The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

In JoVE (1)

Other Publications (7)

Automatic Translation

This translation into Chinese was automatically generated.
English Version | Other Languages

Articles by Miao Wen in JoVE

 JoVE General

使用拟南芥eceriferum突变体探索植物角质层的生物合成


JoVE 709 5/31/2008

1Department of Botany, University of British Columbia - UBC, 2Department of Chemistry, University of British Columbia - UBC

植物角质层蜡质植物的外壳,在节约用水的主要作用,但也是对病原微生物的入境重要屏障。在这段视频中,我们展示了正向和反向遗传学方法所确定的植物角质层突变体的分析。

Other articles by Miao Wen on PubMed

人口动力学研究部分离子 Cl 原子的 K α 线。

人口动力学代码被为了分析 K alpha 排放的碳氢等离子体中部分电离的氯原子。下两个高温等离子体的碰撞辐射平衡解决了原子的过程。显示快速电子主要有助于电离 K 壳绑定电子 (即内壳层电离) 和冷电子外壳到绑定的。K 阿尔法系的部分离化态原子比率列示作为冷电子温度的函数。模型是由 K α 线从 1.5 x 10(17) W/cm(2),推断约 100 eV 目标表面等离子体温度在 1 TW 钛宝石激光脉冲辐照氯化塑料目标观察验证。

Nanotubules 在植物表面上的: 上针的红豆杉山 L.蜡质晶体的化学组成

红豆杉山 L.针布满了管状蜡质晶体不同直径 (100 和 250 nm) 和长度 (300-500 和 500-1000 nm) 下和初步结果曲面上的分别。各种取样规程被雇用来研究化学成分的针蜡上三个不同层次的空间分辨率。第一,整个针浸提取产生极长链脂肪酸 (21%)、 alkanediols (19%)、 苯基酯 (15%),和仲醇 (9%) 和少量的醛、 主醇、 烷烃、 烷基酯和生育酚组成的混合物总角质层蜡。第二,从两面针蜡分别采样与 CHCl3 浸透织物玻璃刷牙。双方表明定性组成非常相似,但在数量方面,与 nonacosan-10-ol (18%) 和 alkanediols (33%) 分别支配下和初步结果蜡,大大不同。第三,扩大免疫方案和 intracuticular 的蜡层有选择性地由机械蜡和涂刷提取的组合抽取样本。这提供了直接证据管状蜡晶体所载比例很高的 nonacosane-4,10-二醇及 nonacosane-5,10-二醇对侧的表面和 nonacosan-10-ol 针的圆盘近轴面上。这些化合物、 较大数额的脂肪酸和醛比例相对较低,主要醇、 烷基酯和烷烃 co-crystallized epicuticular 图层中。相比之下,intracuticular 蜡包括循环成分和 aliphatics 的较高部分的相对较高的极性。管状晶体的形成是一个自发的物理-化学过程,涉及建立的 epi-intracuticular 蜡层与地方相分离的渐变作为讨论的。

很长时间链仲醇和豌豆大蒜叶的表皮蜡中的 Alkanediols。

在从豌豆叶片的表皮蜡,19 仲醇、 10 小学 alkanediols 和三个中学/中学 alkanediols 发现了由各种化学转换产品配上采用气相色谱-质谱法。C29 C33 仲醇 (1.1 microg/cm2) 的同系物以 hentriacontanol 异构体 (94%) 为主。Hexacosanediols (< 1%) 的 octacosanediols 和跟踪额只在小学 alkanediol 派系 (0.7 microg/cm2) 中检测到。中学/中学 alkanediols (0.12 microg/cm2) 所载链长度 c31 蓝精灵与单个同系物。所有三个复合类显示特性的异构体分布与主要位于 C 14 和 C 16 之间的辅助功能组。基于同分异构体组成,被讨论引入羟基职能的生物合成步骤的顺序。

很长时间链 Hydroxyaldehydes 从红豆杉山针角质层蜡。

在红豆杉山针的角质层蜡,由各种化学转换与产品分配使用气相色谱-质谱法发现了同源系列链非常长 1.5 alkanediols 和 5-hydroxyaldehydes。1.5-Alkanediols 了链长度从 C(28) 到 C(38),与强优势的甚至碳原子数和最大 C(32) (29%)。5 Hydroxyaldehydes 系列组成链长度 C(24) 和 C(26)-C(36),并显示偶数同系物的流行率很明显。5 Hydroxyoctacosanal 是系列的最丰富 (42%) 大院。5-Hydroxyaldehydes 一起达 0.4 microg/cm(2),对应的针总蜡的 1.2%。类似于聚酮的生物合成途径建议基于 (类似) 链长度分布和这两个复合类的功能组模式。

细胞色素 P450 氧化酶 CYP96A15 是负责中等醇形成的 Midchain 烷烃羟化酶和酮中的干的拟南芥的角质层蜡。

大多数空中曲面的植物均在表皮细胞中合成的角质层蜡。蜡混合花序茎的拟南芥 (拟南芥) 由烷烃、 仲醇、 酮类、 所有思想的羰基蜡生物合成途径中按顺序形成。在这里,我们用反向遗传方法来标识细胞色素 p450 氧化酶 (CYP96A15) 参与生物合成蜡和它作为 midchain 烷烃羟化酶 (MAH1) 的特点。干蜡 T-DNA 插入突变体等位基因的发现是没有仲醇、 酮 (mah1-1) 或包含这些组件 (mah1-2 和 mah1-3) 比野生型更低水平。所有突变品系也增加了烷烃数额,部分或全部补偿损失的其他复合类。突变体与野生型蜡之间的化学的变化,尽管有干表面蜡质晶体中没有明显的差异。突变干蜡型可由本机启动子以及花椰菜花叶病毒 35S 启动子控制下的野生型 MAH1 表达式部分救出。花椰菜花叶病毒 35S 驱动过表达导致异位积累中等醇、 酮在拟南芥叶蜡,这些化合物的唯一痕迹见于野生型的 MAH1。新成立的叶醇、 酮了 midchain 官能上或旁边的中央碳,因此匹配这些野生型干蜡中的化合物。采取在一起、 突变分析和叶片中的 MAH1 异位表达建议这种酶可以催化还领先从烷烃仲醇并可能导致相应的酮二羟化反应的羟基化反应。MAH1 表达了很大程度上局限于花序茎,专门向表皮路面的单元格,但不是在毛和保卫细胞不断扩大区域。MAH1 绿色荧光蛋白融合蛋白的本地化到内质网,提供证据的羰基通路的中间和最终产品在此亚细胞隔层中生成和随后必须将传送到出口向角质层细胞膜。

仲醇、 酮、 Alkanediols、 Ketols 在拟南芥南芥表皮蜡的组成。

(I) 测试生物合成仲醇与 ketols 之间的关系并 (ii) 确定参与缩酮生物合成的酶 regiospecificity 和衬底偏好,审查了拟南芥蜡组件包含辅助功能组。拟南芥野生型的干蜡所载同系物的 C(27) 到 C(31) 仲醇 (2.4 microg cm(-2)) 和 C(28) 到 C(30) 酮 (6.0 microg cm(-2)) C(29) 同系物的占主导地位。此外,复合类包含两个辅助功能组被确定为 C(29) 二醇 (约 0.05 microg cm(-2)) 和 ketols (约 0.16 microg cm(-2))。所有四个复合类显示分布特性的异构体,与位于 C 14 和 C 16 之间的功能组。在 mah1 突变干蜡、 醇及 ketols 无法检测,同时仲醇的金额和酮大幅度减少了。在两个 MAH1 超量表达行中,发现了同等数量的 C(29) 和 C(31) 的仲醇。基于同系物和同分异构体组成不同的基因型之间的比较,可以断定合成途径导致从烷烃仲醇,并通过酮或二醇 ketols。它似乎有理 MAH1 是羟化酶酶的参与在拟南芥中的所有这些转换。

高流动性组框蛋白-1 与微炎症状态和腹膜透析患者营养状况相关。

高流动性组框蛋白-1 (蛋白-1) 最近被确定为一种新型的炎性细胞因子。炎症可以导致某种程度的营养不良。我们研究的目的是要澄清血清蛋白-1 水平与微炎症状态与腹膜透析 (CAPD) 患者营养状况之间的关系。腹膜透析治疗维持治疗的病人 > 包括 6 个月了。蛋白-1、 白细胞介素-6 (IL-6) 和肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 被衡量酶联酶联免疫吸附法 (ELISA)。超敏 C 反应蛋白 (HS-CRP)、 前白蛋白 (PA)、 血清白蛋白 (S Alb)、 血红蛋白 (Hb)、 主观全球营养评估 (SGA),和腹膜透析礼物尿素清除率 (Kt/V)、 肌酐 (CrCl)、 残余的肾小球滤过率 (rGFR) 与透析液血浆率的肌酐后 4 h (D/P(4Cr)) 进行分析。使用了两个独立样本 t 检验和皮尔逊的等级相关测试。血清蛋白-1、 白细胞介素-6 和肿瘤坏死因子-α 的腹膜透析患者是明显高于对照组 (P < 0.05) ;血清蛋白-1 水平已经与肿瘤坏死因子-α 的积极关系 (r = 0.730,P < 0.01),hs CRP (r = 0.361,P < 0.01),和白细胞介素-6 (r = 0.865,P < 0.01),和曾与 Hb 的负面关系 (r = 下跌 34 点,P < 0.01),Alb (r =-0.34,P < 0.05),和巴勒斯坦权力机构 (r =-0.44,P < 0.01) ;未发现血清蛋白-1 与 SGA、 腹膜透析年龄、 Kt/V、 CrCl、 rGFR 和 D/P(4Cr) 之间有没有很大的关系。我们的研究显示蛋白-1 是在腹膜透析患者显著提升相关指标的炎症及营养不良。血清蛋白-1 可用作评价炎症和腹膜透析患者营养不良的一个标记。

Waiting
simple hit counter