Étudier L'hétérogénéité Des Tumeurs Cérébrales En Utilisant L'analyse LOH Débit Moyen

Cytometry. Jan, 2002  |  Pubmed ID: 11774351

Un Récepteur Transmembranaire Sept Nouveaux Induits Durant Les Premières étapes De La Différenciation Des Astrocytes Identifié Par L'expression Différentielle

Journal of Neurochemistry. May, 2002  |  Pubmed ID: 12065666

La lignée de cellules gliales progénitrices rat CG-4 peut être induite à se différencier en oligodendrocytes ou les astrocytes de type-2. Afin d'identifier les gènes dont l'expression varie coïncidant avec cette différenciation phénotypique, nous avons utilisé analyse de différence représentationnelle (RDA) du mRNA. Ici, nous rapportons 38 ADNc induite chez type-2 astrocytes, les oligodendrocytes, ou aussi bien différencient des États. Parmi ceux-ci étaient connus des facteurs de transcription, récepteurs membranaires, protéines de la matrice extracellulaire, modulateurs de signalisation sécrétées, régulateurs de la chromatine et composants de la gaine de myéline. En outre, plusieurs nouveaux gènes ont été identifiés ; Parmi ceux-ci était un gène induit durant les tout premiers stades de différenciation astrocyte, que nous avons nommé Tawil (induite au début de la différenciation des astrocytes). Plusieurs transcriptions de KEFFI ont été détectées par RT-PCR et semblait être produites par épissage alternatif et utilisation du promoteur. La protéine déduite de l'ARNm de KEFFI plus longue présentaient des signes de séquence caractéristiques des récepteurs G-protéine associée, y compris sept domaines transmembranaires putatifs, tandis que les transcriptions de KEFFI plus courtes codé protéines qui manquaient plusieurs segments transmembranaires. Chez le rat adulte, Ieda transcriptions ont été trouvées exclusivement dans le cerveau et les testicules. Dans le cerveau de rat en développement, Ieda expression première détection à jour embryonnaire 16, soit deux jours avant l'apparition des astrocytes mûrs. Ainsi, cette approche a donné une source potentielle de marqueurs pour les États de la différenciation de ces deux types cellulaires ainsi que des gènes fonctionnellement impliqués dans le processus de différenciation lui-même.

Apoptose Dans Les Gliomes Et Son Rôle Dans Leur Traitement Actuel Et Futur

Frontiers in Bioscience : a Journal and Virtual Library. Aug, 2002  |  Pubmed ID: 12133814

L'apoptose a récemment mises le feu des projecteurs dans la recherche continue de nouvelles approches thérapeutiques pour le cancer car il joue un double rôle dans cette maladie. Comme l'a déclaré Lowe et Lin : "agents anticancéreuses cytotoxiques d'ost (M) induisent l'apoptose.(and SO) les mêmes mutations qui suppriment l'apoptose au cours du développement de la tumeur diminueront également la sensibilité de traitement "(1). Par conséquent, toute stratégie visant à accroître la propension des cellules de gliome apoptose pourrait être thérapeutique à part entière, mais a le potentiel supplémentaire d'accroître leur sensibilité aux autres, établis, traitements. Comme corollaire, compréhension des mécanismes apoptotiques au niveau moléculaire permettra non seulement d'expliquer pourquoi les gliomes se posent, mais aussi identifient les points d'intervention. Cet examen mettra l'accent sur ces points, avec l'accent sur deux familles de molécules d'apoptose, mort ligands et leurs récepteurs et protéines de la famille BCL-2. Les auteurs discutent des stratégies à court terme de comment l'apoptose peut être exploitée thérapeutiquement.

Le Marqueur De Prolifération ICP-67 Organise Le Nucléole Durant Le Cycle Cellulaire Selon Ran Et Cycline B

The Journal of Pathology. Jan, 2003  |  Pubmed ID: 12474222

La prolifération marqueur ICP-67 ('antigène Ki-67 ») est couramment utilisé en clinique et recherche de pathologie pour détecter prolifération des cellules, telle qu'elle est seulement exprimé au cours de la progression du cycle cellulaire. Malgré le fait que cet antigène est connu depuis près de deux décennies, il n'y a toujours aucun une compréhension suffisante de sa fonction. Cette étude a donc identifié des protéines qui interagissent avec l'ICP-67, à l'aide d'un système de deux-hybride de levure. Un système de deux-hybride de mammifère et immunoprécipitation études ont servi à vérifier ces interactions. Parmi les autres protéines de régulation du cycle cellulaire, deux partenaires de liaison associées à la GTPase Ran petit ont été identifiés. En outre, la structure de l'ADN et des protéines associées au nucléole liant à l'ICP-67 ont été trouvés. En outre, il a été démontré que le domaine N-terminal de pKi-67 est capable d'autodiscipline pour sa propre région de répétition codée par l'exon 13. Depuis RanBP, une protéine impliquée dans le transport des macromolécules dans la lamina nucléaire, s'est avéré pour être un partenaire de liaison, un éventuel effet de pKi-67 sur la localisation des protéines de régulation du cycle cellulaire a été proposé. Pour tester cette hypothèse, un système d'expression de gène sensible à la tétracycline a été utilisé pour induire les fragments de l'ICP-67 précédemment utilisés pour les écrans de deux-hybride dans les cellules HeLa. Immunomarquage subséquente a révélé la translocation du cyclin B1 du cytoplasme à nucléoles en réponse à cette déclaration. Il est suggéré que l'ICP-67 est une protéine associée au Ran avec un rôle dans la désintégration et de la réforme du nucléole et, ainsi, à l'entrée et la sortie de la phase M.

Signalisation Intensité De Récepteur De Facteur De Croissance épidermique Détermine L'internalisation, L'ubiquitination Et Interactions Des Protéines Intracellulaires

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. May, 2003  |  Pubmed ID: 12734385

Activation de ligand des facteur de croissance épidermique (EGFR) de récepteurs causes la fixation de la BBC, qui conduit à l'EGFR polyubiquitination et internalisation par le biais de complexes d'endophilin, qui contient l'encodage de domaine SH3 protéine adaptateur, exprimée en tumorigène astrocytes/Cbl-interacting protein de 85 kDa/régulateur de la kinase omniprésent (SETA/CIN85/Ruk). Chez les cellules cultivées à haute densité, des niveaux élevés de SETA interféraient dans le recrutement des protéines de la lignée B Casitas (Cbl) de l'EGFR et réduit son polyubiquitination, suggérant que SETA a une fonction régulatrice dans la formation du complexe EGFR-Cbl-endophilin et régulation EGFR. Dans une situation où il y a signalisation de l'EGFR, mais aucun internalisation ou régulation à la baisse, comme est le cas avec l'EGFR avec les exons 2-7 supprimés oncogène (DeltaEGFR), ces protéines étaient absents au total. À l'aide de mAb 806, qui reconnaît l'état d'activation de l'EGFR et préférentiellement immunoprécipités DeltaEGFR, nous montrons que la DeltaEGFR n'interagit pas avec Cbls, SETA ou endophilin A1, fournissant une explication mécaniste pour son manque d'internalisation. Comme il devrait l'absence de protéines de Cbl dans la DeltaEGFR complexe, le récepteur mutant n'était également pas polyubiquitinée. L'intracellulaire C terminus et la tyrosine autophosphorylation patron de DeltaEGFR ressemblent aux EGFR de type sauvage, mais il signale à une intensité plus faible, tel que déterminé par les niveaux de la phosphotyrosine EGFR. Pour tester la suggestion selon laquelle l'absence d'interaction avec le complexe de Cbl-SETA-endophilin est en raison de différences dans l'intensité du signal, cellules exprimant l'EGFR ont été traités avec des inhibiteurs d'EGFR AG1478 tyrphostine. Atténuation des signaux EGFR sauvage à des niveaux semblables à ceux trouvés dans DeltaEGFR conduit à la dissociation des protéines SETA et Cbl et une atténuation concomitante d'internalisation du récepteur.

SETA/CIN85/Ruk Et Son Partenaire De Liaison AIP1 Associent à Divers éléments Du Cytosquelette, Y Compris FAKs Et Modulent L'adhésion Cellulaire

Journal of Cell Science. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12771190

La protéine adaptatrice que Seta/CIN85/Ruk est impliqué dans la régulation des voies de transduction de signaux divers, notamment l'internalisation des récepteurs à activité tyrosine kinase via les Cbl ubiquitine ligases et atténuant l'activité PI3K par interaction avec sa sous-unité régulatrice. Nous présentons ici des preuves pour un nouvel aspect de la fonction de SETA, basée sur l'observation initiale selon laquelle il co-localise avec l'actine en microfilaments et aux adhésions focales et avec les microtubules. Bien qu'il n'y n'avait aucun preuve directes interactions moléculaires entre les protéines du cytosquelette et de SETA, la protéine interagissant avec SETA AIP1, qui est un orthologue de rat du substrat src Xenopus Xp95, interagissait fortement avec les protéines du cytosquelette, y compris l'actine et la tubuline. SETA et AIP1 interagissaient avec la kinase d'adhérence focale (FAK) et de la proline riche tyrosine kinase 2 (PYK-2), et c-Cbl a interagi avec PYK-2. AIP1, qui interagissent plus fortement que SETA ou c-Cbl, exigé une séquence de phosphorylation consensus intact tyrosine kinase à Y319 à lier à la kinase d'adhérence focale, ce qui suggère que la phosphorylation est un important Médiateur de ce complexe. SETA, qui interagissait sous forme de dimère avec la kinase d'adhérence focale, favorisé l'interaction entre la PYK-2 et AIP1. Analyse directe de l'impact de ces protéines sur l'adhésion cellulaire, par l'utilisation d'un capteur d'impédance électrique de substrats cellulaires (ECIS), a montré que SETA promu adhésion cellulaire AIP1 et c-Cbl il réduit. En outre, la capacité de AIP1 et AIP1 mutants pour diminuer l'adhérence cellulaire dans l'analyse de l'ECIS en corrélation avec leur présence dans les complexes de PYK-2, établissant ainsi un lien direct entre les interactions moléculaires liées aux AIP1 et comportement cellulaire. Transfection de AIP1 a également réduit le niveau de phosphorylation d'endogène PYK-2 et FAK, suggérant que cette protéine peut réguler directement la kinase d'adhérence focale et adhérence de cellules ainsi. Ces données sont les premiers à impliquer la protéine adaptatrice SETA et son partenaire de liaison AIP1 comme étant impliqué avec le cytosquelette et dans la régulation de l'adhérence cellulaire et suggèrent qu'ils soient partie de l'ensemble réglementaire de kinase adhérence focale.

L'angiogenèse Dans Les Gliomes : Mécanismes Moléculaires Et Des Barrages Routiers à La Traduction

Cancer Journal (Sudbury, Mass.). May-Jun, 2003  |  Pubmed ID: 12952305

Les gliomes sont caractérisées par des niveaux très élevés de neo-vascularisation miroiter l'espoir de thérapies ciblant l'angiogenèse devraient avoir un impact significatif sur cette famille insoluble des tumeurs. D'intenses recherches sur les mécanismes moléculaires qui entraînent la formation de nouveaux vaisseaux sanguins en réponse à la croissance de la tumeur a révélé une grande partie de la complexité, le cœur qui se font concurrence influences pro - et anti-angiogéniques. Les voies de signalisation pertinents, et comment ils peuvent être manipulés pour s'immiscer dans la promotion de la croissance des vaisseaux sont discutés. Plusieurs types de composés de plomb anti-angiogéniques sont déjà en essais cliniques, mais n'est pas simple d'évaluer leur impact sur les tumeurs cérébrales. Nous discutons en détail certains aspects pratiques de l'utilisation d'imagerie de suivre plus efficacement la progression tumorale et la réponse au traitement, ce qui est particulièrement pertinent pour l'utilisation des traitements qui ciblent le sang coulent directement, qui est fondamentale aux techniques d'imagerie modernes.

Les Méningiomes : Analyse De La Perte D'hétérozygotie Sur Le Chromosome 10 Dans La Progression Tumorale Et La Délimitation Des Quatre Régions De Délétion Chromosomique En Commun Avec D'autres Types De Cancer

Clinical Cancer Research : an Official Journal of the American Association for Cancer Research. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14555516

Perte d'hétérozygotie (LOH) d'allèles sur le chromosome 10 a été signalée dans nombreux cancers, conduisant à l'identification des gènes suppresseurs de tumeur sur ce chromosome. Plusieurs rapports mettent en cause LOH d'allèles du chromosome 10 en progression de méningiome, mais la fréquence et la complexité de la perte n'ont pas été bien caractérisées. En outre, le lieu et l'identité des gènes suppresseurs de tumeur putatif sur ce chromosome qui contribuent à la progression de méningiome sont inconnus car les gènes suppresseurs de tumeur caractérisée actuellement ne semblent pas être impliqués. Par conséquent, cette étude a été entreprise afin d'évaluer la fréquence et la complexité de LOH en progression de méningiome, (b) cartographier les patrons LOH de méningiomes individuels pour définir les régions plus petites d'une délétion chromosomique partagée et (c) comparer les régions identifiées avec les destructions du chromosome 10 dans d'autres cancers et ainsi initier la localisation des gènes suppresseurs de tumeur putatif.

Les Méningiomes : Perte D'hétérozygotie Sur Le Chromosome 10 Et Marqueur Spécifique Des Corrélations Avec La Qualité, La Récurrence Et La Survie

Clinical Cancer Research : an Official Journal of the American Association for Cancer Research. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14555517

Dans une étude des 208 méningiomes, nous avons constaté un taux élevé de perte d'hétérozygotie (LOH) sur les tumeurs du chromosome 10 bénigne (73,4 %), atypique (80,0 %) et malignes (86,7 %). Un grand pourcentage des tumeurs bénignes et atypiques et un pourcentage croissant des tumeurs malignes avaient LOH sur plusieurs locus (43,9 %, 45 % et 66,7 %, respectivement). L'incidence élevée de LOH survenant au début de la progression de méningiome suggère que LOH à allèles individuels peut servir de marqueur de modifications cliniquement pertinentes utile pour le diagnostic, la ventilation des tumeurs et/ou le traitement des patients.

Répression Médiée Par P53 De L'ADN Méthyltransférase 1 Expression De Liaison De L'ADN Spécifique

Cancer Research. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14583449

Profils de méthylation de cytosine dans l'ADN génomique sont significativement altérées dans le cancer, et de méthylation de l'île de novo CpG a été impliquée dans la tumeur suppresseur gene silencing. Nous démontrons ici un lien mécaniste entre le gène suppresseur de tumeur p53 et le contrôle de régulation épigénétique de la méthylation de la génomique. Suppression de p53in HCT116 humains cellules de carcinome du côlon et des astrocytes de souris primaire a entraîné une augmentation de 6 nombre de cytosine de l'ADN méthyltransférase 1 (Dnmt1) l'ARNm et protéines, ce qui suggère de soulagement de la Dnmt1repression induite par la p53. Un site de liaison du consensus p53 dans l'exon 1 de la Dnmt1gene humaine lié p53 recombinaison in vitro et in vivo, en l'absence de stimuli qui activent la p53, ce qui implique que p53 contrôle Dnmt1transcription via la liaison directe de l'ADN endogène p53. Fait intéressant, rayonnement ionisant ou l'étoposide, de stabilisent et activer la p53, liaison de p53 dans l'immunoprécipitation de la chromatine, concomitante avec un quintuplement Dnmt1 niveaux a diminué. Nos résultats suggèrent que l'activation de p53 réduit la liaison et soulage la répression transcriptionnelle de la Dnmt1gene, alors que la perte de p53, un événement fréquent, au début dans la tumorigenèse, peut contribuer de manière significative à la méthylation aberrante de génomique.

Signalisation De L'EGFR Constitutive Confère Un Phénotype Mobile à Des Cellules Souches Neurales

Molecular and Cellular Neurosciences. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14697673

Le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) s'est avéré jouer un rôle important dans le développement du cerveau, y compris la migration, prolifération, différenciation et la survie des cellules souches et précurseur. Pour examiner de plus près les exigences temporelles et spatiales d'erbB signaux dans les cellules souches neurales non validées (CNS), nous avons exprimé le récepteur EGF indépendante du ligand EGFRvIII, dans C17.2 CNS. Ces CNS sont connus à migrer et à manifester une réponse tropique aux environnements neurodégénératives in vivo, mais pour qui un mécanisme sous-jacent reste peu clair. Nous montrons qu'erbB améliorée de signalisation via l'activité de la kinase constitutive de EGFRvIII en CNS soutient un phénotype immature et améliore la migration de la NSC.

Marqueur De Prolifération ICP-67 Est Présent Dans Différentes Isoformes Avec Différents Effets Cellulaires

Journal of Cellular Biochemistry. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15048881

L'antigène Ki-67, ICP-67, est un marqueur de prolifération couramment utilisés en recherche et en pathologie. Il a été reconnu que la protéine existe dans deux variants d'épissage différentes qui se distinguent par un exon. Dans les travaux en cours, nous présentons trois nouveaux variants d'épissage de l'ICP-67 humaine consistant en deux isoformes d'origine naturelle et une version atypique. En outre, les données sont présentées indiquant alternative épissage de l'ICP-67 N-terminale est fréquente chez les lignées de cellules tumorales. Analyse 93 tissus comprenant principalement des échantillons de tumeur de cerveau, nous avons constaté cette isoforme de long et court peut s'exprimer indépendamment les uns des autres. Induction de la mitose dans les cellules mononucléaires de sang périphérique humain ont révélé que l'ICP-67 court apparaît plus tôt dans le cycle cellulaire que l'isoforme longue et atteint son expression maximale quand transcription des ensembles dans ce dernier. Enfin, le système d'expression de transfection de cellules de culture mammifères avec l'exon 7 (spécifique pour l'isoforme longtemps ICP-67 et absent de l'isoforme court) dans une tétracycline réglementée diminue le taux de prolifération cellulaire sans affecter le cycle cellulaire. En résumé, nous démontrons que l'ICP-67 N-terminale est épissé différentiellement résultant au moins cinq différentes isoformes avec différentes fonctions.

Alix/AIP1 Antagonise Epidermal Growth Factor Receptor Downregulation Par Le Complexe De Cbl-SETA/CIN85

Molecular and Cellular Biology. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15456872

L'assemblage du complexe Cbl-SETA/CIN85-endophiline à l'extrémité C terminale du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) après l'activation de ligand négocie son internalisation et l'ubiquitination. Nous avons trouvé que le SETA/CIN85-interacting protein Alix/AIP1, qui lie également endophilins, module de ce complexe. Alix s'est avéré associé indirectement avec l'EGFR, indépendamment de son état d'activation et avec DeltaEGFR, qui signale à faible intensité et ne lie pas les Cbls ou SETA/CIN85. En accord avec cela, Alix interaction ne bougèrent pas via SETA/CIN85. Cependant, le SETA/CIN85 et Alix étaient capables de promouvoir mutuellement leur interaction avec l'EGFR. Augmenter le niveau d'Alix affaibli l'interaction SETA/CIN85 / Cbl et réduit la phosphorylation de tyrosine de Cbl-c et le niveau de l'ubiquitination des Cbls EGFR et SETA/CIN85. Cet antagonisme du complexe Cbl-SETA/CIN85 par Alix se reflète dans la diminution de l'internalisation de l'EGFR. En accord avec cela, petit parasite-mediated RNA knockdown d'Alix promu downregulation et l'internalisation de l'EGFR. Il a été suggéré que SETA/CIN85 promeut l'internalisation du récepteur en recrutant des endophilins. Cependant, Alix, est également capable d'augmenter le niveau de l'endophiline associé avec l'EGFR, ce qui implique que ce n'est pas suffisant de promouvoir l'internalisation du récepteur. Nous proposons que Alix inhibe l'internalisation de l'EGFR en atténuant l'interaction entre Cbl et SETA/CIN85 et en inhibant la Cbl-mediated ubiquitination de l'EGFR.

Étude Des Isoformes De La Protéine De L'adaptateur De SETA/CIN85/Ruk Avec Anticorps Monoclonaux

Biochemical and Biophysical Research Communications. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15522216

SETA/CIN85/Ruk est une protéine multifonctionnelle adaptateur impliquée dans la transduction du signal et de l'atténuation en aval des récepteurs tyrosine kinase. Il a une structure modulaire, et diverses isoformes qui combinent les domaines d'interaction de protéines différentes ont été proposées basée sur l'analyse de l'ADNc. Comme première étape vers la compréhension des isoformes SETA/CIN85/Ruk au niveau des protéines, nous avons caractérisé 5 anticorps monoclonaux dirigés contre cette protéine. Trois d'entre elles ont permis d'étudier les lysats fractionnés sur un gradient de pH, conduisant à l'identification de diverses protéines SETA/CIN85/Ruk sur la base de la pI et le poids moléculaire apparent. Bonne correspondance avec les protéines prévues par l'analyse d'ADNc a été trouvée pour deux isoformes, dans la plupart des cas il ne était pas possible de faire une cession sans équivoque. Nous concluons que les variants d'épissage supplémentaires restent à être décrit, et qu'une meilleure compréhension de la transformation post-traductionnelle SETA/CIN85/Ruk et la modification est nécessaire pour mieux comprendre ce produit génique complexe.

La Phosphorylation SRC D'Alix/AIP1 Module Son Interaction Avec Les Partenaires De Liaison Et S'oppose à Ses Activités

The Journal of Biological Chemistry. Feb, 2005  |  Pubmed ID: 15557335

Alix/AIP1 est une protéine adaptatrice impliquée dans la régulation de la fonction du récepteur et associées au cytosquelette tyrosine kinases. Ici, nous avons étudié son interaction avec et règlement par Src. Tyr319 Alix lié l'isolé Src homologie-2 (SH2) domaine et était nécessaire pour l'interaction avec la Src intact. Une région riche en proline dans la partie C terminale de Alix lié le domaine Src SH3, mais cette interaction était dépendante de la libération du domaine Src SH2 de son ligand interne Src en interaction avec Alix Tyr319 ou en mutation de la Src Tyr527. SRC phosphorylée Alix à une région de C-terminal riche en tyrosines, une activité qui est stimulée par la présence du partenaire de liaison Alix SETA/CIN85. La phosphorylation d'Alix de la Src a fait effectuer des transferts de la membrane et le cytosquelette au cytoplasme et réduit son interaction avec des partenaires SETA/CIN85, récepteur du facteur de croissance épidermique et Pyk2 de liaison. En conséquence, le Src a antagonisé la régulation négative de l'internalisation de récepteur tyrosine kinase et adhésion cellulaire par Alix. Nous proposons un modèle par lequel Src antagonise les effets de Alix de la phosphorylation de son terminus de C, conduisant à la perturbation des interactions avec les protéines cibles.

L'angiogenèse Et L'apoptose Dans Les Gliomes : Deux Arénas Pour Nouveaux Traitements Prometteurs

Journal of Cellular Biochemistry. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16052525

Nouveaux traitements pour les gliomes sont nécessaires d'urgence compte tenu de l'augmentation très marginale dans la survie des patients qui ont été réalisée au cours des deux dernières décennies, qui est seulement un peu atténuée par l'amélioration de la qualité de vie. Deux champs relativement récentes de la recherche qui tends très prometteur dans ce domaine, sont l'angiogenèse et l'apoptose. Privant les tumeurs croissantes de la circulation sanguine dont ils ont besoin, ou basculer la balance dans la cellule cancéreuse vers la mort cellulaire, fournissent tous deux approches conceptuellement élégants à la thérapie, avec l'espoir d'une grande efficacité et toxicité peu. Cependant, les tentatives de traduire avec succès excitante résultats de laboratoire à la clinique ont été ralentis par la complexité de la biologie sous-jacente. Dans cet article, nous examinons certains des problèmes qui ont entravé le progrès et examiner le rôle potentiel que peuvent les intégrines jouent comme des cibles, avec un rôle dans l'angiogenèse et l'apoptose.

Médicaments Anticancéreux Polynucléaires Platine Sont Plus Puissants Que Le Cisplatine Et Provoquent L'arrêt Du Cycle Cellulaire Dans Les Gliomes

Neuro-oncology. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16723633

Nous avons évalué l'efficacité de la multinucléaire platine chemotherapeutics BBR3464, BBR3571 et BBR3610 contre les cellules de gliome dans des modèles animaux et de la culture et étudié leur mécanisme d'action au niveau cellulaire. Dans un test clonogéniques, BBR3610, le composé plus puissant, a reçu une dose de IC90 (inhibition de la formation de colonie 90 % de réalisation) 250 fois inférieure à celle du cisplatine pour les LNZ308 et les LN443 des cellules de gliome. Dans les xénogreffes sous-cutanée des cellules de gliome U87MG, BBR3610 a pratiquement doublé le temps qu'il a pris pour une tumeur atteindre une taille prédéterminée et survie significativement étendue lorsque ces cellules ont été implantés de données. Analyse de la distribution de l'apoptose et cycle cellulaire indiquent que la BBR composés induit G2/M arrestation en l'absence de mort cellulaire, tandis que le cisplatine principalement induit l'apoptose. Fait intéressant, les composés BBR et le cisplatine induisirent la phosphorylation extracellulaire signal-regulated kinase 1/2, et l'inhibition de cette voie au niveau des MEK antagonisée l'induction de l'arrestation de G2/M ou apoptose, respectivement. Analyse de la situation de Chk1 et Chk2 n'ont pas montré d'effets différentiels des médicaments, et il est donc peu probable à la base de la différence dans la réponse. De même, les médicaments n'a pas différentiellement modulé les niveaux survivin et précipitation de survivine n'a pas converti la réponse à la BBR3610 à l'apoptose. Ensemble, ces résultats développement continu de BBR3610 pour l'usage clinique contre les gliomes et fournissent un cadre pour les futures enquêtes du mécanisme d'action.

Les Mutations Au Sein Du Domaine Kinase Et Les Troncations Du Récepteur De Facteur De Croissance épidermique Sont Rares Dans Le Cancer De La Vessie : Implications Pour La Thérapie

Clinical Cancer Research : an Official Journal of the American Association for Cancer Research. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16899617

Auparavant, il a été signalé que la réponse du patient au gefitinib dépend de la présence de mutations dans le domaine de la kinase du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) ou l'expression de sa forme tronquée, variante de l'EGFR III (EGFRvIII). L'objectif de cette étude était de déterminer si ces altérations sont présentes au sein de l'activité tyrosine kinase et domaine de liaison du ligand de l'EGFR dans les carcinomes urothéliaux.

Analyse De La Réponse Cellulaire Platine Gliome Par Metacomparison Des Profils De Proteome Chromatographie Bidimensionnelle

Molecular & Cellular Proteomics : MCP. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 15951525

Mise au point clinique des traitements contre le cancer est facilitée par le développement de marqueurs moléculaires qui permettent l'identification des patients susceptibles de répondre. Dans le cas des médicaments cytotoxiques largement, comme la série multinucléaire des chimiothérapies platine que nous évaluons pour le traitement des gliomes, une seule voie à l'identification de marqueurs est profilage protéomique. Nous utilisons le système de chromatographie bidimensionnelle, la ProteomeLab PF2D, pour comparer les profils de la protéomique des cellules de gliome en culture avant et après traitement de la toxicomanie. Les logiciels existants, outils a permis l'identification rapide des pics a augmenté de traitement d'un médicament comme par rapport à contrôler les cellules non traitées. Pour comparer entre ces paires, nous avons développé un logiciel nouveau, l'outil MetaComparison (MCT). La MCT utilise les caractéristiques chromatographiques des pics comme identificateurs, une approche qui a été validé par spectrométrie de masse de deux isolements indépendants d'un pic, de cellules qui ont été traités avec deux différents composés de platine. La MCT a permis de rapidement la requête si un pic donné a répondu à plus d'un traitement et donc a permis d'identifier les pics qui sont spécifiques à un médicament donné. Par conséquent, cette analyse a considérablement réduit la liste des sommets dont isolement et aval analyse par spectrométrie de masse est justifiée, accélérer la recherche de marqueurs protéiques de la réponse.

La Phosphorylation Du Domaine Riche En Proline De Xp95 Module Xp95 Interaction Avec Des Protéines De Partenaire

The Biochemical Journal. Jan, 2007  |  Pubmed ID: 16978157

Les protéines de mammifères adaptateur Alix [ALG-2 (produit de l'apoptose-lié-gène-2)-interaction protéine X] appartient à une famille conservée de protéines qui ont en commun un domaine N-terminal Bro1 et un C-terminal PRD (domaine riche en proline), lesquels médiate partenaire des interactions de protéine. À la suite de notre découverte antérieure que Xp95, l'orthologue de Xenopus d'Alix, subit un décalage de mobilité de la phosphorylation dépendante gel durant la maturation méiotique des ovocytes progesteroneinduced, nous avons exploré règlement potentiel de Xp95/Alix de phosphorylation de la protéine induite par l'hormone de cycle cellulaire rentrée ou induction phase M. Par MALDI-TOF (laser assistée par matrice et la désorption ionisation-temps de vol) MS analyses et essais de mobilité-déplacement de gel, Xp95 est phosphorylé sur plusieurs sites au sein de la N-terminale, la moitié du PRD au cours de la maturation des ovocytes Xenopus et une région similaire à Alix est phosphorylé en mitose arrêté mais pas stimulée par le sérum des cellules de mammifères. Par tandem MS, Thr745 dans cette région, qui se localise dans un site de liaison conservée à la protéine adaptatrice SETA [SH3 (Src homologie 3) domaine contenant, exprimée dans les astrocytes tumorigènes] CIN85 (a-cyano-4-hydroxycinnamate) / SH3KBP1 (protéine kinase-obligatoire de domaine SH3 1), est l'un des sites de phosphorylation dans Xp95. résultats de la TPS (glutathion S-transférase)-tirez vers le bas et les analyses de liaison/compétition de peptide encore démontrent que la phosphorylation de Thr745 inhibe Xp95 interaction avec le deuxième domaine SH3 de SETA. Toutefois, immunoprécipités de Xp95 extraits des ovocytes matures M-phase-arrêté contenaient des protéines partenaire supplémentaire par rapport aux immunoprécipités des extraits d'ovocytes immatures G2-arrêté. La deubiquitinase AMSH (molécule associé avec le domaine SH3 de molécule adaptateur transduction de signal) interagit spécifiquement avec Xp95 phosphorylée dans les lysats de cellules de phase M. Ces conclusions établissent que Xp95/Alix est phosphorylée dans le PRD durant l'induction de la phase M et indiquent que la phosphorylation peut positivement et négativement modulent leur interaction avec les protéines de partenaire.

Comparaison De La Protéomique Des Oligodendrogliomes Avec Et Sans 1pLOH

Cancer Biology & Therapy. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17264672

Chimiorésistance est un défi thérapeutique très répandu dans les tumeurs gliales. La base moléculaire de la chimiorésistance est mal comprise, excluant les avancées dans le traitement des gliomes et laissant les gliomes parmi les tumeurs les plus meurtriers. Oligodendrogliomes fournissent un modèle unique pour étudier la base moléculaire de la chimiorésistance, qu'il sont a deux sous-types génétiques distincts avec des différences significatives dans la chimiosensibilité. Malgré une forte similarité morphologique, avec perte allélique sur le bras court du chromosome 1 (1pLOH), les tumeurs sont plus chimiosensibles que ceux sans 1pLOH.

Surveillance Autophagie Glioblastome Avec Anticorps Dirigé Contre L'isoforme B De La Chaîne Légère De La Protéine Associée Aux Microtubules Humaine 1 3

Autophagy. May, 2008  |  Pubmed ID: 18259115

Autophagie, une réponse évolutivement conservée au stress, a récemment été impliqué dans le déclenchement du cancer et de la progression, mais les fonctions et les mécanismes détaillés n'ont pas encore été complètement élucidées. Un des principaux obstacles à la compréhension sont le manque d'une méthode efficace et robuste pour contrôler plus précisément autophagiques cellules dans des échantillons de cancer. Pour identifier les événements moléculaires associés à autophagie, nous avons effectué cDNA microarray analysis of lignées de cellules de glioblastome autophagie. Basée sur l'analyse, nous avons recueilli un anticorps polyclonal dirigé contre l'isoforme B de la chaîne légère de la protéine associée aux microtubules humaine 1 3 (LC3B). Application de l'anticorps anti-LC3B a révélé la présence de cellules autophagiques en milieu in vitro et in vivo. Des tissus glioblastome 65, 31 avaient une coloration cytoplasmique très positive de LC3B. L'interaction statistique entre une coloration cytoplasmique de partition LC3B et échelle de Performance de Karnofsky était significative. Forte expression de LC3B était associée à une amélioration des résultats pour les patients avec des performances réduites, alors que, pour les patients présentant un rendement normal, la survie était meilleure pour les patients avec coloration faible qu'avec une coloration haute de LC3B. Anticorps anti-LC3B fournit un outil utile pour la surveillance de l'induction de l'autophagie dans les tissus et de cellules cancéreuses.

Biomarqueurs Et Les Cellules Souches Cancéreuses Des Tumeurs Primaires Du Cerveau. Avant-propos

Current Problems in Cancer. May-Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18501773

Protéomique : La Nouvelle Frontière Aussi Pour La Recherche Sur Les Tumeurs Cérébrales

Current Problems in Cancer. May-Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18501776

Analyse Exploratoire Des Altérations Numéros Copie Dans Le Glioblastome Multiforme

PloS One. 2008  |  Pubmed ID: 19115005

Le projet Cancer Genome Atlas (TCGA) a entrepris l'analyse de plusieurs échantillons d'une variété de types de tumeurs, à partir de glioblastome multiforme. Les méthodes analytiques englobent génomique et transcriptomique informations, ainsi que des données démographiques et cliniques sur les donateurs de l'échantillon. Les données créent la possibilité pour un dépistage systématique des composants de la machinerie moléculaire des fonctionnalités qui peuvent être associés à la formation de tumeurs. La richesse des informations mécanistes existantes sur la biologie cellulaire du cancer fournit une référence naturelle pour l'exercice exploratoire.

Stage-specific Effet D'inhibition De L'autophagie Sur La Cytotoxicité Induite Par La Chimiothérapie

Autophagy. May, 2009  |  Pubmed ID: 19270491

Thérapies anticancéreuses peuvent induire l'autophagie dans les cellules tumorales et le rôle de l'autophagie dans ces cellules peut dépendre du type de tumeur, le stade de la tumorigenèse, ainsi que la nature et l'étendue de l'insulte. Une modification appropriée de l'autophagie, c'est-à-dire la suppression de l'autophagie cellulaire-protection ou l'amélioration de l'autophagie tuant des cellules pouvait augmenter la cytotoxicité causée par un traitement anticancéreux. Le mésylate d'imatinib est un inhibiteur des tyrosine kinases et est utilisé pour le traitement des patients atteints de tumeurs, y compris les leucémies, mais n'est pas efficace en monothérapie pour gliome malin. Pour chercher une stratégie visant à augmenter l'efficacité thérapeutique de l'imatinib, nous avons étudié le mode de la cytotoxicité d'imatinib dans les cellules de gliome malin humain. Étant donné que l'imatinib induit par cytotoxicité associée d'autophagie, nous avons testé l'effet d'inhibition de l'autophagie sur la toxicité induite par l'imatinib. Nous avons trouvé que toxicité induite par l'imatinib est atténuée par l'inhibition de l'autophagie, à un stade précoce, mais augmentée par l'inhibition de l'autophagie tardivement par l'augmentation de l'apoptose, suite à une avarie mitochondriale. Bien que le mécanisme de l'effet spécifique au stade d'inhiber l'autophagie sur la cytotoxicité reste à élucider, nos résultats pourraient être utiles pour élaborer une nouvelle stratégie pour améliorer l'efficacité du traitement anticancéreux en modulant l'autophagie.

Humaines Moelle Osseuse Cellules Souches Mésenchymateuses Pour Livraison Intravasculaire D'adénovirus Oncolytiques Delta24-RGD De Gliomes Humains

Cancer Research. Dec, 2009  |  Pubmed ID: 19920199

Delta24-RGD est un adénovirus oncolytiques conditionnellement réplicative, infectiosité augmentée avec des effets antiglioma importants. Bien qu'intratumorale livraison de Delta24-RGD peut être efficace, livraison intravasculaire améliorerait application réussie chez l'homme. En raison de leurs propriétés tropique de la tumeur, nous avons supposé que les cellules souches mésenchymateuses humaines (CSAH) pourraient être exploités comme vecteurs intravasculaire de Delta24-RGD de gliomes humains. Afin d'évaluer les événements cellulaires, vert fluorescent CSM marqué protéine transportant Delta24-RGD (CSAH-Delta24) ont été injectés dans l'artère carotide de souris associées orthotopique U87MG ou U251-V121 xénogreffes et sections du cerveau ont été analysées par immunofluorescence pour la protéine fluorescente verte et des protéines virales (E1A et hexon) à accroître la fois. hMSC-Delta24 sélectivement localisée aux xénogreffes de gliome et libéré Delta24-RGD, qui a ensuite été infectés par des cellules de gliome. Pour déterminer l'efficacité, les souris étaient implantés avec luciférase-étiqueté xénogreffes de gliome, traités par le CSAH-Delta24 ou contrôles et imagé par semaine par imagerie de la bioluminescence. Analyse de la taille de la tumeur par bioluminescence d'imagerie ont montré l'inhibition de la croissance de gliome et éradication des tumeurs chez les animaux traités hMSC-Delta24 par rapport aux témoins (P < 0,0001). Il y avait une augmentation de la survie médiane de 42 jours en contrôles à 75,5 jours chez les animaux traités hMSC-Delta24 (P < 0,0001) et une augmentation de survie au-delà de 80 jours de 0 % à 37,5 %, respectivement. Nous concluons qu'intra-arterially livré hMSC-Delta24 sélectivement localiser de gliomes humains et sont capables de délivrer et libérant Delta24-RGD dans la tumeur, résultant dans l'élimination améliorée de survie et de la tumeur en sous-ensembles de souris.

L'inhibition De L'autophagie Tardivement Améliore La Toxicité Induite Par L'imatinib Dans Les Cellules De Gliome Malin Humain

International Journal of Cancer. Journal International Du Cancer. Mar, 2009  |  Pubmed ID: 19048625

Gliomes malins sont des tumeurs primaires courantes du système nerveux central. Le pronostic des patients atteints de gliome malin est pauvre en dépit de la thérapie intensive actuelle et nouvelles modalités thérapeutiques sont donc nécessaires. Le mésylate d'imatinib, un inhibiteur de tyrosine kinase, est efficace dans le traitement des tumeurs, y compris les leucémies, mais pas en monothérapie pour gliome malin. Récemment, on pense que la modulation adéquate de l'autophagie peut améliorer l'efficacité de la thérapie anticancéreuse. Le résultat de la manipulation de l'autophagie, cependant, semble dépendre de l'initiateur de l'autophagie, les stimuli combinés, l'étendue des dommages cellulaires et le type de cellules, et ce n'est pas encore bien compris comment nous devons moduler l'autophagie afin d'augmenter l'efficacité de chaque thérapie anticancéreuse. Dans cette étude, nous avons examiné l'effet de l'imatinib avec ou sans les différents types d'inhibiteurs de l'autophagie des cellules de gliome malin humain. L'imatinib inhibe la viabilité des cellules U87- et U373-MG dans une façon dose-dépendante et causé la mort d'autophagie cellulaire nonapoptotic. Suppression de l'autophagie induite par l'imatinib par 3-méthyladénine ou de petits ARN interférents contre Atg5, qui inhibent l'autophagie à un stade précoce, a atténué la toxicité induite par l'imatinib. En revanche, l'inhibition de l'autophagie tardivement par bafilomycines A1 ou RTA 203 amélioré toxicité induite par l'imatinib dans l'induction de l'apoptose après perturbation mitochondriale. Nos résultats suggèrent que l'efficacité thérapeutique de l'imatinib des gliomes malins peut-être être majorée par l'inhibition de l'autophagie, à un stade avancé, et que la modulation de l'autophagie appropriée peut-être contribuer à sensibiliser les cellules tumorales à la thérapie anticancéreuse.

CIN85 Régule L'endocytose Des Récepteurs Dopaminergiques Et Régit Le Comportement Chez Les Souris

The EMBO Journal. Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20551902

Malgré des recherches approfondies de Cbl-interacting protein de 85 kDa (CIN85) dans le récepteur de trafic et de la dynamique du cytosquelette, on connaît mal ses fonctions in vivo. Nous rapportons ici l'étude d'une carence de souris des deux isoformes CIN85 exprimées dans le système nerveux central, exposant une fonction de CIN85 dans l'endocytose des récepteurs dopaminergiques. Souris dépourvues CIN85 exon 2 (CIN85(Deltaex2)) Voir la hyperactivité phénotypes, caractérisées par l'augmentation de l'activité physique et le comportement exploratoire. Fait intéressant, CIN85(Deltaex2) animaux affiche des niveaux anormalement élevés de dopamine et les récepteurs dopaminergiques D2 (D2DRs) dans le striatum, un important centre de la coordination du comportement animal. Ce qui est important, CIN85 se localise au compartiment post-synaptique des neurones striataux, dans lequel il co-clusters avec D2DRs. En outre, elle interagit avec endocytose régulateurs tels que la dynamine et endophilins dans le striatum. Absence du striatum CIN85 provoque la formation insuffisante du complexe d'endophilins avec D2DRs dans le striatum et finalement a diminué D2DR endocytose dans les neurones striataux en réponse à la stimulation de la dopamine. Ces résultats indiquent une fonction importante de CIN85 dans la régulation des fonctions des récepteurs dopaminergiques et fournissent une explication moléculaire pour le comportement hyperactif de souris CIN85(Deltaex2).

Les Polynucléaires BBR3610 Platine Induit Arrestation G2/M Et Autophagie Tôt Et Apoptose Tardive Dans Les Cellules De Gliome

Neuro-oncology. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 20713409

BBR3610 est un composé de platine de polynucléaires, dans lequel deux platines sont reliés par un linker de la spermine semblables, et dans une variété de cancers, y compris les gliomes, des études ont montré qu'il est plus puissant que les platines classiques et des œuvres de différents moyens. Identifier le mécanisme d'action de BBR3610 aiderait à développer la drogue plus loin pour l'usage clinique. Des travaux antérieurs ont montré que les BBR3610 n'induit pas l'apoptose immédiate mais entraîne une arrestation début de G2/M. Nous rapportons ici que BBR3610 induit autophagie précoce dans les cellules de gliome. Autophagie accrue voit aussi dans les xénogreffes intracrâniennes traités avec BBR3610. Fait intéressant, sur l'atténuation de l'autophagie par précipitation de véhiculée par Arni d'ATG5 ou ATG6/BECN1, aucun changement dans la viabilité cellulaire a été observée, ce qui suggère que l'autophagie est une protection efficace contre les BBR3610 ni une place importante dans le mécanisme par lequel BBR3610 réduit la viabilité de cellules de gliome. Cela a amené une analyse multimodale de 4 lignées cellulaires au cours de l'après traitement de 2 semaines avec BBR3610, ce qui montre que l'arrestation de G2/M a eu lieu au début et l'apoptose s'est produite plus tard dans toutes les lignées cellulaires. Les cellules qui ont survécu entré dans un État sénescent associé à une catastrophe mitotique dans 2 des lignées cellulaires. Ensemble, nos résultats montrent que la réponse au traitement par un seul agent est complexe et change au fil du temps.

Sélection De Peptide Combinatoire Systémique Conduit à Un Mécanisme De Mimétisme-fer Non Canonique Pour Le Ciblage De Tumeurs Chez Un Modèle Murin De Glioblastome Humain

The Journal of Clinical Investigation. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 21183793

Le traitement des tumeurs de la CNS est limité par la barrière sang - encéphalique (BHE), une interface vasculaire qui restreint le passage de la plupart des molécules du sang dans le cerveau. Ici, nous montrons que les particules phagiques ciblés avec certains motifs de ligand choisis in vivo d'une bibliothèque de peptide combinatoire peuvent traverser la BHE dans des conditions normales et pathologiques. Plus précisément, nous avons démontré que les clones de phage affichant un peptide de fer-mimic ont été capables de cibler un complexe protéique de la transferrine et le récepteur de la transferrine (TfR) grâce à un mécanisme de liaison allostérique non-canoniques et que ce complexe de protéine fonctionnelle médiée par transport des particules virales correspondantes dans le cerveau de souris normales. Nous avons également montré que, dans un modèle murin d'orthotopique du glioblastome humain, une combinaison de surexpression de TfR plus longue rétention ligand et de perméabilité vasculaire a entraîné une tumeur au cerveau remarquable ciblant des particules chimérique adeno-associated virus/phage affichant le peptide de fer-mimic et portant un gène d'intérêt. Comme une preuve de concept, nous avons livré le gène HSV thymidine kinase imagerie génétique moléculaire et traitement de tumeurs intracrâniennes de xénogreffe ciblé. Enfin, nous avons établi que ces constatations expérimentales peuvent être cliniquement pertinentes en déterminant par le biais de microarrays de tissu humain que plusieurs tumeurs astrocytaires primaires expriment fortement TFR. Together, notre système de sélection combinatoire et résultats peuvent prévoir une avenue translationnelle la détection ciblée et le traitement des tumeurs cérébrales.

Analyse De La Phosphotyrosine De Signalisation Dans Le Glioblastome Identifie STAT5 Comme Une Nouvelle Cible En Aval De ΔEGFR

Journal of Proteome Research. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21214269

Une mutation dans le cadre de suppression en récepteurs de croissance épidermique (EGFR), ΔEGFR est un commun et puissant oncogène dans le glioblastome (GBM), favorisant la croissance et la survie des cellules cancéreuses. Ce récepteur muté est ligand constitutivement actif et indépendant. Son activité est faible en intensité et de la pensée d'être qualitativement différent de ligand stimulée par les récepteurs de type sauvage, ce qui implique que les cibles privilégiées en aval de ΔEGFR jouent un rôle significatif dans la tumeur maligne aiguë. Pour comprendre le signal ΔEGFR, nous c'est comparée à celle d'un mutant inactivés par la kinase de ΔEGFR et sauvage EGFR avec phosphoprotéomique de fusil de chasse à l'aide d'un spectromètre de masse des piège à ions dissociation (ETD) a permis de transfert d'électrons. Nous avons identifié et quantifié les 354 phosphopeptides correspondant aux 249 protéines. Parmi les phosphorylations associées aux ΔEGFR étaient les phosphorylations roman, y compris celle de STAT5 sur Y694/9 Gab1 décrites précédemment, c-Met et Mig-6 et également. Nous avons confirmé les plus importants événements de phosphorylation dans des cellules cultivées et dans des modèles murins de xénogreffes de glioblastome. Analyse de la voie de ces protéines suggère une préférence pour une voie de transduction de signal alternatif de ΔEGFR par rapport à l'EGFR de type sauvage. Cette entente profitera potentiellement la recherche de nouvelles cibles thérapeutiques pour ΔEGFR exprimant des tumeurs.

Dimérisation Forcée Augmente L'activité De La ΔEGFR/EGFRvIII Et Améliore Sa Oncogénicité

Molecular Cancer Research : MCR. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21775422

Récepteur de facteur de croissance épidermique de Delta (ΔEGFR), un mutant de suppression dans le cadre du domaine extracellulaire de ligands, qui survient chez environ 30 % de glioblastome, est un puissant oncogène qui favorise la progression et la croissance tumorale. La signalisation des ΔEGFR est indépendante du ligand et de faible intensité, ce qui lui permet d'éluder les voies normales d'internalisation et de dégradation de la machinerie d'endocytose et par conséquent est persistante. La base du potentiel oncogène de ΔEGFR reste incomplètement comprise, notamment si la dimérisation joue un rôle important dans son signal et si son potentiel oncogène est tributaire de son intensité relativement faible, en comparaison avec le récepteur de type sauvage aiguë activé. Pour examiner ces deux questions importantes, nous avons généré un ΔEGFR chimérique qui permet forcé dimérisation par domaines dérivés de variantes de la protéine FKBP12 qui sont réunis par FK506 dérivés. Forcé de dimérisation du chimérique ΔEGFR a considérablement augmenté l'intensité de son signal, tel que mesuré par niveaux de phosphorylation des récepteurs, ce qui suggère que la ΔEGFR naturelle ne forme pas de dimères forts ou stables dans le cadre de son signal de bas niveau. Fait intéressant, l'augmentation de l'activité de ΔEGFR dimérisé, chimérique n'encourage pas l'internalisation du récepteur, ce qui implique que le taux réduit d'endocytose downregulation de ΔEGFR est une caractéristique inhérente. Forcé de dimérisation augmenté significativement, le signal oncogène du récepteur, ce qui implique que le ΔEGFR est un puissant oncogène malgré, non pas à cause de sa faible intensité.

Combinée à L'action De La Platine Dinucléaires Composé BBR3610 Avec L'inhibiteur De La PI3-K PX-866 Dans Le Glioblastome

International Journal of Cancer. Journal International Du Cancer. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 20473884

Composés de platine de polynucléaires sont plus efficaces pour tuer les cellules de glioblastome de cisplatine, fonctionnent par un mécanisme différent et généralement ne pas provoquent des niveaux élevés d'apoptose aux premiers moments après l'exposition. Ici, nous avons testé l'hypothèse que la combinaison BBR3610, la plus puissante platinum de polynucléaires, avec un inhibiteur de la phosphoinositide 3-kinase (PI3K) favoriserait l'apoptose et renforcer l'impact sur les cellules de glioblastome. La voie PI3K est généralement activée dans le glioblastome et favorise la survie des cellules tumorales, ce qui suggère que son inhibition serait rendent les cellules plus sensibles aux cytotoxiques agents. Nous avons choisi PX-866 comme un inhibiteur de PI3K, car c'est un agent clinique prometteur évalué pour le traitement de tumeur cérébrale. Combinaison BBR3610 et PX-866 entraîné synergique tuer des cellules de gliome cultivées et une prolongation de la survie dans un modèle animal de xénogreffes orthotopiques. Les deux seuls agents induite par autophagie, et ceci semble être saturé, parce que quand ils ont été combinées aucun autophagie supplémentaire a été observée. Toutefois, la combinaison du PX-866 et BBR3610 n'a induit une augmentation statistiquement significative du niveau de l'apoptose, associée à une réduction de pAkt et pBad, ainsi que l'inhibition de la migration de transwell. Nous concluons que combinant des polynucléaires platines avec des inhibiteurs du PI3K a potentiel translationnelle et modifie la réponse cellulaire afin d'inclure l'apoptose précoce.

Restauration Guanylyl Soluble Fonction Et L'expression De L'adénylcyclase Bloque Le Cours Agressif Des Gliomes

Molecular Pharmacology. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 21908708

Le NO et cGMP signalisation de voies sont de grande importance physiologique et pathologique. Nous avons comparé la non/guanylyl cyclase soluble (sGC) / voie de GMPc dans les tissus de gliome humain et de lignées cellulaires avec celui du contrôle sain ECHANTILLONS et démontré que l'expression de la CGT est significativement plus faible dans les préparations de gliome. Plus loin, notre analyse des bases de données GEO (National Cancer Institute) a révélé une réduction statistiquement significative des niveaux de transcription du sGC dans des échantillons de gliome humain. En revanche, les niveaux d'expression des particules (membrane) guanylyl cyclases (pGC) et cGMP-spécifique phosphodiestérase (PDE) étaient intacts dans les cellules de gliome que nous avons testé. Manipulation pharmacologique génération endogène de GMPc dans les gliomes cellules par l'intermédiaire soit stimulant pGC par ANP/BNP ou blocage PDE de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine/zaprinast a causé une inhibition significative de la prolifération et de la formation de colonies de cellules de gliome. Restauration génétiquement sGC expression aussi corrélation inversement avec la croissance de cellules de gliome. Implantation orthotopique de cellules de gliome transfectées avec une active forme mutante de la CGT (sGCα1β1(Cys105)) chez les souris athymiques a augmenté le temps de survie de 4 fois plus le contrôle. L'analyse histologique des xénogreffes surexprimant α1β1(Cys105) CGT a révélé des changements dans l'architecture cellulaire qui ressemblent à la morphologie des cellules normales. En outre, une diminution dans l'angiogenèse a contribué à l'inhibition de gliome sGC/cGMP thérapeutique. Notre étude propose le nouveau concept qui a supprimé l'expression de la CGT, une enzyme clé dans la voie non/GMPc, peut être associée à un parcours agressif des gliomes. La thérapie ciblée de signalisation de sGC/cGMP peut être une alternative favorable à la chimiothérapie et la radiothérapie pour les gliomes et peut-être d'autres tumeurs.

L'inhibition De La Signalisation Wnt De Cucurbitacine B Dans Les Cellules Cancéreuses Du Sein : Réduction Des Protéines Associées Aux Wnt Et Translocation Réduite D'induite Par La Galectine-3 β-caténine Vers Le Noyau

Journal of Cellular Biochemistry. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 21866566

Les cucurbitacines sont les triterpènes tétracycliques trouvées dans les plantes de la famille des cucurbitacées. Cucurbitacines ont démontré des activités anticancéreuses et anties-inflammatoires. Nous avons étudié l'activité anticancéreuse de la cucurbitacine B extraite de plantes médicinales thaï Trichosanthes cucumerina Linn. La viabilité cellulaire a été évaluée par le test MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Les résultats indiquent que cucurbitacine B de T. cucumerina Linn. a un effet cytotoxique sur les lignées cellulaires de cancer du sein SKBR-3 et MCF-7 avec une IC50 de 4.60 et 88,75 µg/ml, respectivement. Inhibition de la croissance était attribuable à l'apoptose et l'arrestation de phase G2/M. Cycline D1, c-Myc et les niveaux d'expression de β-caténine ont été réduits. Analyse par Western blot ont montré un clivage PARP accru et diminution associée à Wnt signaling molécules β-caténine, galectine-3, cycline D1 et c-Myc et changements correspondants dans les niveaux de GSK-3β phosphorylés. Traitement de la cucurbitacine B inhibe la translocation vers le noyau de la β-caténine et la galectine-3. L'épuisement des β-caténine et la galectine-3 dans le noyau a été confirmée par le fractionnement des protéines cellulaires. Facteur de lymphocytes (FCT) / enhancer lymphoïde facteur (LEF)-activité transcriptionnelle dépendant a été perturbée dans les cellules de cucurbitacine B traité comme ayant été testés par un dosage de journaliste TCF. L'activité de la luciférase relative est diminuée lorsque nous avons traité des cellules avec la cucurbitacine B composé pendant 24 h. Nos résultats suggèrent que cucurbitacine B peut en partie induisent l'apoptose et exercer l'effet inhibiteur de la croissance par l'interruption de la signalisation Wnt.