 유도 생각 된다. 여기 우리 속눈썹 科 인자 (CNTF)에 의해 유도 된 돋 아 돋 아 보 톨 리누스의 독 소 (BoTX)에 의해 유도 된에서 질적으로 다른 인지 보고 합니다. 우리는 먼저 CNTF의 피하 응용 levator auris longus 성인 쥐의 근육을 거의 모든 신경 터미널에서 돋 아 끝을 보여줍니다. 그러나 놀랍게도,, 대부분의 터미널 콩나물 종판 영역의 경계 내에서 유지 하 고 거의 CNTF 만성 관리 하는 경우에 extrasynaptically를 성장. 대조적으로, Botx에 의해 유도 된 터미널 콩나물 extrasynaptic 근육 표면을 따라 적극적으로 확장. 새싹 연신 율의 다양 한 패턴은 개시의 다양 한 패턴에 부분에서 기인: Botx을 이용한 콩나물 독점적으로 근육 섬유 막에 직접 apposition 터미널 분기의 경계를 따라 등장 CNTF 유도 콩나물 터미널 지점의 표면에서 무작위로 등장 하는 반면. CNTF 및 Botx와 결합 하 여 치료 터미널 콩나물의 작은 경우 intrasynaptic 성장에 매우 강력한 extraterminal 돋 아 생산 하 고 있습니다. 우리 마비 돋 아 diffusible 요인 보다는 주로 근육에 연결, 표면 바인딩된 분자에 의해 유도 보여주는으로 이러한 결과 해석 합니다. 우리의 연구 결과 수많은 후보 돋 아-inducers의 생리 적 역할을 정의 하 고 치료 혜택에 대 한 신경 손상 후 보상 돋 아 홍보에 유용할 수 있습니다.

소아 종 양 급성 치료에 걸쳐 높은 경고 약물 혼합의 표준 농도

소아 종 양 환자에서 약물 오류의 위험을 줄이기 위해, 보건 서비스 인증에 캐나다 위원회 승인 표준화 하 고 조직 내에서 사용할 수 있는 약물 농도의 제한.

복제 숙지 및 차동 응축의 여성 오리너구리 (Ornithorhynchus Anatinus)에 염색체 X

성 염색체의 진화에 공통 주제는 섹스 특정 염색체 (Y 또는 W)에 유전자의 대규모 손실 남성 (XY)와 여성 (XX) 남성 heterogametic 종 또는 ZZ와 여성 heterogametic 종에서 ZW 유전자 불균형을 선도. 다른 메커니즘 남녀 사이 X 부담 유전자의 노출량이이 차이 대 한 보상 진화 했다. Therian 포유류에서 X 염색체 중 하나는 비활성화, 반면 새 복용량 보상 부분 및 유전자 관련. Therian 포유류에서 비활성 X의 특징은 monoallelic 유전자 발현, 늦은 DNA 복제 및 chromatin 응축. 오리너구리 여성 및 5 명의 X 염색체와 남성에서 5 개의 Y 염색체 X 5 쌍 있다. 진 식 분석 더 버드 같은 부분 및 유전자 특정 복용량 보상 메커니즘을 제안합니다. 우리 조사 복제 타이밍 및 염색체 응축 여성 오리너구리에 염색체 X 5의 3. 우리의 데이터에 X(1), X(3) 및 X(5) X 특정 영역의 비동기 복제를 제안 하지만 크게 다른 응축 사이 homologues X(1) 또는 X(5) 그리고 X(3),에 대 한 표시. 우리는 함께 우리에 게 오리너구리에 복용량 보상의 가능한 메커니즘에 대 한 통찰력을 제공 하는 X에 연결 된 유전자의 최근 진 식 분석에 관하여 이러한 결과 논의.

건강과 질병에 있는 단백질 Myristoylation

N myristoylation 14 탄소 지방산, myristate, N-myristoyltransferase (NMT) 진핵생물에서 유비 쿼터 스와 필수 효소에 의해 catalysed 대상 단백질의 N-터미널 글리신 잔류물에의 첨부 파일입니다. NMT의 대상 단백질 많은 신호 통로의 중요 한 구성 요소 및 myristoylation는 일반적으로 적절 한 단백질 현지화 또는 생물 학적 기능을 위해 필수적 이다 막 바인딩 촉진. NMT는 곰 팡이 또는 기생 원생 동물에 의해 인간의 기회 감염에 유효한 치료 대상. 또한, NMT 발암, 특히 결 장 암에에서 연루 되어 종양 형성의 초기 단계에서의 upregulation에 대 한 증거입니다. 그러나, 모든 유기 체에 myristoylation의 연구는 최근까지 의해 방해 적 탐지에 대 한 기술 부족 및 myristoylated 단백질의 식별. 화학 및 생물학 NMT, N myristoylation의 소개 생활 시스템에서 중요 한 co-translational 수정이 공부의 과제 회의 화학 proteomic 기술 새로운 개발에 설명 하 고 있습니다.

뚜렷한 Muscarinic 아 세 틸 콜린 수용 체 하위 안정성 및 성장, 하지만 신경 근육 학 냅의 없는 보상가 소성에 기여

Muscarinic 아 세 틸 콜린 수용 체 (mAChRs) 변조 시 냅 스 기능, 하지만 그들은 시 냅 스에 영향 여부 구조 알 수 없는 남아 있다. 신경 근육 학 접합 (NMJs)에 mAChRs 축 삭 단말기 마비 또는 denervated 근육에서의 보상 돋 아에 연루 되어 있다. 여기 시 냅 스 안정과 성장을 보상 돋 아에 자신의 역할을 보여 주기 위해 마우스 Nmjs에서 mAChR 하위의 약리 및 유전자 억제 및 지역화 연구 사용. M(2) mAChRs M(1), M(3), 및 M(5) mAChRs Schwann 세포 또는 근육 섬유와 관련 된 반면 모터 뉴런에서 유일 하 게 참석 했다. 아트로 핀으로 모두 5 개의 mAChR 하위의 봉쇄 터미널 돋 아, 터미널 철수 근육 섬유 위축 등 뚜렷한 효과를 불러 일으켰다. 대조적으로, methoctramine, M(2/4) 선호 적 유도 터미널 돋 아 및 터미널 철수 하지만 아무 근육 섬유 위축 된다. 이 관찰과 일치, M(2)(-/-) 하지만 전혀 다른 mAChR 돌연변이 생쥐 전시 부모의 터미널 아 버의 광범위 한 손실이 동반 자발적인 돋 아. 그러나, 터미널 지점 부분 손실 돋 아 없이 일반적인 M(2)(-/-) Nmjs에도 때문에 원인 결함 수 듯 터미널 돋 아. 또한, 마비 또는 부분 denervation 후 보상 돋 아 M(2) 또는 mAChR 하위 유형이 다른 결핍 생쥐에서 정상적 이었다. 우리는 또한 많은 M(5)(-/-) NMJs 마우스 매우 작고 부모의 근육 섬유의 크기에 비례하여 감소 했다 발견. 이러한 연구 결과 축 삭 단말기는 M(2) 없이 안정 하며 근육 섬유 성장 M(5) 없이 결함이 표시. 하위 형식 관련 muscarinic 신호 소설 조정 활동에 종속적인 개발 및 노사 정 냅의 유지 보수에 대 한 의미를 제공 합니다.

주변 선구자 질병 발병 및 SOD1 쥐에서 과정의 사이트를 변경합니다

루 게 릭 병 측면 경화 증 (ALS), 초기 모터 신경 죽음 귀 착될 exogenous 시간적 트리거 이해 하지 않습니다. Overactivation 및 취약 한 모터 뉴런의 필연적인 가속된 손실 질병 개시의 한 이론 이다. 만성 말 초 신경 선구자에 대 한 응답에서 모터 뉴런의 취약점은 ALS의 SOD1(G93A) 쥐 모델에서 테스트 되었습니다. 주변 phrenic 신경 자극 하는 소설 vivo에서 기술 phrenic 모터 끝점에서 내부 횡 경 막 근육 전극 이식 통해 개발 되었다. 단축된 수명을 포함 한 SOD1(G93A) 쥐 가속된 질병 진행에서 만성 양측 phrenic 신경 선구자 서둘러 모터 신경 손실 및 denervation 횡 경 막 신경 근육 학 접합부에서 증가 했다. 선구자 또한 인접 한 forelimb 기능의 초점 하락 귀착되 었 다. 이 결과 그 주변 phrenic 신경 선구자 취약 척추 운동 뉴런의 세포 죽음 가속 시간적 및 해 부, 질병의 발병을 수정 하 고 병이 루 게 릭 병 모델에서 인접 한 해부학 적 영역에의 참여를이 끈다.

Bioorthogonal 화학 살아있는 세포에서 단백질 Cholesterylation의 태그를 추가 합니다

우리는 bioorthogonal 화학 살아있는 세포에 아 지 드와 post-translationally cholesterylated 단백질의 태그에 대 한 첫 번째 화학 조사 보고. 급속 한 멀티플렉스 형광 검출 및 선호도 라벨로 드 노 보 신분의 cholesterylated 단백질에 대 한 새로운 접근 방식을 열어 소닉 헤 지 호 그 단백질에 의해 exemplified 단백질 cholesterylation 수 있습니다.

다기능 단백질 효소 N 맨끝에 태그를 추가 하 고 정교 하 여 통해 라벨 화학을 클릭 합니다

선택적이 고 사이트 관련 효소 단백질의 라벨에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 메서드를 이용한 공격 단백질 공동-/ 포스트 번역 상 수정 myristoylation, 촉매 효소 myristoyl에 의해 N-터미널 글리신 myristic 산 (14-탄소 포화 지방산)의 전송으로 알려진-CoA:protein N myristoyltransferase (NMT). 대장균, 아니 내 생 NMT는 데 사용 됩니다 여과 및 대상 단백질의 coexpression 표시 될 myristic 산 '클릭할' 태그 베어링의 종합적 파생된 태그 유사 체의 in vivo N 단자 첨부 파일에 참여 하는. 이 태그는 '클릭' 화학, 예를 들어는 아 지 드를 통해 바이오 직교 결 찰을 받을 수 및 추가 사이트별 라벨 체 외에 대 한 핸들을 사용할 수 있는 기능 그룹입니다. 재조합 형 단백질의 in vivo N 터미널 태그에 대 한 프로토콜을 제공 하는 여기를 합성 및 단백질을 통해 라벨을 사용할 수 있는 다기능 시 약의 응용 화학 친 화력 정화 및 검출을 위한 형광을 클릭. 일반적인 N 맨끝 단백질 라벨, 뿐만 아니라 프로토콜 관심, 활동/선택도 NMTs 및 Nmts의 방사성 동위 원소 사용에의 지 하지 않고 간 종 반응성의 증거의 단백질의 네이티브 myristoylation에 대 한 증거를 제공 하 고 특정 사용 될 것 이다.

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