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Articles by Noga Porat in JoVE
JoVE General
Detección rápida homogénea de Ensayos Biológicos Usando el Sistema de modulación magnética biosensores
1Department of Physical Electronics, Faculty of Engineering, Tel Aviv University, 2Department of Biomedical Engineering, Washington University in St. Louis, 3Department of Biological Sciences, University of Illinois, 4Department of Cell Research and Immunology, Tel Aviv University
Magnética modulación del sistema de biosensores se utiliza a la rápida, sensible y simplemente detectar ensayos biológicos, como las moléculas de ADN y las proteínas.
Other articles by Noga Porat on PubMed
Un Análisis Espectrofotométrico De Gamma-glutamilcisteína Sintetasa Y Glutatión Sintetasa En Extractos Crudos De Tejidos Y Células Cultivadas De Mamíferas
Se describe un ensayo de gamma-glutamilcisteína sintetasa (gamma-GCS) y glutatión sintetasa (GS) en extractos crudos de cultivos de células y tejidos. Representa una novedosa combinación de métodos conocidos y se basa en la formación de glutatión (GSH) de cisteína, glutamato y glicina en presencia de riñón de rata GS para el ensayo de gamma-GCS, o de gamma-glutamilcisteína y glicina para el ensayo de g. GSH entonces es cuantificada por el método de reciclaje de Tietze. Ensayo contiene la gamma-glutamil transpeptidasa (GGT) inhibidor de la acivicin para prevenir la degradación de gamma-glutamilcisteína y de la acumulación de GSH y Ditiotreitol para prevenir la oxidación de la cisteína y la gamma-glutamilcisteína. gamma-GCS y niveles de GS determinados por este método son comparables a los determinados por otros. El método es adecuado para la determinación rápida de gamma-GCS GS en tejidos que contienen GGT y para los estudios de inducción de gamma-GCS y GS en cultivos de tejido.
Gamma-glutamil Transpeptidasa Y Glutatión Biosíntesis En Líneas De Células Ovales De Rata No Tumorigénica Y Tumorígeno Hígado
Se estudiaron las propiedades de crecimiento y la síntesis de glutatión en la gamma-glutamil transpeptidasa (GGT)-negativo, no tumorígeno rata hígado oval línea OC/CDE22 de la célula y en su contraparte positiva GGT, tumorigénica línea M22. gamma-glutamilcisteína sintetasa (servicio) actividades eran comparables. Tasas de crecimiento de las células M22 excedieron los de células OC/CDE22 no limitantes y limitar las concentraciones de cisteína exógena. Un anticuerpo monoclonal (Ab 5F10) que inhibe la transpeptidatic pero no la actividad hidrolítica de GGT no afectó las tasas de crecimiento de OC/CDE22 y los de M22 disminuido el nivel OC/CDE22. En M22 GSH-agotado, pero no en células OC/CDE22, el índice y el grado de repleción del GSH cisteína exógeno y glutamina excedieron los obtenidos con glutamato y cisteína exógena. Con 5F10 Ab, repleción con cisteína/glutamina fue similar a la obtenida con cisteína/glutamato. Repleción con GSH exógeno ocurrió solamente en células M22 y fue suprimida por la acivicin de inhibidor de la GGT. Repleción con gamma-glutamilcisteína (CGG) en OC/CDE22 era resistente a acivicin mientras en M22 fue inhibida por acivicin. Necesaria la actividad aminopeptidasa y la repleción con exógenos GSH o cysteinylglycine (CG) fue menor que la obtenida con cisteína. A menos que reduce, disulfuro de CG no apoyó repleción GSH. Los resultados son compatibles con las nociones que (i) GGT-catalyzed transpeptidation fue responsable en gran parte de la ventaja del crecimiento de las células M22 a limitar la concentración de la cisteína, y para su alta GSH contenido a través de la formación de CGG de una actividad (ii) aminopeptidasa/dipeptidasa, gamma-glutamil donante (glutamina) y quiste (e) ine es tarifa-limitadora en repleción GSH cuando GSH o CG sirven como fuentes de cisteína.
La Detección De Sondas Marcadas Con Fluorescencia a Concentraciones Subpicomolar Por Modulación Magnética
Un método sensible y rápido para la detección de colorantes fluorescentes a bajas concentraciones en solución homogénea se demuestra experimentalmente. Fluorescente-sondas de ADN marcadas son detectados por fijación perlas magnéticas y aplicando gradiente campo magnético alterno. Este condensa las sondas fluorescentes en un volumen pequeño de detección y elimina el ruido dispersión de la solución por la detección sincrónica. Por ADN concentración sondas de 1 x 10 (-13) M la señal de detección fue 3,3 veces mayor que el ruido, lo que implica la sensibilidad de detección de 3 x 10 (-14) M.
Detección Rápida Homogénea De La NS3 Virus Ibaraki CDNA En Concentraciones Picomolares Por La Modulación Magnética
Magnética modulación biosensores (MMB) sistema está demostrado experimentalmente para la detección rápida y homogénea del virus de Ibaraki ADNc NS3. Una novela de la transferencia de energía fluorescente de resonancia (FRET) con sede en la sonda discrimina el ADN buscado a partir del control. Cuando la detección se hace, la sonda FRET basado se escinde mediante la Taq-polimerasa actividad y la luz fluorescente se produce. Las sondas biotiniladas se adjuntan a perlas superparamagnéticas estreptavidina-acoplados y se maniobran en movimiento oscilatorio mediante la aplicación de un gradiente de campo magnético alterno a través de dos polos electromagnéticos. Las perlas se condensan en el área de detección y su movimiento dentro y fuera del haz de láser ortogonal produce una señal periódica fluorescente que es demodulada usando la detección sincrónica. 13:09 del virus de Ibaraki ADNc NS3 se detectó en solución homogénea dentro de 18min sin separación o etapas de lavado.
La Modulación Magnética Biosensores Para La Detección Rápida Y Homogénea De Dianas Biológicas a Bajas Concentraciones
Este artículo revisa el desarrollo de una modulación magnética biosensores (MMB) sistema para la detección rápida, sencilla y sensible de dianas biológicas en solución homogénea a bajas concentraciones. Se basa en la condensación y la modulación de las sondas marcadas con fluorescencia unidos a perlas magnéticas usando un gradiente de campo magnético alterno. La condensación de las perlas de todo el volumen aumenta la señal de modulación, mientras que separa la señal del ruido de fondo de la solución no magnetizado. En primer lugar, analizar la motivación y desafíos en el ADN específico de detección de secuencias, así como los enfoques actuales para superar algunos de estos retos. A continuación se presentan el sistema MMB, los esquemas de detección de ADN y la manipulación perlas magnéticas en solución. La detección rápida en sub-picomolares concentraciones de sondas marcadas con fluorescencia, así como de secuencias de codificación de la proteína no estructural del virus de Ibaraki 3 (NS3) ADN complementario (ADNc) sin ningún lavado o etapa de separación también se crítica. Finalmente, se muestran los resultados preliminares de detección de la proteína usando un 'sandwich' basado en ensayo.
Un Seguimiento Prospectivo De Dos Ciclos De 21/7, Seguidos Por Dos Prolongado Régimen 84/7 Ciclos Con Las Píldoras Anticonceptivas Que Contienen Etinilestradiol Y Drospirenona
Continuo uso de anticonceptivos orales combinados actualmente despertando interés creciente como medio de mejorar menstrual relacionados con los síntomas y reducir el número de días de sangrado.
[Salud De La Mujer: ¿Cuáles Son Las Pruebas De Detección Que Toda Mujer Debe Someterse a Fin De Mantener Su Salud?]
La literatura con respecto a la naturaleza y la frecuencia de los exámenes que toda mujer debe someterse a fin de mantener su salud es escasa y no sistemática. El propósito de la presente revisión es asesorar sistemáticamente el médico de la comunidad sobre los exámenes esenciales que se requieren para mantener la salud de la mujer. Esta revisión no se refiere a la prueba que debe realizarse durante el embarazo debido a la naturaleza única de tales exámenes para la detección.
