Translate this page to:
French
In JoVE (1)
Other Publications (17)
- Journal of Chromatographic Science
- Journal of Veterinary Diagnostic Investigation : Official Publication of the American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians, Inc
- Journal of Food Protection
- Journal of Environmental Monitoring : JEM
- Toxicology
- Journal of Environmental Monitoring : JEM
- Toxicological Sciences : an Official Journal of the Society of Toxicology
- The Journal of Veterinary Medical Science / the Japanese Society of Veterinary Science
- Toxicology
- Chemosphere
- Chemosphere
- Archives of Environmental Contamination and Toxicology
- Toxicology Letters
- The Journal of Toxicological Sciences
- Ecotoxicology and Environmental Safety
- Journal of Immunological Methods
- Veterinary Immunology and Immunopathology
Automatic Translation
This translation into French was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Noriko Yamanaka in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Une méthode simple et efficace pour isoler les macrophages de mixte cultures primaires de cellules hépatiques adultes
1Transgenic Animal Research Center, National Institute of Agrobiological Sciences, Tsukuba, Japan, 2Safety Research Team, National Institute of Animal Health, Tsukuba, Japan
Une nouvelle méthode pour obtenir des macrophages de culture primaire de cellules de foie de rat est décrit. Cette méthode utilise la prolifération des macrophages dans la culture, suivie par la secousse de flacons de culture et de la purification par l'attachement sélectif plats en plastique. Cette technique fournit efficacement des macrophages du foie, sans équipement complexe et des compétences.
Other articles by Noriko Yamanaka on PubMed
Détermination De La Oléandrine Sang De Bovin Par Chromatographie Liquide Haute Performance Et Postcolonne Dérivatisation
Une haute performance procédure chromatographie en phase liquide avec une dérivatisation postcolonne fluorescence est développé pour l'analyse des oléandrine dans le sang de bovin. Oléandrine est séparé par une colonne octadécylsilane-collé avec une phase mobile contenant de l'acide déhydroascorbique. L'effluent de la colonne est mélangé avec de l'acide chlorhydrique concentré et passé à travers le poly (tétrafluoroéthylène) tube maintenu à 70 ° C. Les fluorophores résultantes sont détectés à 465 nm avec une excitation à 348 nm. Simple extraction en phase solide en utilisant sept.-Pak tC2 est efficace pour la purification de l'échantillon. Donne la quantité minimale détectable dans le plasma d'oléandrine à 1,5 ng / ml à un rapport signal à bruit de 3:1.
Simple Détermination électrophorèse Capillaire De Oxalate Sous Forme Soluble Et De Nitrates Dans Les Graminées Fourragères
Une méthode simple électrophorèse capillaire est décrit pour la détermination simultanée de l'oxalate soluble et de nitrates dans les graminées fourragères. Des échantillons d'herbe ont été broyés et extrait avec de l'eau. Les extraits ont été filtrés et soumis à une électrophorèse capillaire. L'électrophorèse a été réalisée dans un 75 micromètre x 50 cm capillaire en silice fondue avec 30 mM de sulfate de sodium contenant un modificateur d'écoulement électroosmotique sous tension constante à -8 kV. Séparé oxalate et de nitrate ont été détectés à l'absorption UV directe à 214 nm. Procédé présente peut être utilisé pour la surveillance de routine de la concentration de l'oxalate soluble et le nitrate de graminées.
Le Destin De Maïs Des Gènes Intrinsèques Et Recombinant Dans Les Veaux Nourris De Maïs Génétiquement Modifié Bt11
La présence de maïs intrinsèques et recombinant les gènes Cry1Ab dans le gastro-intestinaux (GI) le contenu, les cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) et les organes viscéraux de veaux nourris de maïs génétiquement modifié Bt11 a été examiné par PCR dans une étude de performance de 90 jours subchronique. Les échantillons ont été recueillis de six japonaise Noir / Holstein veaux nourris maïs Bt11 et de six veaux nourris non-Bt de maïs. Fragments de maïs zéine (Ze1), invertase, chloroplaste, et cry1Ab ont été détectés de façon incohérente dans le liquide du rumen et de contenu rectal 5 et 18 h après le repas. Les fragments d'ADN de chloroplastes de ribulose-1 ,5-bisphosphate carboxylase / oxygénase et ARNt ont été détectés de façon incohérente dans les PBMC, les organes viscéraux, et le muscle longissimus, tandis que le gène cry1Ab n'a jamais été détecté dans des PBMC ou dans les organes viscéraux. Ces résultats suggèrent que l'alimentation ADN dérivé du maïs était surtout dégradé dans le tractus gastro-intestinal, mais que l'ADN fragmenté a été détecté dans le contenu gastro-intestinaux comme une source possible de transfert pour les tissus du mollet. Ces résultats suggèrent également que les gènes cry1Ab recombinantes n'ont pas été transférés à l'PBMC et les tissus des veaux nourris de maïs Bt11.
Cumul Des Naphtalènes Polychlorés Dans Les échantillons D'animaux Domestiques Connexes
Les concentrations de naphtalène polychlorés (PCN) ont été congénères mesurés dans des échantillons d'animaux domestiques connexes tels que les ingrédients alimentaires et les aliments composés de graisses animales. Les concentrations moyennes de PCN au total dans les ingrédients alimentaires ont varié de 500 à 1500 pg g en poids lipidique (-1) avec une forte concentration dans la farine de poisson. Total des concentrations de PCN étaient similaires parmi les aliments composés, qui variait de 98 à 110 pg g en poids lipidique (-1). La concentration totale dans les poulets de PCN a été plus de deux fois le montant des porcs. Tetra-CNS étaient les homologues prédominants dans tous les échantillons. Bioamplification de la hausse des congénères chlorés PCN, en particulier penta-et hexa-SNC, a été un pli quelques plus chez les poulets par rapport à des porcs. Les concentrations estimées de la 2,3,7,8-tétrachloro dibenzo-p-dioxine équivalents (TEQ) de certains PCN sélectionnés dans les ingrédients alimentaires, des aliments composés, les poulets et les porcs étaient de 0,008 à 0,063, de 0,001 à 0,002, 0,033 et 0,011 pg g poids des lipides (-1), respectivement. Basé sur la puissance induisant prédit la luciférase pour chaque congénère PCN, les PCN-TEQ estimés dans les ingrédients alimentaires et les graisses animales étaient semblables à celles qui ont été estimées à partir PCN sélectionnés.
Porcine L'apoptose Des Hépatocytes Et La Réduction De La Sécrétion D'albumine Induite Par Le Déoxynivalénol
Déoxynivalénol (DON) est l'un des principaux contaminants mycotoxique de grains, ce qui provoque un gain de poids réduit chez les porcs. La cytotoxicité de DON pour les hépatocytes porcins a été examiné dans cette étude. DON a été ajouté à la concentration finale de 100, 10, 1, 0,1 ou 0,01 microg / ml dans le milieu de culture des hépatocytes primaires. La mort cellulaire des hépatocytes a été observée dans DON 100 et 10 microg / ml groupes à partir de 6 h après l'addition, et en DON 100, 10, 1 et 0,1 microg / ml groupes à 24 h d'une manière dose-dépendante. Les hépatocytes morts a montré condensation de la chromatine et la fragmentation des noyaux, qui sont considérés comme caractéristiques des changements morphologiques de l'apoptose. Les noyaux des hépatocytes morts ont été colorées positivement par la méthode TUNEL. Lactate déshydrogénase (LDH) de presse, qui est considéré comme une fuite à partir des hépatocytes apoptotiques dans le milieu, est apparu à 24 h après l'addition DON. Augmentation de l'activité caspase-3 a été observée dans DON 100, 10 et 1 microg / ml groupes. Sécrétion d'albumine dans le milieu a été significativement réduite dans DON 100, 10 et 1microg/ml groupes, modérément dans le 0,1 microg / ml de groupe, et légèrement dans le 0,01 microg / ml de groupe. Ces résultats indiquent que l'apoptose induite par le DON par la voie de la caspase-3 activation et entraînent des troubles fonctionnels dans les hépatocytes porcins.
Composés Organiques Perfluorés Dans Le Plasma Sanguin Du Sérum Humain Et Séminale: Une étude De Populations Urbaines Et Rurales Travailleurs De Thé Au Sri Lanka
Les concentrations et l'accumulation de 13 composés organiques fluorés (FOCS) dans le sérum et le plasma séminal humain ont été mesurées dans un pays en développement d'Asie, au Sri Lanka. Six des pavillons de complaisance, le SPFO (sulfonate de perfluorooctane), PFHS (perfluorohexanesulfonate), PFUnA (acide perfluoroundécanoïque), PFDA (acide perfluorodécanoïque), PFNA (acide perfluorononanoic) et le PFOA (acide perfluoro-octanoïque), ont été détectés dans tous les échantillons de sérum. Des quantités mesurables de deux perfluoroalkyles principaux, le SPFO et PFHS, ont été trouvés dans tous les échantillons du plasma séminal. La fréquence de détection de l'prédominante perfluoroalkylcarboxylate, PFOA, dans le plasma séminal était> 70%. L'accumulation de SPFO dans le sérum a été significativement et positivement corrélée avec le PFOA, PFHS et PFNA. Régressions linéaires positives ont également été trouvée entre PFNA et PFUnA et PFNA et PFDA suggérant que ces composés peuvent avoir une origine similaire de l'exposition et l'accumulation. Associations positives significatives ont été observées pour le partitionnement des deux SPFO et PFNA entre le sérum et le plasma séminal. L'accumulation de pavillons de complaisance n'était pas significativement différente dans les sérums de Colombo (population urbaine) et Talawakele (travailleurs ruraux de thé classiques). Cependant, la population Haldummulla (travailleurs ruraux de thé biologique) ont été exposés à des pavillons de complaisance relativement faible par rapport aux deux autres groupes, les travailleurs urbains et ruraux de thé traditionnelles. Les concentrations de pavillons de complaisance au Sri Lanka étaient similaires à ceux rapportés pour les pays industrialisés suggérant que l'exposition humaine à ces produits chimiques est très répandue, même dans les pays en développement. Le roman trouver des pavillons de complaisance dans le plasma séminal humain implique que des études supplémentaires sont nécessaires pour déterminer si l'exposition à long terme chez les humains peut entraîner des déficiences en matière de reproduction.
Profils D'expression Génique Dans Le Foie De Rat Traité Avec Acide Perfluorooctanoïque (PFOA)
L'acide perfluorooctanoïque (PFOA; Pentadecafluorooctanoic acide) est largement utilisé dans diverses applications industrielles. Il est persistant dans l'environnement et ne semble pas subir une dégradation accrue ou de la transformation. PFOA se trouve dans les tissus y compris le sang de la faune et les humains, mais le sort de l'environnement et les effets biologiques de l'APFO restent floues. Techniques de puces à ADN de l'expression des gènes sont devenus une approche puissante pour explorer les effets biologiques des produits chimiques. Ici, le Affymetrix, Inc rat génome 230 2.0 GeneChip a été utilisé pour identifier les altérations dans la régulation des gènes chez des rats Sprague-Dawley rats traités avec cinq concentrations différentes de PFOA. Des rats mâles ont été exposés par gavage quotidien à 1, 3, 5, 10 ou 15 mg PFOA / kg de poids corporel (pc) / jour pendant 21 jours et à la fin de l'exposition, le foie était isolé et de l'ARN du foie au total ont été utilisés pour l'analyse des puces à ADN. Plus de 500 gènes dont l'expression était significativement (p <0,0025) modifié par le PFOA moins deux fois les changements par rapport à un contrôle, ont été examinés. Les effets sont dose-dépendante avec une exposition à 10 mg PFOA / kg, poids corporel / jour, ce qui provoque l'altération de l'expression du plus grand nombre de gènes (plus de 800). Environ 106 gènes et 38 gènes ont été constamment haut ou bas-réglementé, respectivement, dans tous les groupes de traitement. Les plus grandes catégories de gènes induits sont ceux qui sont impliqués dans le transport et le métabolisme des lipides, en particulier les acides gras. D'autres gènes induits ont été impliqués dans la communication cellulaire, l'adhérence, la croissance, l'apoptose, l'hormone de voies de régulation, la protéolyse et peptidolysis et la transduction du signal. L'expression des gènes qui a été supprimée ont été liées au transport des lipides, l'inflammation et l'immunité, et l'adhérence en particulier la cellule. Plusieurs autres gènes impliqués dans l'apoptose, la régulation des hormones, métabolisme, et la protéine G voies de signalisation des récepteurs couplés aux protéines ont été significativement réduit.
Effets De L'alimentation Des Veaux De Maïs Génétiquement Modifié Bt11: Une étude Clinico-biochimique
De maïs génétiquement modifié Bt11 est résistant aux insectes et exprime la toxine Cry1Ab, une protéine insecticide, dans les noyaux. Bien que le maïs Bt11 est considéré comme sûr en fonction des performances des animaux, il n'ya pas de rapports disponibles sur les effets clinico-biochimiques de le nourrir le bétail. Dans cette étude, nous avons évalué les effets de l'alimentation des veaux Bt11, en utilisant du sang et du rumen clinico-biochimiques paramètres. Notre expérience d'alimentation de trois mois depuis longtemps démontré que les veaux (n = 6), nourris avec une ration contenant 43,3% de grains de maïs Bt11 en matière sèche, ne se développent pas toutes perceptibles cliniques, hématologiques, des anomalies biochimiques, ou dans le rumen par rapport à un contrôle veaux (n = 6) alimenté non-Bt11 maïs. Les résultats suggèrent que le transgénique Bt11 n'a pas négatifs clinico-biochimiques des effets sur les veaux.
Expression Différentielle Des Gènes Hépatiques De Poulet Qui Répond Aux PFOA Et PFOS
Les effets de PFOS et PFOA sur les profils d'expression génique de poulets qui ont été exposés soit à des SPFO ou PFOA à de faibles doses ont été étudiés avec l'utilisation de techniques de puces à ADN. Douze tableaux de poulet GeneChip Genome ont été utilisés pour étudier l'expression des gènes hépatiques chez les poulets de 6 semaines anciennes (Gallus gallus) qui ont été exposés à des PFOA (0,1, 0,5, ou 5MG/ML), le SPFO (0,02 ou 0.1mg/mL), ou un contrôle du véhicule une solution saline (0,9% de NaCl dans l'eau Milli-Q) par l'intermédiaire implantation sous-cutanée d'une pompe osmotique 2mL pour 4 semaines ou pendant 4 semaines avec 4 semaines supplémentaires de dépuration. Plus de 240 et 480 gènes ont été significativement affectée par le SPFO après 4 semaines d'exposition, et après 4 semaines d'exposition avec 4 autres semaines de dépuration, respectivement, et plus de 290 et 320 gènes ont été significativement affectée par le PFOA, en conséquence. Pour le SPFO, les gènes qui ont été touchées après 4 semaines d'exposition ont été principalement liées au transport des électrons et l'oxygène, et le métabolisme des lipides et des acides gras, tandis que les gènes qui ont été touchées après 4 semaines d'exposition avec 4 autres semaines de dépuration étaient principalement liées au transport d'électrons et d'ions, et la phosphorylation d'acide aminés de la protéine et la protéolyse. Pour PFOA, les gènes qui ont été touchées après 4 semaines d'exposition ont été liés au transport des ions, des lipides, et les électrons et les cytochromes, tandis que les gènes qui ont été touchées après 4 semaines d'exposition avec 4 autres semaines de dépuration ont été liés à une protéine phosphorylation d'acides aminés et la protéolyse, le transport des ions, et le métabolisme des acides gras et des lipides. Les résultats ont également montré que les profils d'expression génique entre les poulets qui ont été traités avec le SPFO et celles qui ont été traités avec le PFOA étaient différents, ce qui souligne l'importance de l'évaluation séparée des toxicités de PFOS et PFOA. Plus précisément, les expressions de gènes de CYP8B et NOV ont été étudiés.
Détermination De PCDD / F Et PCB De Type Dioxine Dans Les Huiles De Poisson Pour Ingrédients Alimentaires Par Analyse Chimique Des Congénères Spécifiques Et Des Essais Biologiques CALUX
La présente recherche visait à déterminer la pertinence de l'essai CALUX comme méthode de dépistage pour les dioxines dans l'huile de poisson utilisée comme ingrédient dans les aliments au Japon. Modification de TEQ dans l'huile de poisson en fonction de nouvelles propositions de facteurs d'équivalence toxique (TEF) est également discuté. Dans l'analyse, les dibenzo-p-dioxines et dibenzofuranes (PCDD / F) et de type dioxine des biphényles polychlorés (PCB-DL) dans 41 échantillons d'huile de poisson ont été déterminées par chromatographie en phase gazeuse haute résolution / haute résolution spectrométrie de masse (HRGC / SMHR) et des essais biologiques CALUX. Les valeurs moyennes TEQ provenant de l'OMS de 1998-TEF de PCDD / F et PCB-DL était de 2,6 et 9,9 pg g (-1) (ww), respectivement. Les niveaux de TEQ provenant de l'récemment réévalué 2005, l'OMS-TEF ont été légèrement inférieurs à ceux de l'ex-dans les deux groupes. Notamment, la contribution de la mono-ortho PCB-DL pour totaliser 2005, l'OMS-TEQ a été considérablement diminué par rapport au cas de 1998, l'OMS-TEQ, résultant de la réduction de ses valeurs de TEF, tandis que le non-ortho PCB-DL contribution a été augmenté . Le TEQ moyenne déterminée par dosage CALUX pour les PCDD / PCDF était environ trois fois plus élevé, tandis que les PCB-DL était d'environ deux fois plus faible que WHO-TEQ déterminée par CGHR / SMHR; la somme de PCDD / F et PCB-DL était très semblable par les deux méthodes. Les coefficients de corrélation de TEQ entre le dosage et CALUX CGHR / SMHR analyse ont été de 0,84, 0,89, et 0,90 pour les PCDD / PCDF, PCB-DL, et la somme, respectivement. Ces résultats suggèrent que le dosage CALUX est une méthode très utile pour le criblage de composés apparentés à la dioxine dans les huiles de poisson.
Spécifiques Aux Espèces Concentrations De Contaminants Perfluoroalkyliques Dans Les Animaux De Ferme Et Animaux De Compagnie Au Japon
Les métabolites persistants de composés perfluorés (PFC) qui ont été détectés dans les tissus des humains et la faune, et la contamination humaine par PFC suggèrent des différences dans les modes d'exposition à ces composés. Cependant, des études ont porté sur l'identification des voies d'exposition de l'homme au PFC sont rares. Pour fournir une évaluation préliminaire de PFC chez les animaux de ferme tels que poulets, les bovins, les porcs, les chèvres et les chevaux, des échantillons de sang et le foie ont été prélevés dans différentes régions du Japon. En outre, des échantillons de sérums de chiens représentant des animaux de compagnie ont également été utilisés pour l'analyse. Le sulfonate de perfluorooctane (SPFO) est le contaminant le plus important chez les animaux de ferme et animaux de compagnie, avec les concentrations moyennes de SPFO sérums (par ordre décroissant) de: Poulet (5,8 ng / ml)> les bovins (3,0 ng / ml) de chèvre> (2,4 ng / ml)> cheval (0,71 ng / ml) de porc> (0,37 ng / ml). Foies de poulet (67 ng / g) contenait la plus haute concentration moyenne de SPFO parmi les animaux de la ferme, suivis par ceux de porcs (54 ng / g) et les bovins (34 ng / g). En comparaison avec les concentrations de SPFO dans les animaux d'élevage, les niveaux détectés de PFC autres n'étaient pas significatives. Les niveaux élevés de SPFO trouvées dans le foie fœtal bovin suggèrent que le SPFO traverse la barrière placentaire pour entrer dans la circulation fœtale. La consommation de poulet par des humains peut produire une exposition plus élevée de SPFO chez les humains par rapport à celle des animaux d'élevage, mais les niveaux actuels de SPFO dans les animaux d'élevage au Japon étaient inférieurs à ceux rapportés dans les poissons et les animaux sauvages. Des concentrations élevées de SPFO à la fois (25 ng / ml) et le perfluorohexane sulfonate (PFHxS; 10 ng / ml) ont été trouvés dans les sérums de chien, ce qui indique que des études supplémentaires sont nécessaires pour identifier les sources de PFC dans l'environnement humain.
Les Réponses Biochimiques Et Propriétés D'accumulation De Longue Chaîne Composés Perfluorés (PFOS / PFDA / PFOA) Dans Les Poulets De Mineurs (Gallus Gallus)
Un poussins d'un jour des hommes ont été exposés par gavage oral à des mélanges de sulfonate de perfluorooctane (SPFO), perfluorooctanoate (PFOA), et perfluorodecanoate (PFDA) soit à une faible dose (0,1 mg de poids corporel / kg [pc]) ou une haute dose (1,0 mg / kg de poids corporel), ou une solution saline contrôle du véhicule / éthanol, trois fois par semaine pendant 3 semaines. Après 3 semaines d'exposition, la moitié des poussins ont été sacrifiés et l'autre moitié ont été autorisés à épurer pendant encore 3 semaines. Aucune différence dose-dépendantes statistiquement significatives du poids corporel / orgue ont été observés chez les groupes de traitement et de contrôle après 3 semaines d'exposition ou après trois 3 de la dépuration. Ni 15 ni 14 histologiques paramètres du plasma mesurées biochimiques étaient significativement différentes chez les poussins des groupes exposés et les contrôles de véhicules. SPFO, PFDA, et les concentrations de PFOA dans le sang / foie / du rein échantillons ont été mesurés tout au long de l'exposition et périodes d'épuration à des intervalles de temps différents. SPFO et PFDA accumulée à des concentrations beaucoup plus élevées que le PFOA pendant les périodes expérimentales. Fait intéressant, le SPFO et les modes d'accumulation PFDA dans le sang étaient similaires lors de l'exposition et les périodes de dépuration. Les demi-vies pour chaque PFC à l'0,1 et 1,0 mg / kg doses étaient, respectivement, environ 15 et 17 jours pour les SPFO, 11 et 16 jours pour PFDA et 3,9 et 3,9 jours pour les PFOA. L'accumulation dans les organes PFDA était supérieure ou similaire à celle du SPFO: le foie a été la cible principale lors de l'exposition et le sang était le principal réservoir pendant la dépuration. Ces résultats indiquent que l'exposition à un mélange de 1,0 mg de SPFO / PFDA / PFOA / kg de poids corporel n'a aucun effet négatif sur les poulets juvéniles.
Induction Du Cytochrome Différentiel ARNm 1A1 Et 1B1 P450 Dans Primaires Cultures D'hépatocytes De Bovins Traités Avec TCDD, PBDD / F Et De Leurs Ingrédients
Cette étude examine l'expression dose-dépendante du CYP1A1 et le CYP1B1 du primaire cultures d'hépatocytes bovins exposés à la TCDD, plusieurs polybromés dibenzo-p-dioxines et les furannes (PBDD / F) congénères et l'huile de poisson utilisés comme ingrédients d'aliments pour animaux afin d'identifier leur type dioxine potentiels. Les hépatocytes ont été isolés à partir de foie de veau, cultivés et traités pendant 24 heures avec les composés cibles ou des extraits. Quantitative polymérase en temps réel la réaction en chaîne d'analyse (qRT-PCR) a montré que les niveaux d'ARNm par rapport aux CYP1A1 et CYP1B1 montré une induction dose-dépendante par la TCDD. La CE (50) de la concentration de TCDD pour CYP1A1 expression était environ 4 fois inférieure à celle de CYP1B1. Le estimé de type dioxine potentiel toxique des PBDD / F pourraient être classés dans l'ordre suivant: 2,3,7,8-TBDD> 1,2,3,7,8-PBDF> 2,3,4,7,8 -PBDF> 1,2,3,6,7,8-HBDD. Une bonne corrélation a également été observée dans CGHR / SMHR-TEQ dérivés dans des échantillons d'huile de poisson et par rapport à induction d'ARNm CYP1A1 dans les hépatocytes bovins traités avec des extraits purifiés d'huile de poisson. Les données suggèrent que la quantification de biomarqueurs de la réglementation dans des hépatocytes primaires en culture pourrait représenter un outil efficace tant pour le dépistage et l'étude des entités chimiques différentes dans les grands animaux.
Effet Du Sulfonate De Perfluorooctane (SPFO) Sur La Grippe A De La Mortalité Induite Par Le Virus Dans Des Souris Femelles B6C3F1
Des études récentes ont montré que le sulfonate de perfluorooctane (SPFO) affecte le système immunitaire des mammifères à des niveaux aurait trouvé dans la population humaine en général. Il a été démontré que l'exposition aux produits chimiques immunotoxiques peut diminuer la résistance de l'hôte d'animaux à des défis divers pathogènes et d'améliorer la mortalité. Par conséquent, la présente étude a été réalisée afin de caractériser l'effet d'une journée 21 jours avant l'administration de zéro, 5 ou 25 microg SPFO / kg de poids corporel / dans des souris femelles B6C3F1 sur résistance de l'hôte à la grippe à virus A. A la fin de l'exposition SPFO, du corps / poids des organes n'a pas significativement changé alors que la distribution du SPFO dans le plasma sanguin, de la rate, le thymus et du poumon a été dose-dépendante a augmenté. L'exposition SPFO dans une souris a entraîné une augmentation significative de l'amaigrissement et la mortalité en réponse à la grippe A virus. Les concentrations plasmatiques efficaces chez les souris femelles étaient moins plusieurs fois inférieur à celui rapporté moyenne de SPFO teneurs sanguines de humains exposés professionnellement, et tomba dans la gamme supérieure des concentrations sanguines de SPFO dans la population humaine normale et dans un large éventail d'animaux sauvages. Par conséquent, il devrait être important de préciser le mécanisme précis (s) pour excès de mortalité observé dans le groupe à dose élevée.
Cinétique De Dépuration Et De Disposer Des Tissus De PFOA Et PFOS Dans Les Poulets White Leghorn (Gallus Gallus), Administré Par Implantation Sous-cutanée
Cinétique d'élimination et d'élimination des tissus de l'acide perfluorooctanoïque (PFOA) et le sulfonate de perfluorooctane (SPFO) chez les poulets mâles (Gallus gallus) a été déterminée suite à une exposition par implantation sous-cutanée. Les poulets ont été exposés à deux niveaux de PFOA ou SPFO pour 4WK puis autorisé à épurer un 4WK supplémentaire. Ces expositions ne pose pas de changement statistiquement significatif de l'indice de corps, de la biochimie clinique ou histologique entre les traitements par rapport aux témoins (p> 0,05), sauf que les concentrations de cholestérol total et les phospholipides étaient moins chez les poulets exposés au SPFO. Le taux d'élimination constante de PFOA (0,150 + /-0.010d (-1)) était d'environ six fois supérieure à celle du SPFO (0,023 + /-0.004d (-1)). Les plus grandes concentrations de PFOA et PFOS ont été trouvés dans les reins et le foie, respectivement. L'organe le ratio sang de concentration de SPFO a été augmenté après toute l'expérience, ce qui indique l'importance de la séparation des organes de SPFO dans la cinétique d'élimination. La demi-vie d'élimination du PFOA (t (1/2) = 4.6d) et le PFOS (t (1/2) = 125d) chez les poulets a été calculé.
Une Méthode D'isolement De Roman Pour Les Cellules De Type Macrophage De Mixtes Des Cultures Primaires De Cellules Hépatiques De Rat Adulte
Nous rapportons une méthode simple et efficace pour obtenir cellules de type macrophage dans les cultures mixtes primaires de cellules hépatiques de rat adulte. Un parenchymateuse des hépatocytes fraction enrichie a été préparé à partir de foies de rats adultes et ensemencées dans des flacons de culture. Après 7 à 10 jours de culture, où la plupart des hépatocytes ont été dégénéré ou transformées en cellules fibroblastiques, cellules de type macrophage vigoureusement proliféré sur la feuille de cellule. En secouant les flacons, cellules de type macrophage ont été facilement détaché. Le transfert ultérieur et l'incubation dans des plats en plastique abouti à l'adhésion rapide et sélective des cellules de type macrophage, tandis que d'autres cellules contaminantes est restée suspendue dans le milieu. Après rinçage avec une solution saline, joints cellules de type macrophage ont été récoltées avec une pureté de 95 à 99%, évaluée par cytométrie de flux ou immunocytochimie. Ces cellules ont montré la morphologie des macrophages typique et a été fortement positive pour les marqueurs de macrophages de rat, comme ED-1, ED-3, et OX-41, mais négatif pour les cytokératines et l'actine musculaire lisse alpha-. Ils possèdent des propriétés fonctionnelles des macrophages typiques, y compris la phagocytose active de billes de latex, réponse proliférative à GM-CSF recombinant, la sécrétion de cytokines inflammatoires et anti-inflammatoire lors d'une stimulation avec le LPS, et la formation de cellules géantes multinucléées. Comme les cellules de plus de 10 (6) peut être récupéré à plusieurs reprises à partir d'un flacon T75 culture de deux à trois jours d'intervalle pour plus de deux semaines, notre procédure pourrait impliquer une nouvelle alternative pour obtenir les cellules de Kupffer en nombre suffisant et la pureté sans équipement complexe et des compétences .
Isolement Et Caractérisation Des Macrophages à Partir D'une Culture Mixte Primaire De Cellules De Foie De Bovins
Auparavant, nous avons développé une méthode simple et efficace pour isoler les macrophages du foie à partir d'une culture mixte primaire de cellules hépatiques de rat adulte. Pour étendre l'applicabilité de cette méthode, nous avons isolé les macrophages de mixtes de cultures primaires de cellules hépatiques de l'espèce bovine. Macrophages proliféré sur la plaque de cellules de bovins mixtes cellules du foie après 8-16d de la culture. Ces cellules ont été détachées par agitation des flacons de culture. Le transfert ultérieur et une brève incubation dans des plats en plastique abouti à l'adhésion sélective des macrophages. Après rinçages avec du PBS, les macrophages joints ont été récoltés. Plus de 10 (6) cellules pourraient être récoltés à partir du flacon de culture à des intervalles de 2-3d pour plus de trois semaines. Les cellules isolées sont fortement positives pour les marqueurs des macrophages bovins, tels que CD68, CD172a et Iba-1. Ces cellules présentent des propriétés fonctionnelles des macrophages, y compris la phagocytose active de microbilles de polystyrène, de la réponse proliférative à bovine recombinante de granulocytes-macrophage colony-stimulating factor, les gènes spécifiques de la régulation positive des cytokines inflammatoires lors de la stimulation avec un lipopolysaccharide, et la formation de cellules géantes multinucléées. La secousse et la méthode de fixation offre une alternative simple et efficace pour obtenir les macrophages du foie bovins sans nécessiter d'équipement complexe ou des compétences techniques spécialisées.
