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Articles by Michael Lerch in JoVE
JoVE General
Una lectina Método HPLC para enriquecer péptidos selectivamente glicosilada de muestras biológicas complejas
1Obstetrics, Gynecology and Reproductive Sciences, University of California, San Francisco - UCSF, 2Buck Institute for Age Research, 3Department of Chemistry, Purdue University
Lectina conjugada con perlas de Poros fueron empleados para HPLC. Normas glicopéptido sirvieron como controles positivos y negativos. MARS-14 empobrecido, tripsina digerido plasma humano y se sometió a cromatografía de flujo continuo (FT) y las fracciones recogidas obligado para el análisis de ESI-LC-MS/MS. Glicopéptidos fueron enriquecidos en la fracción unida en comparación con el FT.
Other articles by Michael Lerch on PubMed
Verificación De La Dosimetría De Plan Para Braquiterapia De Tasa De Dosis Alta Con Detectores De Transistor De Efecto De Campo Metal-óxido-semiconductor
Se investigó la viabilidad de un sistema de dosimetría de campo de metal-óxido-semiconductor recientemente diseñado efecto transistor (MOSFET) para verificación de la planificación del tratamiento braquiterapia alta dosis (HDR) de tasa de dosis. Detectores MOSFET fueron calibrados con una cámara de ionización NE-2571 granjero-tipo 0,6 cm3 en agua. Se midieron las características clave de los detectores MOSFET, tales como la dependencia de la energía, que afectarán a mediciones fantasmas con fuentes de 192Ir HDR. El detector de MOS-FET entonces fue aplicado para verificar la exactitud dosimétrica de tratamientos de braquiterapia HDR en un fantasma de agua por encargo. Tres detectores MOSFET fueron calibrados de forma independiente, con los factores de calibración desde 0.187 hasta 0.215 cGy/mV. Distancia dependiente de la energía se observó una respuesta, significativa dentro de los 2 cm de la fuente. El nuevo detector MOSFET tiene una buena reproducibilidad (< 3%), pequeño efecto angular (< 2%) y buena dosis de linealidad (R2 = 1). Se observó que los detectores MOSFET tenían una respuesta lineal con la dosis hasta que la tensión umbral había alcanzado aproximadamente 24 V para las mediciones de fuente 192Ir. La comparación adicional del fantasmas medidas usando detectores MOSFET con cálculos de dosis por un sistema de planificación de tratamiento comercial para planes de tratamiento de braquiterapia basadas en la tomografía computada demostró que la desviación relativa media era 2.2 +/-0.2% de puntos de dosis 1 cm de distancia de la fuente y 2.0 +/-0.1% para dosis puntos de 2 cm de distancia. Las desviaciones de porcentaje entre la medida de la dosis y la dosis prevista estuvieron por debajo de 5% para todas las mediciones. El detector MOSFET, con sus ventajas de pequeño tamaño físico y facilidad de uso, es una herramienta confiable para el aseguramiento de la calidad de la braquiterapia HDR. El método de verificación fantasma descrito aquí es universal y puede ser aplicado a otros tratamientos de braquiterapia HDR.
Verificación in Vivo De Dosis Superficial Para Tratamientos De Cabeza Y Cuello Mediante Técnicas De Intensidad Modulada
Dosis de piel es uno de los temas claves para dosimetría clínica en radioterapia. Actualmente la planificación de sistemas informáticos son incapaces de predecir con precisión la dosis en la región de acumulación, dejando la ambigüedad en cuanto a los niveles de dosis realmente recibidos por la piel del paciente durante la radioterapia. Se trata de una de las razones principales por qué medidas in vivo son necesarias para estimar la dosis en la región de acumulación. Un detector de (MOSFET) metal-oxide-semiconductor-field-effect-transistor desarrollado recientemente diseñado específicamente para la medición de dosis en rápida evolución de los gradientes de dosis fue introducido para la dosimetría de la piel in vivo precisa. La viabilidad de este detector para mediciones de dosis de piel se verificó en comparación con plano paralelo cámara de ionización y películas radiochromic. La precisión de un sistema de planificación de tratamiento comercial (TPS) en los cálculos de dosis de piel para el tratamiento de terapia de radiación de intensidad modulada de carcinoma nasofaríngeo se evaluó utilizando detectores MOSFET en un fantasma antropomorfo, así como en los pacientes. Los resultados muestran que este nuevo detector MOSFET puede proporcionar una acumulación intrínseca mínima pero altamente reproducible de 7 mg cm(-2) responda a las necesidades de personal superficie dosis equivalente Hp (0.07). La reproducibilidad de la respuesta MOSFET, en modo de alta sensibilidad, resulta para ser mejor que el 2% en la superficie del fantasma en las dosis que normalmente se entrega a los pacientes. El detector MOSFET coincide bien con la cámara Attix y la película Gafchromic EBT en términos de superficie y acumulación región dosis medidas, incluso para vigas incidentes oblicuas. Mientras que la diferencia de dosis entre MOSFET mediciones y cálculos de TPS es dentro de la incertidumbre de medición para las profundidades iguales o superiores a 0,5 cm, se encontró una sobreestimación de hasta 8,5% para los cálculos de dosis superficial en el estudio fantasma antropomorfo. Las mediciones de dosis de piel in vivo revelan que la diferencia de dosis entre los resultados de los MOSFET y los cálculos de TPS fue en promedio de-7.2%, que van desde tactil 4.3% a-9.2%. El nuevo diseño detector MOSFET encapsulado en una película protectora delgada de agua tiene una acumulación intrínseca reproducible mínimo recomendada para la dosimetría de la piel. Esta característica hace muy conveniente para la rutina IMRT QA y dosimetría de la piel in vivo precisa.
Dosimetría in Vivo En Tiempo Real Pared Rectal Para Radioterapia De Próstata
Globos rectales se utilizan en la radioterapia externa de la próstata para proporcionar anatomía reproducible y reducciones de dosis rectal. Se trata de una investigación sobre la combinación de un detector de radiación de MOSFET con un balón rectal para en tiempo real en vivo dosimetría de la pared rectal. El MOSFET utilizado en el estudio es un detector de radiación que proporciona una profundidad equivalente de agua de medición de 70 microm. Dos MOSFETs se combinaron en una orientación cara a cara. Se midieron la reproducibilidad, sensibilidad y dependencia angular para el MOSFET dual en un haz de fotones de 6 MV. El MOSFET dual fue combinado con un balón rectal y se irradiaron con tratamientos de próstata hipotéticos en un fantasma. La dosis de la pared rectal anterior se midió en tiempo real y en comparación con la dosis calculada planificación de sistema. El MOSFET dual mostró dependencia angular dentro de +/-2,5% en el acimut y + 2.5 / - 4% en los ejes polares. En comparación con una medición de la cámara de iones en un fantasma, el MOSFET dual acordadas en 2,5% para una gama de longitudes de trayectoria de la radiación y los ángulos incidentes. El MOSFET dual tenía sensibilidad reproducible para tamaños de fracción de 2-10 Gy. Para los tratamientos de próstata hipotéticos la dosis de la pared rectal anterior medida fue 2,6 y 3,2% inferior a la dosis calculada para 3DCRT y planes IMRT. Esto se esperaba debido a las limitaciones del método de cálculo de dosis utilizado en la interfaz de la cavidad del globo. Un MOSFET de doble combinado con un balón rectal comercial fue demostrado para proporcionar mediciones reproducibles de la dosis de la pared rectal anterior en tiempo real. La dosis de la pared rectal anterior medido de acuerdo con la dosis esperada desde el plan de tratamiento para 3DCRT y planes IMRT. El MOSFET dual podría ser leída en tiempo real durante la irradiación, proporcionando la capacidad para dosis en tiempo real, control de la dosis de la pared rectal durante el tratamiento.
Un Flujo De Trabajo De Afinidad De Lectina Orientación Glycosite Específicos, Relacionados Con El Cáncer Estructuras De Carbohidratos En La Tripsina Digerido Con Plasma Humano
Los glicanos son las células específicas del tipo de proteína, modificaciones postraduccionales que se modulan en los procesos de desarrollo y de la enfermedad. Como tal, glicoproteínas son candidatos atractivos biomarcadores. A continuación, describimos una espectrometría de masas basado en flujo de trabajo que incorpora la cromatografía de afinidad de lectina para enriquecer las proteínas que transportan determinadas estructuras de glicano. A medida que aumenta en sialilación y fucosilación destacan entre asociados al cáncer modificaciones, nos centramos en Sambucus nigra aglutinina (SNA) y la lectina Aleuria aurantia (AAL), lectinas que se unen con ácido siálico y las estructuras de fucosa que contienen, respectivamente. Glicopéptidos fucosilados y sialilada de lactoferrina humana sirvieron como controles positivos, y alto contenido en manosa estructuras de invertasa de levadura sirvieron como controles negativos. Las normas se disparó en múltiples sistemas de eliminación de afinidad (MARS) de 14 empobrecido, digerido con tripsina plasma humano de donantes sanos. Las muestras se cargaron en columnas de lectina, separados por HPLC en flujo continuo y fracciones enlazados, y tratados con el péptido N-glicosidasa F para eliminar N-glicanos ligados. Las fracciones peptídicas desglicosiladas fueron interrogados por HPLC-MS/MS ESI. Se identificaron un total de 122 glicoproteínas del plasma humano que contienen 247 glycosites únicas. Es importante destacar que varias de las glicoproteínas observados (por ejemplo, cadherina 5 y neutrófilos lipocalina gelatinasa asociada) normalmente circulan en el plasma a baja nanogramos por mililitro niveles. En conjunto, estos resultados proporcionan la espectrometría de masas basada en la evidencia de la utilidad de la incorporación de la separación lectina-plataformas en las tuberías descubrimiento de biomarcadores de cáncer.
Dosimetría in Vivo En Tiempo Real Con Detectores MOSFET En Tomotherapy Serial Para Pacientes De Cáncer De Cabeza Y Cuello
Se evaluó un método de verificación de la dosis en tiempo real usando un sistema de dosimetría recientemente diseñado metal óxido semiconductor de campo efecto transistor (MOSFET) para el aseguramiento de la calidad (QA) de radioterapia de intensidad modulada (IMRT).
