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 JoVE General

Dos tipos de ensayos para la detección de espermatozoides quimioatracción rana


JoVE 3407 12/27/2011

1Department of Animal Sciences, University of Illinois, Urbana-Champaign, 2School of Life Sciences, Arizona State University

Los huevos y los recubrimientos extracelular alrededor de los huevos con frecuencia liberación péptidos, proteínas y pequeñas moléculas que se comunican con el esperma para guiarlos hacia el óvulo promoviendo así la fecundación. Utilizando el esperma de rana se describen y comparan dos tipos de ensayos para detectar los espermatozoides quimioatracción - ensayos de esperma y la acumulación de pruebas de esperma de seguimiento.

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Piscina De Xenopus Esperma Laevis Exposiciones Múltiples Engranajes Y Su Duración Es Prolongada Por Los Componentes De La Jalea De Huevo

La motilidad de los espermatozoides de Xenopus es iniciada por el choque osmótico experimentado cuando estas células se eyaculado en agua del estanque de baja salinidad. La motilidad es breve y es necesario para que el espermatozoide penetre las capas de gelatina y fertilizar el óvulo. En este estudio hemos demostrado que los extractos de huevo mermelada contienen factores que amplían el período de la motilidad del esperma, así como proporcionar una actividad quimiotáctica como se informó anteriormente. Ambas actividades son parcialmente dependiente de calcio extracelular. Time-lapse y el programa de video microscopía que después de la activación de la motilidad del número de espermatozoides móviles se reduce rápidamente, con un tiempo medio de unos 2 minutos. La adición de 10% v / v de huevo jalea de extracto ("agua de huevo") se incrementó el número de espermatozoides móviles dos veces en los controles en los 20 s, y cerca de 4 - a 10 veces respecto a los controles a los 10 minutos después del inicio de la motilidad. Extensión de la vida útil motilidad no estaba mediada por una proteína no específica o por allurin, la proteína de huevo-agua que tiene actividad quimiotáctica. La trayectoria helicoidal de los espermatozoides Xenopus expuesto estrecho acoplamiento entre las velocidades de rotación y hacia delante en el huevo gelatina, pero cambió rápidamente acoplamiento de momento a momento en una solución tampón de baja salinidad. Nuestras observaciones sugieren que la jalea factores derivados de regular tanto la longevidad y la direccionalidad de la propulsión de esperma.

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