Kostimulation Und Endogenen MHC-Liganden Tragen T-Zell-Erkennung

Nature Immunology. Jan, 2002  |  Pubmed ID: 11731799

Membran-Domänen Und Der Immunologischen Synapse: Eine Frage Der Ruhenden T-Zellen Und Fertig

The Journal of Clinical Investigation. Jan, 2002  |  Pubmed ID: 11805125

T-Zell-Rezeptor Signalgebung Vorausgeht Immunologischen Synapse Formation

Science (New York, N.Y.). Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11859198

WIP-Mangel Zeigt Eine Differentielle Rolle Für WIP Und Dem Aktin-Zytoskelett in T-und B-Zell-Aktivierung

Immunity. Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11869681

Polar Umverteilung Des Sialoglykoprotein CD43: Implikationen Für Die T-Zellfunktion

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11937524

Die Stimulation Von Naiven T-Zell-Adhäsion Und Immunologischen Synapse Formation Von Chemokin-abhängige Und-unabhängige Mechanismen

Immunology. Jul, 2002  |  Pubmed ID: 12100716

Die Immunologischen Synapse

Arthritis Research. 2002  |  Pubmed ID: 12110130

Unreife CD4 (+) CD8 (+) Thymozyten Bilden Eine Multifokale Immunologischen Synapse Mit Anhaltender Tyrosinphosphorylierung

Immunity. Jun, 2002  |  Pubmed ID: 12121665

Shmoos, Flöße, Und Uropods-die Vielen Facetten Der Zellpolarität

Cell. Jul, 2002  |  Pubmed ID: 12150993

Schliff: Quantitative Bildgebung Von Floß Akkumulation in Der Immunologischen Synapse

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12218094

T-Zell-Aktivierung: Ein Multidimensionales Signalisierungsnetzwerk

Current Opinion in Cell Biology. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12231352

Die Immunologischen Synapse: Integrine Auf Der Bühne

Immunological Reviews. Aug, 2002  |  Pubmed ID: 12234366

Die Korrelation Eines Dynamischen Modells Zur Immunologischen Synapse Formation Mit Effektor-Funktionen: Zwei Wege, Um Die Bildung Synapse

Trends in Immunology. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12297421

Die Synapse Montage Modell

Trends in Immunology. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12297422

Neuronale Und Immunologische Synaptischen Beziehungen

Science (New York, N.Y.). Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12399580

Verordnung Des T-Zell-Migration Durch Die Bildung Von Immunologischen Synapsen: Das Stoppsignal Hypothese

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2002  |  Pubmed ID: 12405204

Koordination Der T-Zell-Aktivierung Und Migration Durch Die Bildung Der Immunologischen Synapse

Annals of the New York Academy of Sciences. Apr, 2003  |  Pubmed ID: 12727623

In-vivo-Bildgebung Ansätze in Tiermodellen Von Rheumatoider Arthritis

Arthritis Research & Therapy. 2003  |  Pubmed ID: 12823846

Unterstützte Planaren Doppelschichten in Studien Zur Immun-Zell-Adhäsion Und Kommunikation

Journal of Immunological Methods. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12957393

Die Immunologischen Synapse Balanciert T-Zell-Rezeptor-Signal-und Abbau

Science (New York, N.Y.). Nov, 2003  |  Pubmed ID: 14512504

In-silico-Modelle Für Zelluläre Und Molekulare Immunologie: Erfolge, Verheißungen Und Herausforderungen

Nature Immunology. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14515121

Zytotoxische T-Lymphozyten Bilden Eine Antigen-unabhängige Ringverknüpfung

The Journal of Clinical Investigation. Jan, 2004  |  Pubmed ID: 14702108

Calcineurin Legt T-Zell-Unempfindlichkeit Durch Gezielte Proteolyse Von Signalproteine

Nature Immunology. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 14973438

Membranen Als Boten in T-Zell-Adhäsion Signalisierung

Nature Immunology. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15052266

LFA-1/ICAM-1 Zusammenspiel Senkt Die Schwelle Von B-Zell-Aktivierung Durch Erleichterung Des B-Zell-Adhäsion Und Synapsenbildung

Immunity. May, 2004  |  Pubmed ID: 15142527

Was Ist Die Bedeutung Der Immunologischen Synapse?

Trends in Immunology. Jun, 2004  |  Pubmed ID: 15145322

T-Zell-Rezeptor-Antagonismus Stört MHC-Clustering Und Integrin-Strukturierung Bei Immunologischen Synapse Formation

The Journal of Cell Biology. Aug, 2004  |  Pubmed ID: 15314068

Stop and Go-Verkehr Zu T-Zellreaktionen Zu Stimmen

Immunity. Sep, 2004  |  Pubmed ID: 15357942

Eine Polarisierende Lage

Nature Immunology. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15454929

Visualisierung Von Netzwerken Dendritischen Zellen in Vivo

Nature Immunology. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15543150

Intravaskuläre Immunüberwachung Durch CXCR6 + NKT-Zellen Patrouillieren Lebersinusoide

PLoS Biology. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15799695

Distinct Rolle Lymphocyten-Funktions-assoziiertes Antigen-1 Bei Der Vermittlung Wirksame Zytolytische Aktivität Von Zytotoxischen T-Lymphozyten

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. May, 2005  |  Pubmed ID: 15851656

ICAM-1 Co-stimuliert Zielzellen Zu Antigen-Präsentation Zu Erleichtern

Current Opinion in Immunology. Jun, 2005  |  Pubmed ID: 15886114

ATP Vermittelt Eine Schnelle Reaktion Auf Lokale Mikroglia-Hirn-Trauma in Vivo

Nature Neuroscience. Jun, 2005  |  Pubmed ID: 15895084

Ein Modell Für CD2/CD58-mediated Adhäsionsverstärkung

Annals of Biomedical Engineering. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15909654

Stabile T-Zell-Interaktionen Von Dendritischen Zellen Vorangehen Die Entwicklung Von Toleranz Und Immunität Sowohl in Vivo

Nature Immunology. Jul, 2005  |  Pubmed ID: 15924144

Eine Molekulare Analyse Von Lymphozyten-Teilnahmslosigkeit Durch Anhaltende Calcium-Signalgebung Induziert

Novartis Foundation Symposium. 2005  |  Pubmed ID: 15999806

Aktin Und Agonist MHC-Peptid Komplex-abhängige T-Zell-Rezeptor Mikrocluster Als Gerüste Für Die Signalisierung

The Journal of Experimental Medicine. Oct, 2005  |  Pubmed ID: 16216891

T-Zell-Rezeptor (TCR) Mikrocluster bilden innerhalb von Sekunden der T-Zell-Kontakt mit unterstützten planar Doppelschichten, enthält der Adhäsion Molekül-1 und Agonist Haupthistokompatibilitätskomplex (MHC)-Peptid-komplexe und Erhöhung von cytoplasmatische Ca2 + wird innerhalb von Sekunden die erste nachweisbare Mikrocluster beobachtet. Bei 0-30 s nach Kontakt, TCR Mikrocluster sind colocalized mit aktivierten Formen der Lck, ZAP-70 und der Linker für die Aktivierung von T-Zellen. 2 Min aktivierte Kinasen werden in den älteren zentrale Mikrocluster reduziert, sondern sind reichlich vorhanden in jüngeren periphere Mikrocluster. Von 5 min TCR im zentralen supramolekulare Aktivierung Cluster haben reduziert aktivierte Kinasen, während schwache periphere TCR Mikrocluster effizient erzeugt Lck und ZAP-70 aktiviert. TCR Microcluster Bildung ist resistent gegen Hemmung von Src Familie Kinasehemmer PP2, allerdings ist durch Aktin-Polymerisation Inhibitor Latrunculin A. aufgehoben Wir schlagen Src Kinase-unabhängige Bildung von TCR Mikrocluster als Antwort auf Agonisten MHC-Peptid ein Aktin-abhängige-Gerüst für die Signalverstärkung ermöglicht.

Eine Dynamische Ansicht Der Immunologischen Synapse

Seminars in Immunology. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16266811

T-Zell-Aktivierung erfordert Wechselwirkungen zwischen T-Zell-Antigen-Rezeptoren (TCR) und Peptiden präsentiert von major Histocompatibility komplexer Moleküle (MHCp) in eine selbstklebende Übergang zwischen der T-Zelle und Antigen-präsentierenden Zelle. Stabile Kreuzungen mit Bullauge supramolekulare Aktivierung Clustern (SMACs) wurden als immunologische Synapsen (IS) definiert. Diese Strukturen bei der T-Zell-APC Kommunikation und gesteuerte Sekretion zu ermöglichen. T-Zellen können auch durch asymmetrische Hemi-Synapsen (HS) aktiviert werden, die Migration bei der Signal-Integration zu ermöglichen. IS und HS arbeiten in unterschiedlichen Phasen der T-Zell-Grundierung. Optimale Effektor-Funktionen können auch von zyklischen Verwendung von IS und HS abhängen.

Neu Generiert T-Zell-Rezeptor Mikrocluster Initiieren Und Wahrung Des T-Zell-Aktivierung Durch Rekrutierung Von Zap70 Und SLP-76

Nature Immunology. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16273097

Aktivierung der T-Zell-Rezeptor (TCR) und Signalisierung immunologische Synapse Bildung vorausgehen und Stunden nach der Initiation gleichbleibend sind. Allerdings sind die genauen physischen Standorten der anfänglichen und nachhaltige TCR signalisieren nicht endgültig bekannt. Wir berichten hier, dass T-Zell-Aktivierung wurde initiiert und dabei in TCR-haltigen Mikrocluster generiert, die auf den ersten Kontakt Sites und der Peripherie der Reifen immunologische Synapse. Mikrocluster mit TCRs, wurden die Tyrosinkinase Zap70 und das Adapter-Molekül SLP-76 kontinuierlich an der Peripherie generiert. TCR Mikrocluster migriert in Richtung der zentralen supramolekulare Cluster während Zap70 und SLP-76 dissoziiert aus diese Mikrocluster vor der Mikrocluster mit zentralen supramolekulare Cluster TCR-Reich verschmolzen. Tyrosin-Phosphorylierung und Kalzium Zustrom wurden als Mikrocluster bildete der erste Kontakt Standorte induziert. Hemmung der Signalisierung verhindert Rekrutierung von Zap70 in der Mikrocluster. Diese Ergebnisse darauf hingewiesen, dass TCR-reiche Mikrocluster initiieren und, TCR signalisiert aufrechterhalten.

Geänderte TCR Signalisierung Von Geometrisch Repatterned Immunologische Synapsen

Science (New York, N.Y.). Nov, 2005  |  Pubmed ID: 16293763

Der immunologische Synapse ist eine spezielle Zell-Zell-Kreuzung, die durch groß angelegte räumliche Muster der Rezeptoren und signalisierende Moleküle noch bleibt weitgehend rätselhafte in Bezug auf Bildung und Funktion definiert ist. Wir verwendet unterstützten Bilayer Membranen und Nanometerbereich Strukturen auf die zugrunde liegende Substrat hergestellt, um geometrische Zwangsbedingungen auf immunologische Synapse Bildung zu verhängen. Analyse der resultierenden Alternativ gemusterten Synapsen offenbart eine kausale Beziehung zwischen der radialen Position der T-Zell-Rezeptoren (TCRs) und signalisiert Aktivität, mit verlängert Signalisierung von TCR Mikrocluster, die mechanisch in den Randgebieten der Synapse aufgefangen worden war. Diese Ergebnisse stehen im Einklang mit einem Modell von der Synapse in welche räumliche Verlagerung von TCRs einen direkten Mechanismus Signal Verordnung darstellt.

CD80 Zytoplasmatischen Domäne Steuert Lokalisierung Von CD28, CTLA-4 Und Von Protein-Kinase-Ctheta in Der Immunologischen Synapse

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16339518

Die Bindung des Liganden kostimulatorischen CD80 CD28 oder CTLA-4 auf T-Zellen eine wichtige Rolle bei der Regulierung der T-Zell-Antwort. Wir haben die Rolle der zytoplasmatischen Domäne von CD80 in murinen T-Zell-Costimulation und seiner Organisation in der immunologischen Synapse (IS) geprüft. Entfernung von CD80 zytoplasmatischen Schwanz sank seine Wirksamkeit in costimulating proliferative T-Zell-Antwort und frühe Il-Produktion als Reaktion auf Agonist MHC-Peptid-komplexe. Immunfluoreszenz Studie zeigte eine verminderte schwanzlose CD80-Ansammlung in der Informationsgesellschaft von naiven T-Zellen. Die beiden Formen der CD80 angesammelt anders bei den IS; die schwanzlose CD80 wurde mit TCR colocalized, während die in CD80 von TCR getrennt wurde. Darüber hinaus haben wir bewiesen, dass CD80, CD28 und Protein-Kinase Ctheta colocalized in der Anwesenheit oder Abwesenheit des Schwanzes CD80 zytoplasmatischen. Daher der zytoplasmatische Schwanz CD80 regelt die räumliche Lokalisierung der IS und seiner Rezeptoren und T-Zelle signalisieren der Moleküle wie Proteinkinase Ctheta und dadurch erleichtert die vollständige T-Zell-Aktivierung.

Regulatorische T-Zellen Hemmen Stabile Kontakte Zwischen CD4 + T-Zellen Und Makrophagen, Die In-vivo

The Journal of Experimental Medicine. Mar, 2006  |  Pubmed ID: 16533880

Regulatorische T (T-Reg)-Zellen üben starke unten-modulierende Wirkung auf Immunantworten, aber es ist nicht bekannt, wie sie in-vivo handeln. Mit intravital zwei-Photonen-Laser-scanning-Mikroskopie haben wir festgestellt, dass in Ermangelung T-Reg-Zellen, die Fortbewegung des Autoantigen-spezifische T-Zellen in Lymphknoten verringert wird und die Kontakte zwischen T-Zellen und Antigen belasteter dendritische Zellen (DCs) von längerer Dauer sind. T-Reg-Zellen können so die frühe Beeinflussung der Immunantworten ausüben, durch die Herstellung von stabilen Kontakten während der Grundierung der naive T-Zellen durch DCs abgeschwächt.

T-Zellen Wie Einen Festen Molekularen Händedruck

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2006  |  Pubmed ID: 16537367

T-Zell-Dendritische Zelle Immunologische Synapsen

Current Opinion in Immunology. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16777399

Dendritische Zellen (DCs) sind myeloid Abstammung Zellen, die geprägt sind von ihrer Umgebung und ältere, die als Reaktion auf mikrobielle Produkte. Eine entscheidende Rolle des DC ist diese Kontext-sensitive Informationen zu T-Zellen als auch daß selbst und fremde MHC-Peptid-komplexen durch Bildung eine immunologische Synapse Gesundheitsgefährdung zu vermitteln. Die Struktur der T-Zell-DC immunologische Synapse befinden sich die kanonische Struktur gebildet mit B-Zellen oder unterstützten planar Doppelschichten an, dass es mehrere Brennpunkte des T-Zell-Rezeptor-Interaktionen und keinen Schwerpunkt. Aktuelle Studien über Modellsysteme geben Einblick in die Mechanismen und die biologischen Auswirkungen der einzigartige T-Zell-DC synaptische Muster.

Dynamische Imaging Des Immunsystems: Fortschritt, Fallstricke Und Versprechen

Nature Reviews. Immunology. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16799470

Beide angeborenen und erworbenen Immunität sind die wandernden Kapazität der myeloischen und lymphatischen Zellen abhängig. Effektorzellen des angeborenen Immunsystems rasch infizierte Gewebe, während Wachposten dendritische Zellen in dieser Sites mobilisieren und den transit zu den Lymphknoten. In diesen und anderen sekundären lymphatischen Geweben fördern die Interaktionen zwischen verschiedenen Zelltypen adaptive humorale und Zell-vermittelten Immunantwort. Jüngste Fortschritte in der Lichtmikroskopie konnten direkte Visualisierung dieser Ereignisse in lebenden Tieren und Gewebe Explantaten, wodurch eine neue Wertschätzung der Dynamik der immunen Zellen Verhalten. In diesem Artikel überprüfen wir die grundlegenden Techniken und die Werkzeuge für in-situ Bildgebung, sowie die Einschränkungen und mögliche Artefakte dieser Methoden verwendet.

T-Zell-Rezeptor-proximale Signale Sind in Peripheren Mikrocluster Nachhaltig Und Im Zentralen Supramolekulare Aktivierung Cluster Beendet

Immunity. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16860761

T-Zell Rezeptor (TCR) Signalisierung wird initiiert und in Mikrocluster nachhaltig; Allerdings ist nicht bekannt, ob Signalisierung auch im TCR-reiche zentrale supramolekulare Aktivierung Cluster (cSMAC tritt). Wir haben gezeigt, dass die cSMAC, gebildet durch die Fusion von Mikrocluster weitere CD45 als Mikrocluster enthalten und eine Website in Lysobisphosphatidic Säure, ein Lipid bereichert ist-Sortierung Ubiquitinated Membranproteine für Abbau beteiligt. Kalzium-Signalisierung über TCR wurde durch Latrunculin-A-Behandlung innerhalb von 2 Minuten durch Anti-MHCp-Behandlung und 1 min blockiert. TCR-MHCp Interaktionen in der cSMAC überlebte diese Perturbationen 10 min und folglich reichten nicht aus, um Signalisierung zu erhalten. TCR Mikrocluster waren auch resistent gegen Störungen durch Anti-MHCp und Latrunculin-A-Behandlungen. Wir vorschlagen, von stabilisierten Mikrocluster getragen ist und in der cSMAC endet, TCR signalisiert eine Struktur von welche TCR Leistungsabfall sortiert werden. Unsere Studien zeigen eine Rolle für F-Actin in TCR Signalisierung über Microcluster-Bildung.

Immunologie. Wann Wird F-Actin Zu Viel Des Guten

Science (New York, N.Y.). Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16902113

Laterale Membran Wellen Bilden Eine Universelle Dynamische Muster Stäbchenförmiges Zellen

Physical Review Letters. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16907546

Wir haben aktive Bewegungen der Zelle Umfang auf speziell beschichteten Substraten für eine Vielzahl von Zellen einschließlich Mäuseembryonalen und T-Zellen, sowie Flügel Disk Zellen von Fruchtfliegen überwacht. Trotz der verschiedene Funktionen und in der aus mehrere Stämme, teilen diesen Zelltypen ein gemeinsames raumzeitliche Muster in ihren normalen Membran-Geschwindigkeit; Wir zeigen, dass Körper und Retraktion Ereignisse in seitliche Wellen entlang der Zellmembran organisiert sind. Diese Wellenmuster zeigen sowohl räumliche und zeitliche Langstrecke periodische Korrelationen des Actomyosin Gels.

Angeborene Reaktion Auf Fokalen Nekrotischen Verletzungen Innerhalb Der Blut - Hirn-Schranke

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Oct, 2006  |  Pubmed ID: 17015712

Wir haben die erste angeborene Immune Antwort zur fokalen nekrotischen Schädigung auf verschiedenen Seiten der Maus Blut - Hirn-Schranke durch zwei-Photonen-intravital-Mikroskopie untersucht. Transgene Mäuse, in denen der Veranstalter die myeloische Isoform von Lysozym GFP Laufwerke, wurden verwendet, um die Granulozyten und Monozyten zu verfolgen. Nekrotische Verletzungen in den Meningen, aber nicht das Gehirn Parenchym, rekrutierten GFP +-Zellen innerhalb von Minuten, die vollständig umgeben von nekrotischen Standort innerhalb eines Tages. Vor kurzem wurde vermutet, dass Microglial Zellen und Astrozyten zusammenarbeiten, um eine eindeutige Antwort, um laser-Verletzung hinter die Blut - Hirn-Schranke zu mounten. Wir folgten die Microglial Antwort heterozygote knockin Mäusen in der GFP CX3CR1 kodierende Sequenz ersetzt. Vor Verletzungen Microglial Zelle Körper waren unbeweglich über Tage, aber verschoben auf die Laser-Verletzung-Website innerhalb eines Tages. Wir folgten Astrozyten, die Zusammenarbeit mit Microglial Zellen als Reaktion auf fokalen Verletzung vorgeschlagen wurden, mit Transgene Mäusen in welche Gliazellen fibrilläre sauren Protein Projektträger Laufwerke GFP-Expression. Vor Verletzung durchdringen feine Gliazelle Prozesse der Parenchym. Astrozyten polarisiert gegenüber die Verletzung in ein ATP Connexin Hemichannels und intrazellulären Ca2 +-abhängigen Prozess. Das Astrozyten-Netzwerk eingerichtet cytoplasmatische Ca2 + Farbverlauf, der die Antwort Microglial vorausging. Dies steht im Einklang mit Gliazelle-Microglial Zusammenarbeit, diese angeborenen Antwort, die Blut-Leukozyten ausschließt.

Auswirkungen Der Immunologischen Synapse Auf T-Zellen Zu Signalisieren

Results and Problems in Cell Differentiation. 2006  |  Pubmed ID: 17068972

T-Zell-Aktivierung erfordert Wechselwirkungen zwischen T-Zell-Antigen-Rezeptoren und Peptiden präsentiert von major Histocompatibility komplexe Moleküle in eine selbstklebende Übergang zwischen der T-Zelle und Antigen-präsentierende Zellen (APC). Stabile Kreuzungen mit Bullauge supramolekulare Aktivierung Cluster wurden als immunologische Synapsen (IS) definiert. Diese Strukturen bei der T-Zell-APC Kommunikation und gesteuerte Sekretion zu ermöglichen. T-Zellen können auch durch asymmetrische Hemisynapses (HS) aktiviert werden, die Migration bei der Signal-Integration zu ermöglichen. IS und HS dominieren in unterschiedlichen Phasen der T-Zell-Grundierung. Optimale Effektor-Funktionen können auch von zyklischen Verwendung von IS und HS abhängen.

Quantum Dot/Peptid-MHC-Biosensoren Zeigen Starke CD8-abhängige Kooperation Zwischen Selbst- Und Virale Antigene, Die Die T-Zell-Antwort Zu Ergänzen

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17077145

Cytotoxische T-Lymphozyten (CTL) können Antworten auf einige wenige virale Peptid-MHC-I (pMHC-ich) komplexe unter eine Vielzahl von endogenen selbst pMHC Virus-nichts zu tun haben-ich komplexe auf Virus-infizierten Zellen angezeigt. Um die molekulare Erkennung-Ereignisse auf Leben CTL zu erhellen, wir haben genutzt einen monomolekularen Biosensor bestehend aus Halbleiter-Nanokristallen, Quantenpunkte, beladen mit kontrollierten zahlreichen Virus abgeleitet (Cognate) und andere (noncognate) pMHC-ich komplexe und deren Anerkennung durch Antigen-spezifische T-Zell-Rezeptor (TCR) auf Antiviren-CD8(+) T-Zellen untersucht. Die einzigartige Architektur von nanoskaligen Quantum Dot/pMHC-I-Konjugaten offenbart, dass unerwartet starke multivalenter CD8-MHC-I Wechselwirkungen den kooperativen Beitrag der noncognate pMHC zugrunde liegen-ich die Anerkennung der verwandten pMHC-I von TCR T-Zell-Antworten zu erweitern. Die kooperative, CD8-abhängige Ausbreitung des Signals aus ein paar produktiv engagierten TCR auf viele andere TCR kann erklären, die bemerkenswerte Fähigkeit der CTL auf Virus-infizierten Zellen reagieren, die paar verwandten pMHC zu präsentieren-ich komplexe.

Kontrolle Der Antigen-Präsentation Mit Einer Photoreleasable-Agonist-Peptid

Journal of the American Chemical Society. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 17131984

Der immunologische Synapse ist eine spezialisierte interzelluläre Kreuzung zwischen einer T-Zelle und eine Zielzelle, die das Engagement der Rezeptoren und Liganden in Raum und Zeit als Mittel der regulierende Funktion orchestriert. Hier stellen wir ein Reagenz für die Steuerung der räumlichen und zeitlichen Präsentation natürliche Antigen auf T-Zellen. Nachtfalter Cytochrom c (88-103) Peptid (MCC), ein Agonist an den murinen T-Zell-Rezeptor und bei im Zusammenhang mit H2 IEk Haupthistokompatibilitätskomplex (IEk), wurde mit dem Sidechain-Amin der Lys99 Konjugation mit einer lichtempfindlichen Schutzgruppe, 6-Nitroveratryloxycarbonyl (SVOC) synthetisiert. Zellen plattiert auf unterstützt Doppelschichten anzeigen mobile der Adhäsion Molekül-1 (ICAM-1) und SVOC-MCC geladenen IEk nicht immunologische Synapsen und ausgestellten geringen intrazellulären Kalziumspiegel, ähnlich wie Zellen mit selbst-Peptid präsentiert bilden. Bestrahlung mit UV-Licht reichte Agonist Tätigkeit in-situ wiederherstellen.

Mechanismen Der Zellulären Avidität Verordnung in CD2-CD58-vermittelter T-Zell-Adhäsion

ACS Chemical Biology. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17168569

Der CD2-Rezeptor auf T-Lymphozyten ist für T-Zell-Adhäsion und Stimulation durch Antigen-präsentierende Zellen (APC). Blockade der CD2-Funktion ist immunsuppressive Modellsysteme und Menschen, die die Bedeutung der CD2 für die zelluläre Immunantwort. Obwohl die Affinität der Molekulare Interaktion zwischen CD2 und seine Counter-receptor, CD58, relativ gering gemessen in Lösung ist, vermittelt diese Interaktion enge Haftung die 2D Zell-Zell-Oberfläche. Um die Mechanismen, die für die Regulierung der Gier der CD2-CD58 Interaktion zu verstehen, wir Maßen Anzahl, Affinität und seitlichen Mobilität von CD2 Molekülen auf Ruhe und T-Zellen aktiviert. ZELLAKTIVIERUNG verursacht eine 1.5-fold Zunahme der Zahl der CD2-Sites auf der Zelloberfläche, und die 2D Affinität der CD2 für CD58 um 2,5-fach erhöht. Die Kombination aus T-ZELLAKTIVIERUNG und CD2 Verbindung zu CD58 sank der seitlich mobile Bruchteil die Ligaturen CD2. Zusammen würden diese Änderungen erheblich verbessern CD2 Avidität und T-Zell-APC Adhäsion zu stärken. Die Veränderung der CD2 mobile Bruchteil legt nahe, dass die Zelle Zytoskelett Regulierungsbehörden wird verwendet, um den Rezeptor selektiv am Standort Kontakt mit Oberflächen auszudrücken CD58 zu immobilisieren. Unsere Beobachtungen sind konsistent mit einem Modell in die T-Zell Aktivierung anfänglich erhöhte CD2 2D Affinität Zelle Oberfläche Rezeptor Ausdruck und seitlichen Mobilität, so dass die CD2-Moleküle zu Websites mit CD58-Lager APCs verbreiten induziert. T-ZELLAKTIVIERUNG führt anschließend die CD58 gebundene CD2 erkannt und an Standorten der Zell-Zell-Kontakt, so stärken, T-Zell-APC Adhäsion immobilisiert werden.

Kraft Als Vermittler Von Integrin Konformationsveränderungen Während Leukozyten Festnahme Auf Blutgefäße Und Antigen-präsentierenden Zellen

Immunity. Jan, 2007  |  Pubmed ID: 17241958

Integrine umfassen eine große Familie von Zell-Zell und Zelle-Matrix Adhäsion-Rezeptoren, die schnell ihre Haftfähigkeit zu modulieren. Die Verhaftung von Leukozyten Integrine auf deiner vaskuläre Betten umfasst die sofortige Konformationsänderungen Schalter Generieren von scher-und säurefeste Adhäsionen. Strukturelle Daten schlagen vor, daß diese Integrine in niedrig-Affinität Konformationen gepflegt sind und schnell Konformationsänderungen Schalter über zellplasmatischen Änderungen Prozessänderungen ("Inside-Out"-Signalisierung) und gleichzeitige Ligand induziert Umlagerungen ("outside-in") ausgestrahlt. Diese bidirektionale-Aktivierung wird durch Signale von endothelialen Attractanten (Chemokine) beschleunigt. Aktuelle Studien prognostizieren, dass Scherkräfte im Bereich Piconewton (pN) pro Integrin diese biochemische Schalter erleichtern können. Nach Paravasation umfasst die Antigen-Anerkennung kleineren inneren Kräfte vom Zytoskelett Motoren und Aktin Polymere bilden die immun Synapse. In diesem Bericht wenden wir uns, wie Kräfte allosterischer Integrin Aktivierung durch biochemische Signale erleichtern. Anhaltspunkte dafür, dass das Zytoskelett Ankerplatz vorgeformt, anstatt freie Integrin Mobilität Schlüssel für Kraft-verbesserte Integrin Aktivierung von Chemokinen und TCR Signale ist.

In-vivo Bildgebung Germinal Zentren Zeigt Eine Dynamische Offene Struktur

Nature. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17268470

Germinal Zentren sind spezialisierte Strukturen, wobei B-Lymphozyten zu, klonale Expansion, Class Switch Rekombination, Antikörper-gen Diversifizierung und Affinität Reifung unterziehen. Drei bis vier Antigen-spezifische B-Zellen besiedeln ein Follikel etablieren ein germinal Center und werden schnell Division germinal-Zentrum-Centroblasts, die zu dunkle Bereiche führen. Centroblasts produzieren nicht wuchernden Centrocytes, die man zur leichten Zone des germinal Zentrums, zu migrieren, die reich an Antigen-Trapping follikuläre dendritische Zellen und CD4 + T-Zellen ist. Es ist vorgeschlagen worden, daß Centrocytes in der hellen Zone aufgrund ihrer Fähigkeit, cognate Antigen binden ausgewählt werden. Jedoch wurden keine Studien der germinal-Zentrum Dynamik oder das Zugverhalten von germinal-Zentrum Zellen in-vivo. Hier berichten wir die direkte Visualisierung von B-Zellen in Lymphknoten germinal Zentren von zwei-Photonen-Laser-Rastermikroskopie bei Mäusen. Fast alle Antigen-spezifische B-Zellen eine germinal-Zentrum-Reaktion beteiligt waren, stäbchenförmiges und körperlich eingeschränkten germinal Zentrum aber bidirektional zwischen dunklen und hellen Zonen migriert. Follikuläre B-Zellen waren insbesondere häufige Besucher zum Fach germinal-Zentrum, was darauf hindeutet, dass alle B-Zellen Antigen in germinal Zentren gefangen scannen. In Übereinstimmung mit dieser Beobachtung, fanden wir, dass hoher Affinität Antigen-spezifische B-Zellen zu einer laufenden germinal-Zentrum-Reaktion eingestellt werden können. Wir schließen, dass die offene Struktur des germinal Zentren verstärkt den Wettbewerb und stellt sicher, dass seltene hoher Affinität-B-Zellen Antikörperantworten teilnehmen können.

Der Lymphozyten Funktion-assoziierte Antigen-1-Rezeptor Costimulates Plasmamembran Ras über Phospholipase D2

Nature Cell Biology. Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17486117

RAS Aktivierung infolge der Antigen-Rezeptor (T-Zell-Rezeptor; TCR) Engagement auf T-Lymphozyten ist für T-Zell-Entwicklung, Auswahl und Funktion erforderlich. Lymphozyte-Funktion-assoziierte Antigen-1 (LFA-1) vermittelt Lymphozyte Adhäsion, Stabilisierung des Immunsystems Synapse und bidirektionale Signalisierung. Mit einem fluoreszierenden Biosensor fanden wir, dass TCR Aktivierung mit oder ohne Costimulation von CD28 zur Aktivierung des Ras nur über Golgi-Apparat, führte während Costimulation mit LFA-1 Ras Aktivierung auf die Golgi und die Plasmamembran induziert. RAS Aktivierung auf beide Fächer benötigt, RasGRP1, ein Austausch-Faktor von Kalzium und Diacylglycerol (DAG), reguliert, aber Phospholipase C (PLC) Aktivität war nur bei der Aktivierung auf die Golgi. Engagement der LFA-1 höhere DAG an der Plasmamembran durch die Stimulierung Phospholipase D (PLD). PLD2 und Phosphatidsäure saure Phosphatase (PAP) waren für Ras Aktivierung auf der Plasmamembran erforderlich. So wirkt LFA-1 durch PLD2 das Muster der Ras Aktivierung stromabwärts des TCR umzuformen.

Gegenläufige Effekte Von PKCtheta Und WASp Auf Symmetrie Zu Brechen Und Verlagerung Von Der Immunologischen Synapse

Cell. May, 2007  |  Pubmed ID: 17512410

Der immunologische Synapse (IS) ist eine Kreuzung zwischen der T-Zelle und die Antigen-präsentierenden Zelle und besteht aus supramolekulare Aktivierungs-Clustern (SMACs). Keine Studien wurden auf die Naïve T Zelle IS Dynamik veröffentlicht. Hier finden wir, dass IS Bildung bei Antigen-Anerkennung Zyklen stabil IS-Entstehung und autonome naiven T-Zelle Migration umfasst. Der Migrationsphase wird mit PKCtheta, angetrieben, die F-Aktin-abhängigen periphere (p) SMAC lokalisiert wird. PKCtheta(-/-) T-Zellen gebildet-Hyperstable ist in vitro und in-vivo und wie WT-Zellen, schnelle Schwingungen in die distale SMAC angezeigt, aber zeigten sie reduzierte langsame Schwingungen in pSMAC Integrität. IST, dass die Reformation durch das Wiscott Aldrich-Syndrom Protein (WASp) angetrieben wird. WASp(-/-) T-Zellen, die angezeigten normal IS-Bildung, sondern waren nicht in der Lage, zu reformieren sei nach der Migration PKCtheta gehemmt wurde. Somit steuern gegenläufige Effekte von PKCtheta und WASp IS Stabilität durch pSMAC Symmetriebrechung und Reformation.

Anforderungen Für T-Lymphozyten-Migration in Der Explantierten Lymphknoten

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17548612

Obwohl die Anforderungen für die T-Lymphozyten homing auf Lymphknoten (LNs) gut untersucht sind, ist über die Anforderungen für die T-Lymphozyten Fortbewegung innerhalb LNs. Imaging murinen T-Lymphozyten-Migration in der explantierten LNs mit weit weniger bekannt, dass zwei-Photonen-Laser-scanning-Fluoreszenzmikroskopie bietet eine Gelegenheit, diese Anforderungen systematisch zu studieren. Wir haben ein geschlossenes System für eine intakte LN mit kontrollierter Temperatur, Sauerstoffzufuhr, und Perfusion imaging entwickelt. Naive T-Lymphozyten Fortbewegung in der Tiefe Parakortex der LN benötigt eine Perfusion-Rate von > 13 Microm/s und einem Partialdruck von O(2) (pO(2)) von > 7,4 %. Naive T-Lymphozyten Fortbewegung in der subkapsuläre Region lag bei 38 % langsamer und höher drehen Winkeln und Verhaftung Koeffizienten als naive T-Lymphozyten in den tiefen Parakortex hatte. T-Lymphozyten-Aktivierung das Erfordernis einer pO(2) verringert, aber auch die Geschwindigkeit der Fortbewegung in der Tiefe Parakortex zurückgegangen. Obwohl CCR7(-/-) naive T-Zellen eine geringe Senkung in Fortbewegung angezeigt, systemische Behandlung mit Pertussis-Toxin reduzierte naive T-Lymphozyten Geschwindigkeit um 59 %, angibt, einen Beitrag von Galpha (i)-Signalisierung, sondern die Beteiligung der anderen G-Protein-gekoppelte Rezeptoren neben CCR7 vermittelt. Rezeptor Aussparungen oder pharmakologische Hemmung der Adenosin, PG/Lipoxygenase, Lysophosphatidylcholine und Sphingosin-1-Phosphat-Wege naive T-Zelle Migration nicht individuell ändern. Diese Daten implizieren, pO(2), Gewebe-Architektur und G-Protein-gekoppelte Rezeptor Signalisierung bei Regulierung der naive T-Lymphozyten-Migration in der explantierten LNs.

Kleiner GTPasen Und LFA-1 Modulieren Gegenseitig, Adhäsion Und Signalisierung

Immunological Reviews. Aug, 2007  |  Pubmed ID: 17624948

Leukozyten-Funktion-assoziierte Antigen-1 (LFA-1) ist ein Integrin, die für die T-Zell-Adhäsion und immunologische Reaktionen entscheidend ist. Als Transmembran Rezeptor und Adhäsion Molekül signalisiert die LFA-1 bidirektional, wobei Informationen zur extrazellulären Liganden außen nach innen übergeben wird, während zelluläre Aktivierung übermittelten innen nach außen auf die selbstklebende APPsα ist. Hier überprüfen wir die Rolle der kleinen Guanosin Triphosphatases (GTPasen) im LFA-1 zu signalisieren. Rap1, eine Ras-bezogene GTPase scheint zentrale LFA-1-Funktion. Rap1 ist durch Rezeptor-Signalisierung [z.B. T-Zell-Rezeptor (TCR), CD28 und zytotoxischen T-Lymphozyten Antigen-4 (CTLA-4)] und Adapter-Proteine [z.B. Adhäsion und Förderung der Degranulation Adapter Protein (ADAP) und Src Kinase-assoziierte Phosphoprotein von 55 kDa (SKAP-55)] geregelt. Inside-Out-Signalisierung durchfließt Rap1 Regulierungsbehörde Adhäsion und Zelle Polarisierung im lymphatischen Gewebe (RAPL) und Rap1-GTP interagierenden Adapter Molekül (RIAM) angereichert, die dienen in Verbindung mit Zytoskeletts auf die Zytosolische Domäne des LFA-1, Adhäsion von der APPsα zu erhöhen. Außen nach innen Signalisierung verwendet den kleinen GTPasen z. B. Rho Proteine. VAV-1, einen Guaninnukleotid-Austauschfaktor für Rho Proteine, wird als Folge der LFA-1-Engagement aktiviert. Jun-Aktivierung verbindliches Protein 1 (JAB-1) und Cytohesin-1 haben als möglich außen nach innen Signalling Zwischenprodukte verwickelt. Wir haben kürzlich gezeigt, dass Ras auch flussabwärts von LFA-1-Engagement: LFA-1 Signalisierung durch Phospholipase D (PLD) an RasGRP1 für die Ras-Aktivierung auf der Plasmamembran nach Stimulation des TCR erforderlich war.

Peptid-MHC-Potenz Regelt Dynamische Interaktionen Zwischen T-Zellen Und Makrophagen in Den Lymphknoten

Nature Immunology. Aug, 2007  |  Pubmed ID: 17632517

T-Zellen Umfrage antigenpräsentierende dendritische Zellen (DCs) durch die Migration durch DC Netze, verhaften und Pflege von Kontakten mit DCs für mehrere Stunden nach der Begegnung High Potency komplexe von Peptid und Haupthistokompatibilitätskomplex (pMHC), was zu T-ZELLAKTIVIERUNG. Die Auswirkungen der niedrigen Potency pMHC komplexe auf T-Zellen in vivo sind jedoch unbekannt, wie der Mechanismus Steuerung T-Zell-Verhaftung. Hier wir T-Zell-Antworten, die zu hoch-, Mittel und niedrig-Potency-pMHC-komplexe in-vivo ausgewertet und festgestellt, dass unabhängig von Potenz, pMHC-komplexe induzierte Hochregulation von CD69, Anergy und Aufbewahrung von T-Zellen in den Lymphknoten. Jedoch induzierte nur hoher pMHC-komplexe, die durch DCs ausgedrückt, Kalzium-abhängige T-Zell-Verzögerung und Calcineurin-abhängige Anergy. Die pMHC-komplexe der niedrigeren Potenz induzierte stattdessen T-Zelle Anergy durch ein biochemisch unterschiedliche Verfahren, die T-Zell-Dynamik nicht beeinflussten.

Quantifizierung Und Modellierung Von Dreigliedrigen CD2-, CD58FC-Chimäre (Alefacept)-, Und CD16-vermittelte Zelladhäsion

The Journal of Biological Chemistry. Nov, 2007  |  Pubmed ID: 17911103

Alefacept ist ein Chimärer Protein kombinieren CD58 Immunglobulin-ähnlichen Domänen 1 mit menschlichen IgG1 Fc. Alefacept vermittelt Adhäsion durch Überbrückung CD2 auf T-Zellen zu Fc-Rezeptoren in Effektorzellen aktivieren, aber die Bindungsparameter Gleichgewicht haben nicht festgestellt worden. Alefacept vermittelte T-Zelle, die Tötung von NK-Zellen und Adhäsion zwischen den Zellen CD2 und CD16-Ausdrücken, in eine optimale Konzentration von 100 nM. Wir führen ein neuartige Messungen mit unterstützten Hobel Doppelschichten, aus denen zweidimensionalen und dreidimensionalen Schlüsselparameter nach Daten passend bestimmt werden können. Alefacept gehemmt konkurrierend Bilayer Zelladhäsion vermittelt durch die CD2-CD58-Interaktion. Alefacept vermittelte maximale Adhäsion der CD2(+) T-Zellen zu CD16B, ein Fc-Rezeptor, in planaren Doppelschichten bei 500 nM. Mechanistische Modell für Zelle-Bilayer Alefacept-vermittelte Adhäsion erlaubt Anpassung der Daten und Bestimmung der zweidimensionalen Bindungsparameter. Dazu gehörten die Dichte der Anleihen im Bereich der Adhäsion, die zur Aufrechterhaltung einer konsistenten durchschnittliche Bond-Dichte von 200 molecules/microm(2) und zweidimensionalen Verband Konstanten der 3.1 und 630 microm(2) für bivalently wuchs und monovalent gebundenen Formen von Alefacept, beziehungsweise. Die maximale Anzahl von CD16 gebunden und der locker Wert von 4.350 CD2 pro Zelle sind viel niedriger als die 40.000 CD2 pro Zelle gemessen mit Anti-CD2-Fab. Diese Ergebnisse legen nahe, dass zusätzliche Informationen benötigt werden, Alefacept-vermittelte Brücke Bildung vorherzusagen.

ZELLADHÄSIONSMOLEKÜLE Und Aktin-Zytoskeletts Immun Synapsen Und Kinapses

Current Opinion in Cell Biology. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 17923403

Der immunologische Synapse ist eine stabile selbstklebende Kreuzung zwischen einer polarisierten immun-Effektor-Zelle und einer Zelle für die Antigen-Lager. Immunologische Synapsen sind oft beobachtet, um eine auffallende radiale Symmetrie in der Ebene der Kontakt mit einem prominenten zentralen Cluster von Antigenrezeptoren, die umgeben von konzentrischen Ringe Adhäsionsmoleküle und Aktin-reiche Projektionen zu haben. Gibt es eine auffallende Ähnlichkeit zwischen der radialen Zonen von der immunologischen Synapse und dynamische Actinomyosin Module der Migration von Zellen. Bricht die Symmetrie der eine immunologische Synapse erzeugt eine bewegliche Klebstoff Kreuzung, die eine Kinapse kann als das Signal Integration von Immunzellen definiert werden während der Bewegung über der Oberfläche von Antigen-präsentierenden erleichtert Zellen.

Dynamik Der Host Verteidigung: Der Blick Auf Den Vorderen Linien

Nature Immunology. Nov, 2007  |  Pubmed ID: 17952039

Mechanismen Zur Trennung T Zell Rezeptor Und Adhäsion Moleküle Während Immunologische Synapse-Formation in Jurkat T-Zellen

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Dec, 2007  |  Pubmed ID: 18077330

T-Zellen, die Interaktion mit Antigen-präsentierenden Zellen (APC) Form eine "immunologische Synapse" (ist), eine Bullauge-Muster bestehend aus einem zentralen supramolekulare Aktivierung-Cluster angereichert mit T-ZELLREZEPTOREN (TCRs) umgeben von einem Ring der Adhäsionsmoleküle (eine periphere supramolekulare Aktivierungs-Cluster). Der Mechanismus für Segregieren TCR und Adhäsion Moleküle verantwortlich bleibt weitgehend unverstanden. Hier zeigen wir, dass aufgrund fortgesetzter Jurkat T-Zellen, die Interaktion mit einer planaren Lipid-Bilayer (Nachahmung einer APC) bilden ein IS, wodurch eine zugängliche Modellsystem zur Untersuchung des biologisches Zelle zugrunde liegenden IS Bildung verarbeitet. Wir fanden, dass ein Aktin-abhängigen Prozess verursacht TCR und Adhäsion Proteine an der Peripherie der Zelle gruppiert, aber diese Moleküle erschien, in den frühesten Stadien der Microdomain Bildung voneinander trennen. Die TCR und Haftung Microdomains an Aktin und centripetally durch retrograde Strömung durchgeführt wurden. Jedoch nur die TCR-Microdomains in der Aktin-abgereichertem Zelle-Center, eingedrungen, während die Adhäsion Microdomains unstable ohne eine zugrunde liegende Aktin-Zytoskeletts zu sein schien. Unsere Ergebnisse zeigen, dass TCR und Adhäsion Moleküle räumlich voneinander gut vor der Entstehung von einem Reifen IS partitionieren und differenzielle Aktin Interaktion, Form helfen und das endgültige Bullauge-Muster der vs pflegen.

Analyse Der Zweidimensionalen Dissoziationskonstante Des Seitlich Mobile ZELLADHÄSIONSMOLEKÜLE

Biophysical Journal. Feb, 2007  |  Pubmed ID: 17085486

Wir formulieren eine allgemeine Analyse um die zweidimensionale Dissoziationskonstante (2D Kd) zu ermitteln, und verwenden Sie diese Methode, um das Zusammenspiel von CD2-Ausdruck T-Zellen mit Glas-unterstützt planare Doppelschichten mit Leuchtstoff beschriftetem CD58, ein CD2-Counter-receptor zu studieren. CD2 und CD58 sind seitlich beweglich in ihren jeweiligen Membranen. Haftung wird durch die Ansammlung von CD2 und CD58 in der Zelle-Bilayer Kontaktfläche kenntlich gemacht; Adhäsion Molekül Dichte und Größe der Kontaktfläche erreichen Gleichgewicht innerhalb von 40 Minuten. Die Standardanalyse (Scatchard) Lösung-Phase Bindung gilt nicht im Falle der seitlich mobile Adhäsionsmoleküle aufgrund der dynamischen Natur der Interaktion. Wir leiten eine neue Bindung-Gleichung, B/F=[(Ntxf)/(KdxScell)]-[(VenturCom) /Kd], wo B und F sind gebunden und frei CD58 Dichte in der Kontaktfläche; NT ist CD2-Molekül-Anzahl pro Zelle; f ist die CD2 gebrochene Mobilität; Scell ist Zelle Oberfläche; und p ist das Verhältnis der Kontaktfläche bei Gleichgewicht zu Scell. Wir verwenden diese Analyse ermitteln, ob die 2D Kd für CD2-CD58 5.4-7.6 Moleküle/microm2 ist. 2D Kd-Analyse liefert eine allgemeine und quantitative Messung der die Regulierungsmechanismen Zell-Zell-Adhäsion.

Planare Doppelschichten Unterstützt Für Studie über Die Immunologische Synapse

Current Protocols in Immunology / Edited by John E. Coligan ... [et Al.]. Feb, 2007  |  Pubmed ID: 18432988

Unterstützte planare Doppelschichten wurden in der Immunologieforschung seit über 25 Jahren, einschließlich den ersten Demonstrationen der MHC-Peptid-komplexe funktionelle Aktivität und Adhäsion Molekül Aktivität eingesetzt. Neuere Änderungen der Methode sind benutzt worden, um zweidimensionale Affinitäten zu messen und die Bildung der immunologischen Synapse zu studieren. Diese deckt der Einbeziehung der Glycolipide verankert Membranproteine, 6-6xHis-Tag lösliche Proteine und Monobiotinylated lösliche Proteine in unterstützten planar Doppelschichten. Reagenzien für die MHC-Peptid-Tetramer Färbung Methode (Einheit 17.3) entwickelt adaptierbar bereitwillig Präsentation auf planaren Doppelschichten. Der einzigartige Vorteil dieses Ansatzes ist, dass die Proteine auf der Oberfläche der unterstützten Bilayer dargestellt seitlich mobil sind. Dies bietet eine mehr physiologische Darstellung der Zelloberfläche Moleküle und unterstützt die Visualisierung von Protein-Umlagerung auf den Bilayer von lebenden Zellen.

Micropatterning Kostimulatorischen Liganden Erhöht CD4 + T-Zelle-Funktion

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18505845

Räumliche Organisation komplexe zu signalisieren ist ein charakteristisches Merkmal der der immunologischen Synapse (IS), aber seine Auswirkungen auf die Zelle Kommunikation ist unklar. T-Zell-APC paarweise, weitere Il wird erzeugt, wenn CD28-Clustern von zentralen supramolekulare Aktivierungs-Cluster (cSMAC) getrennt werden-CD3 lokalisiert und in der IS-Peripherie. Allerdings ist es in diesen zellulären Experimenten unklar, ob die erhöhte IL getrieben wird, indem das Muster selbst oder upstream-Ereignisse, die die Muster auszufällen. In diesem Artikel wir rekapitulieren Hauptmerkmale von physiologischen Synapsen mit planaren Costimulation Arrays enthält Antikörper gegen CD3 und CD28, umgeben von ICAM-1, erstellt durch die Kombination mehrere Wahlrunden Microcontact Drucken auf einer einzigen Oberfläche. Naïve T-Zellen durchlaufen diese Arrays, Halt an Funktionen von Anti-CD3-Antikörper und bilden eine stabile Synapse. Wir zeigen direkt, dass Anti-CD28 in der Peripherie der Zelle präsentiert, rund um eine Anti-CD3-Funktion, Il Sekretion von naiv-CD4(+) T-Zellen im Vergleich mit diesen Signalen kombiniert in der Mitte der vs verbessert. Dies erhöht Cytokine Produktion korreliert mit NF-KappaB Translokation und erfordert PKB/Akt zu signalisieren. Die Fähigkeit, willkürlich und unabhängig voneinander steuern die Speicherorte der Anti-CD3 und Anti-CD28 bot die Möglichkeit, Muster nicht gerade erreichbar in Zell-Zell-Schnittstellen zu prüfen. Mit diesen Mustern zeigen wir, dass die periphere Präsentation von CD28 einen größeren Einfluss auf Il Sekretion als CD3 Kolokalisation/Trennung hat.

TH1 Und Th2 Zellen Bilden Morphologisch Unterschiedliche Immunologische Synapsen

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18566405

Die Anordnung der Moleküle an der Schnittstelle zwischen T-Zellen und APC ist bekannt als der immunologischen Synapse (IS). Wir führten Experimente mit unterstützten planar Doppelschichten und transfizierte Fibroblast APC, die IS zu prüfen, die durch polarisierte Th1 und Th2 Zellen gebildet. TH1-Zellen gebildet typische "Bullauge" IS mit einem Ring der umliegende MHC/TCR Interaktionen bei allen Ag-Konzentrationen getestet während Th2 Zellen multifokale IS in hohen Konzentrationen der Ag bildete, Adhäsionsmoleküle. Bei niedrigen Konzentrationen der Ag die Mehrheit der Th2 Zellen gebildet ist mit einem kompakten, zentrale Anhäufung von MHC/TCR, aber ICAM-1 wurde von der Mitte der vs nicht ausgeschlossen. Darüber hinaus wurde CD45 ausgeschlossen von der Mitte der Schnittstelle zwischen Th1-Zellen und APC, während CD45 in der Mitte der multifokale vs gebildet durch Th2 Zellen gefunden wurde. Schließlich phosphoryliert signalisierende Moleküle mit MHC/TCR in größerem Umfang in Th2 ist colocalized. Unsere Ergebnisse zufolge zusammen, das IS von Th1 und Th2 Zellen gebildet sind in Struktur, mit Th2 Zellen bilden Scheibenmitte IS versäumt.

Jäger Und Sammler: Immunologische Synapsen Und Kinapses Als Variationen über Das Thema Der Amöboide Fortbewegung

Annual Review of Cell and Developmental Biology. 2008  |  Pubmed ID: 18598213

Der immunologische Synapse war ursprünglich definiert, wie eine stabile Zell-Zell-Kreuzung, bestehend aus drei konzentrischen supramolekulare Aktivierung Clustern (SMACs) insbesondere Komponenten bereichert: eine zentrale SMAC mit gruppierten Antigenrezeptoren und Kinasen, eine periphere SMAC reich an beta2 Integrin Adhäsion Molekül LFA-1 und eine distale SMAC gekennzeichnet durch eine kritische Tyrosin-Phosphatase. Im vergangenen Jahr die SMACs jeweils wurden mit funktionalen Modulen amöboide Beweglichkeit und die Stabilität der immunologischen Synapse hat als eine Neukonfiguration der stäbchenförmiges Apparatur aus einer asymmetrischen Jagd-Modus, eine Kinapse, eine symmetrische sammeln-Modus, der Synapse offenbart worden. Die genetische Kontrolle dieses Prozesses umfasst Actinomyosin Regulatoren PKCtheta und Wespe. Crtam ist postsynaptisches Polarität in frühen Kinapses vor der Zellteilung beteiligt. Es ist unwahrscheinlich, dass das Immunsystem mit Hilfe von Angleichende um Migration zu beenden, ohne zu inaktivieren stäbchenförmiges Maschinen eindeutig ist.

Human-Immunodeficiency-Virus Typ 1 Umschlag Gp120 Induziert Ein Stopp-Signal Und Virologische Synapse-Formation in Noninfected CD4 + T-Zellen

Journal of Virology. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18632854

Human-Immunodeficiency-Virustyp 1 (HIV-1)-infizierte T-Zellen bilden eine virologische Synapse mit noninfected CD4(+) T-Zellen, um effizient HIV-1-Virionen von Zelle zu Zelle übertragen. Die virologische Synapse ist eine spezialisierte zelluläre Kreuzung die ähnelt in mancher Hinsicht an die immunologische Synapse beteiligt bei der T-Zell-Aktivierung und Effektor-Funktionen von den T-Zell-Antigen-Rezeptor vermittelt. Der immunologische Synapse hält T-Zell-Migration, um eine kontinuierliche Interaktion zwischen T-Zellen und Antigen-präsentierenden Zellen zu ermöglichen. Hier haben wir gefragt, ob HIV-1 Umschlag-gp120 präsentiert auf einer Fläche zu eine HIV-1-infizierten Zelle imitieren auch ein Stopp-Signal liefert und ob dies ausreicht, um eine virologische Synapse zu induzieren. Wir zeigen, dass HIV-1 gp120-präsentierenden Oberflächen verhaftet die Migration der primären aktivierten CD4 T-Zellen, die spontan, in Anwesenheit von ICAM-1 auftritt und induziert die Bildung eine virologische Synapse, die durch getrennte Supramolekulare Strukturen mit einem zentralen Cluster des Umschlags, umgeben von einem Ring von ICAM-1 gekennzeichnet war. Die virologische Synapse wurde vorübergehend, mit der Einleitung der Migration innerhalb 30 min gebildet. HIV-1 gp120-präsentierenden Oberflächen induzieren somit einen vorübergehenden Stopp-Signal und supramolekularen Segregation in noninfected CD4(+) T-Zellen.

Modulation Der T-ZELLAKTIVIERUNG Durch Stomatin, Hereditäre Form-wie Protein 2

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18641330

T-Zell-Aktivierung durch den Ag-Rezeptor (TCR) erfordert nachhaltige Signalisierung von Signalosomes innerhalb von Lipid-Raft-Microdomains in der Plasmamembran. Proteomic Analyse von Lipid Rafts aus menschlichen T-Zellen haben wir festgestellt, Stomatin, hereditäre Form-wie Protein (SLP)-2 als ein Kandidat-Molekül T-Zell-Aktivierung durch den Ag-Rezeptor beteiligt. In dieser Studie zeigen wir, dass die SLP-2 Ausdruck im menschlichen primären Lymphozyten oben-geregelt ist nach in-vivo und ex Vivo-Aktivierung. In aktivierten T-Zellen interagiert SLP-2 mit Komponenten des TCR Signalosomes und polymerisierte Actin. Noch wichtiger ist, erhöht bis-Regelung der SLP-2 Ausdruck im menschlichen T-Zell-Linien und primäre peripheren Blutzellen T Effektor Antworten, während Herunterregulation SLP-2 Ausdruck mit Verlust nachhaltig TCR signalisieren korreliert und T-ZELLAKTIVIERUNG verringerte. Unsere Daten zeigen, dass die SLP-2 ein wichtiger Akteur in der T-ZELLAKTIVIERUNG ist dadurch nachhaltig TCR signalisiert, die für volle Effektor T benötigt Zell-Differenzierung, und zeigen Sie auf SLP-2 als mögliches Angriffsziel für Immunmodulation.

Strahlen-induzierte CXCL16-Release Von Brustkrebszellen Zieht T-Effektorzellen

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Sep, 2008  |  Pubmed ID: 18713980

Einstellung von T-Effektorzellen zu entzündeten peripheren Geweben wird von Chemokinen und ihre Rezeptoren reguliert, sondern die Faktoren, die Regulierung der Rekrutierung zu Tumoren bleiben weitgehend undefiniert. Ionisierende Strahlung (IR)-Therapie ist eine gemeinsame Behandlungsform für Brustkrebs und anderen Krebsarten. Als ein Cytocidal-Agent für wuchernden Krebszellen verwendet, hat IR in Kombination mit Immuntherapie nachweislich Tumor immun-vermittelte Zerstörung in präklinischen Studien zu fördern. In dieser Studie zeigen wir, dass IR verbessert deutlich die Sekretion von Maus und menschlichen Brustkrebszellen von CXCL16, ein Chemokine die aktivierte CD8-Effektor-T-Zellen bindet an CXCR6 auf Th1 und spielt eine wichtige Rolle bei deren Einstellungen in Websites der Entzündung. Mit einem schlecht immunogen Mausmodell von Brustkrebs, wir fanden, dass Bestrahlung erhöht die Migration von CD8(+)CXCR6(+) aktivierte T-Zellen zu Tumoren in vitro und in vivo. CXCR6-defizienten Mäusen zeigte reduziert Infiltration von Tumoren von aktivierten CD8 T-Zellen und beeinträchtigt Tumorrückbildung führt nach Behandlung mit lokalen IR der Tumor und Abs blockieren die negativen Regulator der T-ZELLAKTIVIERUNG, CTLA-4. Diese Ergebnisse liefern die erste Beweise, dass IR die Sekretion von Krebszellen Proinflammatory chemotaktische Faktoren hervorrufen kann, die antitumor--T-Effektorzellen zu rekrutieren. Die Fähigkeit der IR Tumoren in peripheren Geweben "entzündet" umwandeln kann ausgenutzt werden, um Hindernisse zu überwinden, mit der Effektor-Phase der antitumor Immunantwort und verbessern die therapeutische Wirksamkeit der Immuntherapie.

Protein-Kinase C-Theta Regelt Die Stabilität Der Peripheren Adhäsion-Ring-Kreuzung Und Der Empfindlichkeit Des Ziel-Zellen-Zerstörung Von CTL Trägt

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18802085

Zerstörung des Virus-infizierten Zellen von CTL ist ein extrem empfindliches und effizienten Prozess. Unsere vorherigen Daten zufolge LFA-1-ICAM-1-Interaktionen in den peripheren supramolekulare Aktivierung-Cluster (pSMAC) von der immunologischen Synapse vermitteln Bildung von einer engen Adhäsion-Kreuzung, die auf die Sensitivität der Ziel-Zellen-Zerstörung von CTL beitragen könnten. Hierin, verglichen wir mehr (CD8(+)) und weniger (CD4(+)) effektive CTL. zu verstehen, die molekularen Ereignisse, die effiziente Förderung deiner Zellenzerstörung Wir fanden, dass die Aufhebung der pSMAC-Formation wesentlich die Fähigkeit des CD8(+) aber nicht CD4(+) CTL Zielzellen beeinträchtigt trotz keine Wirkung des Betrags der veröffentlichten Granulat sowohl CD8(+) als auch CD4(+) CTL aufzulösen. Folgerichtig CD4(+) CTL brechen ihre Synapsen weitere, oft als CD8(+) CTL, führt zu die Flucht der CYTOLYTISCHE Moleküle von der Oberfläche. CD4(+) CTL-Behandlung mit einem Protein-Kinase-Ctheta-Inhibitor erhöht Synapse Stabilität und Empfindlichkeit des spezifischen Zielgruppen Zellenzerstörung. Damit Bildung eine stabile pSMAC, die teilweise von Proteinkinase Ctheta, Funktionen die veröffentlichten lytischer Moleküle an der synaptischen Schnittstelle zu beschränken und die Wirksamkeit der Ziel-Zellenzerstörung kontrolliert wird.

T-Zell-Dendritische Zelle Immunologische Synapsen Enthalten TCR-abhängige CD28-CD80-Clustern, Die Protein-Kinase C-Theta Zu Rekrutieren

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18802089

Kurzlebige TCR Mikrocluster und einer Quecksilberbelastung Protein Kinase Ctheta-konzentrieren zentrale supramolekulare Aktivierung Cluster (cSMAC) wurden im Modell immunologische Synapsen (IS) definiert. In verschiedenen Modellsysteme wurden CD28-vermittelte kostimulatorischen Interaktionen in Mikrocluster, die cSMAC, erkannt oder von TCR bilden mehrere unterschiedliche Herde ausgesondert. Die Beziehung zwischen TCR und kostimulatorischen Molekülen in der physiologischen IS der T-Zell-dendritischen Zellen (DC) ist unklar. Um das dynamische Verhältnis von CD28-CD80 und TCR Interaktionen in der T-Zell-DC ist während der Ag-spezifische T-Zell-Aktivierung zu studieren, haben wir CD80-eCFP Mäuse mit bacterial artificial Chromosome transgenen Technologie generiert. In Milz DCs, endogene CD80 und CD80-eCFP lokalisiert zu Plasma war Membran und Golgi-Apparat und CD80-eCFP funktionell in Vivo. Im OT-II T-Zell-DC ist wurden mehrere getrennte TCR, CD80 und LFA-1 Cluster erkannt. In der T-Zell-DC wurden Synapse CD80 Clustern mit CD28 und PKCtheta, ein Merkmal der cSMAC colocalized. Akute Blockade der TCR Signalisierung mit Anti-MHC Ab ergab eine rasche Reduzierung Ca(2+) signalisieren und die Anzahl und Größe der CD80 Cluster, ein Merkmal der TCR Mikrocluster. Die T-Zell-DC-Schnittstelle enthält daher dynamische kostimulatorischen Herde, die Merkmale der Mikrocluster und cSMACs zu teilen.

Nanoskalige Erhöhungen Der Intermembrane Abstand CD2-CD48-vermittelte Adhäsion Zu Verringern Und Reorganisieren Der Immunologischen Synapse

The Journal of Biological Chemistry. Dec, 2008  |  Pubmed ID: 18826951

Die Beziehung zwischen intermembrane Abstand, Adhäsion Effizienz und seitlichen Organisation Adhäsion Rezeptoren wurde nicht für jede Haftung-System eingerichtet. Wir haben die CD2-Ligand CD48 mit zwei genutzt (Wildtyp CD48 (CD48-WT)), vier (CD48-CD2) oder fünf (CD48-CD22) Ig-ähnlichen Domänen. CD48-WT war 10-fache effizienter bei der Vermittlung von Adhäsion als CD48-CD2 oder CD48-CD22. Elektronenstrahl-Tomographie der Kontaktflächen mit planar Doppelschichten zeigte durchschnittliche intermembrane Abstand von 12,8 nm mit CD48-WT, 14,7 nm mit CD48-CD2 und 15,6 nm mit CD48-CD22. CD48-CD2 und CD48-CD22 Chimären komplett aus CD48-WT in gemischten Kontaktflächen getrennt. Im Gegensatz dazu co-localized CD48-CD2 und CD48-CD22 beim gemischten Kontakte entstanden sind. Konfokale Bildgebung der immunologische Synapsen zwischen primären T-Lymphozyten gebildet und chinesischer Hamster Eierstock Zellen präsentieren, major Histocompatibility Complex-Peptid-komplexe und unterschiedliche Formen der CD48 gezeigt, dass CD48-CD2 und CD48-CD22 einen exzentrischen CD2/T Zelle Antigen-Rezeptor-Cluster induzieren. Wir schlagen diese Neuordnung der immunologischen Synapse Sequester den T-Zell-Antigen-Rezeptor an einem Ort, wo es nicht interaktiv mit seiner Ligand und T-Zell-Empfindlichkeit drastisch reduziert.

Lrp4 Ist Ein Rezeptor Für Agrin Und Bildet Einen Komplex Mit Moschus

Cell. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18848351

Neuromuskuläre Synapse Bildung erfordert einen komplexen Austausch von Signalen zwischen Motoneuronen und Skelett Muskelfasern, die Anhäufung von postsynaptisches Proteine, einschließlich Acetylcholin-Rezeptoren im Muskel-Membran und spezialisierte Version Websites oder aktive Zonen in den präsynaptischen terminal Nerv führt. Moschus, ein Rezeptor-Tyrosinkinase, der ausgedrückt wird, im Skelettmuskel und Agrin, Motoneuron abgeleitetes Ligand, der Moschus Phosphorylierung, stimuliert spielen in synaptische Differenzierung, kritische Rollen, wie Synapsen nicht in ihrer Abwesenheit bilden, und Mutationen im Moschus oder nachgeschalteten Effektoren eine der Hauptursachen für eine Gruppe von neuromuskulären Erkrankungen sind, kongenitale Myasthenien (CMS) genannt. Wie Agrin Moschus aktiviert und stimuliert die synaptische Differenzierung nicht bekannt ist und bleibt eine wesentliche Lücke in unserem Verständnis an neuromuskulären Synapsen zu signalisieren. Hier berichten wir, dass Lrp4, ein Mitglied der Familie LDLR ein Rezeptor für Agrin ist, einen Komplex mit Moschus bildet und Moschus-Aktivierung durch Agrin vermittelt.

Raumzeitliche Regulation Der T-Zelle Costimulation Von TCR-CD28 Mikrocluster Und Protein-Kinase C Theta Translokation

Immunity. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18848472

T-ZELLAKTIVIERUNG ist durch Mikrocluster (MCs), T-Zell-Rezeptoren (TCRs), Kinasen und-Adapter vermittelt. Obwohl TCR MCs akkumulieren so einen zentralen supramolekulare Aktivierung Cluster (cSMAC) von der immunologischen Synapse an der Schnittstelle von einer T-Zelle und eine antigenpräsentierende Zelle, bleibt unklar die Rolle des MC Translokation in T-Zelle signalisieren. Hier fanden wir, dass die Anhäufung von MCs bei cSMAC für T-Zell-Costimulation wichtig war. Kostimulatorischen CD28-Rezeptor wurde zunächst coordinately eingestellt, mit TCR zu MCs und seine Signale über die Assembly mit der Kinase PKCtheta vermittelt wurden. Die Anhäufung von MCs an der cSMAC der Trennung von CD28 TCR, begleitete von, der in die Translokation von CD28 und PKCtheta eines räumlich eindeutige Unterbereichs des cSMAC geführt hat. Daher ist von der Generation der eine einzigartige kostimulatorischen Fach in der cSMAC über die dynamische Regelung der MC Translokation Costimulation vermittelt.

Tauziehen Um Die Ausgangstür

Immunity. Jan, 2008  |  Pubmed ID: 18199414

Lipid Sphingosin-1-Phosphat wurde als wichtige Ausfahrt Signal für Lymphknoten identifiziert. In dieser Ausgabe der Immunität, Pham Et Al. (2008) zeigen, dass seine Wirkung nur im Rahmen der Aufbewahrung Signale von CCR7 transduzierten verstanden werden kann.

T-Zell-Rezeptor Microcluster Transport Durch Molekulare Labyrinthe Zeigt Mechanismus Der Translokation

Biophysical Journal. Apr, 2008  |  Pubmed ID: 18199675

Anerkennung von Peptid-Antigen durch T-Zellen beinhaltet koordinierte Bewegung der T-Zell-Rezeptoren (TCRs) zusammen mit anderen kostimulatorischen und signalisieren der Moleküle. Die räumlich organisierten Konfigurationen, die Ergebnis werden kollektiv als die immunologische Synapse bezeichnet. Experimentelle Untersuchung der Rolle der Raumordnung in TCR Signalisierung wurde durch den Einsatz von Nanopatterned-gestützte Membranen, TCR in alternative Muster lenken, erleichtert. Hier untersuchen wir den Mechanismus, mit dem Substrat Strukturen TCR Verkehr umleiten. Mit einem Fluss-Tracking-Algorithmus, wurde das Ensemble der TCR-Cluster innerhalb jeder Zelle während Synapse Bildung unter verschiedenen Einschränkung Geometrien verfolgt. Kurz nach der anfänglichen Clusterbildung entwickelt eine koordinierte zentripetalen ca. 20 nm/s Durchfluss. Cluster die Substrat auferlegte Einschränkung auftreten werden abgelenkt und Parallel zu der Einschränkung bei Geschwindigkeiten, die mit den relativen Winkel der Bewegung auf die bevorzugte zentripetaler Richtung skalieren zu bewegen. TCR-Transport wird angetrieben durch Aktin-Polymerisation und die Verteilung von F-Actin wurde zu verschiedenen Zeitpunkten während des Synapse-Bildung-Prozess abgebildet. Zu frühen Zeitpunkten gibt es keinen signifikanten Einfluss auf Aktin-Verteilung von Substrat Einschränkungen produziert. Zu späteren Zeitpunkten wurden bescheidene Unterschiede beobachtet. Diese Daten stehen im Einklang mit einem kraftschlüssigen Modell der TCR-Ankopplung an Zytoskelett Flow, der Slip lässt. Auswirkungen dieses Modells über räumliche Sortierung der Zelloberfläche Moleküle werden diskutiert.

Cutting Edge: Aktivierung Von Angeborenen Zytokine Oder Mikrobielle Antigene Kann Dazu Führen, Dass Die Verhaftung Von Natürlichen Killer T-Zell-Patrouillen Der Leber Sinusoide

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18250405

Natürliche Mörder T (NKT)-Zellen sind angeborene-wie Lymphozyten, die schnell große Mengen von Effektor Zytokine bei der Aktivierung absondern. Anerkennung von Alpha-chromosomale Glykolipide präsentiert von CD1d führt zu die Produktion von IL-4, IFN-Gamma oder beides, während direkte Aktivierung durch die synergistische Wirkung von IL-12 und IL-18 führt zu IFN-Gamma Produktion nur. Wir berichteten bereits, dass in-vitro kultivierte dendritische Zellen NKT ZELLAKTIVIERUNG modulieren können und mit intravital Fluoreszenz-Laser-scanning-Mikroskopie, wir berichteten, dass die starke Stimulation der NKT-Zellen Verhaftung innerhalb Leber Sinusoide führt. In dieser Studie untersuchen wir die Beziehung zwischen murinen NKT Zelle patrouillieren und Aktivierung. Wir berichten, dass NKT Zelle Verhaftung bei Aktivierung angetrieben durch Begrenzung der Dosen ein Bakterien-abgeleiteten schwachen Agonist, Galacturonsäure Säure-haltige Glycosphingolipide oder ein synthetisches Agonist, Alpha-Galaktosyltransferase Ceramid entsteht. NKT Zelle Verhaftung ergibt sich interessanterweise auch von IL-12 und IL-18 synergistischen Aktivierung. So lösen angeborenen Zytokine und natürliche mikrobielle TCR-Agonisten sinusförmige NKT Zelle Verhaftung und Effektor reagiert.

T-Zell-Aktivierung Durch Immunologische Synapsen Und Kinapses

Immunological Reviews. Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18275476

T-Zell-Aktivierung erfordert 'Kontakt' mit Antigen-präsentierenden Zellen (APC), die T-Zell-Rezeptor (TCR) und Antigene Haupthistokompatibilitätskomplex (MHC) bringen-Peptid-Komplex zusammen. Kontakt wird definiert, indem die Größe der TCR und MHC-Peptid-Komplex, die um ca. 13 nm erfordert umfangreiche Interdigitation der Glykokalyx der T-Zellen und APC. T-Zellen können durch Bildung einer stabilen T-Zell-APC-Kreuzung, als eine immunologische Synapse bezeichnet aktiviert werden. Es wurde auch in-vitro nachgewiesen, dass Signale von APCs ohne eine stabile Interaktion von T-Zellen integriert werden können. In Vivo unterstützt die imaging-Studien die Bedeutung der beiden stäbchenförmiges und stabile T-Zell-APC-Interaktionen in T-Zell-Grundierung. Wir haben festgestellt, dass Stabilität nicht drehen abseits bewegliche Maschinen, sondern durch Angleichende Kraft erzeugen abhängt Strukturen, halten die Zelle in Kraft und Gleichgewicht der Kräfte. Motilität wird induziert durch die Symmetrie, die weiterhin die Differenzierung erforderlich sein können potenzielle der T-Zelle zu brechen. Vor kurzem entdeckten wir auch einen Modus der T-Zell-Signalisierung führt zu Toleranz in-vivo rein auf stäbchenförmiges Interaktionen basiert. Da der gesamte Prozess in einem Zustand der ständigen T-Zell-Kinesis stattfindet, schlage ich den Begriff 'Kinapse' für stäbchenförmiges T-Zell-APC-Kontakte zu signalisieren. Synapsen und Kinapses sind inter-convertible durch Angleichende/Symmetrie brechen Prozesse und beide Modi scheinen normale T-Zell-Grundierung beteiligt zu sein. Ungleichgewicht der Synapse/Kinapse Staaten führen zu Immunpathologie.

Synaptische Asymmetrie Zu Gehen

Cell. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18329360

Zellpolarität ist entscheidend für die T-Lymphozyten Bewegung während ihrer Jagd für Antigen tragenden Zellen und infizierten Zielzellen. In dieser Ausgabe der Zelle Yeh Et Al. (2008) jetzt zeigen eine direkte Verbindung zwischen T Zellpolarität und die Produktion von Proinflammatory Cytokines in Mäusen fehlt die Klasse I MHC-eingeschränkte T-Zell-assoziierten Moleküls (Crtam).

Messung Der Diffusion Und Verbindliche Kinetik Von Kontaktfläche FRAP

Biophysical Journal. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18390627

Der immunologische Synapse ist eine stabile interzelluläre Struktur, die im wesentlichen spezialisiert und Transfer von einer immun Zelle in einen anderen zu signalisieren. Seine Entstehung ist teilweise durch die Verbreitung der Adhäsion und signalisieren der Moleküle in und ihre Bindung des Countermolecules in der Kontaktfläche geregelt. Die Stabilität der immunologische Synapsen kann Rezeptor-Ligand-Interaktionen zur Angleichung von chemischen Gleichgewichts trotz andere dynamische Aspekte. Wir haben ein mathematisches Modell entwickelt, das den gekoppelten Reaktion-Diffusion-Prozess in einem etablierten immunologische Synapse beschreibt. In dieser Studie haben wir eine zuvor beschriebenen Kontaktfläche Fluoreszenz Erholung nach Photobleaching (FRAP) Experiment um die Gültigkeit des Modells testen erweitern. Der Rezeptor-Aktivität und die seitliche Beweglichkeit der Leuchtstoff beschriftet, Lipid-verankert Liganden in der Bilayer führte zu einer Anhäufung, wie durch eine viel höhere Fluoreszenz-Intensität in der Kontaktfläche als außerhalb aufgedeckt. Nach der vollständigen Photobleichung von der Synapse erfordert Fluoreszenz Wiederherstellung Liganden zu distanzieren und binden und ein-und die Kontaktfläche zu verbreiten. Solch ein FRAP-Zeit-Kurs informiert daher über Reaktion und Diffusion, die durch den Einbau der Modell-Lösung für die Daten extrahiert werden können. Überrascht waren die umgekehrte Preise in die zweidimensionale Fläche mindestens 100-fold langsamer als in dreidimensionale Lösung. Wie bereits berichtet in immunologische Synapsen wurde ein beträchtlicher Anteil der nicht korrigierbare Fluoreszenz beobachtet, mit einem der beiden Systeme studiert, einige Liganden entweder getrennt oder verbreitet viel langsamer im Vergleich zu anderen Liganden in der gleichen Synapse. Die kombinierte Theorie und Experiment so bietet eine neue Methode zur in-situ Messungen der kinetischen Preise, Diffusionskoeffizienten und nicht korrigierbare Brüche interagierende Moleküle in immunologische Synapsen und andere stabile Zelle-Bilayer-Kreuzungen.

Eine Gekoppelte Verbreitung-Kinetik-Modell Zur Analyse Von Kontakt-Bereich FRAP Experiment

Biophysical Journal. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18390628

Kinetische Preise und verbindliche Affinität von Rezeptor-Ligand-Interaktionen sind wichtige Determinanten der Zelladhäsion. Messungen dieser Parameter in der flüssigen Phase mit lösliche Moleküle (d. h. drei-dimensionial Parameter) nicht unbedingt korrelieren mit ihren Gegenstücken gemessen, wenn beide Partner Bindung bzw. mit zwei apposing Flächen (d. h. zweidimensionale (2D) Parameter) verankert sind. Darüber hinaus können 2D Affinitäten mit verschiedenen Methoden gemessen um Größenordnungen unterscheiden. Hier beschreiben wir ein gekoppelten Verbreitung-Reaktions-Modell für die Fluoreszenz-Erholung nach Photobleaching Experiment vorher verwendet, um die Dynamik der Verklebungen in der Kontaktfläche zu demonstrieren. Die Anwendung des mathematischen Modells auf die Kontaktfläche Fluoreszenz Erholung nach Photobleaching Experiment in-situ Messungen der 2D kinetische Bewertungen der Adhäsionsmoleküle und deren zurückgebliebene Verbreitung in eine stabile Kontaktfläche ermöglicht. Die mathematischen Eigenschaften des Modells sind in diesem Artikel gekennzeichnet und seine experimentelle Validierung im Begleiter-Artikel vorgestellt werden.

Visualisierung Von Zell-Zell-Interaktion-Kontakte-Synapsen Und Kinapses

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2008  |  Pubmed ID: 19065791

T-Zell-Aktivierung erfordert Wechselwirkungen zwischen T-Zell-Antigen-Rezeptoren (TCR) und Peptiden präsentiert von major Histocompatibility komplexer Moleküle (MHCp) in eine selbstklebende Übergang zwischen der T-Zell und Antigen-präsentierende Zellen (APC). Stabile Kreuzungen mit Bullauge supramolekulare Aktivierung Clustern (SMACs) wurden als immunologische Synapsen definiert. Der Begriff Synapse funktioniert in diesem Fall, da mündet Wurzeln für "gleich" und "befestigen", die als "an der gleichen Stelle befestigen" übersetzt werden könnte. Diese Strukturen bei der T-Zelle-APC Kommunikation und gesteuerte Sekretion zu ermöglichen. Wir haben vorgeschlagen, dass SMACs nicht wirklich Cluster sind, aber sind analog zu höherer Ordnung Membran-Zytoskeletts Zonen amöboide Fortbewegung einschließlich Prüfung Lamellipodium, eine selbstklebende Lamellen und antiadhäsive Uropod Substrat beteiligt. Da T-Zellen während der Fortbewegung über Antigen präsentiert Zellen signalisieren auch integrieren können, ist es wichtig zu prüfen, selbstklebende Kreuzungen gepflegt wie Zellen aneinander vorbei bewegen. Diese Kombination aus Bewegung (Kine-) und Befestigung (-Apsis) kann als Kinapse oder beweglichen Kreuzung beschrieben werden. Synapsen und Kinapses arbeiten in unterschiedlichen Phasen der T-Zell-Grundierung. Optimale Effektor-Funktionen können auch von zyklischen Einsatz von Synapsen und Kinapses abhängen. Visualisierung dieser Strukturen in vitro und in vivo stellt viele verschiedene Herausforderungen, die in diesem Kapitel diskutiert werden.

Renale Dendritische Zellen: Ein Update

Nephron. Experimental Nephrology. 2009  |  Pubmed ID: 19276627

Entdeckung in der Rolle der renalen dendritische Zellen (rDCs) in Gesundheit und Krankheit der Niere beschleunigt rasch sich. Fortschritte in der Entschlüsselung DC Grundstoffe und die Heterogenität der Monozyt Teilmengen bei Mäusen und Menschen liefert einen Einblick in die Biologie der rDCs. Neuere Befunde haben Kenntnisse über die Herkunft, Anatomie und Funktion des rDC-Netzwerks bei Steady-State und während der Dauer der Schädigung die renale Parenchym erweitert. Diesen kurzen Bericht hebt diese neuen Erkenntnisse und stellt ein Update auf die Studie von rDCs.

Phospholipase D1 Regelt Lymphozyte Adhäsion Durch Hochregulation Von Rap1 an Der Plasmamembran

Molecular and Cellular Biology. Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19332557

Rap1 ist eine kleine GTPase, die Haftung von T-Zellen moduliert durch Regulierung Inside-Out-Signalisierung durch LFA-1. Der Großteil der Rap1 drückt sich in einem BIP-gebundenen Zustand auf intrazelluläre Vesikel. Exozytose von diesen Bläschen liefert Rap1 an der Plasmamembran, wo wird es aktiviert. Wir berichten, dass Phospholipase D1 (PLD1) wird auf demselben vesikulären Fach in T-Zellen als Rap1 ausgedrückt und ist an der Plasmamembran zusammen mit Rap1 transloziert. Darüber hinaus ist die PLD-Aktivität für Umsiedlung und Aktivierung von Rap1 erforderlich. Erhöhte T-Zell-Adhäsion in Antwort auf die Stimulation des Rezeptors Antigen hing von PLD1. C3G, ein Rap1 Guaninnukleotid-Austauschfaktor befindet sich in das Zytosol Ruhestellung Zellen transloziert, die Plasma-Membranen der stimulierten T-Zellen. Unsere Daten unterstützen ein Modell, bei dem PLD1 regelt Rap1 Tätigkeit durch die Kontrolle der Exozytose aus einem gespeicherten, vesikuläre Pool von Rap1, die mit der Lieferung an die Plasmamembran durch C3G aktiviert werden kann.

T-Zell-Antigen-Rezeptor-Signalisierung Und Immunologische Synapse Stabilität Erfordern Myosin IIA

Nature Immunology. May, 2009  |  Pubmed ID: 19349987

Immunologische Synapsen sind vom signalisieren in diskrete T-Zell-Antigen-Rezeptor-Mikrocluster initiiert und sind wichtig für die Differenzierung und Effektor-Funktionen von T-Zellen. Synapse Bildung beinhaltet das orchestrierte Verschieben von Mikrocluster in die Mitte des die Kontaktfläche mit der Antigen-präsentierenden Zelle. Microcluster Bewegung zentripetalen Aktin Strömung zugeordnet ist, aber die Funktion der motor-Proteine ist unbekannt. Hier zeigen wir, dass Myosin IIA für die komplette Montage und Bewegung der T-Zell-Antigen-Rezeptor-Mikrocluster notwendig war. In Ermangelung von Myosin IIA oder seine ATPase-Aktivität T-Zelle Signalisierung wurde stromabwärts von der Kinase Lck unterbrochen, und der Synapse wurde destabilisiert. T-Zell-Antigen-Rezeptor-Signalisierung und der späteren Gründung der immunologische Synapsen sind daher abhängig von Myosin IIA aktive Prozesse.

Immunsystem Komplexität Zu Visualisieren

Science Signaling. 2009  |  Pubmed ID: 19366990

Die European Molecular Biology Organization (EMBO) treffen Visualisierung Immunsystem Komplexität, im Januar 2009, statt abgedeckt mehrere Skalen, von imaging Einzelmoleküle zu imaging ganze Tiere. Neben experimentellen Informationen gab es eine Betonung der Modellierung für Datenanalyse und als vorausschauende Instrument zur Unterstützung von experimentellen Design. Imaging-Technologien diskutiert, inklusive Totalreflexion Fluoreszenz-Mikroskopie, Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie, zwei-Photonen-Laser-scanning-Mikroskopie und Magnetresonanz-Bildgebung. Die biologische Systeme enthalten grundlegende Aspekte der adaptive und Angeborene Immunität. Das Typ-1-Diabetes-Modell wurde verwendet, um veranschaulichen, wie eine menschliche Krankheit auf allen Skalen, Einzelmolekül-Analyse der Interaktion von T-ZELLREZEPTOREN mit major Histocompatibility geladene Peptid-komplexe Dynamik der Immunzellen Lungeninfiltrate durch intravital-Mikroskopie, sowie die Anwendung von bildgebenden Diagnostik beim Menschen seziert wurde.

Der Zellulären Kontext T-Zelle Zu Signalisieren

Immunity. Apr, 2009  |  Pubmed ID: 19371714

Klassische Alphabeta T Zellen schützen den Host durch intrazelluläre und extrazelluläre Proteine in einem zweistufigen Prozess überwachen. Der erste Schritt ist Proteinabbau und Kombination mit einem major Histocompatibility complex (MHC) Molekül, zur Oberfläche Ausdruck dieses Amalgam (Antigen Verarbeitung). Der zweite Schritt ist die Interaktion des T-Zell-Rezeptors mit der MHC-Peptid-Komplex, was zu signalisieren in den T-Zellen (Antigen-Anerkennung). Der Kontext für diese Interaktion ist eine T-Zell-Antigen präsentierende Zelle Kreuzung, bekannt als eine immunologische Synapse, wenn symmetrische und stabil und als ein Kinapse, wenn asymmetrische und mobile. Die physiologische Anerkennung einen Liganden findet am effizientesten in der F-Aktin-reiche Lamellipodium und ist F-Actin-abhängig in Phasen Entstehung und Auslösung und Myosin-II-abhängigen für Signalverstärkung. Diese Bewertung wird erläutert, wie diese Konzepte von frühen Studien über Adhäsion, Signalisierung und Zellbiologie von T-Zellen entstanden.

Coreceptor CD2 Wird Plasma Membrane Microdomains Verwendet, Um Signale in T-Zellen Zurückwirken

The Journal of Cell Biology. May, 2009  |  Pubmed ID: 19398758

Die Interaktion zwischen einer T-Zelle und ein Antigen-präsentierende Zellen (APC) kann eine signalisierende Reaktion auslösen, die zu T-ZELLAKTIVIERUNG führt. Frühere Studien haben gezeigt, dass Ligaturen von der T-Zell Rezeptor (TCR) löst eine signalisierende Kaskade, der durch das Zusammenwachsen der TCR und verschiedenen signalisierende Moleküle (z.B. die Kinase Lck und Adapter Protein LAT [Linker für T-ZELLAKTIVIERUNG]) in Microdomains auf der Plasmamembran fortschreitet. In dieser Studie untersuchten wir ein weiteres Ligand-Rezeptor-Interaktion (CD58-CD2) dieser Einrichtungen T ZELLAKTIVIERUNG mit Modellsystem bestehend aus Jurkat T-Zellen, die Interaktion mit einer planaren Lipid Bilayer, die eine APC nachbildet. Wir zeigen, dass die Bindung der CD58 auf CD2, in Ermangelung der TCR-Aktivierung, auch durch das Zusammenwachsen der Aktin-abhängige induziert signalisieren der Moleküle (einschließlich TCR-Zeta-Kette, Lck und LAT) in Microdomains signalisieren. Wenn gleichzeitig aktiviert, colocalize TCR und CD2 zunächst in kleinen Microdomains aber dann Partition in separaten Zonen; Diese räumliche Trennung können die zwei Rezeptoren zu verbessern Signalisierung synergistisch. Unsere Ergebnisse zeigen, dass zwei strukturell verschiedene Rezeptoren veranlassen eine schnelle räumliche Neuorganisation der Moleküle in der Plasmamembran, schlägt ein Modell wie die lokalen Steigerungen der Konzentration zu signalisieren, dass Moleküle T Zelle Signalisierung auslösen können.

Doppelschichten an Der Spitze Der Immunzellen Aktivierung Studien Unterstützt

Journal of Structural Biology. Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19500675

Biologische Adhäsion zwischen den Zellen ist entscheidend für die Entwicklung von mehrzelligen Organismen und für die Funktion des adaptiven Immunsystems der Wirbeltiere. Eine Lücke im Verständnis der Adhäsion Systeme ergibt sich aus der Schwierigkeit der Sammlung quantitativer Daten über die molekularen Interaktionen, die zugrunde liegenden Adhäsion, die normalerweise von Bevölkerungsstatistiken wie Prozent Haftung in Anwesenheit von empirisch definierte Kräfte weniger adhärenten Zellen trennen untersucht wird. Unterstützte Lipid-Doppelschichten gebildet auf Glasflächen bieten ein nützliches Modell-System, in dem einige grundlegende Merkmale der molekularen Interaktionen in Klebstoff Kontakte zu erkunden. Wir haben die seitliche Mobilität der Moleküle in den unterstützten planar Doppelschichten und Fluoreszenzmikroskopie zur Entwicklung eines Systems zur Messung von zweidimensionalen Affinitäten ausgenutzt und kinetische Preise in Kontaktflächen. Affinität Messungen basieren auf einer modifizierten Scatchard-Analyse. Messungen der kinetischen Preise basieren auf Fluoreszenz Photobleaching nach seiner Genesung auf der Ebene der gesamten Kontaktfläche. Dies hat zu einer Reaktion-Diffusionsgleichung gekoppelt, die Berechnung des auf - und ab-Preise ermöglicht. Wir haben festgestellt, dass Mischungen von Liganden in unterstützten planar Doppelschichten können effektiv T-Lymphozyten aktivieren und gleichzeitig erlauben die immunologische Synapse zu überwachen. Neuere Studien in planaren Doppelschichten haben zusätzliche Einblicke in die Grundsätze der Organisation der Zell-Zell-Schnittstellen zur Verfügung gestellt. Mehrjährige Probleme beim Verständnis von Zell-Zell-Kommunikation sind quantitative Messungen auf der Grundlage von planar Doppelschichten in Bereichen der Ligand-Rezeptor-clustering und die Rolle des Aktin-Zytoskeletts in Immunzellen Aktivierung angetrieben nachgeben. Ein wichtiges Ziel für das Feld ist die quantitative Vorschriften beteiligt Signalisierung Komplexbildung Bestimmung.

Multiskalen Analyse Der T-ZELLAKTIVIERUNG: Korrelation Von in Vitro Und In-vivo-Analyse Der Immunologischen Synapse

Current Topics in Microbiology and Immunology. 2009  |  Pubmed ID: 19521681

Kürzlich implementierten Fluoreszenz bildgebende Verfahren, z. B. Totalreflexion Fluoreszenzmikroskopie und zwei-Photonen-Laser-scanning-Mikroskopie, möglich Multiskalen-Analyse der Immunantwort von einzelnen Molekülen in einer Schnittstelle an Zellen verschieben im lymphatischen Gewebe und Tumoren vorgenommen. In diesen Bericht betrachten wir die Komponenten der T-Zell-Empfindlichkeit: die immunologische Synapse, die Koordinierung der Migration und in-vivo Antigen-Anerkennung. Potenz, Dosis und Nachweisgrenze für Peptid-MHC bestimmen T-Zell-Empfindlichkeit. Der immunologische Synapse enthält T-Zell-Rezeptor Mikrocluster, die initiieren und aufrechterhalten, Signalisierung und es bestimmt auch die positionelle Stabilität der T-Zellen durch Symmetrie und Symmetriebrechung. In-vivo Entscheidungen durch T-Zellen zu stoppen oder Migration basieren auf Antigen Stop und Umwelt gehen Signale, die können manchmal ganz Verhaftung von T-Zellen verhindern, und so können ändern, das Ergebnis der Antigen-Begegnungen.

CCR7 Signalisierung Als Eine Wesentliche Regulator Der CNS-Infiltration in T-Zell-Leukämie

Nature. Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19536265

T-Zelle akuter lymphatischer Leukämie (T-ALL) ist eine Blut-Hyperkalzämie leidet vor allem Kinder und Jugendliche. T-ALL-Patienten bei der Diagnose mit erhöhten White Zellzahlen und Hepatosplenomegalie präsentieren und sind ein erhöhtes Risiko des zentralen Nervensystems (ZNS) Rückfall. Aus diesem Grund erhalten T-ALL-Patienten in der Regel kraniale Bestrahlung neben intensivierte intrathekale Chemotherapie. Die deutliche Steigerung Überleben ist vermutlich Wert die erheblichen Nebenwirkungen dieser Therapie zugeordnet. Solche Komplikationen sind sekundäre Tumoren, neurokognitive Defizite, Hormonstörungen und Wachstum Beeinträchtigung. Über den Mechanismus der Infiltration der leukämischen Zellen des ZNS, trotz ihrer klinischen Bedeutung ist wenig bekannt. Hier zeigen wir, mit T-ALL Tier Modellierung und Genexpression-Profilerstellung, die der Chemokin-Rezeptor CCR7 (Ref. 5) ist das wesentliche Adhäsion-Signal für die Ausrichtung der leukämischen T-Zellen in der CNS erforderlich. Ccr7 Genexpression wird gesteuert durch die Aktivität der T-ALL-Onkogen Notch1 und äußert sich in menschlichen Tumoren mit Notch1-Aktivierung-Mutationen. Unterdrückender CCR7 oder seine Chemokine Ligand CCL19 (Ref. 6) in einem Tiermodell der T-ALL speziell hemmt CNS eindringen. Darüber hinaus hängt das murine CNS-targeting Humanzellen T-ALL ihre Fähigkeit, CCR7 auszudrücken. Diese Studien eine einzelne Chemokin-Rezeptor-Interaktion als CNS 'Eintrag' Signal zu identifizieren und öffnen den Weg für zukünftige pharmakologische Ausrichtung. Gezielte Hemmung der CNS Beteiligung an T-ALL könnte potenziell die Intensität der CNS-gezielte Therapie, wodurch seine damit verbundenen kurz- und langfristigen Komplikationen verringern.

Die Klasse II Phosphatidylinositol 3-Kinase Ist C2beta Für Die Aktivierung Des K +-Kanals KCa3.1 Und CD4 T-Zellen Erforderlich

Molecular Biology of the Cell. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19587117

K(+) Ca(2+) aktivierte Kanal KCa3.1 ist für Ca(2+) Zustrom und die anschließende Aktivierung von T-Zellen erforderlich. Zuvor haben wir gezeigt, dass Nukleosid Diphosphat Kinase Beta (NDPK-B), eine Säugetier-Histidin-Kinase, direkt phosphorylates und aktiviert KCa3.1 und ist erforderlich für die Aktivierung der menschlichen CD4-T-Lymphozyten. Wir zeigen, dass das Klasse II Phosphatidylinositol 3 Kinase C2beta (PI3K-C2beta) wird aktiviert, indem der T-Zell-Rezeptor (TCR) und Funktionen stromaufwärts von NDPK-B KCa3.1 aktivieren-channel-Aktivität. Verminderte Expression von PI3K-C2beta von SiRNA in humanen CD4 T-Zellen führte Hemmung der KCa3.1 Channel-Aktivitäten. Die Hemmung war aufgrund verringerter Phosphatidylinositol-3-Phosphat (3) P PI], weil dialyzing PI3K-C2beta SiRNA behandelten T-Zellen mit PI (3) P KCa3.1 Channel-Aktivitäten gerettet. Zudem führte eine Überexpression von PI3K-C2beta in KCa3.1-transfected Jurkat T-Zellen um erhöhte TCR-stimuliert die Aktivierung des KCa3.1 und Ca(2+)-Zustrom, während beide Antworten zum Schweigen der PI3K-C2beta gehemmt werden. Mit Totalreflexion Fluoreszenzmikroskopie und planare Lipid-Doppelschichten, fanden wir, dass mit Zap70 und TCR in peripheren Mikrocluster in der immunologischen Synapse PI3K-C2beta colocalized. Dies ist die erste Demonstration eine Klasse II PI3K eine kritische Rolle in T-Zell-Aktivierung.

Integrin-abhängige Organisation Und Bidirektionale Vesikulären Verkehr Zytotoxischen Immun Synapsen

Immunity. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19592272

Cytotoxische Lymphozyten töten Zielzellen durch die Freigabe des Inhalts der sekretorische Lysosomen in der immun Synapse. Zum Verständnis der Dynamik und Kontrolle der zytotoxischen immun Synapsen abgebildet wir menschliche Leben, primäre natürliche Killerzellen auf Lipid-Doppelschichten Liganden Aktivierung Rezeptoren tragen. Bildung einer organisierten Synapse war abhängig von der Anwesenheit des beta2-Integrin-Liganden ICAM-1. Liganden Coactivation Rezeptoren 2B4 und NKG2D getrennt in zentrale und periphere Regionen, beziehungsweise. Lysosomal Protein Lampe-1, die während der Degranulation exocytosed wurde gesammelt in einem groß und räumlich stabil-Cluster, die mit einer Website von Membran-Internalisierung überschnitt. Lysosomale Fächern erreichte die Plasmamembran auf Schwerpunkte neben Zentral gesammelten Lampe-1. Bildgebung der örtlich festgelegten Zellen ergab, dass Perforin-haltigen Granulat zu einem intrazellulären Fach gegenübergestellt wurden dem exocytosed Lampe-1 abgerufen wurde. So beispielsweise zytotoxischen immune Synapsen eine zentrale Region bidirektionale vesikulären Verkehr, der durch das Integrin signalisieren kontrolliert wird.

Regelungstechnik Der Regulatorische T-Zell-Homöostase Durch Dendritische Zellen in Vivo

The Journal of Experimental Medicine. Aug, 2009  |  Pubmed ID: 19667061

CD4(+)CD25(+)FOXP3(+) natürliche regulatorische T-Zellen (T-Reg-Zellen) pflegen Selbsttoleranz und Autoimmunerkrankungen wie Typ 1 Diabetes und entzündliche Darmkrankheit (IBD) zu unterdrücken. Zusätzlich zu ihren Auswirkungen auf die T-Zellen, T-Reg-Zellen sind wesentlich für die Aufrechterhaltung der dendritischen Zellen (DCs): beim T-Reg-Zellen aufgebraucht sind, gibt es eine kompensatorische Flt3-abhängige Zunahme der DCs. Jedoch ist wenig bekannt über, wie T-Reg-Zelle-Homöostase in-vivo aufrechterhalten wird. Wir zeigen die Existenz einer regulatorischen Rückkopplung zwischen DCs und T Reg-Zellen. Wir finden, dass Verlust der DCs zu einem Verlust der T-Reg-Zellen führt, und, dass die übrigen T-Reg-Zellen zeigen Foxp3 Ausdruck verringerte. Der DC-abhängige-Verlust in T-Reg-Zellen führt zu einer Erhöhung der Zahl der T-Zellen produzieren inflammatorische Zytokine wie Interferon-Gamma und Interleukin 17. Umgekehrt führt Erhöhung der Anzahl der DCs zu erhöhten T-Reg-Zellteilung und Akkumulation durch einen Mechanismus, der major Histocompatibility complex II Ausdruck auf DCs erfordert. Der Anstieg der T-Reg-Zellen induziert durch DC-Erweiterung ist autoimmune Typ 1-Diabetes zu verhindern und IBD, was darauf, dass Interferenzen mit diesem Feedback-Schleife hindeutet schafft neue Möglichkeiten für die immun-basierte Therapien.

Galectin-3 Reguliert Negativ TCR-vermittelte CD4 + T-Zell-Aktivierung an Der Immunologischen Synapse

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Aug, 2009  |  Pubmed ID: 19706535

Wir haben die Funktion von endogenen Galectin-3 in der T-Zellen untersucht. Galectin-3-Mangel (gal3(-/-))-CD4(+) T-Zellen abgesondert mehr IFN-Gamma und IL-4 als gal3(+/+)CD4(+) T-Zellen nach T-Zell-Rezeptor (TCR) Engagement. Galectin-3 wurde an der zytoplasmatischen Seite der immunologischen Synapse (IS) in aktivierten T-Zellen angeworben. Galectin-3 befand sich in T-Zellen stimuliert auf unterstützten Lipid-Doppelschichten in erster Linie auf die peripheren supramolekulare Aktivierung-Cluster (pSMAC). Gal3(+/+) T-Zellen gebildet zentrale SMAC auf Lipid-Doppelschichten weniger effektiv und verklebt auf Antigen-präsentierenden Zellen weniger fest als gal3(-/-) T-Zellen, was darauf hindeutet, dass Galectin-3 destabilisiert die IS. Galectin-3 Ausdruck war verbunden mit geringeren frühe Signalling Veranstaltungen und Phosphotyrosine Signale an die pSMAC. Zusätzliche Daten vorschlagen, dass Galectin-3 Herunterregulation TCR in T-Zellen Spurenelement. Durch Hefe-zwei-Hybrid-Früherkennung, haben wir festgestellt, als Partner Galectin-3-Bindung, Alix, die bekannt ist, Proteintransport und Regulierung der Zelle Oberfläche Ausdruck bestimmter Rezeptoren beteiligt sein. Co-Immunopräzipitation bestätigt, dass Galectin-3-Alix-Vereinigung und Immunfluoreszenz-Analyse zeigte, die Umsiedlung von Alix auf die IS in aktivierten T-Zellen. Wir schließen, dass Galectin-3 ist eine hemmende Regulator der T-Zell-Aktivierung und Funktionen intrazellulär durch die Förderung von TCR Herunterregulation, möglicherweise durch die Modulation Alixs-Funktion bei der IS.

Human-Immunodeficiency-Virus Typ 1 Umschlag Gp120-induzierte Teilweise T-Zell-Rezeptor-Signalisierung Erstellt Eine F-Aktin-abgereichertem Zone in Der Virologischen Synapse

Journal of Virology. Nov, 2009  |  Pubmed ID: 19710135

Zell-Zell-Übertragung des humanen Immundefizienz-Virustyp 1 (HIV-1) erfolgt über eine virologische Synapse (VS), gebildet eine enge Zell-Zell-Kreuzung zwischen HIV-infizierten Zellen und Zielzellen, in denen die HIV-1-infizierten Zelle polarisiert und frei Virionen in Richtung der noninfected Zielzelle in gp120 und der Adhäsion Molekül 1 (ICAM-1)-abhängigen Prozess. Die Reaktion der Zielzelle wurde weniger untersucht. Wir genutzt unterstützte planare Doppelschichten gp120 und ICAM-1 zu präsentieren, wie eine reduktionistische Modell für infizierte-Zellmembran und seine Wirkung auf die Zielzelle CD4 T untersucht. Diese Studie zeigt, dass HIV-1 gp120 Interaktion mit seinen Rezeptoren zunächst in Mikrocluster unterteilt ist, die F-Aktin-abhängigen Konsolidierung in einer zentralen supramolekulare Aktivierung komplexe (cSMAC) zu unterziehen. Src-Kinasen sind aktiv in beiden gp120 Mikrocluster und in der VS-cSMAC. Der frühe T-Zell Rezeptor (TCR) signalisieren, dass Maschinen teilweise an die VS aktiviert wird und Signalisierung wird nicht weitergegeben, um Ca(2+) Höhe auslösen oder Ausdruck CD69 zu erhöhen. Jedoch diese partielle Signale TCR Akt lokal um eine F-Aktin-abgereichertem Zone zu erstellen. Wir schlagen ein Modell, in dem die F-Aktin-abgereichertem Zone, in der Zielzelle CD4 T gebildet die Aufnahme von Virionen verbessert, indem Sie auf die physische Barriere für HIV-1 Eintrag und postentry Veranstaltungen zu erleichtern.

Myelomonozytische Zellen Rekrutierung Verursacht Tödlichen CNS Vaskuläre Während Akute Virale Meningitis

Nature. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19011611

Lymphozytäre Choriomeningitis-Virus-Infektion der Maus-Zentralnervensystem (ZNS), löst tödlichen Immunpathologie durch den Zusammenbruch der Blut - Hirn-Schranke und konvulsive Anfälle. Obwohl eine lymphozytäre-Choriomeningitis-Virus-spezifische zytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) notwendig für die Krankheit sind, ist deren Wirkmechanismus nicht bekannt. Um Einblicke in die Pathogenese der Krankheit zu gewinnen, beobachteten wir die Dynamik der Immunzellen in der Meningen durch zwei-Photonen-Mikroskopie. Hier berichten wir Visualisierung von stäbchenförmiges CTLs und massive sekundäre Rekrutierung von pathogenen Monozyten und neutrophile, die für vaskuläre Leckage und akute Letalität erforderlich waren. Zertifikatsvertrauenslisten äußerten mehrere Attractanten Recruiting myelomonozytische Zellen fähig. Wir schließen, dass eine CD8(+) T-Zelle-abhängige Störung gehen Sie diesbezüglich keine direkte T-Zell-Effektor-Mechanismen und stattdessen auf CTL-rekrutiert myelomonozytische Zellen verlassen kann.

Kinetik Der Frühen T-Zell-Rezeptor-Signalisierung Regulieren Die Pathway Lytischer Untermodul Lieferumfang Der Sekretorischen Domäne

Immunity. Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19833088

Keiko Granulat vermitteln Tötung von Virus-infizierten Zellen durch zytotoxische T-Lymphozyten. Wir zeigen hier, dass das Granulat lange oder kurze Wege der sekretorischen Domäne nehmen können. Beide Pfade verwendet die gleichen intrazellulären Molekulare Ereignisse, die unterschiedliche räumliche und zeitliche Anordnungen und werden durch die Kinetik der Ca(2+)-vermittelte Signalisierung geregelt. Schnelle signalisieren verursacht rasche Untermodul Konzentration nahe dem Microtubule organizing Center (MTOC) und Nachlieferung von polarisierten MTOC direkt an der sekretorischen Domäne – der kürzeste Weg. Indolent Signalisierung führte zu spät Rekrutierung von Granulaten, die entlang der Mikrotubuli an die Peripherie von der Synapse verschoben und dann zog tangential, am äußeren Rand des sekretorischen Domäne-a länger Pfades zu verschmelzen. Der kurze Weg ist schneller Granulat-Freigabe zugeordnet und effizienter als des langen Weges zu töten. So regelt die Kinetik der frühen signalisieren die Qualität der CYTOLYTISCHE T-Zell-Antwort.

Modularer Aufbau Der Immunologische Synapsen Und Kinapses

Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 20066081

Das Konzept der eine immunologische Synapse geht zurück auf Anfang der 1980er Jahre mit der Entdeckung des Verhältnisses zwischen T-Zell-Antigen-Rezeptor vermittelt Ca(2+) signalisieren, Adhäsion und gesteuerte Sekretion. Jedoch dieses Konzept nicht Zugkraft gewinnen, erst ab 1998, die ein bestimmtes Molekulare Muster in der Schnittstelle zwischen T-Zellen und Modell Antigen-präsentierenden Zellen aufgedeckt oder unterstützt planare Doppelschichten Bilder veröffentlicht wurden. Das dominante Muster, einen Ring der Adhäsionsmoleküle, die rund um einen zentralen Cluster von Antigenrezeptoren, wurde in beiden Modellsystemen beobachtet. Analyse der Ursprünge dieses Musters in den letzten 10 Jahren hat präsentiert eine Lösung für ein schwieriges Problem in Lymphozyten Biologie--wie eine stark gekrümmter Zelle plötzlich stoppen kann, wenn er ein Signal trifft von wenigen Antigene Liganden auf der Oberfläche einer anderen Zelle ohne deaktivieren die sensorische Maschinerie der stäbchenförmiges Zelle geliefert. Die T-Lymphozyten assembliert aktiv das immunologische Synapse-Muster nach einer Modulbauweise mit Wurzeln im Actin-Myosin-basierte Motilität.

Nanoengineering Immunzellen Funktion

Materials Research Society Symposia Proceedings. Materials Research Society. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 21562611

T-Lymphozyten sind eine wichtige regulatorische Komponente des adaptiven Immunsystems. Verstehen, wie die Mikro- und Nano-Maßstab-Details der extrazellulären Umwelt T-ZELLAKTIVIERUNG beeinflussen kann breit zur Nutzung von T-Zellen für therapeutische Zwecke auswirken. In diesem Artikel untersuchen wir, wie die Mikro- und Nano-Maßstab-Präsentation des Liganden zu Handy-Oberfläche Rezeptoren, einschließlich Microscale Organisation und nanoskaligen Mobilität, die Aktivierung von T-Zellen beeinflusst. Wir erweitern diese Studien auf die Rolle der Zelle erzeugten Kräfte und die Starrheit der Mikroumgebung auf T-Zell-Aktivierung. Diese Ansätze ermöglichen die Lieferung von definierten Signalen an T-Zellen, einen Schritt in Richtung die Zell-Zell-Kommunikation im Immunsystem zu verstehen und die Entwicklung von Mikro-/Nano- und Material - Systeme für das Nähen der Immunantworten für adoptiven T-Zell-Therapien entwickelt.

Einblicke in Funktion Der Immunologischen Synapse Aus Studien Mit Unterstützten Planar Doppelschichten

Current Topics in Microbiology and Immunology. 2010  |  Pubmed ID: 19960306

Angeborenen und erworbenen Immunität ist abhängig von zuverlässiger Zell-Zell-Kommunikation vermittelt durch direkte Interaktionen der Oberfläche Zellrezeptoren mit Liganden in der Oberfläche der Zellen apposing integriert oder direkt an der Oberfläche wie in Ergänzung Ablagerung oder Antikörper vermittelte Anerkennung über Fc-Rezeptoren gebunden. Unterstützte Lipid-Doppelschichten bildete sich am Glas Oberflächen bieten nützliche Modellsystem, um einige grundlegende Merkmale der molekularen Interaktionen in immunologischen relevanten Kontakte zu erkunden, die Signal-Integration und Effektor-Funktionen durch immunologische Synapsen und Kinapses enthalten. Wir haben ausgenutzt, dass die seitlichen Mobilität von Molekülen in den unterstützten planar Doppelschichten und Fluoreszenzmikroskopie zur Entwicklung eines Systems zur Messung der zweidimensionalen Affinitäten und kinetische Preise in der Kontaktfläche, die immunologische interessiert. Affinität Messungen basieren auf einer modifizierten Scatchard-Analyse. Messungen der kinetischen Preise basieren auf Fluoreszenz Foto bleichen nach der Wiederherstellung auf der Ebene der gesamten Kontaktfläche. Dies hat zu einer Reaktion-Diffusionsgleichung gekoppelt, die Berechnung des auf - und ab-Preise ermöglicht. Wir haben festgestellt, dass Mischungen von Liganden in unterstützten planar Doppelschichten können effektiv T-Lymphozyten aktivieren und gleichzeitig erlauben die immunologische Synapse zu überwachen. Neuere Studien in planaren Doppelschichten haben zusätzliche Einblicke in die Grundsätze der Organisation der Zell-Zell-Schnittstellen zur Verfügung gestellt. Mehrjährige Probleme beim Verständnis von Zell-Zell-Kommunikation sind quantitative Messungen auf der Grundlage von planar Doppelschichten in Bereichen der Ligand-gesteuerten Rezeptor Clusterbildung und die Rolle des Aktin-Zytoskeletts in Immunzellen Aktivierung nachgeben. Ein wichtiges Ziel für das Feld ist die Bestimmung quantitativer Vorschriften signalisieren Komplexbildung von angeborenen und erworbenen Rezeptor Systems beteiligt.

Funktionelle Anatomie Der T-Zell-Aktivierung Und Synapse-Formation

Annual Review of Immunology. Mar, 2010  |  Pubmed ID: 19968559

T-Zell-Aktivierung und Funktion erfordern eine strukturierte Engagement der Antigen-präsentierenden Zellen. Diese Zelle-Kontakte zeichnen sich durch zwei unterschiedliche Dynamik in-vivo: flüchtige Kontakte aus Promigratory Kreuzungen immunologische Kinapses oder längere Kontakte von stabilen Junctions genannt immunologische Synapsen genannt. Kinapses arbeiten in der Steady-State beziehen zu selbst-Peptid-MHC (pMHC) und Suche nach Erreger abgeleiteten pMHC zu lassen. Synapsen sind induziert durch T-Zell-Rezeptor (TCR)-Interaktionen mit Agonist pMHC unter bestimmten Bedingungen und korrelieren mit robusten Immunantworten, die Effektor und T-Gedächtniszellen zu generieren. Hochauflösende Bildgebung hat ergeben, dass die Synapse gut koordinierte, Zelladhäsion, TCR Anerkennung der pMHC-komplexe und ein Array von Aktivierung und hemmenden Liganden zu fördern oder zu verhindern, dass T-Zellen zu signalisieren. In diesem Bericht untersuchen wir die molekularen Bestandteile, Geometrie, und Zeitpunkt zugrunde liegenden Kinapses und Synapsen. Wir integrieren neue Molekulare und physiologische Daten um eine Synthese und schlage vor, dass Wege vorwärts.

Proteinkinase C-Theta Vermittelt Negatives Feedback Auf Regulatorische T-Zell-Funktion

Science (New York, N.Y.). Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20339032

T-Zell-Rezeptor (TCR)-abhängige regulatorische T-Zellen (Treg) steuert die Funktion der Effektor-T-Zelle (Teff) und ist durch die inflammatorische Zytokin Tumornekrosefaktor-Alpha (TNF-Alpha) gehemmt. Proteinkinase C-Theta (PKC-Theta) Anwerbung für die immunologische Synapse ist für volle Teff-Aktivierung erforderlich. Im Gegensatz dazu war die PKC-Theta abseits der Treg immunologische Synapse Kohlenstoff. Darüber hinaus verbessert die PKC-Theta Blockade Treg-Funktion, demonstrieren, dass PKC-Theta Treg-vermittelte Unterdrückung hemmt. Hemmung der PKC-Theta Treg vor Inaktivierung von TNF-Alpha geschützt, Aktivität des defekten Treg von Patienten mit rheumatoider Arthritis wiederhergestellt und verbessert Schutz der Mäuse von entzündliche Kolitis. Treg befreit von PKC-Theta-vermittelte Hemmung kann Funktion in Anwesenheit inflammatorische Zytokine und damit therapeutisches Potenzial Kontrolle über entzündliche Erkrankungen.

Wesentliche Rolle Der Ubiquitin Und TSG101 Protein in Entstehung Und Funktion Des Zentralen Supramolekulare Aktivierung Clusters

Immunity. Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20399684

Agonist MHC-Peptid-komplexen in der immunologischen Synapse (IS)-Signal durch T-Zell-Rezeptor (TCR) Mikrocluster (MCs), die zu einem zentralen supramolekulare Aktivierungs-Cluster (cSMAC) konvergieren. Die Determinanten und die Funktion der cSMAC bleiben unbekannt. Wir zeigen eine wesentliche Rolle für Ubiquitin (Ub) und TSG101, aber weniger für HRS, im Signal verarbeiten von Ereignissen in der cSMAC. Primäre T-Zellen mit SiRNA, zeigen wir, dass die Ub Anerkennung durch TSG101 für cSMAC Bildung, TCR MC Signalanbindung, TCR Heraufregulation und Trennung der TCR-MHC-Peptid aus PKC-Theta angereicherten Signalling komplexen erforderlich ist. Schwacher Agonist MHC-Peptid induzierten CD80-abhängige TCR MCs, die in der Mitte der vs dissoziiert, ohne TSG101 zu rekrutieren. Diese Ergebnisse unterstützen TSG101-abhängige Anerkennung von CD80-unabhängige TCR MCs als eine molekulare Checkpoint für TCR Heraufregulation.

Monozyt Menschenhandel Zu Hepatische Seiten Einer Bakteriellen Infektion Ist Chemokin Unabhängig Und Regie: Fokale Interzelluläre Adhäsion Molekül-1 Ausdruck

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Jun, 2010  |  Pubmed ID: 20435926

Rekrutierung von CCR2(+)Ly6C(high) Monozyten auf Seiten der Infektion ist entscheidend für effiziente Abfertigung der mikrobiellen Krankheitserregern. Obwohl CCR2-vermittelte Signale Monozyte Auswanderung aus dem Knochenmark fördern, der Beitrag des CCR2 zu späteren Phasen der Monozyt Einstellung bleibt weiterhin ungeklärt. In diesem Artikel zeigen wir, dass CCR2-Mangel deutlich hepatische Listeria Monocytogenes-Infektion verschlechtert, weil Ly6C(high) Monozyten im Knochenmark beibehalten werden. Intravenös übertragen, CCR2-defizienten Ly6C(high) Monozyten Verkehr normalerweise zu hepatische Foki der Infektion und tragen zur bakteriellen Freiraum. Pertussis-Toxin-Behandlung der adoptively übertragenen Monozyten nicht beeinträchtigen ihre intrahepatische Menschenhandel, darauf hindeutet, dass Chemokine signalisiert, sobald CCR2(+)Ly6C(high) Monozyten aus dem Knochenmark, auswandern nicht für Monozyte Lokalisierung auf Seiten der bakteriellen Infektion in der Leber benötigt wird. Expression von ICAM-1 wird in unmittelbarer Nähe zum Foki der bakteriellen Infektion in der Leber, in CD31(+) Endothelzellen, einschließlich induziert und Blockade von CD11b und CD44 vermindert Monozyte Lokalisierung zu diesen hepatische Herde. Unsere Studien gezeigt, dass Ly6C(high) Monozyte Rekrutierung aus dem Blut zur Leber L. Monocytogenes infiziert Chemokin-Rezeptor-vermittelte Signale, sondern ist hauptsächlich abhängig von Integrin- und extrazellulären Matrix-vermittelte Monozyte Haftung nicht erforderlich ist.

Affinität Von Microcluster Gemessen

The Journal of Experimental Medicine. May, 2010  |  Pubmed ID: 20439542

Wie T-Zell-Aktivierung wird B-ZELLAKTIVIERUNG durch Aggregation von B-Zell-Rezeptoren (BCR) in Mikrocluster getrieben. Neue Arbeit legt nahe, dass die frühen Dynamik der BCR-Mobilität und Microcluster-Formation "BCR Affinität für Antigen in B-Zelle Reaktionsfähigkeit zu übersetzen".

Zytotoxische Immunologische Synapsen

Immunological Reviews. May, 2010  |  Pubmed ID: 20536553

Eine der grundlegendsten Tätigkeiten des adaptiven Immunsystems soll infizierte Zellen und Tumorzellen töten. Zwei unterschiedliche Wege vermitteln dabei, beide durch eine zytotoxische immunologische Synapse erleichtert werden. Während traditionell als angeborene immune Zellen betrachtet, sind natürliche killer (NK) Zellen jetzt geschätzt, um langfristige Anpassungsfähigkeit an chemischen und virale Beleidigungen zu haben. Diese Zellen integrieren mehrere Positive und negative Signale durch NK-Zellen-zytotoxischen oder hemmende Synapsen. Die traditionelle CD8 (+) Alphabeta T-Zell-Rezeptor-positiven Zellen gehören zu den besten Modellen für das Konzept der eine immunologische Synapse, in der vektoriellen Signalisierung gesteuerte Sekretion in eine stabile Schnittstelle für Apoptotic Zellentod in einer infizierten Zelle auslösen, verbunden ist. Groß angelegte Molekulare Organisation in Synapsen erzeugt eine Reihe von Hypothesen. Studien in den letzten 5 Jahren haben begonnen, klare Antworten bezüglich der Gültigkeit dieser Modelle geben. In-vivo Bildgebung Ansätze haben einige Hinweise über die physiologische Relevanz dieser Prozesse mit großen Versprechen für die Zukunft zur Verfügung gestellt. Diesen Bericht gibt einen Überblick der Arbeit über zytotoxische immunologische Synapsen und lässt vermuten, dass die Wege leiten, bei der Anwendung dieser Informationen auf die Entwicklung von Therapeutika.

Hohe Plasmamembran Lipid-Orden Aufgenommen Bei Der Immunologischen Synapse-Peripherie in Live-T-Zellen

Molecular Membrane Biology. Aug, 2010  |  Pubmed ID: 20540668

Cholesterin und Glycosphingolipide angereicherten Membran Lipid Microdomains, häufig genannt Lipid Rafts, werden gedacht, um eine wichtige Rolle bei der räumlichen und zeitlichen Organisation der immunologische Synapsen. Höhere Anordnung von Lipid Acil Ketten wurde vorgeschlagen, für diese Entitäten und Bildgebung der Membran Ordnung in lebenden Zellen während der Aktivierung kann daher helfen, um zu verstehen, die Mechanismen der supramolekularen Organisation von Molekülen, die die Aktivierung von T-Zellen beteiligt. Hier setzen wir die Phase-Sensitive Membran Farbstoff di-4-ANEPPDHQ zusammen mit einer Vielzahl von spektral aufgelöst Mikroskopie-Techniken, einschließlich 2-Kanal ratiometrisch TIRF-Mikroskopie und Fluoreszenz Lebensdauer imaging, zur Charakterisierung von Membran-Bestellung bei der T-Zell-immunologische Synapse mit hoher räumlicher und zeitlicher Auflösung in lebenden Zellen bei physiologischen Temperatur. Wir finden, dass höherer Ordnung der Membran an der Peripherie immunologische Synapse befindet sich in dem proximalen Signalisierung durch die Immunoreceptors und Zubehör Proteine in Mikrocluster zuvor nachweislich stattfinden. Die beobachteten räumlichen Musterung der Membran-Ordnung in der immunologischen Synapse hängt davon ab, aktiv-Rezeptor Signalgebung.

Entwicklung Und Migration Von Plasmazellen in Der Maus-Lymphknoten

Immunity. Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20619695

In dieser Studie abgebildet wir die Differenzierung und wandernde Verhalten entstehenden Plasmazellen (PCs) Maus Lymphknoten durch intravital-Mikroskopie. Pre-PCs zeigte eine eindeutige Migrations-Muster zeichnen sich durch lange, lineare Pfade, die zufällig ausgerichtet waren. Obwohl Chemotaxis über Galphai gekoppelt-Rezeptoren in PC-Migration verwickelt hat, verhinderte Behandlung mit Pertussis-Toxin (Ptx), die diese Signale ablates, nicht Bewegung der Pre-PCs während es anderen Lymphozyten verhaftet. In-vitro-Pre-PCs angezeigt prozessualen amöboide Fortbewegung auf Oberflächen beschichtet mit Integrin-Liganden, während ganz PCs langsam verschoben differenziert oder wurden verhaftet. PC-Verhaftung und Differenzierung in der medulläre Schnüre ist aufgetreten. Ptx Behandlung bevor PC Differenzierung zu einer Anhäufung in der medulläre Schnüre aber Pre-PCs blockiert, differenziert noch in anderen Lymphknoten-Regionen. Zusammengenommen suggest we Pre-PCs durchlaufen eine permanente Random-Walk um die medulläre Schnüre zu finden, wo lokalisierte Chemokine helfen, diese Zellen zu behalten, bis sie Differenzierung und Verhaftung in-situ unterziehen.

Das Verständnis Der Struktur Und Funktion Der Immunologischen Synapse

Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20843980

Der immunologische Synapse wurde eine Fläche von wissenschaftlichem Interesse sehr aktiv in den letzten zehn Jahren. Überraschend, viel über die Synapse ist unbekannt oder umstritten ist. Hier überprüfen wir einige dieser aktuellen Themen im Bereich: wie der Synapse definiert ist, ihre mögliche Rolle bei der T-Zell-Funktion und unser gegenwärtiges Verständnis über die Synapse wie gebildet wird.

HIV-1 Virologischen Synapse Ist Nicht Einfach Ein Nachahmer Von Der Immunologischen Synapse

Viruses. May, 2010  |  Pubmed ID: 20890395

Die virologische Synapse (VS) ist ein dicht Klebstoff als Verbindungsglied zwischen einer HIV-infizierten Zelle und eine nicht infizierte Zielzelle, über das Virus effizient von Zelle zu Zelle in Ermangelung von Zell-Zell-Fusion übertragen werden kann. Der VS hat postuliert, in seiner Morphologie, der gut erforscht immunologische Synapse (IS) zu ähneln. Bewertung erläutert die strukturellen Ähnlichkeiten zwischen IS und VS und den gemeinsamen T-Zell-Rezeptor (TCR) Signalisierung von Komponenten, die in der VS gefunden werden. Jedoch zeigen die IS und die VS unterschiedliche Kinetik in Demontage und intrazelluläre signalisierende Veranstaltungen, möglicherweise zu unterschiedlichen biologischen Ergebnissen führt. HIV-1 nutzt daher molekularen Bestandteile des IS und TCR Signalisierung Maschinen einzigartige Veränderungen im zellulären Morphologie, Migration und Aktivierung auszulösen, die die Übertragung und Ausbreitung von Zelle zu Zelle ermöglichen.

Signalisierung Microdomains in T-Zellen

FEBS Letters. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 20965175

Sub-Mikron Skala Signalisierung Domänen in der Plasmamembran von Zellen induziert gedacht werden, um in der Signaltransduktion eine wichtige Rolle spielen. In T-Zellen induzieren Agonist MHC-Peptid-komplexe kleine Beugung begrenzte Domänen in T-Zell-Rezeptor (TCR) angereichert und signalisieren der Moleküle. Diese Mikrocluster dienen als vorübergehende Plattformen für Signal-Einleitung und erforderlich für nachhaltige signalisieren in T-Zellen, obwohl jedes Microcluster für nur ein paar Minuten funktioniert. Wie sie entstehen und was Mechanismen fördern und regulieren in TCR Mikrocluster Signalisierung ist weitgehend unbekannt, obwohl klar ist, dass TCR Engagement und dynamische Reorganisation der kortikalen Aktin beteiligt sind. Hier überprüfen wir das gegenwärtige Verständnis der Signalisierung in Mikrocluster in T-Zellen, und spekulieren, wie diese Strukturen bilden, biochemische Signale zu initiieren und dienen als Standorte beider signalisieren, Integration und Verstärkung, und zugleich auch entsprechende Beendigung des TCR und signalisieren Verwandte.

Germinal Center Dynamik Von Multiphoton-Mikroskopie Mit Einem Fluoreszierenden Photoactivatable-Reporter Aufgedeckt

Cell. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 21074050

Die germinal Center (GC)-Reaktion produziert hoher Affinität Antikörper durch zufällige Mutation und selektive klonalen Expansion von B-Zellen mit hoher Affinität Rezeptoren. Der Mechanismus, durch die B-Zellen ausgewählt sind, bleibt unklar, ebenso wie die Rolle der beiden anatomisch definierten Bereiche des GC, leichte (LZ) und dunkle Zone (DZ). Wir zusammen ein transgenen Photoactivatable fluoreszierenden Proteins Tracer mit multiphoton-Laser-Rastermikroskopie und Durchflusszytometrie anatomisch untersuchen definiert LZ und DZ B Zellen und GC-Auswahl. Wir finden, dass B Zellteilung an die DZ, mit einem Netto-Vektor der B-Zelle Bewegung von DZ auf die LZ eingeschränkt ist. Der Entschluss, zu den DZ und klonalen Expansion zu unterziehen wird durch T-Helfer-Zellen in den GC-LZ gesteuert, die zwischen LZ B-Zellen, die bezogen auf die Menge des Antigens erfasst und dargestellt nicht erkennen. T-Zell-Hilfe und keine direkte Konkurrenz für Antigen, also der begrenzende Faktor in GC-Auswahl.

Zwei-Photonen-Laser-scanning-Mikroskopie-Bildgebung Der Intakte Rückenmark Und Großhirnrinde Zeigt Für Die CXCR6 Und Neuroinflammation in Immunzellen Infiltration Der Kortikalen Verletzung Websites

Journal of Immunological Methods. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 19800886

Das Maus-Rückenmark ist ein wichtiger Standort für autoimmune und Verletzungen-Modelle. Schädel Ausdünnung Chirurgie bietet eine minimal-invasive Fenster für die Mikroskopie der Großhirnrinde Maus, aber es gibt keine parallelen Verfahren für das Rückenmark. Wir führen einen Roman, einfache und kostengünstige Methode für die zwei-Photonen-Laser-Rastermikroskopie des Rückenmarks intakt in die Maus unter Ausnutzung der natürlich zugänglich Foramina Raum. Hierbei handelt es sich um leistungsfähige Methoden in Kombination mit Gen-bezogene Mäuse in der endogene Immunzellen mit grün fluoreszierendes Protein (GFP) beschriftet sind. Zuerst zeigen wir, dass die Generation der Foramina Fenster eine Reaktion der GFP(+) Microglial Zellen bei CX3CR1(gfp/+) Mäusen nicht entlocken wird. Als Nächstes zeigen wir eine unterschiedliche Rostrocaudal Migration von GFP(+) Immunzellen im Rückenmark von Mäusen CXCR6(gfp/+) während der aktiven experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis (EAE). Interessanterweise Infiltration der Großhirnrinde von GFP(+) Zellen in diesen Mäusen drei Voraussetzungen erforderlich: EAE Induktion, kortikale Verletzungen und Berechnung der CXCR6 auf Immunzellen.

Induktion Von IL-1 Und Interferon-γ: Gewebe-Verteilung, Biochemie Und Funktion Eines Natürlichen Einhaltung-Moleküls (ICAM-1). J. Immunol. 1986. 137: 245-254

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). May, 2011  |  Pubmed ID: 21505214

Ein Mensch Der Adhäsion Molekül (ICAM-1) Von LFA-1. J. Immunol. 1986. 137: 1270-1274

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). May, 2011  |  Pubmed ID: 21505215

Dynamische T-Zell-begrenzte Checkpoint Regelt Affinität-abhängigen B-Zell-Inkrafttreten Der Germinal Center

The Journal of Experimental Medicine. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21576382

Die germinal Center (GC)-Reaktion ist notwendig für die Generation der somatically Hypermutated, hoher Affinität Antikörper, die adaptive Immunität zu vermitteln. Einstieg in die GC beschränkt sich auf eine kleine Anzahl von B-Zell-Klone; Allerdings ist ist der Prozess, durch den diese Anzahl der Klone begrenzte, ausgewählt unklar. In dieser Studie zeigen wir, dass niedrige Affinität B-Zellen intrinsisch Lage Aussaat eine GC-Reaktion nicht erweitern und in Anwesenheit von höhere Affinität-B-Zellen noch vor GC Verschmelzung aktiviert werden. Live multiphoton Bildgebung zeigt, dass die Auswahl basiert auf den Betrag der Peptid-Major Histocompatibility Complex (pMHC) verwandten T-Zellen innerhalb von Clustern der antwortende B und T-Zellen an der T-B-Grenze vorgelegt. Wir schlagen ein Modell in der T-Zelle Hilfe auf die B-Zellen mit den höchsten Mengen an pMHC, beschränkt, so dass für eine dynamische Affinität-Schwelle den B-Zellen Antigen-Bindung auferlegt werden.

Eine Biophysikalische Modell Der Zelladhäsion Von Immunoadhesin Drogen Und Antikörper Vermittelt

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21629715

Eine vielversprechende Richtung in der Medikamentenentwicklung ist es, die Fähigkeit der natürlichen Killerzellen Antikörper beschriftet Zielzellen zu töten auszuschöpfen. Monoklonale Antikörper und Medikamente entwickelt, um diesen Effekt in der Regel zu entlocken binden-Zellenoberfläche Epitopes, die auf Zielzellen Pleuramesotheliom sind aber auch auf andere Zellen. Daher ist es wichtig, die Adhäsion der Zellen durch Antikörper und ähnlichen Molekülen zu verstehen. Wir präsentieren ein Gleichgewichtsmodell von solchen Adhäsion, Einbeziehung von Heterogenität in Ziel-Epitop Zelldichte, unspezifische Adhäsion Kräfte und Epitop Unbeweglichkeit. Wir vergleichen mit Experimenten auf die Adhäsion von Jurkat T-Zellen zu Doppelschichten, enthält den relevanten Natural Killer Cell-Rezeptor, mit Haftung durch die Droge Alefacept vermittelt. Wir zeigen, dass ein Modell, in dem alle Ziel-Zelle Epitopes mobile und verfügbar sind, ist nicht konsistent mit den Daten, was darauf hindeutet, dass komplexere Mechanismen bei der Arbeit sind. Wir vermuten, dass der immobile Epitop-Bruch mit Zelladhäsion ändern kann und wir finden, dass solch ein Modell mehr mit den Daten konsistent ist, obwohl Diskrepanzen bleiben. Wir beschreiben auch quantitativ der Parameterraum, in dem Bindung erfolgt. Unser Modell baut wesentlich auf frühere Arbeiten und unsere Ergebnisse bieten Anleitung für die Verfeinerung der therapeutischen Immunoadhesins. Darüber hinaus weist unser Vergleich mit Daten aus Jurkat T-Zellen auch in Richtung Mechanismen, die im Zusammenhang mit Epitop Unbeweglichkeit Zelladhäsion.

Die Entscheidende Rolle Der Agrin in Der Hämatopoetischen Stammzellen-Nische

Blood. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21653324

Blutbildung ist der Prozess, die nachhaltige Produktion von Blutzellen durch hematopoietic Stammzellen (HSCs) führt. Wachstum, Überleben und Differenzierung der HSCs auftreten in spezialisierten Mikroumgebungen genannt "hämatopoetische Nischen," durch molekulare Signale, die nur teilweise verstanden werden. Hier zeigen wir, dass Agrin ein Proteoglycan der neuromuskulären Synapse beteiligt ist ein kritischer Nische abgeleitete Signal, dass Steuerelemente überleben und Verbreitung von HSCs. Agrin wird ausgedrückt durch multipotenten Nonhematopoietic mesenchymale Stammzellen (MSCs) und differenzierte Osteoblasten Auskleidung der Endosteale Knochenoberfläche, während Lin(-)Sca1(+)c-Kit(+) (LSK) Zellen den α-Dystroglycan-Rezeptor für Agrin schnelles. In-vitro-, Agrin-defizienten MSCs waren weniger effizient unterstützen Proliferation Maus Lin(-)c-Kit(+) Zellen, was darauf hindeutet, dass diese Agrin spielt eine Rolle bei der Entwicklung der hämatopoetischen Zellen. Diese Ergebnisse wurden in der Tat durch die Analyse von Agrin-Knockout-Mäuse (Moschus-L; in-vivo bestätigt.Agrn(-/-)). Agrin-defizienten Mäusen angezeigt in-vivo Apoptosis CD34(+)CD135(-) LSK Zellen und beeinträchtigt die Blutbildung, die durch eine Agrin-ausreichend Stroma zurückgesetzt wurden. Diese Daten enthüllen eine entscheidende Rolle von Agrin in den hämatopoetischen Nischen und das Nebensprechen zwischen Stroma und hämatopoetischen Stammzellen.

PKC-Theta-Funktion Bei Der Immunologischen Synapse: Perspektiven Für Die Therapeutische Ausrichtung

Trends in Immunology. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21733754

Proteinkinase C (PKC)-θ regelt konventionellen Effektor T (Teff) Zelle-Funktion. Seit dieser ersten Befund deutlich geworden, dass die Rolle der PKC-Theta in T-Zellen Komplex. PKC-Theta spielt eine zentrale Rolle in Teff ZELLAKTIVIERUNG und überleben, und negativ reguliert die Stabilität der immunologischen Synapse (IS). Neue Studien gezeigt, dass PKC-Theta erforderlich für die Entwicklung des natürlichen CD4(+)Foxp3(+) regulatorischen T (Treg) Zellen ist und negative Regelung der Treg Zellfunktionen vermittelt. Hier untersuchen wir die Rolle der PKC-Theta in der Informationsgesellschaft, Beweise für seine eindeutige Lokalisierung in Treg-Zellen und die therapeutischen Implikationen der Hemmung PKC-Theta in Teff Zellen, Effektor-Funktion, zu reduzieren und in Treg-Zellen, Suppressor-Funktion zu erhöhen, für die Prävention und Behandlung von Autoimmunerkrankungen und Alloimmune Krankheitzuständen.

Flt3L Steuert Die Entwicklung Der Radiosensitive Dendritische Zellen in Den Meningen Und Plexus Choroideus Des Gehirns Stationären Maus

The Journal of Experimental Medicine. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21788405

Antigen-präsentierenden Zellen im Gehirn krankheitsfreie wurden in erster Linie durch Ausdruck von Antigenen wie CD11b, CD11c und MHC-II, die von Monozyten, dendritische Zellen (DCs) und Mikroglia geteilt werden können. In dieser Studie, beginnend mit dem Kriterium der Flt3 (FMS-Like-Rezeptor-Tyrosinkinase 3)-abhängigen Entwicklung, wir charakterisieren die Merkmale des authentischen DCs innerhalb der Meningen und Plexus choroideus in gesunde Maus Gehirnen. Analysen der Morphologie, Genexpression und Antigen-präsentierenden Funktion etabliert eine enge Beziehung zwischen Meningen und Aderhaut Plexus DCs (m/ChDCs) und Milz DCs. DCs in beiden Standorten gemeinsam eine systeminterne Voraussetzung für Flt3 Ligand. Microarrays offenbart Unterschiede im Ausdruck der Transkripte Codierung Oberfläche Moleküle, Transkriptionsfaktoren, Muster-Anerkennung-Rezeptoren und andere Gene in m/ChDCs verglichen mit Monozyten und Mikroglia. Migrieren von Pre-DC-Vorläuferzellen aus dem Knochenmark führte zu m/ChDCs, die eine 5-7-d-Halbwertszeit hatte. Im Gegensatz zum Mikroglia DCs aktiv selbst-Antigene zu präsentieren und T-Zellen zu stimulieren. Deshalb enthalten die Meningen und Plexus choroideus des Gehirns stationären DCs, die von lokalen Vorstufen ableiten und weisen eine Differenzierung und Antigen-präsentierenden Programm ähnlich wie Milz DCs und Mikroglia unterscheiden.

Boltzmann Energie-basierte Bildanalyse Zeigt, Dass Die Größenunterschiede Der Extrazellulären Domäne Protein Trennung Bei Immun Synapsen Erklären

PLoS Computational Biology. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21829338

Immun Synapsen gebildet durch T und NK Zellen zeigen Trennung von der Integrin ICAM1 von anderen Eiweißen wie CD2 (T Cell) oder KIR (NK-Zellen). Der Mechanismus, durch den diese Proteine absondern, bleibt jedoch unklar; eine wichtige Hypothese ist eine Umverteilung, basierend auf Protein-Größe. Simulationen dieses Mechanismus reproduzieren qualitativ beobachtete Trennung Muster, aber nur in bestimmte Parameter-Regime. Überprüfen, ob diese Einschränkungen in der Tat halten war nicht möglich bis heute diese erfordern einer quantitativen Kopplung von Theorie zur experimentellen Daten. Hier wenden wir uns dieser Herausforderung, eine neue Methodik zur Analyse und Quantifizierung von Bilddaten und der Integration mit biophysikalischen Modelle zu entwickeln. Speziell passen wir verbindliche Kinetik Modell 2 Farbe Fluoreszenz Daten Zytoskeletts unabhängige Synapsen (2 und 3D) und testen, ob die festgestellte inverse Korrelation zwischen Fluorophore Größe abhängigen Ausschluss entspricht, und weiter, ob gemusterte Staaten vorhergesagt werden, wenn auf einzelne Synapsen Modellparameter geschätzt werden. Alle Synapsen analysiert erfüllen diese Bedingungen zeigen, dass die Mechanismen der Umverteilung Protein identifizierbare Signaturen in ihrer räumlichen Muster haben. Wir schließen, dass Energieprozesse in Protein Größe Trennung implizit der Patternation beobachtet in einzelnen Synapsen, zumindest für die spezifische Beispiele getestet fahren können, so dass keine zusätzlichen Prozesse aufgerufen werden müssen. Dies impliziert, dass biophysikalische Prozesse innerhalb der Membran-Schnittstelle einen entscheidenden Einfluss auf die Zelle: Zelle Kommunikation und Zelle signalisieren, EZB Proteininteraktionen und Proteinanhäufung.

HIV Umschlag Gp120 LFA-1 Auf CD4 T-Lymphozyten Aktiviert Und Erhöht Die Zelle Anfälligkeit Für LFA-1-targeting Leukotoxin (LtxA)

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21850260

Das zellulare Adhäsion Molekül LFA-1 und ihrer Liganden ICAM-1 Rolle eine wichtige bei der Förderung der HIV-1-Infektiosität und Übertragung. Diese Moleküle sind auf dem Umschlag von HIV-1-Virionen und sind integrale Bestandteile der der virologischen HIV-Synapse. Zelluläre Aktivierung ist jedoch erforderlich, LFA-1 in der aktiven Konformation zu konvertieren, die hohe Affinität Bindung für ICAM-1 hat. Diese Studie wertet aus, ob solche Aktivierung durch HIV selbst verursacht werden kann. Die Daten zeigen, dass HIV-1 gp120 ausreichend war, um die LFA-1 Aktivierung in voll Ruhezustand naiven CD4-T-Zellen CD4-abhängigen Weise auslösen und diese CD4-T-Zellen anfälliger für Tötung durch LtxA, eine bakterielle Leukotoxin, das vorzugsweise Leukozyten zum Ausdruck bringen hohe Niveaus der aktiven LFA-1 Ziel. Darüber hinaus wurden Virus p24-auszudrücken CD4 T-Zellen im peripheren Blut der HIV-infizierten Personen gefunden, die höheren Ebenen Fläche LFA-1 und LtxA Behandlung führte zu erheblichen Reduktion der die virale DNA-Belastung. Diese Ergebnisse zeigen zum ersten Mal die Fähigkeit des HIV, LFA-1 Aktivierung auf CD4 T-Zellen direkt zu induzieren. Obwohl LFA-1 Aktivierung HIV Infektiosität und Übertragung verbessern kann, macht es auch die Zellen anfälliger für ein LFA-1-targeting bakterielle Toxine, die als neuartige therapeutische Strategie zu Virus-Reservoir bei HIV-infizierten Personen zum Abbau genutzt werden kann.

Neue Einblicke in Die T-Zelle Synapse Aus Einzelmolekül-Techniken

Nature Reviews. Immunology. Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21904389

T-ZELLAKTIVIERUNG hängt extrazelluläre Verbindung der T-Zell-Rezeptor (TCR) von Peptid-MHC-Komplexe in eine Synapse zwischen der T-Zelle und einer Antigen-präsentierenden Zelle. Der Prozess erfordert dann die Assembly Signalling komplexe zwischen TCR und der Adapter-Protein-Linker für die Aktivierung der T-Zellen (LAT) und anschließende filamentösen Actin (F-Actin)-abhängige TCR-Clusterbildung. Jüngste Fortschritte in diesen Bereichen, die durch das Aufkommen neuer Techniken, hat uns unsere Annahmen zu überdenken und betrachten einige radikale neue Modelle gezwungen. Diese beschreiben den Rezeptor Interaktion Steuerungsparameter für die T-Zell-Antworten und der Mechanismus, mit dem LAT, TCR Signalisierung Maschinen eingestellt wird. Dies ist eine aufregende Zeit in T-Zellen-Biologie und weitere Innovationen in Bildgebung und Genomics kann führen zu einem besseren Verständnis der wie T-Zellen aktiviert werden.

PKC-Theta: Treffen Der Volltreffer

Nature Immunology. Nov, 2011  |  Pubmed ID: 22012436

Integrin Inside-Out-Signalisierung Und Der Immunologischen Synapse

Current Opinion in Cell Biology. Nov, 2011  |  Pubmed ID: 22129583

Integrine äquilibriert dynamisch zwischen drei Konformationsänderungen Zuständen auf Zelle Oberflächen. Eine verbogene Konformation hat eine geschlossene Kopfstück. Zwei erweiterte Konformationen enthalten eine geschlossene oder eine offene Kopfstück. Kopfstück Eröffnung beinhaltet Hybrid Domäne ausschwenkbare und ein 70 Å Trennung an den Knien Integrin, die von Allostery von Hybrid-proximalen Ende der βI-Domäne auf eine 3 Å Neuordnung der Ligand-Bindungsstelle am entgegengesetzten Ende der Domäne βI vermittelt wird. Sowohl gebogen geschlossen und erweitert-geschlossen-Integrine haben geringe Affinität, während erweitert-öffnen-Integrin-Affinität 10 Absatz 3 zu 10 4 höher ist. Integrin-vermittelte Adhäsion erfordert die erweiterte offene Konformation, die in physiologischen zusammenhängen durch post-ligand Bindung Ereignisse stabilisiert ist. Integrine unterscheiden daher zwischen Substrat gebunden und lösliche Liganden. Analyse von LFA-1-ICAM-1-Interaktionen in der immunologischen Synapse zufolge Bond Lebensdauer in der Größenordnung von Sekunden, sind die steht im Einklang mit hoher Affinität Interaktionen unterworfen Zytoskelett Kräfte, die die Dissoziation-Rate zu erhöhen. LFA-1 βI Domäne Antagonisten hebt die Funktion in der immunologischen Synapse, weitere Unterstützung eine entscheidende Rolle für die hohe Affinität LFA-1.

Der Wachstumsfaktor Progranulin an TNF-Rezeptoren Bindet Und Ist Therapeutisch Gegen Entzündliche Arthritis in Den Mäusen

Science (New York, N.Y.). Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21393509

Der Wachstumsfaktor Progranulin (PGRN) hat in der Embryonalentwicklung, Reparatur von Gewebe, Tumorentstehung und Entzündung verwickelt worden, aber seine Rezeptoren bleiben nicht identifizierten. Wir berichten, dass PGRN direkt an den Tumor-Nekrose-Faktor-Rezeptoren (TNFRs) gebunden und die TNFα-TNFR-Interaktion gestört. PGRN-defizienten Mäusen waren anfällig für Kollagen-induzierte Arthritis und Administration des PGRN revidierte entzündliche Arthritis. Atsttrin, ein veränderter Protein, bestehend aus drei PGRN Fragmente, ausgestellt selektive TNFR-Bindung. PGRN und Atsttrin verhindert Entzündungen in mehrere Arthritis Mausmodelle und TNFα-aktiviert intrazellulären Signalling gehemmt. Zusammenfassend zeigen diese Ergebnisse, dass PGRN ein Ligand TNFR, ein Antagonist TNFα zu signalisieren ist, und eine wichtige Rolle in der Pathogenese der entzündlichen Arthritis in den Mäusen spielt. Sie schlagen auch neue potentielle therapeutische Interventionen für verschiedene TNFα-vermittelte Krankheiten und Bedingungen, einschließlich der rheumatoiden Arthritis.

Dynamische Bildgebung Der Effektor-Immunantwort Auf Listeriose Infektion In-vivo

PLoS Pathogens. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21455492

Host Verteidigung gegen die intrazelluläre Erreger Listeria Monocytogenes (Lm) erfordert angeborenen und erworbenen Immunität. Hier abgebildet wir direkt Immunzellen Dynamik bei Lm-Foki der subkapsuläre roten Brei (ScDC) mit intravital-Mikroskopie von dendritischen Zellen gegründet. Blut getragen Lm ScDC rasch zugeordnet. Myelomonozytische Zellen (MMC) wimmelte es um nicht-bewegliche ScDC bilden Foki from welche, die Blut fließen Excluded. Die Erschöpfung der ScDC nach Foki gegründet wurden, führte zu eine 10fach verbesserter Verminderung tragfähige Lm, während abgestuften Erschöpfung der MMC 30-1000 Falte lebensfähigen Lm in Herde mit verbesserten Blutfluss Anstieg geführt. CD8 + T-Effektorzellen an Standorten der Infektion eine zweistufige Reduzierung in Motilität mit Antigen unabhängig und Antigen abhängigen Komponenten, einschließlich stabile Interaktionen mit infizierten und nicht infizierten ScDC angezeigt. So, schwärmen MMC zur Kontrolle der Lm vor der Entwicklung der T-Zell-Immunität durch direkte Tötung und Sequestrierung von Blutfluss, während ScDC erscheinen Lm überleben während der Interaktion bevorzugt mit CD8 + T-Zellen in Effektor-Sites fördern.

Migration Von Zytotoxischen Lymphozyten Im Zellzyklus Ermöglicht Lokale MHC-abhängige Steuerung Der Division an Den Standorten Der Viralen Infektion

The Journal of Experimental Medicine. Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21464219

Nach Infektion Teilen cytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) rasch um den Erreger zu beseitigen und zu verhindern, dass die Einrichtung der Persistenz. Das Ausmaß der eine antivirale CTL-Antwort wird gedacht, durch die Einleitung eines Zellzyklus-Programms in den lymphatischen Geweben gesteuert werden. Jedoch ist derzeit nicht bekannt, ob dieses Programm Abteilung während der Migration Erlöse oder lokal an den Standorten der viralen Infektion beeinflusst wird. Wir zeigen, dass antivirale CTLs im Zellzyklus bleiben, während im Transit auf infizierte Gewebe. Bis zu einem Drittel des Virus-spezifischen CTLs im Blut fanden sich im Zellzyklus nach Infektion mit Virus der lymphozytären Choriomeningitis oder vesikuläre Stomatitis-Virus sein. Mit zwei-Photonen-Mikroskopie, fanden wir, dass Effektor, die CTL unterteilt schnell nach Verhaftung in infizierte ZNS ebenso wie in Meningen Blutgefäße. Wir beobachten auch, dass MHC-abhängige Interaktionen, aber nicht Costimulation, beeinflusst das Abteilung-Programm von Effektor CTL durch Phasen des Zellzyklus vorantreiben. Diese Ergebnisse zeigen, dass CTLs, um auf der Durchreise zu teilen bereit sind und dass ihre Zahl lokal am Ort der Infektion durch die Interaktion mit Zellen anzeigen cognate Antigen beeinflusst werden kann.

Zertifikatsvertrauenslisten Reagieren Mit Aktivierung Und Untermodul Sekretion Als Ziele Für Die T-Zell-Erkennung

Blood. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 21045195

Cytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) unterdrücken T-Zell-Antworten gegen ihre Antigene unabhängig von ihren eigenen T-Zell-Rezeptor (TCR)-Spezifität. Dies macht den Einsatz von CTLs vielversprechende für Toleranz-Induktion in Autoimmunität und Transplantation. Es wurde festgestellt, dass die binden die CTL CD8-Moleküle an die major Histocompatibility complex (MHC)-Klasse ich α3 Domäne der Erkenntnis T-Zelle für den Tod der letzten Zelle gestattet werden muss, ergeben. Die Signalisierung von dieser Molekulare Wechselwirkung in Ermangelung der TCR-Anerkennung in der CTL ausgelöste Ereignisse sind jedoch nie geklärt. Hier verwenden wir Einzelzellen-imaging, um die Ereignisse in CTLs dienen als Ziele für die Anerkennung durch spezifische T-Zellen zu studieren. Wir zeigen, dass CTLs aktiv auf Anerkennung von Polfilter ihre zytotoxischen Granulat an der Kontaktfläche, die Freigabe ihre tödliche Fracht und kräftig vermehren zu reagieren. Mit CTLs von Perforin Knockout (KO) Mäuse und Lymphozyten spezifische Kinase (Lck) Niederschlag mit spezifischen small interfering RNA (SiRNA), wir zeigen, dass die Tötung der Erkenntnis CD8-T-Zelle Perforin abhängig und wird durch Lck initiiert signalisieren in der CTL. Kollektiv, deuten diese Daten ein neuer Mechanismus, in dem die gesamte Kaskade im Allgemeinen durch TCR Engagement ausgelöst, in CTLs dienen als Ziele für die T-Zelle Anerkennung ohne TCR Ligaturen "entführt" ist.

Visualisierung Von Zell-Zell-Interaktion-Kontakte: Synapsen Und Kinapses

Self/nonself. 4, 2011  |  Pubmed ID: 22299060

T-Zell-Aktivierung erfordert Wechselwirkungen zwischen T-Zell-Antigen-Rezeptoren (TCR) und Peptiden präsentiert von major Histocompatibility komplexer Moleküle (MHCp) in eine selbstklebende Übergang zwischen der T-Zell und Antigen-präsentierende Zellen (APC). Stabile Kreuzungen mit Bullauge supramolekulare Aktivierung Clustern (SMACs) wurden als immunologische Synapsen definiert. Der Begriff Synapse funktioniert in diesem Fall, da mündet Wurzeln für "gleich" und "befestigen", was übersetzt werden könnte, wie "an der gleichen Stelle zu befestigen." Diese Strukturen bei der T-Zelle-APC Kommunikation und gesteuerte Sekretion zu ermöglichen. Wir haben vorgeschlagen, dass SMACs nicht wirklich Cluster sind, aber sind analog zu höherer Ordnung Membran-Zytoskeletts Zonen amöboide Fortbewegung einschließlich Prüfung Lamellipodium, eine selbstklebende Lamellen und antiadhäsive Uropod Substrat beteiligt. Da T-Zellen während der Fortbewegung über Antigen präsentiert Zellen signalisieren auch integrieren können, ist es wichtig zu prüfen, selbstklebende Kreuzungen gepflegt wie Zellen aneinander vorbei bewegen. Diese Kombination aus Bewegung (Kine-) und Befestigung (-Apsis) kann als Kinapse oder beweglichen Kreuzung beschrieben werden. Synapsen und Kinapses arbeiten in unterschiedlichen Phasen der T-Zell-Grundierung. Optimale Effektor-Funktionen können auch von zyklischen Einsatz von Synapsen und Kinapses abhängen. Visualisierung dieser Strukturen in vitro und in vivo stellt viele verschiedene Herausforderungen, die in diesem Artikel besprochen werden.

T-Zell-auslösenden Schwellenwerte Werden Durch Die Anzahl Der Antigen in Einzelne T-Zell-Rezeptor-Cluster Moduliert

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. May, 2011  |  Pubmed ID: 21576490

T-Zellen reagieren auf sehr kleine Zahlen Agonist Peptide zu aktivieren. Räumliche Organisation von T-Zell-Rezeptoren (TCR) und ihrer Peptid-Major Histocompatibility Complex (pMHC)-Liganden in Mikrocluster ist mit T-Zell-Aktivierung korreliert. Hier haben wir eine experimentelle Strategie, die Kontrolle über die Anzahl der Agonist Peptide pro TCR Cluster, ermöglicht entwickelt, ohne Veränderung der Gesamtzahl von der Zelle engagiert. Unterstützt Membranen, partitioniert mit Rastern der Hindernisse für die Mobilität, laterale, bieten ein wirksames Mittel zur Begrenzung der Gesamtzahl der pMHC-Liganden, die innerhalb eines einzigen TCR-Clusters zusammengebaut werden kann. Beobachtungen zeigen direkt, dass die Beschränkung der pMHC Inhalt in einzelne TCR-Cluster T-Zell-Empfindlichkeit für die Auslösung der anfänglichen Kalziumfluß Wohneinheiten, feste total pMHC verringern kann. Weitere Analyse zufolge auslösenden Schwellenwerte durch die Anzahl der Liganden für einzelne TCR-Clustern, Aktivierung nicht durch die Gesamtzahl gestoßen von der Zelle bestimmt sind. Ergebnisse aus einer Reihe von Experimenten, in denen die gesamte Agonist-Dichte und die maximale Anzahl von Agonist pro TCR Cluster unabhängig in primären T-Zellen sind vielfältig, zeigen, dass die wahrscheinlichste minimale auslösende Einheit Kalzium Signalisierung mindestens vier pMHC in einem einzigen Cluster für dieses System ist. Diese Schwelle wird durch Einbeziehung von Coagonist pMHC nicht geändert, aber Costimulation von CD28 von CD80 kann modulieren den unteren Schwellenwert.

Gerüst Protein Disc Große Homolog 1 Ist Erforderlich Für Die T-Zell-Rezeptor-induzierte Aktivierung Der Regulatorische T-Zell-Funktion

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22307621

FOXP3(+)CD4(+)CD25(High) regulatorische T-Zellen (Treg) Unterdrückung der Entzündung hängt T-Zell-Rezeptor-vermittelten Nuclear Factor of aktivierte T Zellen c1 (NFATc1) Aktivierung mit reduzierten Akt-Aktivität. Wir untersuchten die Rolle der großen Homolog zu Gerüst Protein Disc 1 (Dlgh1) bei der Verknüpfung des T-Zell-Rezeptors zu diesem eindeutigen Signalisierung Ergebnis. Der Treg immunologische Synapse (IS) rekrutiert Vierfache mehr Dlgh1 als konventionelle CD4(+)-T-Zell-IS. Tregs isoliert von Patienten mit aktiver rheumatoider Arthritis oder behandelt mit Tumornekrosefaktor-α, angezeigt Funktion reduziert und ein reduziertes Dlgh1 Einstellung auf die IS. Darüber hinaus Dlgh1 silencing aufgehobene Treg Funktion, NFATc1 Aktivierung beeinträchtigt, Phosphatase und tensin Homolog Ebenen reduziert und erhöht Akt Aktivierung. Dlgh1 arbeitet unabhängig von der Gegenkopplung Weg durch das zugehörige Adapter Protein Carma1 vermittelt und somit präsentiert eine Reihe von einzigartigen Ziele selektiv Treg Funktion bearbeiten.

Selbstzersetzliche Menschliche CD4 T-Zelle Klont Form Ungewöhnliche Immunologische Synapsen

The Journal of Experimental Medicine. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22312112

Anerkennung von selbst-Peptid-MHC (pMHC)-komplexen durch CD4 T-Zellen Rolle eine wichtige in der Pathogenese von vielen Autoimmunkrankheiten. Wir analysierten Bildung der immunologische Synapsen (IS) in Selbstzersetzliche T-Zell-Klone von Patienten mit multipler Sklerose und Typ 1 Diabetes. Alle Selbstzersetzliche T-Zellen enthalten eine große Anzahl von phosphorylierten T-Zell-Rezeptor (TCR) Mikrocluster, indikative aktive TCR zu signalisieren. Jedoch zeigten sie wenig oder gar keine sichtbaren pMHC Anhäufung oder Transport der TCR-pMHC komplexe zu einem zentralen supramolekulare Aktivierungs-Cluster (cSMAC). Dagegen angesammelt Grippe-spezifische T-Zellen große Mengen an pMHC-komplexen in Mikrocluster und ein cSMAC, auch wenn mit Hundertfachen niedrigere pMHC dichten dargestellt. Die Selbstzersetzliche T-Zellen verwaltet auch ein hohes Maß an Beweglichkeit, wieder in krassem Gegensatz zu Virus-spezifische T-Zellen. 2D Affinität Messungen von drei dieser Selbstzersetzliche T-Zell-Klone zeigten eine ab-Normaltarif aber eine langsame auf-Häufigkeit der TCR-Bindung an pMHC. Diese ungewöhnliche IS-Features können negative Auswahl Selbstzersetzliche T-Zellen, die Begegnung mit sehr kleiner Mengen von selbst-Antigen im Thymus zu entfliehen erleichtern. Jedoch können diese gleichen Features Erwerb der Effektor-Funktionen Selbstzersetzliche T-Zellen, die große Mengen an selbst-Antigen in das Zielorgan der autoimmunen Krankheit auftritt ermöglichen.

Mechanosensing T-Lymphozyten-Aktivierung

Biophysical Journal. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22339876

Mechanische Kräfte spielen eine zunehmend anerkannte Rolle bei der Modulierung der Zellfunktion. Dieser Bericht zeigt Mechanosensing von T-Zellen, mit Polyacrylamidgele Liganden CD3 und CD28 präsentieren. Naive CD4-T-Zellen ausgestellt stärkere Aktivierung, Anhaftung und Sekretion von Il, mit steigenden Substrat Elastizitätsmodul über den Bereich von 10-200 kPa gemessen. Mit der Vorlage dieser Ligands auf verschiedenen Oberflächen, veranschaulicht diesen Bericht weiter, dass die Mechanosensing stärker an der CD3 anstatt CD28 Signalisierung zugeordnet ist. Schließlich empfiehlt Phospho-spezifische Färbung für Zap70 und Src Familie Kinase-Proteine Abtasten von Steifigkeit Substrat zumindest teilweise durch Prozesse stromabwärts der T-Zell-Rezeptor-Aktivierung auftritt. Die Fähigkeit der T Zellen Starr quantitativ auf Substrat reagieren bietet ein faszinierendes neues Modell für Mechanobiology.

Deutliche Einflüsse Von Peptid-MHC-Qualität Und Quantität Auf In-vivo-T-Zell-Antworten

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22223661

Die Stärke der T-Zell-Rezeptor (TCR)-Stimulation und nachfolgende T-Zell-Antwort hängen von einer Kombination von Peptid-Major Histocompatibility Complex (pMHC) Dichte und Potenz. Durch den Vergleich von zwei verschiedenen pMHC in Dosen, die Gewinnung von in-vivo ähnliche Verbreitung, haben wir unerwartete Unterschiede in der qualitativen und quantitativen Auswirkungen der TCR-Ligand hervorgehoben. Messungen der Zytokin-Empfindlichkeit und zwei-Photonen-Bildgebung der T-Zell-Dendritische Zelle (T-DC) Wechselwirkungen zeigen Diskriminierung zwischen vergleichsweise schwache Reize infolge verringerter pMHC Potenz oder pMHC Dichte. Darüber hinaus induziert durch TCR-Gene in breiten Gen-Ausdruck-profile trennen in zwei Gruppen: eine, die reagiert auf kumulative TCR-Signal und eine andere, die auf pMHC Qualität, unabhängig von Menge reagiert. Diese Beobachtungen legen nahe, dass Modelle von TCR Ligand Diskriminierung unterschiedliche Empfindlichkeit der nachgeschaltete Reaktionen auf bestimmte Einflüsse der pMHC Potenz berücksichtigen müssen.

Immunologie. Antigen-Feast or Famine

Science (New York, N.Y.). Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22282794