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In vivo Ca 2 + - Imaging von Pilzkörper Neuronen während olfaktorischen Lernen in der Honigbiene


JoVE 1353 8/18/2009

1Institut für Biologie - Neurobiologie, Freie Universität Berlin, 2Institut für Biologie - Neurobiologie, Free University Berlin - Freie Universitaet Berlin

Bienen können in einer appetitive olfaktorischen Lernparadigma (PER-Konditionierung) konditioniert werden. Mit Gerüche als Stimuli, haben wir ein Verfahren, bei welchem ​​Verhalten aufgezeichnet, während gleichzeitig Calcium Imaging wird verwendet, um Geruchs-evozierte Aktivität im Pilzkörper Neuronen zu messen ist

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Sensorische Repräsentation Und Lernen-bezogene Plastizität Im Pilz Körper Extrinsischen Rückmeldungen Neuronen Des Protocerebral Traktes

Gamma - Aminobuttersäure immunreaktivem Rückmeldungen Neuronen des Protocerebral Traktes sind ein wichtiger Bestandteil der Honigbiene-Pilz-Körper. Sie haben nachweislich unterliegen im Zusammenhang mit lernen Plastizität und Bereitstellung von vermeintlichen hemmenden Input Kenyon Zellen und den Pedunculus extrinsischen Neuron, PE1. Wir vermuten, die lernen-bezogene Modulation in diese Neuronen vermittelt wird, indem man die Menge der Hemmung von Rückmeldungen Neuronen bereitgestellt. Wir spielten Ca(2+) imaging Aufnahmen der Bevölkerungen der Neuronen des Protocerebral-Calycal-Trakt (PCT), der die Rüssel Erweiterung Reaktion steuert, während die Bienen in einem Vorabend olfaktorischen Paradigma konditioniert wurden und ihre Verhaltens-Antworten wurden mit Hilfe von elektromyographische Aufnahmen von M17, der Muskel quantifiziert. Die Ergebnisse bestätigen Funde aus elektrophysiologische Studien, die zeigen, dass PCT Neuronen auf Saccharose und Geruch Reize reagieren. Die Geruch-Antworten sind Konzentration abhängig. Geruch und Saccharose Antworten werden durch wiederholte Anregung Präsentationen moduliert. Darüber hinaus reagiert Tiere, die gelernt haben, Saccharose Belohnung einen Geruch zugeordnet zu den wiederholten Präsentationen von der belohnte Geruch mit weniger Depression als noch zu einer unbelohnt und einen Steuerelement-Geruch.

Heterogenität Und Dynamik Der Seitenlinie Afferente Innervation Während Der Entwicklung in Der Zebrabärbling (Danio Rerio)

Das Seitenlinienorgan-System der larvalen Zebrafisch entsteht als Modell eine Reihe von Themen in Neurobiologie, aus Haar Zellregeneration zu sensorischen Verarbeitung zu studieren. Jedoch ist trotz zahlreicher Studien, die detailliert die Musterung und die Entwicklung der Seitenlinie Neuromasts, wenig über die Organisation ihrer Verbindungen zu afferenten Neuronen und Zielen in das Hinterhirn bekannt. Wir fanden, dass Fische wachsen und Neuromasts vermehren sich über die Körperoberfläche, die Anzahl der afferenten Neuronen linear ansteigt. Die Anzahl der afferenten nervenstärkend bestimmte Neuromasts steigt im Laufe der Zeit, während es für andere Neuromasts verringert. Das Verhältnis der afferenten Neuronen im Neuromasts unterscheidet sich zwischen den Front- und Seitenzahnbereich Seitenlinienorgan-System, schlägt mögliche Unterschiede in Sensibilitätsschwelle oder räumlicher Auflösung. Ein einzelnes afferenten Neuron Kontakte regelmäßig eine Gruppe von Neuromasts, was darauf hindeutet, dass verschiedene afferente Neuronen Informationen zum rezeptiver Felder entlang den Körper vermitteln können. Wenn afferente Projektionen in das Hinterhirn verfolgt werden, wo eine deutliche Somatotopy zuvor beschrieben wurde, finden wir beanspruchen allgemeine Organisation fehlt bei der Mauthner-Zelle. Wir spekulieren, dass gerichtete Eingaben von der Seitenlinie in einem frühen Alter, weniger wichtig ist, während die Geschwindigkeit der Escape-Antwort von höchster Bedeutung ist und direktionale Antworten später in Entwicklung entstehen. Durch Quantifizierung der morphologische Verbindungen in das Seitenlinienorgan-System, bietet diese Studie eine detaillierte Grundlage zu verstehen, wie hydrodynamische Informationen verarbeitet und letztendlich in entsprechenden motorische Verhaltensweisen übersetzt. J. Komp. Neurol., 2011. © 2011 Wiley-Liss, Inc.

Langfristigen Speicher Und Antwort Verallgemeinerung in Pilz Körper Extrinsischen Neuronen in Der Honigbiene Apis Mellifera

Honigbienen erfahren Sie einen Geruch zuzuordnende Saccharose Belohnung unter Bedingungen, die es ermöglichen, die Überwachung der neuronalen Aktivität von imaging Ca(2+) Transienten in morphologisch identifizierten Neuronen. Hier berichten wir solche Aufnahmen von Pilz Körper extrinsischen Neuronen - gehören eine wiederkehrende Trakt verbinden der Ausgabe von Pilz Körper mit seiner Eingabe potenziell die hemmenden Feedback- und anderen extrinsischen Neuronen. Der Neurons Antworten zu den Gelehrten Geruch und zwei unbekanntes Gerüche wurden 24 h nach dem Lernen gemessen. Wir fanden, dass Kalzium Antworten zu den Gelehrten Geruch und ein Geruch, der stark mit ihm verallgemeinert wurde verglichen mit Antworten auf ein schwach generalisierte Steuerelement erweitert wurden. So spiegeln die physiologischen Reaktionen, die in diese extrinsischen Neuronen genau gemessen, was Verhalten beobachtet wird. Wir schließen, dass die aufgezeichneten wiederkehrenden Neuronen Informationen zurück zu Pilz Körper zu den Features von gelernten Geruch reizen feed. Anderen extrinsischen Neuronen können Informationen zum Gelehrten Gerüche auf verschiedene Hirnregionen signalisieren.

Physiologie Der Afferenten Neuronen in Larvalen Zebrafisch Bietet Einen Funktionellen Rahmen Für Seitenlinienorgan Somatotopy

Fische verlassen sich auf die Neuromasts ihres Systems Seitenlinienorgan erkennen Wasserstrom während Verhaltensweisen z. B. Räuber-Vermeidung und Lokalisierung zum Opfer. Während das Muster der Neuromast Entwicklung ein Thema ausführliche Forschung gewesen ist, verstehen wir die funktionellen Konsequenzen seiner Organisation noch nicht. Bisherige Arbeit zeigte Somatotopy in die hintere Seitenlinie, wobei afferente Neuronen, die mehr kaudale Neuromasts Kontakt mehr dorsal in das Hinterhirn als Projekt, die mehr Körperabschnitt Neuromasts (Gompel Et Al., 2001) zu kontaktieren. Wir spielten Patch Clamp Aufnahmen von afferenten Neuronen Kontakt Neuromasts in die hintere Seitenlinie der ästhetisierten, transgene larvalen Zebrabärbling (Danio Rerio) zeigen, dass größere Zellen früher geboren werden haben einen niedrigeren Eingangswiderstand, eine niedrigere spontane Auslösung bewerten und neigen dazu, mehrere Neuromasts liegt näher an den Schwanz, als kleinere Neuronen, die später geboren werden, einen höheren Eingangswiderstand haben kontaktieren, eine höhere spontane Auslösung bewerten und neigen dazu, die einzelnen Neuromasts zu kontaktieren. Wir schlagen vor, dass früh geborene Neuronen bereit sind, um große Reize in der Anfangsphase der Entwicklung zu erkennen. Später geborene Neuronen sind leichter angetriebene Feuer und somit empfindlicher auf lokalen, schwächere Ströme. Afferente Projektionen auf identifizierten Glutamat Regionen in das Hinterhirn veranlassen uns, einen neuen Mechanismus für Seitenlinienorgan Somatotopy vermuten. Wir zeigen, dass die afferente Fasern zugeordnete Tail Neuromasts auf stärkere Reize zu reagieren und sind so verschaltet, dorsal Hinterhirn Regionen zugeordnet Escape Mauthner-vermittelte Reaktionen und schnell, die Vermeidung schwimmen. Die Möglichkeit zum Fluss Reize verarbeiten unter Umgehung höhere Ordnung Gehirnzentren würde die Aufgabe der Verarbeitung erleichtern, wo Geschwindigkeit von entscheidender Bedeutung ist. Unsere Arbeit legt den Grundstein, um zu verstehen, wie die Seitenlinie Strömung Reize in entsprechenden Verhaltensweisen auf der Ebene der einzelnen Zelle übersetzt.

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