보석 GTPase: 바위와 힘든 장소

Current Biology : CB. Jul, 2002  |  Pubmed ID: 12176351

보석 GTPase Rad, Rem 및 rem2를 포함 하는 단백질 가족의 구성원입니다. 최근까지 소중한 작은 알려진 보석, 최근의 기능에 대 한 연구는 보석 Rho GTPase effector 단백질의 작업 antagonising 셀 형태 영향 수 있습니다 밝혀 있다 비록 내가 바위.

발송 합니다. GTPase 신호: Formins Diaphanous 관련에 대 한 새로운 기능

Current Biology : CB. Apr, 2003  |  Pubmed ID: 12725753

Diaphanous 관련 formins는 이펙터로 Gtpases에 대 한. 두 개의 보고서가 최근 drf3의 이전에 진가 활동을 발표 했습니다 (mDia2), Cdc42, 그리고 drf2의 부탁에 cytoskeletal 재배열 도출 (hDia2C) endosome 역학 로드에 대 한 규제.

Ras 프로테아좀 중재 저하에서 Cyclin D1 부과 블록을 통해 P21(Waf1/Cip1) 단백질 안정성을 촉진합니다

The EMBO Journal. May, 2003  |  Pubmed ID: 12727871

Ras  종속 kinase 억제제 p21(Waf1/Cip1) (p21)의 축적을 촉진합니다. 이전 연구 보고 급성 영국 공군/MEK/ERK 활성화 증가 전사에 의해 p21 단백질 레벨을 올린다. 그러나, 우리는 murine 게재 Ras 변형에서 p21 유도 닢 메커니즘에 의해 주로 발생을 발견 했다. 영국 공군/MEK/ERK 통로의 만성적인 활성화 차단 프로테아좀 중재 p21 저하, 높은 하프 라이프와 p21 단백질의 축적의 결과. Ras에 의해 p21 안정화 cyclin D1 p21 관련 된 높은 수준의 동행 했다 하 고 마찬가지로 Ras를 cyclin D1 프로테아좀 중재 p21 저하를 억제 하기에 충분 했다. RNA 간섭에 의해 cyclin d1의 노크 다운 확인 Ras-유도 p21 안정화  D1 식에 의존 했다. 우리는 p21 복잡 20S 프로테아좀의 C8alpha 소 단위에 직접 바인딩됩니다 20 대 단지 체 외 정화 바인딩에 대 한 경쟁으로 cyclin D1 억제 p21 저하 하 여 보여줍니다. 따라서 우리가 제안 하는 Ras 20S 프로테아좀에 의해 p21 연관 및 후속 저하를 방지 하는 p21  d 1 단지의 형성을 촉진 하 여 p21를 안정 시킨다.

세포 외 ATP P2X7 페 HEK293 세포에 바위 나 종속 Bleb을 발생합니다

Molecular Biology of the Cell. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12857854

P2X7 ATP 수용 체 세포 외 ATP cytotoxic 효과 중재 합니다. P2X7 종속 셀 죽음 극적인 플라즈마 멤브레인 bleb 형성에 의해 예 고. 멤브레인 blebbing은 저조한 세포내 경로 특징 아직 관련 된 복잡 한 현상이 다. 우리 cytotoxic/기 공 형성 P2X7 수용 체와 페 HEK293 세포에 세포 외 ATP의 영향을 조사 했습니다. Wt P2X7-덜 HEK293 세포 아니라 P2X7 페에 ATP의 추가 1-2 분 UTP, 뉴클레오티드 P2X7 활성화 능력 내에서 대규모 막 blebbing, 세포 모양과 bleb 형성에 초기 효과 없이 했다. ATP에 의해 트리거되는 bleb 형성 되돌릴 수 및 필요한 세포 외 Ca2 +와 그대로 cytoskeleton 이었다. 또한, 그것은 완전히 P2X 산화 차단제 ATP와 preincubation에 의해 수 없습니다. 그것은 최근에 록 단백질 bleb 형성의 주요 결정이 관찰 되었다. 락 차단기 Y 27632 HEK293 P2X7 셀의 preincubation는 완전히 P2X7 종속 blebbing을 수 없습니다. ATP 바위의 분열을 촉발 하는 비록 내가 isoform P2X7 페 HEK293 세포는 광범위 한 caspase 억제제 z-VAD-fluoromethylketone 아무 효과가 없었습니다. 이러한 관측 제안 P2X7 종속 플라즈마 멤브레인 blebbing 떠들고/트레오닌 키 락의 활성화에 따라 달라 집니다 내가.

Keratinocyte 차별화로 록 신호 통로 의해 규제 됩니다

Current Biology : CB. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14680635

표 피 keratinocytes 라는 특수 한 상피 세포의 여러 계층으로 구성 됩니다. 세포는 표 피의 가장 바깥쪽 레이어에서 손실, 터미널 차별화, 기저 레이어의 keratinocytes 확산 중단, 위쪽으로 마이그레이션 하는 결국 가장 바깥쪽 cornified 층에 도달을 통해 대체 됩니다. 표 피의 정상적인 항상성 확산과 차별화 사이의 균형 단단히 통제 될 필요 합니다. GTP 바인딩 단백질 RhoA 말라 cytoskeleton의 규제와 정상 조직의 항상성 비판적으로 중요 한 접착 이벤트 근본적인 역할을 한다. Rhoa에서 신호의 2 명의 중앙 중재자는 록 떠들고/트레오닌 kinases 바위-어 록-II. 우리는 약리 반응 억제제를 사용 하 고 기본 인간의 keratinocytes에 락 II의 조건에 따라 활성 또는 비활성 형태를 표현 하 여 상피 keratinocyte 함수의 규칙에 있는 바위의 역할 분석. 우리 보고는 억제 keratinocyte 터미널 분화 및 세포 증식 증가 결과 락 기능을 차단 합니다. 반면, keratinocytes에 락 II의 활성화 결과 세포 주기 검거와 식 터미널 차별화와 관련 된 유전자의 수의 증가. 따라서 이러한 결과 록 증식과 분화에 인간의 keratinocytes 사이의 균형을 조절에 중요 한 역할을 나타냅니다.

Rac 변환: 말라 연결

Cancer Biology & Therapy. Jan, 2004  |  Pubmed ID: 14726705

수축 반응: Rho Gtpase의 기계적 규제

Trends in Cell Biology. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 15055199

물리적 환경에는 상피 세포 분화에 영향을 받습니다. 로컬 외부 세포 외 매트릭스의 강성은 증가 또는 감소 긴장으로 ' 감지' 변화와 침 전달. 세포 외 물리적 환경의 상태 신호 통신 네트워크 말라 cytoskeleton Rho GTPase 활동 변조를 통해 작동 합니다. 최근 종이 보고 유 방 상피 세포 downregulating로 레 귤 레이트 된 락 kinases의 행동을 통해로 활동 하 여 유연한 환경 응답 놀라운 발견.

RAS 및 G 1 단계 세포 주기 조절에 RHO GTPases

Nature Reviews. Molecular Cell Biology. May, 2004  |  Pubmed ID: 15122349

SPRY2 Melanocytes 야생-타입 BRAF 하지만 하지 V599E 돌연변이 흑색 종 세포에 Ras/세포 외 신호 규제 니 통로의 억제 물 이다

Cancer Research. Aug, 2004  |  Pubmed ID: 15313890

BRAF 돌연변이 constitutively 활성 BRAF 키 니 아 제 활동 및 증가 된 세포 외 신호 규제 니 (ERK) 신호 및 셀 확산 결과. 초기 연구 BRAF 돌연변이 melanocytic nevi에 전이성 병 변, 높은 주파수에서 발생 하지만 최근 데이터 초기 단계 흑색 종, 기타 요인 야생-타입 (WT) BRAF 컨텍스트에서 흑색 종 병에 기여할 수 있습니다 암시에 이러한 돌연변이의 낮은 발병 률 많이 밝혀졌다. Microarray 유전자 발현 프로 파일링 melanocytic의 패널 사이의 유전자 발현의 차이 대 한 화면을 사용 했습니다 같은 요인 식별 및 흑색 종 세포 라인 WT BRAF와 흑색 종 그룹 셀 V599E BRAF 돌연변이와 라인. 우리 SPRY2는 억제 물 Ras/ERK 영국 공군 1 직접 바인딩을 통해 신호 표시 하지 않으려면 표시 이전에, spry4를 동종 WT BRAF 셀에 식을 감소 했다 발견. 작은 간섭 RNA 중재 SPRY2 최저를 사용 하 여, 우리는 SPRY2 ERK 신호 V599E 돌연변이와 셀 라인에만 melanocytes와 WT BRAF 흑색 종 세포의 억제제로 작동 보였다. 우리는 또한 SPRY2 및 SPRY4 직접 바인딩할 WT BRAF 하지는 v599e와 다른 exon 15 BRAF 돌연변이 보여줍니다. 이러한 데이터 SPRY2, ERK 시그널링의 억제제 WT BRAF 셀에는 식의 다운 레 귤 레이 션 또는 BRAF 돌연변이의 존재에 의해 흑색 종 세포에 우회 수 있습니다 것이 좋습니다.

조건부 락 활성화 Vivo에서 종양 세포 보급 및 신생 유도 한다

Cancer Research. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15604264

침략 적 및 전이성 종양의 진행 해야 종양 세포로 Gtpases에 의해 규제 프로세스 극적인 형태 론 적 변화 받아야 합니다. Rho effector 단백질 락 뿐만 아니라 Rhoa와 RhoC, 상승된 식 및 록 II, 일반적으로 인간의 암 발생에 관찰 하 고 더 많은 침략과 전이성 고기 연관 많습니다. 바위 고체 종양의 진행에 기여 하는 방법을 검토 하 우리는 스 트로 겐 수용 체 호르몬 바인딩 도메인 (락: 응급실) 하 니 도메인을 융합 하 여 락 II의 조건에 따라 활성화 된 형태를 설립. 록: 응급실-주변 혈관을 클러스터 immunocompromised 누드 마우스에서 종양 조직으로 개별 성장 결 장 암 세포를 표현. 그러나, 록: 응급실 활성화 신호 증가 바위 단단한 종양에서 침공을 홍보 충분 한지 나타내는 주변 기질에 종양 세포의 적극적인 보급에 결과. 또한, 바위: 응급실 활성화 된 종양 했다 더 높은 vascularized, 나타내는 락 종양 혈관 신생에 기여 한다. 록: 응급실 활성화 상피 형태학 및 adherens 접합으로 ezrin, 단백질 및 세포 외 매트릭스 바인딩 단백질의 재배포 유도 가능성이 시험관에서 운동 성 촉진 조직 변경 결과. 이 결과 락 억제제 도움이 될 것 이라고 제안 antimetastatic 및 높은 RhoA, RhoC와 관련 된 종양에 항 혈관 신생 화학요법 에이전트 바위 나 바위 II 식.

말라 Myosin 기반 수축 Apoptotic 핵 해체에 대 한 책임 이다

The Journal of Cell Biology. Jan, 2005  |  Pubmed ID: 15657395

Apoptotic 실행 단계에서 막 blebbing caspase 중재 유 방 사이의 골짜기와 바위의 활성화 나 결과입니다. 여기, 우리 락 활동, myosin 빛 체인 (MLC) 인 산화, MLC ATPase 활동 하 고 그대로 말라 cytoskeleton 하지만 하지 microtubular cytoskeleton 표시는 apoptosis 중 핵 무결성의 중단에 대 한 필요 합니다. Apoptotic 핵 무결성을 보호 하는 바위 또는 MLC ATPase 활동의 저해 caspase 중재 lamins A, B1, 또는 C와 같은 핵 단백질의 저하에 영향을 주지 않습니다. 바위의 조건부 활성화 나 핵/C null 게재 lamin 야생-타입 섬유 아 세포에만 떨어져 눈물 충분 했다. 따라서, apoptotic 핵 해체 말라 myosin 수축 힘 및 핵 해체 결과 microtubule 기반 세력에서 및 인 산화와 depolymerization lamin에서 유사 하, 그러나 다릅니다, 유사 분열 apoptosis를 만드는 베이스 lamin 필요 합니다.

암 치료제에 대 한 기회 Ras 및 Rho Gtpases를 대상으로 합니다

Current Opinion in Genetics & Development. Feb, 2005  |  Pubmed ID: 15661535

Ras 및 Rho GTPases 특정 세포내 신호 통로의 일반 규정에 손 댄에 의해 개시와 암의 진행에 기여. 그 결과, Ras 및 Rho 역할 중요 한 악성 표현 형의 여러 측면의 개발에서 세포 주기 진행, apoptotic 자극, 네오-vascularisation 및 종양 세포의 운동 성, 침입 및 전이에 대 한 저항을 홍보 하 여. 이러한 GTPases 너무 많은 수준에 기여, 그들은 암 화학요법 에이전트의 개발에 대 한 매력적인 대상입니다.

인간의 암 모델링: 8 Beatson 국제 암 컨퍼런스 대 한 보고서

Cancer Research. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16357126

암 연구자에 직면 하는 주요 과제 중 하나는 적절 하 게 인간의 질병 모델 필요성입니다. 이 필요는 암, 약물 발견 및 유효성 검사를 위한 시스템을 수립 하 고 금하는 프로세스를 수정 하는 추가 요소를 발견 하는 유전자의 기여 확인/확인을 포함 하 여 목표에 의해 구동 됩니다. 암 모델링의 최근 발전 8 Beatson 국제 암 컨퍼런스 2005 년 6 월 19 ~ 22 일 영국 글래스고 (미국)에 논의 했다. 회의와 250 과학자 들에 의해 참석 했다 > 130 구두 및 포스터 프레 젠 테이 션. 연구 발표 2 차원 및 3 차원 세포 배양에서 nonmammalian 및 포유류 in vivo 모델에 이르기까지 시스템의 사용 하 여 만든된. 암에 관련 된 기본 프로세스에 기초 연구 뿐만 아니라 암 치료에 새로운 개발 제시 했다.

AP 1 차동 표현된 단백질 Krp1 및 Fibronectin 협력 기능, 지역화, 및 Nondifferentially 표현된 단백질의 활동을 변경 하 여 노 락 독립적인 중간 엽 침략 강화

Molecular and Cellular Biology. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16449658

Fos와 6 월 가족 단백질으로 이루어져, 녹음 방송 요인 AP-1 유전자 발현을 변경 하 여 종양 세포 침략에 필수적인 역할을 한다. 우리 보고 여기 Krp1, AP 1 위로 단백질 v Fos 변형 쥐 fibroblast 세포의 pseudopodial 신장에 역할이 소설 상호 nondifferentially 표현된 말라 바인딩 단백질 Lasp 1을 형성 합니다. Krp1 및 Lasp-1 colocalize pseudopodia, 팁에 말라와 그리고이 지역화 AP 1 중재 fibronectin 차례로 integrin과로 록 신호를 억제 하 고 pseudopodial 돌출 및 mesenchyme 같은 침략의 다운 레 귤 레이 션을 계속 하 여 유지. Lasp 1의 돌연변이 분석 SH3 도메인 pseudopodial 확장 하 고 침략 하는 데 필요한 것을 보여 줍니다. 결과 단백질 차동 인코딩 기능, 지역화, 및 활동 강화 셀의 침입을 차동 표시 되지 않는 단백질의 유전자 직접에 표시 하는 multigenic 침공 AP 1 규제 프로그램의 개념을 지원 합니다.

문신-C3 Exoenzyme의 정화입니다

Methods in Enzymology. 2006  |  Pubmed ID: 16472655

Clostridium 보 톨 리누스 C3 exoenzyme로 Gtpases의 생물학적 기능 연구를 위한 귀중 한 도구가 되었습니다. C3 효소는 선택적으로 ADP-ribosylation, 및 RhoA, RhoB, 및 Rho GTPase 단백질 가족의 Rhoc의 필연적인 비활성화 catalyzes. C 3의 실험적 사용을 통해 그것은 이러한 신호 단백질에 의해 세포 형태, 세포 주기 진행 및 유전자 전사의 규정을 포함 하 여 프로세스에 게 기부금을 확인할 수 있었습니다. 연결할 셀을 입력 하는 방법이 있는 세균성 독 소는 달리 C3 효율적인 항목을 용이 하 게 하는 요소는 없습니다. 그 결과, 다양 한 메서드를 효과적으로 c 3 셀에 전달 하기 위해 사용 되었습니다. 한 가지 방법은 원형질 막에 걸쳐 단백질의 변환 허용 하는 HIV 문신 지도자 시퀀스와 재조합 C3 엔지니어링 되었습니다. 이 장에서 정화 및 재조합 단백질 문신-c 3의 설명.

락 스 트로 겐 수용 체 융합 단백질의 조건부 규칙

Methods in Enzymology. 2006  |  Pubmed ID: 16472686

여로 관련 된 kinases 락 락 II 떠들고/트레오닌 kinases 말라 cytoskeleton 조절에 중앙 및 중요 한 역할을 재생할 수는. 록 단백질의 활성화 myosin II 경 쇄 (MLC) myosin ATPase 활동, filamentous 말라의 안정화의 인 산화에 긍정적으로 기여 하 고 플라즈마 멤브레인 말라 myosin 필 라 멘 트의 커플링 그로 인하여 증가 말라 myosin로 강제로 생성 및 수축. 우리가 스 트로 겐 수용 체 호르몬 바인딩 도메인을 2 차 록 키 도메인 융합 하 여 락 II (록: 응급실 이라고 함)의 조건에 따라 활성화 형태를 생성. 이 장에서 우리 건설 및이 regulatable 락: 응급실 융합 단백질의 특성에 설명합니다.

Rho GTPase 이펙터 락 Cyclin A, Cyclin D1, 및 P27Kip1 수준 가지 메커니즘에 의해 조절

Molecular and Cellular Biology. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16738326

Rho GTPase 가족 구성원 말라 cytoskeletal 구조의 그들의 레 귤 레이 션으로 잘 알려져 있습니다. 또한, 그들은 세포 주기 진행에 영향을 미칠. Rhoa와 RhoC 단백질을 중심으로 수많은 effector 단백질 조절 하 고 중요 한 신호 역할 어 록 II 떠들고/트레오닌 kinases는 바위 중재. 수많은 셀 종류의 확산에 락 기능에 대 한 요구 사항 Y 27632 같은 바위 선택적 억제제를 이용 하 여 연구에 의해 밝혀졌다. 그러나, 세포 주기 진행을 촉진 신호는 락 메커니즘 있다 하지 되었습니다 철저 하 게 특징입니다. 조건에 따라 활성화 된 락-에 스 트로 겐 수용 체 융합 단백질을 사용 하 여, 우리는 락 활성화는 G1/S NIH 3T3 마우스 섬유 아 세포에서 세포 주기 진행을 자극 하기에 충분 한 발견. 추가 분석 계시 록 세포 주기 규제 단백질의 수준을 변경할 독립적인 경로 통해 역할: cyclin D1 및 Ras 및 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 경로 통해 p21(Cip1) 상승 증가 임 니 2, p27(Kip1) 단백질 레벨의 감소를 통해 cyclin A. 따라서, 세포 주기 규제 단백질에 록의 영향을 여러 개의 독립적인 메커니즘에 의해 발생합니다.

임 Kinases: 규제 기능과 인간의 질환 협회

Journal of Molecular Medicine (Berlin, Germany). Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17294230

임 니 가족 두 멤버로 구성: 임 니 1 (LIMK1)와 임 니 2 (LIMK2). 주로 행동의 업스트림 신호 경로 의해 규제 됩니다 임 kinases 고유 조직 신호 도메인, cofilin 가족 단백질 cofilin1, cofilin2 및 destrin의 활동을 조절 하 여 말라 cytoskeleton의 아키텍처에 영향을 Gtpases로 다운스트림. 임 kinases는 매우 동종, 키 니 아 제 도메인을 비교 하는 경우에 특히 거기는 신흥 증거 각각 다른 규제 경로 대상이 될 수 있습니다 하 고 고유 하 고 겹치는 세포 및 발달 기능에 기여할 수 있습니다. 정상 중앙 신경 시스템 개발 LIMK1, 존재에 의존 하 고 삭제할 인간의 유전 질환 윌리엄스 증후군의 개발에 연루 되어. 정상적인 고환 개발, 다른 한편으로, limk2의 삭제가 중단 됩니다. 또한, 심혈 관 질환 뿐만 아니라 암 각 키의 개입 가능성 최근에 나왔다. 임 kinases 종양 세포 침입과 전이;에 중요 한 역할을 제안합니다 phosphorylated 및 비 phosphorylated cofilin 사이의 균형을 조정 잠재력을 전이성 종양 세포의 중요 한 결정 요인이 될 수 있습니다. 이 리뷰에서 우리는 구조, 규제 및 임 kinases의 기능 및 셀룰러 및 organismal 수준에서 그들의 기능 뿐만 아니라 인간의 질병에 그들의 가능한 기여 개요.

종양 세포 침입과 전이의 메커니즘입니다

Journal of Molecular Medicine (Berlin, Germany). Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17404698

Ras 암 치료에서 대상으로 통로 신호

Recent Results in Cancer Research. Fortschritte Der Krebsforschung. Progrès Dans Les Recherches Sur Le Cancer. 2007  |  Pubmed ID: 17607939

알파 (E)-Catenin의 C-터미널 영역을 통해 SRF 종속 Transcriptional 활동을 유도 하 고 부분적으로 RhoA/바위-종속

Biochemical and Biophysical Research Communications. Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18078809

유비 쿼터 스 알파 (E)-catenin은 필수적인 말라 cytoskeletal 링커. 녹음 방송 요인, 혈 청 반응 계수 (SRF) 유전자 프로모터 및 말라 역학에 많은 경우 응답 혈 청 반응 요소 (SRE)에 바인딩을 통해 전사를 유도합니다. 여기에, 우리는 그 알파 (E) 보고서-catenin 식 HEK293 세포의 활성화는 SRE.L transcriptional 기자, 포함 하는 격리 된 SRF 바인딩 사이트와 안정적 통합된 SRE 기자.섬유 아 세포에서 L 기자입니다. 알파 Catenin 유도 기자 활동 RhoA GTPase Rho 키 기능에 부분적으로 의존만 나타납니다. 알파-Catenin 식 RhoA 활성화 또는 지역화 및 알파 catenin 유도 SRE에 아무 효과가 없습니다.L 기자 활성화 말라 변조를 구분 하지 않습니다 에이전트 latrunculin 2.가 소성 알파-catenin 식 말라 필 라 멘 트 어셈블리 스트레스 섬유 형성에 의해 측정 된 유도 하기에 충분 했다. SRE입니다.L 기자 알파 (E)의 C-터미널 약 300 잔류물 지역별 활성화-catenin. 이 결과 알파 (E)에 의해 유도 SRF 중재 전사의 제안-catenin 중 하류 RhoA 또는 병렬 통로 통해.

록 키 니 아 제 저해에 대 한 응용 프로그램입니다

Current Opinion in Cell Biology. Apr, 2008  |  Pubmed ID: 18282695

록 kinases 말라 cytoskeleton의 조직에 있는 중앙 역할을 인간의 질병 치료를 위한 표적 파편은. 삭제 록의 쥐에서 나 pathophysiological 응답, 높은 혈압을 하는 역할을 밝혀와 락 저해 심혈 관 질병의 특정 유형의 치료에 대 한 유효성을 검사 합니다. 까지, 유일한 락 억제제 인 간에 있는 임상 고용 사용 되었습니다 안전 하 게 일본에서 1995 년부터 대뇌 vasospasm 치료에 대 한 fasudil 이다. 대부분 심장 혈관 시스템에 초점을 임상 시험 추가 표시에 대 한 fasudil의 유익한 효과 발견. 흥미로운 최근 결과 또한 생산 및 질병 치료를 위해 줄기 세포 이식에서 락 억제제에 대 한 상당한 잠재력을 좋습니다.

규제 간의 변환을 둥글고 길쭉한 암 세포 이동의 모드

Cancer Cell. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18977323

움직임의 길쭉한 둥근된 모드 사이 전환 다양 한 microenvironments에 맞게 침 윤 성 종양 세포 수 있습니다. 셀의 최근 문제점에서 펠 레 모레노 외. 식별 DOCK3, NEDD9, WAVE2, 및 ARHGAP22 키 분자 Rac와 Rho 규제 움직임 흑색 종 세포 전이 운전 모드를 결정 하는 신호.

조직의 정의 된 로커 스를 대상으로 유전자에 의해 락 조건에 따라 규제의 선택적 식입니다

Genesis (New York, N.Y. : 2000). Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19391117

록 kinases 규제로 Gtpases의 하류 말라 myosin 구조. 4-Hydroxytamoxifen (4HT)을 표현 하는 마우스를 생성 했습니다-인간의 락 II (ROCKII:mER)는 cytokeratin14의 transcriptional 통제 규제 (K14) 발기인. K14-ROCKII:mER minigene는 클로닝 벡터 포함 모터와 인간의 HPRT 유전자의 첫 번째 exon 마우스 Hprt 유전자의 두 번째 및 세 번째 exons 소설으로 recombineered. 발기인 및 처음 두 exons HM1 배아 줄기 세포에 대 한 삭제 Hprt 로커 스에 동종 재조합 기능 Hprt 유전자, 모자 티 미 (hypoxanthine-aminopterin-딘) 매체에 성장에 대 한 수 있도록 다시 구성. K14 모터 구동 ROCKII:mER 식 4HT. rockii:mer에 의해 유도 된 증가 록 기판 인 산화와 embryoid 바디에서 피상적인 셀 계층으로 제한 했다-ROCKII:mER 활동 4HT 대상 조직에 의해 규제 됩니다 나타내는 표현 기본 murine keratinocytes 4HT 증가 기판 인 산화와 cytoskeleton 재배열에 응답 합니다. K14-ROCKII:mER 쥐 피부 개발 및 암 바위의 역할을 검사 하는 데 도움이 될 것입니다.

Constitutively 활성 RhoA G(1) S 단계 세포 주기 진행에 Retarding 및 Cytokinesis를 방해 하 여 증식을 억제 한다

European Journal of Cell Biology. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19515453

Cytoskeletal 레 귤 레이 션에 Rhoa의 행동은 광범위 하 게 공부 했습니다. Rhoa은 또한 적은 well-characterized 방법으로 확산 하 고 금하는 변환에 기여 한다. 인간의 암;와 연결 되어 상승 된 RhoA 신호 통해 RhoA 식, 돌연변이 또는 높은 식 Rho guanine 염기 교환 요인 (조달)을 활성화 하거나 삭제에서 또는 억제로 GTPase 활성화 단백질 (격차)의 감소 식 증가. Ras oncogene 달리 GTPase 불충분 한 RhoA 돌연변이 constitutively 활성화 하지 종양에서 발견 되었습니다. 확산에 적극적인 Rhoa의 효과 조사 하기 위해 야생-타입 RhoA 또는 불충분 한 GTPase 활성 V14RhoA inducibly 익스프레스 Swiss3T3 셀을 생성 했습니다. 우리는 V14RhoA retarding DNA 합성 세포 주기 단계 진입 하 고 차단 하는 cytokinesis, 성공적으로 완료 하 여 binucleate 셀의 발생률이 증가에 따른 세포 증식 억제 발견. 이러한 효과가 억제 MAPK 경로의 활성화 물질 유발 및 여러 단백질 anillin을 포함 하 여 유사 분열에 관련 된 ECT2 및 셀 적도에서 생 Rhoa의 감소 활성화 될 것으로 예상 것 이라고 cyclin b 1의 억제와 관련 된 했다. Telophase 셀의 midbody의 활성 RhoA 단백질의 축적 그 RhoA 비활성화 활성화 re 전에 발생 해야 합니다 제안 셀 V14RhoA 표현에 저해 했다. 결함이 있는 cytokinesis 또한 적도 furrowing와 호환 수 있습니다 v14rhoa을 표현 세포에서 눈에 띄는 말라 구조와 연관 되었다. 단일 분자 스위칭 기반 슈퍼 고해상도 이미지를 사용 하 여, 크게 midbodies 활성 Rhoa의 해상도 향상 되었습니다. 이러한 결과 constitutively 활성 RhoA 반감 확산에 기여 하는 여러 가지 세포 활동을 GTP/GDP 바인딩된 상태 간에 자전거에 대 한 중요성을 강조 나타냅니다.

B-영국 공군 Sprouty2 협회는 인 산화와 니 나 란에 의해 규제 됩니다

Cancer Research. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19690147

Sprouty2 영국 공군 kinases와 직접 상호 작용을 통해 되는 한 가지 방법은 여러 수준 Ras/영국 공군/MEK/세포 외 신호 규제 니 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 (MAPK) 통로 제어 하는 피드백 레 귤 레이 터 이다. Sprouty2 식은 종양 억제기로 역할와 일치, 종종 인간의 암 발생에 아래로 규제. 그러나, sprouty2은 최대 일부 암에 레 귤 레이트 된 antitumorigenic 속성 Sprouty2 중재의 회피를 허용 하는 posttranscriptional 메커니즘의 존재를 제안. 우리 보고 MAPK 활성화 Sprouty2 연관 야생-타입 B-영국 공군 감소 6 떠들고 잔류물에 Sprouty2 인 산화를 유도 합니다. 이러한 6 serines nonphosphorylatable alanines에의 돌연변이 증가 성장 인자 유도 MAPK 활성화를 억제 하기 위해 sprouty2의 능력. Sprouty2, B-영국 공군 V600E 같은 금하는 B-영국 공군 돌연변이 연결 하지 않았다 하지만 Sprouty2 바인딩에이 저항 인 산화 때문이 아니었다. 대신, oncogenic 돌연변이 의해 유발 된 활성 키 니 아 제 나 란 Sprouty2 바인딩을 수 없습니다. 이 결과 공개 영국 공군 Sprouty2/B 상호 작용에 영향을 미치는 듀얼 메커니즘: Sprouty 인 산화와 B-영국 공군 나 란.

MST Kinases 말라 Cytoskeletal 무결성 및 P21Waf1/Cip1 안정성 규제 C 6 월 N 맨끝 니 스트레스 활성화 키를 통해 신호를 모니터링 합니다

Molecular and Cellular Biology. Dec, 2009  |  Pubmed ID: 19822666

뿐만 아니라 구조 프레임 워크를 제공 말라 cytoskeleton 세포 죽음, 생존과 확산에 필수적인 역할을 한다. 말라 cytoskeleton 중단 결과 c 6 월 N 맨끝 키 (JNK) 스트레스 활성화 단백질 키 니 아 제 (SAPK) 통로;의 활성화 그러나 JNK 통로에 커플 말라 무결성의 센서 포유류 세포에 특징 되지 있다. 우리가 지금 보고 있는 포유류 Ste20 같은 (MST) kinases 중재 말라 cytoskeleton의 중단에 대 한 응답으로 JNK 통로의 활성화. 말라 중단 한 결과 thr57의 인 산화를 통해 p21(Waf1/Cip1) (p21) JNK 중재 안정화입니다. MST1 또는 mst2의 표현 말라 중단에 의해 p21 안정화 필수 MST 활동 p21 JNK 및 Thr57 종속 방식으로 안정화 하는 데 충분 했다. 이러한 데이터는 살바도르-사마귀-히포 종양 억압 바인딩 및 네트워크 파트너의 c-영국 공군 및 RASSF1A 종양 억제기 MST kinases 서브 모니터 cytoskeletal 무결성 및 JNK SAPK 통로 규제 하는 주요 세포 주기 단백질의 규제를 통해 한 쌍의 구성 요소 이외에,을 나타냅니다.

암 세포의 운동 성에서는 말라 Cytoskeleton

Clinical & Experimental Metastasis. 2009  |  Pubmed ID: 18498004

암 세포 전이 주변 조직으로 침입을 포함 하는 다단계 프로세스 intravasation, 혈액 또는 림프, 넘쳐 흐름, 그리고 새로운 사이트에 성장에 대 중 교통. 이러한 단계 중 많은 셀 운동 성, 말라 합의 사이클에 의해 구동 필요로, 접착 및 acto myosin 수축 세포. 이러한 프로세스 암 세포와 자주 보이는 모순 된 결과 몇 년 동안 체 외에서 공부가 되었습니다. 도전은 지금 어떻게 체 외 관측의 무리에 관한 생활에 암 세포의 움직임을 이해 하는 종양 조직. 이 리뷰에서 우리는 말라 돌출 및 acto myosin 수축에 집중 됩니다. 우리는 공동-ordinated 규제 말라 중 합 및 수축에 대 한 광범위 하 게 허용 메커니즘을 요약 몇 가지 일반적인 원칙을 제시 하 여 시작 됩니다. 다음 말라 역학에 영향을 미치는 암 세포 침공 복잡 한 환경에서 그리고 vivo에서 어떻게 실험 조작 조사 최근 연구를 하겠습니다.

혼자 죽어: Rho의 이야기

Cell Stem Cell. Aug, 2010  |  Pubmed ID: 20682437

셀 줄기 세포, Chen et al. (2010)로 중재 actomyosin 수축 기반이 인간 배아 줄기 세포의 분리에 따라 또는 저밀도 전파, 생체 외에서 절연 및 조작 그들의 도전 속성 중 apoptosis를 받 다 proclivity Ohgushi 그 외 여러분 (2010 년) 보고서의이 문제.

임 Kinases는 종양 및 종양 관련 된 Stromal 세포 침입 경로 생성을 위해 필요 합니다

The Journal of Cell Biology. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20876278

1과 2 (LIMK1/2) 임 kinases는 말라 cytoskeleton 역학의 중앙에서 위치 지정 된 레 귤 레이 터. 최저의 siRNA 중재 또는 새로운 작은 분자 억제 물을 사용 하 여, 우리가 보여줄 LIMK 필요한 경로 생성을 위한 최고의 종양 세포와 nontumor stromal 세포에 의해 집단 종양 세포 침공 하는 동안. LIMK 저해 낮추고 cofilin 인 산화, F 말라 수준, 혈 청 반응 계수 transcriptional 활동와 콜라겐 수축 하 고 3 차원 침공 분석 실험에 침공을 감소 시킨다. 운동 성, 영향을 받는 하지 비록 LIMK 저해 매트릭스 단백질 저하 및 invadopodia 형성 감소 F 말라 안정성을 나타내는 FRAP 분석 실험에서 상당히 빠른 복구 시간와 관련 된 손상. LIMK MDA-MB-231 셀에 뜨 되, 그들은 총체적으로 세포에 침입의 가닥을이 끌 능력을 잃게됩니다. 마찬가지로 LIMK 활동 암 관련 게재에 차단 될 때 그들은 organotypic 피부 모델에서 편평 상피 암 종 세포의 집단 침공이 끌 수 없습니다. 이 결과 LIMK 매트릭스 셀 집단 침공에 선도 활동 경로 생성에 대 한 리 모델링에 필요한 것을 보여줍니다.

지도자를 따라: 임 Kinases 집단 종양 세포 내 습을 위한 방법을 포장

Cell Cycle (Georgetown, Tex.). Nov, 2010  |  Pubmed ID: 21088476

췌장암 세포 침공 돌연변이 P53에 의해 구동 하는 동안 RhoA 활동의 공간적 규정

Cancer Research. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21266354

변경 내용을 관찰 분자 행동에 암 세포 침공 하는 동안 생체 조건 능력 전이성 프로세스에 대 한 우리의 이해에 대 한 주요 도전 남아 있습니다. 여기, 우리가 처음 subcellular 수준의 FLIM 무서 워 (형광 수명 현미경 형광 공명 에너지 전달 이미징) 이미지를 사용 하 여 췌장암의 라이브 동물 모델에서 RhoA 활동의 분석에 대 한 보여 줍니다. 침략 마우스 췌 장 ductal 선 (PDAC) 암 세포 돌연변이 p53에 의해 구동 (p53(R172H)), 앞 가장자리에 높은 RhoA 활동의 개별 분수 및 결 석 하는 생체 조건 셀의 후면 관찰 2 차원 체 외 문화에서. 활성 Rhoa이이 풀 결 석 했다 특히, vivo에서 그들의 불 쌍 한 침략 적 잠재력과 비 침 투 적인 p53(fl) 녹아웃 PDAC 셀에. Dasatanib, 공간적으로 레 귤 레이트 된 Rhoa의 기능적 중요성을 설명 하기 위해이 모델에서 활성화 되어 있는 임상 승인된 anti-invasive 에이전트 사용 했습니다. Dasatanib p53(R172H) 셀 생체 조건에서 Rhoa의 활동을 저해 하 고이 효과 셀 본문 내 기저 RhoA 활동의 독립 했다. Vivo에서 양적 함께 찍은 형광 수명 이미징 일러스트 RhoA, 침공에 필요한 뿐만 아니라 글로벌 활동 반대로 RhoA 활동의 subcellular 공간 규정을 제공, 침공 효율 vivo에서 지배 가능성이 높습니다. 우리의 연구 결과 살아있는 동물에 약물 치료 하는 동안 동적 생체 분석에 FLIM-무서 워 유틸리티를 공개 하 고 그들은 또한 어떻게 개별 세포내 분자 풀 보여 차동 미래 anti-invasive 요법에 의해 조작 될 수 있습니다.

K-Ras 중재 Murine 피 Tumorigenesis에 따라 달라 집니다 및 관련 된 높은 Rac1 활동

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21358804

잠재적인 암 치료에 대 한 공통의 목표는 단백질 식 또는 정상 세포 대 종양의 선택적 대상 지정에 대 한 허용 하는 활동의 차이 식별. (K-Ras, h 조-Ras 및 N-라스) Ras proto-oncogene 가족이 인간의 암 발생에 가장 자주 돌연변이 유전자는입니다. 그 결과, 상당한 노력을 결정 어떤 경로 Ras 신호에 의해 활성화 됩니다 및, 더 중요 한 것은,이 암에 기여에 전념 하고있다. 가장 광범위 하 게 공부를 Ras 규제 신호 통로 영국 공군/물질 활성화 단백질 키 니 아 제 캐스케이드, Rac1 GTP 바인딩 단백질은 또한 생물학 응답 Ras-유도에 필요한 모델 시스템에서 이전 연구는 밝혔다. 그러나 엄격한 vivo에서 Rac1 대상 유효성 검사 데이터와 명확한 데모 비 병 변 Ras 기반에서 Rac1 활동 증가 어떤 부족 했습니다. 조직 선택 활성화 또는 신호 분자 항 활성화 상태 민감한 Rac1 체 GTP 바인딩된 Rac1 감지의 삭제를 허용 하는 유전자 변형 마우스 모델의 조합을 사용 하 여, 우리 Rac1 K-Ras 유도 상피 유 두 종 개시 및 성장에 기여 하 고 Rac1 활동은 금하는 K-Ras 생체 조건에 의해 상승 된 발견. 이전에, 실질적인 임상 종양 표본에 대 한 가장 일반적으로 사용 되는 형식에서 Rac1 활성화 상태를 평가 하는, 포 르 말린 고정 파라핀 (FFPE) 조직 샘플을 포함 합니다. 그러나,이 연구 명확 하 게 보여줍니다 Rac1 K-Ras 상피 세포 hyperproliferation 구동에 대 한 근본적이 고 돌연변이 표현 하는 조직에서 Rac1 활동은 고가의 금하는 K-Ras 또한 FFPE 샘플에서 Rac1 활성화 상태를 검사 하는 프로브로 활성화 상태 특정 Rac1 GTP 항 체를 특성화 하는 동안. 우리의 연구 결과 인간의 종양에서 Rac1 활동의 상태에 대 한 연구를 더욱 촉진 하 고 잠재적으로 Rac 활성화 또는 다운스트림 이펙터 신호 경로 대상으로 하는 요법을 누릴 수 있는 환자 인구의 종양 형식을 정의 하는 데 도움이 됩니다.

셀룰러 긴장 Actomyosin 중재 증가 조직의 경직과 β-catenin 활성화 표 피 세포의 증식 및 종양의 성장을 유도 하기 위해 드라이브

Cancer Cell. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21665151

종양과 관련 된 기질 암 홍보 하는 기계적 성질을 매니 페스트. Mechanosensation 조직의 경직성의 증가 힘 균형을 다시 설정 하려면 셀룰러 긴장 actomyosin 중재 Rho/바위 통로를 활성화 됩니다. Actomyosin 긴장 조직의 항상성 및 종양 개발에 미치는 영향을 확인 하려면 마우스 피부 조건에 따라 활성 ROCK2 우리 표현. 락 활성화 증가 콜라겐을 통해 조직 강성 높은. Β-catenin, mechanotranscription 통로의 핵심 요소는 록 활성화 선도 핵 축적, transcriptional 활성화 및 결과 hyperproliferation 및 피부 두껍게 하 여 안정화. 팍 저해 했던 것 처럼 이러한 응답 감쇠 LIMK myosin ATPase 차단 하 여 actomyosin 수축 억제. 종양 수 성장과 진행 증가 했다 록 활성화 하 여 바위 봉쇄는 금지, 셀룰러 긴장과 중요 한 종양 발기인으로 필연적인 콜라겐 증 착 actomyosin 중재 연루.

Trailblazing 임 Kinases 선두 집단 종양 세포 침공 시작

Bioarchitecture. 1, 2011  |  Pubmed ID: 21866254

주 사이트에서 종양 세포의 확산 관련된 세포 집단으로 종종 발생합니다. 침략의 형태로이 방법을 선도 하는 셀의 기여 그에 따라 다를 수 있습니다. 의미상, 말라 cytoskeleton 세포의 운동 성의 주요 드라이버를 조절 하는 단백질 선도 또는 셀 뒤에 있는지 여부에 따라 서로 다른 역할을 할 수 있습니다. 1과 2 (LIMK) 임 kinases phosphorylate와 cofilin 단백질의 기능을 severing filamentous 말라 비활성화. SiRNA 나 약리 억제제를 사용 하 여, LIMK 집단적으로 종양 세포에 침입의 셀 선도에 필요한 것으로 발견 되었거나 암 관련 stromal 게재에 효과적인 세포 외 기질 성능 저하는 용이 3 차원 침공. 감소 세포 외 기질 굴욕적인 활동 밀어내 구조 매트릭스 저하 하 게 하는 데 필요한 안정적인 filamentous 말라 구조를 형성 하는 무 능력에 연결 했다. 그러나 LIMK 셀 운동 성 또는 관련된 집단에서 경로 다음 필요 했다. 이러한 결과 집단 침공에 선도 하 고 다음 셀 속성이 다릅니다 셀 선도 활동을 대상으로 크게 종양 세포 침입을 억제 하기에 충분 한 표시 보여줍니다.

MRCKβ, 종양 세포 침공의 주요 레 귤 레이 터와 저 해제의 Co-crystal 구조

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21949762

MRCKα 및 MRCKβ (myotonic 영양 장애 니 관련 Cdc42 바인딩 kinases) actomyosin cytoskeleton 규제는 Rho GTPase 활성 떠들고/트레오닌 kinases AGC 가족 내 아에 속한다. Myosin 빛 체인 (MLC) 인 산화에 그들의 역할을 반영, MRCKα 및 MRCKβ 영향 셀 모양 및 운동 성. 우리 보고 추가 MRCKα 및 MRCKβ 공헌 3 차원 매트릭스 침공 분석 실험에서 암 세포의 침입에 대 한 증거. 특히, 우리의 결과 락 kinases의 억제와 함께 MRCKα 및 MRCKβ의 결합된 저해 줄이고 암 세포 침입 차단 MRCK 또는 바위 kinases 혼자 보다 훨씬 더 큰 효과에 결과 나타냅니다. 니 리간드 포켓 프로브를 우리 체 외 MRCKβ 니 분석 결과에서 159 kinase 억제제 상영 및 효소의 활동을 저해 하는 11 화합물 발견 > 3 µ M에서 80%. 3 안타, TPCA 1, Fasudil 및 Y 27632의 추가 분석 MRCKα 및 MRCKβ에 대 한 낮은 micromolar IC(50) 값을 공개 했다. 우리는 또한 Fasudil 및 TPCA 1는 kinase의 활성 사이트에 바인딩된 억제제와 복잡 한 MRCKβ의 결정 구조를 설명 합니다. 이러한 고해상도 구조 전형적인 dimeric 배열에서 고도로 보존된 AGC 아 배 공개. 니 도메인은 완벽 하 게 주문 하 고 올바르게 위치 αC 나선 및 촉매에 대 한 관할 구조 촉매 잔류물 활성 나 란에서. 함께, 이러한 결과 추가 MRCK 참여 암 세포 침공의 규제에 대 한 유효성 검사를 제공 하 고 미래의 구조 기반 약물 발견 노력에 대 한 중요 한 출발점을 제시.

Actomyosin Contractililty: 전원 드라이브 종양의 성장을 강제로

Cell Cycle (Georgetown, Tex.). Oct, 2011  |  Pubmed ID: 22067650

TGFβ 유도 전사, 운동 성 및 침략 LIMK과 바위의 다른 기여

European Journal of Cell Biology. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 21074289

상피 엽 전환 (응급)을 유발 하는 변형 성장 인자 β (TGFβ)의 기능 Rho GTPase 시그널링의 활성화 등 SMAD 종속 및 SMAD 독립적인 경로 의해 중재입니다. 활성화, GTP 바운드로 차례로 phosphorylate 임 kinases (LIMK)를 포함 하 여 수많은 기판 바위 kinases 자극. 락 활성화의 결과 LIMK 유도 말라 필 라 멘 트 안정화에서 기여와 함께 증가 말라 myosin 수축 힘 세대. 이 연구에서 우리가 만든 siRNA 중재 최저의 및 선택적 저 해제의을 사용 하 여 TGFβ을 이용한 응답 바위와 LIMK 기여 결정. 우리는 바위와 LIMK 혈 청 반응 계수 (SRF) transcriptional 활동 및 응급 중 말라 스트레스 섬유 형성 TGFβ 자극에 대 한 필요를 찾을. 대조적으로, 비록 LIMK 저해 셀 운동 성 스크래치 상처 및 Transwell 마이그레이션 분석 실험에 거의 영향을 했다, 록 저해 실제로 승진 TGFβ 유도 세포 운동 성 상피 시트에서 무료로 휴식에 개별 셀을 도와. 또한, matrigel 세포 외 기질 단백질의 계층을 통해 하지 바위, 효과적으로 차단 된 TGFβ 구동 침공 하지만 LIMK의 선택적 저해를 보여 줍니다. 이러한 결과 나타냅니다 Rho 신호 통로 하류에서 LIMK와 바위의 역할 TGFβ의 동일 하지 않은 LIMK TGFβ 구동 기관 섬유 증 및 전이성 암 확산에 매력적인 치료 목표를 나타내는 것이 좋습니다.

P53 중재 Transcriptional 규정과 활성화 신호 통로 규제 RhoC LIMK2 추진 하 고 말라 Cytoskeleton의 세포 생존

Cell Research. Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21079653

DNA 손상에 대 한 응답에서 셀 운명의 중앙 중재는 p53 유전자 세포 주기 검거, 생존과 apoptosis에 관여의 식을 통제 하는. DNA 손상에 의해 시작 많은 반응을 특징 되었습니다, 비록 말라 cytoskeleton 레 귤 레이 터의 역할을 크게 알 수 있다. 우리는 지금 RhoC 임 니 2 (LIMK2)는 직접 p53 대상 유전자 genotoxic 에이전트에 의해 유도 된 보여줍니다. RhoC 및 LIMK2 말라 cytoskeleton 규제에 잘 역할을가지고, 비록 우리의 결과 DNA 손상에 따라 pro-survival 기능을가지고 하는 limk2의 활성화를 나타냅니다. LIMK 저해 최저의 siRNA 중재 또는 선택적 약리 LIMK 저해와 결합 하면 세포의 죽음 귀착되 었 다 했다 sub-lethal 단독으로 투여 하면 치료는 라디오-또는 화학 요법, 민감하게 셀을 봉쇄. 우리의 연구 결과 좋습니다 genotoxic 요법 LIMK 저 해제 결합 수 단일 에이전트 관리 보다 효능이 더 될 말라 cytoskeleton 레 귤 레이 터 및 DNA 손상 유도 세포 생존 메커니즘 사이의 새로운 연결을 강조.

임 니 1 ATP 소비 루시페라아제 기반 분석 결과 사용 하 여 높은 처리량 검열 방법의 개발

Journal of Biomolecular Screening. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 22156225

Kinases 신호 변환 통로 인간의 질병에서 중앙 역할 때문에 매력적인 약물 목표입니다. 그들의 잘 구성 된 아데노신 삼인산 (ATP)-바인딩 주머니 작은 분자 억제제에 대 한 이상적인 목표를 확인 합니다. 약물 발견을 위해 많은 펩타이드 기반 키 분석 실험 형광 기반 정보를 사용 하 여 그 측정 기판 인 산화를 개발 되었습니다. 그러나, 일부 kinases 이러한 분석 실험 되지 않을 수도 있습니다 적절 한. 임 kinases (LIMK)의 경우 펩 티 드 기판 phosphorylate를 판독으로 재조합 cofilin 단백질의 방사성 라벨을 사용 하 여 이전 높은 처리량 화면 (HTS) 귀착되 었 다. 우리 LIMK 활동의 함수로 루시페라아제 생성 된 발광을 사용 하 여 상대 ATP 레벨을 측정 하는 HTS 호환 가능한 분석 결과의 개발을 설명 합니다. 분석 결과 수행, 저렴 하 고 증거의 원칙 kinase 억제제의 시연 LIMK 상대로 그 복합 효능 확인 못했습니다; 자동화 된 HTS.의 성공적인 검찰에 대 한 분석 결과 사용 하는 궁극적으로, HTS, 다음 2 차 분석 결과 형식 힘 및 더 복잡 한 (그리고 비싼) 분석 실험을 사용 하 여 작업의 메커니즘의 보다 정확한 측정값을 얻기 위해 변경 되었습니다. 루시페라아제 분석 결과를 그럼에도 불구 하 고 결국 인간의 질병 치료에 대 한 검색 프로그램을 시작 하려면 LIMK 억제제의 식별을 위해 허용 되는 HTS에 대 한 저렴 하 고 신뢰할 수 있는 기본 분석 결과를 제공 합니다.

Rho GTPase 시그널링의 Transcriptional 규제입니다

Transcription. Sep-Oct, 2011  |  Pubmed ID: 22231116

작은 Gtpases로 제품군을 통해 신호 다양 한 세포질 프로세스 말라 cytoskeleton의 변화를 통해 조절 합니다. 여기 우리 전사 인자 p53 조절 어떻게 암에서 p53 돌연변이 극적으로이 통로 통해 신호 출력을 변경 몇 가지로 경로 신호 분자의 식을 보여주는 최근 연구 결과 대해.

Rho GTPase 암 치료에 대 한 신호를 대상으로 합니다

Future Oncology (London, England). Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22335581

기초 및 임상 연구에서 증거를 축적 Rho Gtpases의 하류 신호 경로 종양 개발 및 진행에 중요 한 역할을 재생 하는 개념을 지원 합니다. 그 결과, 이러한 신호 전달 경로 있는 특정 단백질 암 치료에 대 한 잠재적인 공격 대상이 될 수 있는 가능성에 상당한 관심이 있었다. 다양 한 중요 한 이펙터 단백질, 활성 제 또는 자신, Rho Gtpases을 대상으로 하는 저 해제 개발 되었습니다. 현재 Rho GTPases 및 다운스트림 신호 kinases 억제제를 개발 하 고 후보 엔터티를 설명 하는 데 사용 하는 전략을 검토 하겠습니다. Rho GTPase 신호를 억제 하는 분자로 표적으로 한 약이 아직 널리 채택 되지 임상 사용에 대 한, 비록 암 치료제로 서 그들의 잠재적인 가치 상당한 제약 연구 및 개발 하 고 있습니다.

척수 부상 Neurite 파생물 및 Myelination Rho와 락 억제제의 첨가제 효과 보여주는 체 외 모델에서 쥐의 개발

Glia. Mar, 2012  |  Pubmed ID: 22139636

그것은 현재 치료 척수 상해 (SCI)에 대 한 결합 된 약리학 및 생물학적 접근; 포함 한다 생각 그러나, SCI의 동물 모델에서 그들의 효능을 테스트 시간 이다-소모 하 고 큰 동물 동료를 요구 한다. 이런 이유로 우리가 우리의 myelinating 문화 과학의 체 외 모델을 수정 하 고 prescreen 결합된 치료 학에 대 한로 서의 잠재력을 공부. 이 문화 이다, 노드의 Ranvier와 interspaced myelinated 축 삭 형성의 단층에 도금 천연된 쥐 배아 척수 세포 구성 됩니다. 문화, 절단 neurites, 없는 지속적으로 표시 되는 초기 셀 프리 영역 시간이 지남에 demyelination 등 과학의 많은 기능을 동반 하 고 병 변, 그리고 lesioned 영역으로 microglia 및 반응성 이다의 침투에 인접 한 neurite 밀도 감소. SCI 수리 vivo에서 촉진 된 Rho 억제제 c 3과 (C3)와 록 억제제 y27632의 농도 범위를 테스트 했습니다. C 3 병 변 및 주변 지역에서 밀도 향상 된 neurite에 neurite 확장을 추진 하지만 remyelination을 유도 하지 못했습니다. 반면, y27632는 상당한 neurite 파생물을 유도 하지 않았다, 그러나 myelination 병 변에 인접 한 극적으로 향상 되었습니다. 저 해제의 효과 농도 의존 했다. C 3와 y27632와 결합 하 여 치료가 했다 neurite 파생물 및 증가 myelination coadministered 때 충돌 하는 것도 시너지 효과 발휘 하는 병 변에 인접 한 강화 된 첨가제에 영향을 줍니다. 전반적으로, 이러한 결과는이 문화 CNS 복구를 촉진 하는 통합된 전략 공부를 유용한 도구로 서 역할 하는 방법을 보여 줍니다. © 2011와 일리 정기 간행물 주식 회사