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 JoVE General

Imágenes en directo de la motilidad celular y citoesqueleto de actina de las neuronas individuales y las células de la cresta neural en embriones de pez cebra


JoVE 1726 2/03/2010

1Genetics Training Program, University of Wisconsin-Madison, 2Department of Anatomy, University of Wisconsin-Madison, 3Department of Zoology, University of Wisconsin-Madison, 4Cell and Molecular Biology Training Program, University of Wisconsin-Madison

Este protocolo describe imágenes de las neuronas individuales o de las células de la cresta neural en embriones de pez cebra de vida. Este método se utiliza para examinar los comportamientos celulares y la localización de actina mediante fluorescencia confocal time-lapse microscopía.

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Imágenes in Vivo Del Comportamiento Celular Y F-actina Revela LIM-HD Reglamento Factor De Transcripción Del Desarrollo Axonal Sensorial Periférica En Comparación Con Centroamérica

Desarrollo de la morfología neuronal específica requiere un control preciso sobre los procesos de la motilidad celular, incluyendo la formación del axón, crecimiento y ramificación. Remodelación dinámica de la actina filamentosa (F-actina) citoesqueleto es fundamental para estos procesos, sin embargo, poco se sabe sobre los mecanismos que controlan las conductas móviles axón y la dinámica de la F-actina en vivo. Estructura neuronal se especifica en parte por la actividad intrínseca del factor de transcripción, sin embargo, los pasos moleculares y celulares entre la transcripción y el comportamiento de los axones no son bien entendidos. Pez cebra Rohon-Beard (RB), las neuronas sensoriales tienen una morfología única, con axones centrales que se extienden en la médula espinal y un axón periférico que inerva la piel. LIM homeodominio (LIM-HD) la actividad del factor de transcripción es necesaria para la formación de los axones periféricos RB. Para entender cómo se controla la morfogénesis neuronal in vivo y cómo LIM-HD de actividad del factor de transcripción diferencialmente regula los axones periféricos frente central, que utiliza imágenes en directo de la conducta del axón y la F-actina de distribución in vivo.

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