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Articles by Monica Mejia in JoVE
JoVE Neuroscience
Nanoinjection associato e test Elettrofisiologia allo schermo per la bioattività dei composti con il Drosophila melanogaster Sistema Fiber Giant
1Department of Biological Sciences, Florida Atlantic University, 2Department of Chemistry & Biochemistry, Florida Atlantic University
Un rapido
Other articles by Monica Mejia on PubMed
Assiale E Radiale Acqua Trasporto E Lo Stoccaggio Di Acqua Interna Nella Foresta Tropicale Baldacchino Di Alberi
Calore e stabile traccianti isotopo sono stati utilizzati per studiare il trasporto di acqua assiali e radiali in relazione alle caratteristiche anatomiche di alburno e immagazzinaggio dell'acqua interna in quattro specie di alberi di una foresta tropicale secca stagionalmente in Panama a baldacchino. Caratteristiche anatomiche dei profili di legno e radiale del flusso della linfa sono state misurate alla base superiore del tronco e la corona di un singolo individuo di Anacardium excelsum, Ficus insipida, Schefflera morototoni e Cordia alliodora durante due stagioni consecutive secche. Nave lume diametro e densità della nave non ha esibito una tendenza coerenza assialmente dalla base del fusto alla base della corona. Tuttavia, diametro del lume è diminuito nettamente dalla base della corona ai rami terminali. Il rapporto tra area lume vaso all'area della sezione trasversale di alburno è stato costantemente superiore alla base della corona rispetto alla base del tronco in a. excelsum, insipida F. e c. alliodora, ma nessuna tendenza assiale era evidente in S. morototoni. Profili radiali delle precedenti caratteristiche anatomiche legno variavano secondo la specie e l'altezza a cui sono stati ottenuti i campioni di legno. Profili radiali della densità di flusso della linfa misurato con sensori di dissipazione termica di lunghezza variabile vicino alla base della corona erano altamente correlati con profili radiali della conducibilità idraulica specifico (k(s)) calcolato da caratteristiche anatomiche xilema. Il rapporto tra densità di flusso di linfa ed è stato indipendente dalla specie. Ossido di deuterio (D(2)O) iniettato nella base del tronco degli alberi quattro studio è stato rilevato nell'acqua trapelata dalla corona superiore dopo solo 1 giorno nella struttura della alliodora c. 26-m-alto, nell'albero insipida-28-m-alto F., 3 giorni nell'albero excelsum a. 38-m-alto e nell'albero di morototoni-22-m-alto S. 5 giorni 2 giorni. Trasporto radiale di iniezione D (2) O è stato rilevato in excelsum a., F. insipida e S. morototoni, ma non c. alliodora. Il tasso di trasporto assiale D (2) O un surrogato per velocità massima sap, è stata positivamente correlato con il predetto alburno è e con altezza albero normalizzata per la capacità di archiviazione relativa acqua diurni. Residenza i tempi per la scomparsa del tracciante D (2) O nei pori acqua variava da 2 giorni in alliodora c. a in a. excelsum 22 giorni ed erano positivamente correlato con un indice normalizzato di capacità di stoccaggio di acqua diurni. Capacitivo scambio di acqua tra staminali vani portaoggetti e il flusso di traspirazione così ha avuto una profonda influenza sull'apparente tariffe di trasporto acqua assiale, la grandezza del movimento radiale dell'acqua e il tempo di ritenzione nell'albero dell'acqua preso dalle radici. La relazione inversa tra capacità di scambio acqua interna ed è stato coerenza con un compromesso che contribuiscono alla stabilità dello status dell'acqua foglia attraverso trasporto acqua altamente efficiente a un estremo e il rilascio di acqua immagazzinata a altro estremo.
Mutazioni Dominanti Nel Gene Tyrosyl-tRNA Sintetasi Ripassare Nelle Caratteristiche Della Drosofila Dell'umano Neuropatia Di Charcot-Marie-Tooth
Dominante-intermedia neuropatia di Charcot-Marie-Tooth (CMT-DI) è caratterizzata da degenerazione assonale e demielinizzazione del motore periferico e neuroni sensoriali. Tre mutazioni dominanti nel gene YARS, codifica tyrosyl-tRNA sintetasi (TyrRS), sono stati finora associate CMT DI tipo C. I meccanismi molecolari attraverso i quali mutazioni YARS portano a neuropatia periferica sono attualmente sconosciuti, e modelli animali per DI-CMTC non sono ancora disponibili. Riportiamo la generazione di un modello di Drosophila di-CMTC: espressione del mutante 3 - ma non il tipo selvatico - TyrRS in drosofila ricapitola numerosi tratti distintivi della malattia umana, tra cui un deficit progressivo delle prestazioni di motore, evidenza elettrofisiologica di disfunzione neuronale e segni morfologici di degenerazione assonale. Non solo onnipresente, ma anche neurone specifica espressione del mutante TyrRS, induce questi fenotipi, che indica che l'enzima mutante ha effetti autonomi delle cellule in neuroni. Inoltre, esperimenti di complementazione di biochimica e genetica ha rivelato che la perdita dell'attività enzimatica non è una caratteristica comune delle mutazioni DI CMTC-associati. Pertanto, il fenotipo DI CMTC non è dovuto aploinsufficienza di attività aminoacylation, ma più probabilmente un guadagno di funzione alterazione del mutante TyrRS o interferenza con una funzione sconosciuta della proteina WT. Anche i nostri risultati suggeriscono che le vie molecolari che portano alla neurodegenerazione associata TyrRS mutante sono conservate dalle mosche agli esseri umani.
Un Nuovo Approccio Per Lo Screening in Vivo Delle Tossine Tramite Il Circuito Fibra Gigante Della Drosofila
Trovare composti che influiscono sulla funzione neuronale o muscolare è di grande interesse come potenziali agenti terapeutici per una varietà di disordini neurologici. Applicazioni alternative per questi composti includono il loro uso come sonde molecolari, come pure gli insetticidi. Abbiamo sviluppato un'analisi biologica che richiede piccole quantità di composti e permette per lo screening imparziale dell'attività biologica in vivo. Per questo, abbiamo abbinato amministrando composti in maniera non invasiva con registrazioni elettrofisiologiche simultanee da un circuito neuronale ben caratterizzato, il gigante sistema fibra di Drosophila melanogaster, che media la risposta di fuga della Mosca. Il circuito comprende una varietà di neuroni con colinergico, glutamatergico e sinapsi elettriche così come giunzioni neuromuscolari. Registrazioni elettrofisiologiche da questo sistema permettono il rilevamento di composti correlati effetti contro qualsiasi bersaglio molecolare su questi componenti. Qui, forniamo prove che questo romanzo analisi biologica funziona con piccole molecole come il cloridrato di mecamylamine bloccanti del recettore colinergico e l'idrossido di tetraetilammonio blocco canale potassio, nonché con veleno da Conus brunneus e conopeptides isolati. Conopeptides sono stati sviluppati in farmaci potenti, come ad esempio gli antidolorifici Prialt ™ e Xen2174. Tuttavia, la maggior parte dei conopeptides devono ancora essere caratterizzata, rivelando la necessità di un rapido e semplice metodo di screening. I nostri risultati mostrano che cloridrato mecamylamine, come pure il α-conotossina ImI, che è noto per essere un antagonista del recettore nicotinico dell'acetilcolina umano α7, efficacemente interrotta la trasmissione sinaptica di un percorso di dipendente dal recettore nicotinico dell'acetilcolina drosofila α7 nel nostro circuito ma non influisce sulla funzione dei neuroni con altri tipi di sinapsi. Ciò dimostra che la nostra analisi biologica è un valido strumento per lo screening di composti rilevanti per la salute umana.
