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Articles by Peer Wulff in JoVE
JoVE Immunology and Infection
組換えアデノ随伴ウイルスベクターの産生と力価測定
1School of Medical Sciences, College of Life Sciences and Medicine, University of Aberdeen, 2Translational Neuroscience Facility and Department of Physiology, School of Medical Sciences, University of New South Wales, 3Department of Biochemistry and Molecular Biophysics, Columbia University
組換えアデノ随伴ウイルス（rAAVs）ベクトルはのためにますます貴重になってきています
Other articles by Peer Wulff on PubMed
Sgk1 ノックアウト マウスの腎障害の Na(+) 保存期間。
血清とグルココルチコイド調節キナーゼ （sgk1) ミネラルコルチコイドによって誘導されるし、順番に、トランスフォーミング heterologously アフリカツメガエル卵母細胞における腎上皮 Na(+) チャネル (ENaC) 活動を表明しました。したがって、Sgk1 ミネラルコルチコイド刺激の腎 ENaC 活動と antinatriuresis を仲介すると見なされます。ここでは標準の塩化ナトリウム摂取で水と電解質の腎排泄 sgk1-ノックアウト （sgk1(-/-)) マウス、(sgk1(+/+)) 野生型マウス。 区別がつかないことを示す対照的に、食餌療法の塩化ナトリウム制限は適切に血漿アルドステロン濃度と近位尿細管の Na(+) および体液の再吸収が増加排泄にもかかわらず、血圧および腎糸球体濾過率の減少 Na(+) を減少させる sgk1(-/-) マウスの能力が低下を明らかにします。
腎 K + 除去 Sgk1 ノックアウト マウスでの障害者の規制。
血清とグルココルチコイド調節キナーゼ 1 （Sgk1) Na + アルドステロン敏感な遠位ネフロンの再吸収に貢献します。Sgk1 ノックアウト (sgk1-/-） と littermate 野生型マウス (sgk1 +/+) Sgk1 の重要性腎除去の K + のテストに使用されました。静脈内アプリケーション K + 麻酔下で負荷の増加血漿 K + 濃度で両方 sgk1-1.3 〜 1.4 mm/-(n = 6) と sgkl c++/cli + (n = 7) マウス。ただし、絶対とフラクショナル腎 K + 排泄の増加観測で sgk1 +/+ sgk1/動物で大幅に鈍化しました。マウスの両方のグループが減少または増加の腎 K + 排泄と同程度に低 (< 0.03%) または高 (5%)K + ダイエット 6 d、それぞれ。Sgk1 で c++/cli + プラズマ K + 濃度は有意に高または低のいずれか K + ダイエットによって修正されたないです。Sgk1-/-、しかし、高 K + ダイエット プラズマ K + 濃度は、sgk1 で約 6 倍高い値に達する血漿アルドステロン濃度の過剰な増加にもかかわらず約 1.6 mM によって強化 +/+。Electrophysiological と免疫組織化学的研究高 K + 食下示されてその減少上皮性 Na + チャネル ENaC や Na + K + - 障害者の応答 sgk1 で占めアルドステロン敏感な遠位ネフロン ATPase 活性-/- と部分的に腎外側延髄 K + チャネル ROMK の強化された尖豊富用欠陥補償こと。腎 K + 除去の急性および慢性の規制は、Sgk1 を伴います。
親和性マウスにおける GABA(A) 受容体 Gamma2 サブユニットの点突然変異とのベンゾジアゼピン サイト Ligands の様々 です。
GABA(A) 受容体のベンゾジアゼピン結合部位および α, γ サブユニットの界面に位置しています。これらのサブユニットの特定点突然変異はベンゾジアゼピン結合サイト配位子親和性これらの受容体を劇的に削減する実証されています。最近では、マウスはフェニルアラニン (F) GABA(A) 受容体 gamma2 サブユニット内位置に 77 イソロイシン (I) 置換すると生成されました。ここ 24 ベンゾジアゼピン バインディング サイト リガンド [3 H] フルニトラゼパム結合阻害のための 16 の異なった構造クラスからこれらの gamma2F77I のマウスの脳の膜の効力をテストしました。結果の 1, 4-thienodiazepine クロチアゼパム、1, 5 ベンゾジアゼピン クロバザムまたは pyrazoloquinoline CGS 9896 の古典 1, 4-ベンゾジアゼピン、効力のみ 2-7 - この gamma2F77I 点突然変異によって減少倍ことを示します。100-1000年倍減少のいくつかの imidazobenzodiazepines、ベータ版 carbolines、cyclopyrrolones、imidazopyridines、triazolopyridazines、またはキノリンの効力のあるに対し 10-20 折り Ru 32698、Ru 33203、および 33356、Ru Ru 31719、imidazoquinoline の imidazopyrimidines または CGS 20625 です pyrazolopyridine の効力を削減しました。興味深いことに、様々 な化合物の構造型クラス内で gamma2F77I 点突然変異誘起力低減の程度。結果はサポートし、残留 gamma2F77 が高親和性結合ないすべてがいくつか、ベンゾジアゼピン サイト配位子のために重要であることを示す以前の観測を大幅に延長します。
生理の基板として SGK1 と GSK3 の NDRG の家族のメンバーを識別するチョウゲンボウの搾取。
SGK1 によって急速にリン酸化したウサギ骨格筋の抽出物、タンパク質を検出 (キナーゼ 1)、血清グルココルチコイド誘発プロテインキナーゼ Ba ではなく、NDRG2 として識別 (下流規制 n-myc 2)。SGK1 NDRG2 Thr330、Ser332、Thr348 in vitro でリン酸化されます。すべて 3 残基は、骨格筋野生型マウスでなく SGK1 を表明しないマウスないからリン酸化されました。SGK1 また関連 NDRG1 アイソ フォーム Thr356 と同様に Thr328、Ser330 と Thr346 （Thr330、Ser332、NDRG2 Thr348 に相当） のリン酸化し、残 Thr366。 Thr346、Thr356、Thr366 NDRG1 で 3 回を繰り返し同一 decapeptide シーケンス GTRSRSHTSE、内に位置しています。これらのスレオニン類 NDRG1 SGK1/マウスでは肝臓、肺、脾臓および野生型マウスの骨格筋におけるリン酸化されました。ノックダウン SGK1 も低分子干渉 RNA を用いた HeLa 細胞でのリン酸化スレオニン残基の NDRG1 リピート領域での抑制。SGK1 によって NDRG1 のリン酸化 GSK3 は優秀な基板にそれを変形 (グリコーゲン合成酵素キナーゼ 3) ができませんでした [に対する Ser342、Ser352、Ser362、リピート領域に。インキュベーション特定 GSK3 インヒビター CT 99021 HeLa 細胞の HeLa 細胞におけるこのタンパク質 GSK3 細胞によりリン酸化されることを示す NDRG1 の電気泳動度を増加しました。我々 の結果 NDRG1 と NDRG2 生理的基板として SGK1 の識別し、そのリン酸化を実証 NDRG1 SGK1 によってそれによる GSK3 のリン酸化の素数します。
塩とカリウムのホメオスタシスにおける Sgk1 の役割
アルドステロン Na(+) 再吸収およびアルドステロン敏感な遠位ネフロン (ASDN) におけるに於いて分泌刺激による NaCl とに於いての恒常性に極めて重要な役割を再生します。最近の調査は、血清とグルココルチコイド調節キナーゼ 1 （Sgk1) アルドステロン、ASDN で誘導され、動脈血圧血圧関連付けるキナーゼの遺伝子多型を示した。このレビューは含め Sgk1 欠損マウスの生体内研究によって証明されるよう NaCl とに於いてのホメオスタシスにおける Sgk1 の役割について説明します。研究は、Sgk1 が Na(+) の再吸収およびに於いて分泌、ASDN に絶対に必要がないことを示します。標準の NaCl とに於いてダイエットを控えめに強化された血漿アルドステロン濃度 Sgk1 の不在で補償の表現型を確立するための十分な表示します。キナーゼは必要、ただし、transcellular Na(+)、ASDN 再吸収のアップレギュレーションです。これは、Sgk1 を介する刺激の基底 Na (+) を伴うことがあります-K (+)-atp アーゼとして保持上皮 Na(+) のチャンネル、ENaC、アピカル膜で。このようなアップレギュレーション 1) 腎の NaCl 5-mf 制限された食塩摂取として 2) に於いて分泌に応答して強化されたに於いて摂取の間に十分な適応のための前提条件です。こうして機能獲得変異 Sgk1 の腎 NaCl リテンションと強化されたに於いて分泌の結果として予想されます。さらなる研究は、Sgk1、他 Sgk1 アクティベーターの役割だけでなく、Sgk1 多型人間の動脈高血圧にリンクの効果アルドステロン腎と nonrenal を明らかにする必要があります。
血清およびグルココルチコイドの誘導性プロテインキナーゼ SGK1 に欠けているマウスから線維芽細胞に異常を来す Kv チャネルの調節。
血清およびグルココルチコイドの誘導性プロテインキナーゼ 1 の発現 (SGK1) Kv チャネル活性アフリカツメガエル卵母細胞およびヒト胚性腎細胞がアップを調整します。SGK1 依存 Kv チャネルの調節の生理的影響を調査するには、我々 全体セル電流 SGK1 ノックアウト マウスから肺繊維芽細胞内記録 (sgk1-/-) と野生型の同腹仔 (sgk1 +/+)。血清成長マウス肺繊維芽細胞 (MLF) 両方の遺伝子型から展示電圧ゲート外側整流 K (+)-電流の時間依存性活性 (tau(act) 約 3 ミリ秒)、遅い不活性化 (tau(inact) 約 700 ミリ秒)、使用依存的不活性化、に於いての （部分的） 阻害チャネル遮断薬茶、4 AP と margatoxin。MLF 成長血清中 Kv 電流密度 +100 でピーク mV は、sgk1 - で有意に低/-(14 + 2 pA/pF、n/= 13) より sgk1 で c++/cli + (31 ± 4 pA/pF、n = 16)。異なる Kv1 と Kv3 サブユニット マウス繊維芽細胞からの PCR 増幅 Kv1.1 1.7、Kv3.1、および Kv3.3 の発現を実証両方 sgk1 mRNA c++/cli + と sgk1/セル。血清剥奪要 Kv 電流はほぼ sgk1 で消えた c++/cli + (4 ± 1 pA/pF、n = 11) ではなく、sgk1-/-（10 ± 1 pA/pF、n = 6) MLF。したがって、次の血清剥奪 Kv 電流密度 sgk1 で有意に低かった +/+ より sgk1-/-。Sgk1 Kv 電流を大幅に活性化細胞血清枯渇とデキサメタゾン (dex) （1 日 1 microM） IGF-1 （6.7 microM、4-6 h） またはその両方を刺激 +/+ sgk1/MLF ではなく。両方のデックスと IGF-1 の存在下では、Kv の電流密度は sgk1 で大きかったが c++/cli + (27 3 pA/pF、n 個の +/-= 12) より sgk1-/-（13 ± 3 pA/pF、n = 10) 細胞。MLF と同様、Kv 電流 sgk1 で有意に多かった +/+ マウス尾線維芽細胞 (MTF)。Sgk1 で c++/cli + がない/MTF sgk1 Kv 電流だった時に血清剥奪を抑制し、dex （1 microM、1 日） とその後 IGF-1 （6.7 microM、4-6 h） MTF の血清刺激を奪われた後の稈します。フラ 2 蛍光によると容量性カルシウム エントリ sgk1/MTF sgk1 に比較して低かった +/+ MTF。Sgk1 で有意に血清剥奪容量性カルシウム エントリ時 +/+ sgk1/MTF ではなく。枯渇した細胞 dex （1 microM、1 日） とその後 IGF-1 （6.7 microM、4-6 h） 刺激稈容量性カルシウム エントリ sgk1 で c++/cli + MTF、sgk1/セルにそれに残った一方変わらず。結論としては、SGK1 の欠如 Kv チャネルの利用状況を破棄するかないが、血清、グルココルチコイドと IGF-1、容量性カルシウム エントリに影響を及ぼす効果によってそれらのチャネルの規制を廃止したとき。
神経回路遺伝学、薬理学を組み合わせることにより解剖。
システム神経科学に進歩は、しばしば脳領域の受けずと可逆的阻害から来る。地域の回路を解剖概念的に同じアプローチを伴います - セル電位、あるいは細胞より、火災し、どのようにこれらのコンポーネント回路および動物の行動のパフォーマンスに影響を推測を発射からのクラスを停止します。このような細胞型特異および可逆圧縮を実行するには、微小スケール解析の回路、および高速信号タイム スケールの脳 (ミリ秒) を秒に哺乳類では挑戦です。独創的な多様な方法は、この目標に向かって開発されています。これらの新しいツールは、さらに分子生物学者、システム神経科学者、electrophysiologists 間の相乗効果を促進します。
興奮性アミノ酸トランスポーター EAAT5 は血清と糖質コルチコイド依存プロテインキナーゼによる SGK1 と SGK3 の規制。
哺乳類網膜のグルタミン酸再取り込みナトリウム依存能動システム EAAT1-5 したがって終端の神経細胞の興奮と防止 neuroexcitotoxicity によって媒介されます。網膜アマクリン細胞と神経節細胞では、EAAT5 は、血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼと輸送を規制することが知られて、セリン/スレオニンキナーゼ SGK1 教育者です。研究 EAAT5 の可能な限り規制そのアイソ フォーム SGK3、SGK1 によって探検し、密接に関連した蛋白質キナーゼ B. EAAT5 アフリカツメガエル アフリカツメガエル卵母細胞それぞれキナーゼの有無） だった。交通活動による電気生理学の定量化を行ったし、細胞表面発現化学発光によって決定されました。両方 EAAT5 電流を介したし、EAAT5 タンパク質の豊富な細胞表面が 1.5-2 SGK1 または SGK3 の発現が PKB のない次の共発現時の要因によって増加しました。結論としては、SGK1 と SGK3 キナーゼは、キャリアの増加細胞表面豊富によって EAAT5 活動を増やします。
血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1） グルココルチコイド誘発インスリン分泌抑制を仲介します。
グルココルチコイド過剰インスリン分泌の障害を介して少なくとも一部の糖尿病発症素因となります。基になるメカニズムはつかめなかった。私達はここでデキサメタゾン トランスフォーミング転写とインスリン分泌における血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1) の発現細胞株によるミフェプリストン （RU486） の核グルココルチコイド受容体拮抗薬が逆に効果を示します。アフリカツメガエル卵母細胞の近く （下段） されるときは、SGK1 電位に於いてチャネル K (v) 1.5 の活動が増加します。INS 1 細胞におけるデキサメタゾン K (v) 1.5 の転写を刺激する, 再分極の外側現在において増加する, [させた振動と減少グルコース誘発インスリン分泌。 のピーク値を低減後者の効果がより選択的 K (v) 1.5 チャネル阻害 MSD D. によってに於いてチャネル遮断薬 4-アミノピリジンとテトラエチル アンモニウムによる逆です。デキサメタゾンはまた K (v) 1.5 マウスの膵島での発現が増加し、グルコース誘発インスリン分泌、MSD-D. によって逆転効果を低減野生型がなく、SGK1 ノックアウト マウスから分離した小島でデキサメタゾンはグルコース ・ フォルスコリン ・ ホルボール ミリスチン酸誘発インスリンのリリース大幅に鈍化。結論として、デキサメタゾン トランスフォーミング活動電位に於いてチャンネルの順番 SGK1 の転写を刺激します。に於いてチャネル活動の増加カルシウム エントリ カルシウム チャネルの電圧ゲートとインスリンのリリースを削減します。
腎機能とミネラルコルチコイド過剰への応答の食塩摂取量の決定因子として SGK1。
ミネラルコルチコイド塩収支は、塩の取入口を刺激して塩の損失を抑制することの両方で変更します。腎塩保持部分的に血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1) によって媒介効果の再吸収のアップレギュレーションによって行われます。本研究はミネラルコルチコイド過剰時腎機能、塩分の摂取量と血圧の制御を SGK1 の貢献を模索しました。DOCA/1% NaCl 処理血圧とクレアチニン ・ クリアランス SGK1 欠損 sgk1(-/-) と野生型 sgk1(+/+) マウスが sgk1(+/+) マウスにおける (474 ± 89%) より sgk1(-/-) マウスにおける蛋白尿の led より顕著に増加 (によって 154 ± 31%) で似たような程度に増加しました。DOCA/1% NaCl 処理は腎臓重量 （24 ％） での大幅な増加と低カリウム血症 (3.9 ± 0.1 ～ 2.7 ± 0.1 モル/l） から sgk1(+/+) マウスでのみにつながった。治療腎 Na(+) 排泄 (1 に 134 32 micromol.24 h(-1).g ボディ wt(-1)) より sgk1(-/-) マウス (1 に 49 塩の取入口の SGK1 依存型刺激にポインティングする 8 micromol.24 の h(-1).g のボディ wt(-1)) ± ± 4 から ± ± 3 から sgk1(+/+) マウスではるかに多くの強化2 つの飲料ボトルへのアクセス 1% 食塩水、または水、DOCA 処置を含む大幅にいずれかの遺伝子型の水の摂取量に影響しなかったが DOCA 誘起塩の食欲と一貫した sgk1(+/+) マウス (3.5 ± 0.9 に 16.5 ± 2.4 ml/日から 9 日間） 以内で 1% 塩化ナトリウム摂取量を増加しました。この応答は、大幅に sgk1(-/-) マウス （2.6 ± 0.6 〜 5.9 ± 0.9 ml/日) からの減衰されました。こうして SGK1 食塩摂取量、腎臓の成長、蛋白尿、ミネラルコルチコイド過剰中に於いての腎排泄の刺激に貢献します。
高血圧におよぼす複合フルクトースおよび高食塩食機能血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ SGK1 欠けている遺伝子をターゲットとしたマウスを鈍化しました。
血清と糖質コルチコイド誘導性プロテインキナーゼ (SGK1) 発現調節ミネラルコルチコイド発現が誘導され、インスリンによって活性化します。キナーゼは腎上皮 Na(+) チャネルを刺激し、こうして血圧調節に参加可能性があります。高インスリン血症は、塩の取入口の血圧の感受性を高める食事果糖によってトリガーされます。高血圧に及ぼす複合フルクトースと高食塩摂取量における SGK1 の役割は、こうして SGK1 ノックアウト マウス (sgk1(-/-)) とその野生型の同腹仔 (sgk1(+/+))。 探検されました。Sgk1(+/+) マウスの腎 SGK1 トラン スクリプト レベル果糖食後有意に高値を認めた.制御下でダイエット、水分摂取量、尿流率, 尿中の Na(+)、に於いて、および Cl(-) の排泄および血圧 sgk1(-/-) と sgk1(+/+) のマウスに類似していた。飲料水への 10 ％ のフルクトース添加水分摂取量と尿流率両方の遺伝子型の増加し、大幅にいずれかの遺伝子型の尿中 Na(+)、に於いて、および Cl(-) 出力は変わりませんでした。追加高食塩食 (4 %nacl) 流体の摂取量と尿中のボリュームを大幅には変わりませんでしたが、Na(+) と値を大幅に近づいて Cl(-) の尿量を著明に増加した (P < 0.05) より sgk1(-/-) sgk1(+/+) マウスで大きい (Na(+): 2,572 1,428 236; ± 対 462 の +/-Cl(-): 2,364 388 対 1,379 225 micromol/24 h +/+/-)。血圧は sgk1(+/+) と sgk1(-/-) のマウス コントロール ダイエットまたはフルクトース sgk1(+/+) マウスの増加のみが単独で類似していた (115 +/-1 103 ± 0.7 mmHg、P 対 < 0.05) 複合フルクトースおよび高食塩摂取後。急性静脈インスリン注入 （中グルコース クランプ） antinatriuresis sgk1(+/+) マウス、大幅に鈍化 sgk1(-/-) マウスで効果の原因。観測では、SGK1 インスリンを介したナトリウム保持率の極めて重要な役割と高果糖の摂取量の塩感作性高血圧効果を明らかにします。
腸機能遺伝子をターゲットとしたマウスの血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 欠けています。
In vitro 実験腸 Na (+) を刺激する血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1) の能力が明らかに-グルコース共輸送体 1 (SGLT1) 結合と腸の Na(+)/H(+) 交換 3 (NHE3)。本研究貢献 SGK1 の in vivo 腸管輸送規制に探検。SGK1 トラン スクリプト レベル リアルタイム PCR およびグルコース誘発電流 (I(g)) Ussing チャンバー実験によって SGLT1 アクティビティを反映します。 決定しました。BCECF 蛍光 Na (+) の決定のために利用された-依存 pH の回復から、アンモニウム パルス （NHE 活動を反映して DeltapH(NHE))。結果、腸 SGK1 トラン スクリプト レベルは 4 日間の治療と 10 microg.mg ボディ wt(-1).day(-1) デキサメタゾン (Dex) によって大幅に拡張されました。I(g) は、sgk1 ノックアウト マウス (sgk1(-/-)) とその野生型の同腹仔 (sgk1(+/+))。 実質的に同一の制御条件下であった4 日間の治療とデックス、しかし、I(g) 約 3 倍 sgk1(-/-) マウスではないが、sgk1(+/+) マウスの増加。DeltapH(NHE) sgk1(-/-) と sgk1(+/+) のマウス治療前に類似していた。デックス増加 DeltapH(NHE) 約 3 倍 sgk1(+/+) マウスと約 2 倍で sgk1 (-/-) マウス、効果 NHE3 の特定のブロッカ S 3226 存在下で大幅に鈍化 （10 microM）。西部のしみの分析によると Dex は大幅に SGLT1 と NHE3 の蛋白質豊富に刷子縁膜の sgk1(+/+) マウスではなく、sgk1 の強化 (-/-) マウス。結論として、SGLT1 と NHE3 の基本的な機能、腸 SGK1 による刺激は必要ありません。しかし、SGLT1 に及ぼすグルココルチコイドの完全と NHE3 部分的には、SGK1 に依存です。
SGK1 と SGK3 の両方に欠けている遺伝子をターゲットとしたマウスの腎機能。
血清と糖質コルチコイド誘導性プロテインキナーゼ (SGK) 1 および SGK3 機能亢進を上皮 Na(+) チャネルを含むいくつかのイオン チャネルを共有します。SGK3 は、SGK1 ミネラルコルチコイドとグルココルチコイドのゲノムの制御下にあるに対し、恒常表されます。SKG1 ノックアウト (sgk1(-/-)) マウスは一見普通それは標準的な食事が供給されるが、それは塩欠乏食が供給されるときに NaCl を保持する能力が損なわれます。SGK3 ノックアウト （sgk3(-/-)) マウス飼育標準と塩欠乏ダイエット、髪の成長が著しく遅れるが NaCl 排泄は正常です。このように可能性は、SGK1 と SGK3 相互にお互いの重度の NaCl 損失の sgk1(-/-) と sgk3(-/-) マウスを防止するため置き換えることを考えられていた。我々 交差 SGK1 と SGK3 ノックアウト マウスと電解質の腎排泄二重突然変異体の比較 (とその野生型の同腹仔 （sgk1(+/+)/sgk3(+/+)） の sgk1(-/-)/sgk3(-/-))。Sgk3(-/-) マウスと同様、sgk1(-/-)/sgk3(-/-) マウス遅延髪の成長を表示します。血圧だった少し、しかし大幅に （P < 0.03）、sgk1(-/-)/sgk3(-/-) （102 4 mmHg の +/-) の sgk1(+/+)/sgk3(+/+) (114 3 mmHg の +/-) マウスでは、マウスで維持された違い低および高塩飼料よりも低い。血漿アルドステロン濃度を有意 (P 0.01 <) sgk1(+/+)sgk3(+/+) のマウス コントロール (対 32 pg/ml の +/-143 の 143 の +/-511) と低塩分 (199 + 145 pg/ml/362 対 ± 1,325) ダイエット供給よりも sgk1(-/-)/sgk3(-/-) でより高い。塩の枯渇中に Na(+) の絶対とフラクショナル排泄有意 (P < 0.01) sgk1(-/-)/sgk3(-/-) （1.2 ± 0.2 micromol/24 h g ボディ wt、0.12 ± 0.03%） よりも sgk1(+/+)/sgk3(+/+) （0.04 ± 0.01 ％ 0.4 ± 0.1 micromol/24 h g ボディ wt） マウスで高い。Sgk1(-/-)/sgk3(-/-) マウス遅延髪の成長 sgk3(-/-) マウスと控えめな障害腎塩保有を sgk1(-/-) マウスを共有します。アイソ フォーム キナーゼの追加の欠如のいずれかのプロパティを表現型複合実質的にないです。
SGK1 依存的心臓 CTGF 形成と DOCA 治療後の線維化。
ミネラルコルチコイド アルドステロンと deoxycorticosterone 酢酸 （DOCA） 腎細管塩を刺激、塩の食欲を増加、細胞外のボリューム拡張を誘発する、血圧を高めます。ミネラルコルチコイドの心臓に対する影響は少なくとも部分的に心筋細胞に及ぼすホルモンの直接行動によるものです心臓の線維につながるマトリックス蛋白沈着の刺激があります。ミネラルコルチコイド誘発心筋線維化を媒介する信号メカニズムはこれまでとらえどころのないに残っています。ミネラルコルチコイド腎細管 Na + および塩の食欲に及ぼすミネラルコルチコイド参加、血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1) 上昇させることが示されています。ミネラルコルチコイド誘発心筋線維化、SGK1 ノックアウト マウスの病態における SGK1 の関与を探索する (sgk1-/-） と野生型の同腹仔 (sgk1 c++/cli +) された 21 日のリリース 50 mg DOCA ペレットを植え付け、1% を供給 NaCl の 18 日間の水を飲むの。この DOCA/高塩処理増加した遺伝子型の両方の血圧が sgk1 でのみ有意な心筋線維化につながった +/+ sgk1/マウスではなく。リアルタイムのポリメラーゼの連鎖反応とウエスタンブロット法によると、DOCA/高塩処理トラン スクリプト レベルと心臓の結合組織成長因子 (CTGF) の蛋白質発現 sgk1 でのみ強化 +/+ sgk1/マウスではなく。さらに、DOCA (10 microM) 発現亢進 CTGF の発現および肺線維芽細胞における強化された CTGF プロモーター活性に分離 sgk1 から c++/cli + がない sgk1-/-マウスから、エフェクトを含むスピロノラクトン敏感ミネラルコルチコイド受容体と核要因 kappaB (受けた) の活性化。SGK1 ミネラルコルチコイド誘起 CTGF 式および心臓維で決定的な役割を果たしていることが示唆されました。
腎 Ca 2 + ハンドリング Sgk1 ノックアウト マウスでは。
アフリカツメガエル卵母細胞における共発現研究は腎上皮性カルシウム チャネル TRPV5 を刺激する血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1) の能力を明らかにしました。SGK1 チャネル蛋白プラズマ膜、Na(+)/H(+) 交換の調節因子 2 (NHERF2) の参加が必要な効果の豊かさが増加します。本研究は、SGK1 の腎カルシウム処理 in vivo での規制における役割を探索を行った。このエンド、TRPV5、カルビンジン D-28 K の豊富さ、腎カルシウムに機能的 SGK1 欠けている遺伝子をターゲットとしたマウスの排泄された分析した (sgk1 (-/-)) と自分の年齢と性別をマッチさせた同腹仔 (sgk1 (c++/cli +))。免疫組織化学が明らかに低い豊富 TRPV5 とカルビンジン D-28 K タンパク質 sgk1 で (-/-) マウスより sgk1 (c++/cli +) マウス、両方コントロール食で飼育。マウスを餌 ly マーク Ca(2+) 欠乏食 TRPV5 タンパク質の豊富な遺伝子型の両方で増加しました。コントロール ダイエット下腎カルシウム排泄された sgk1 (-/-） よりも有意に低い sgk1 (+/+) マウス。Ca(2+) 欠乏食カルシウムの腎排泄両方の表現型で同じレベルに減少しました。フロセミドはフラクショナル カルシウム排泄を増加し、表現型の違いを消費します。我々 は、SGK1 の欠如は細管をつなぐ TRPV5 豊富な減少につながる可能性がありますが、TRPV5 規制を廃止するかない結論します。Sgk1 の細管をつなぐ TRPV5 の豊かさの減少 (-/-) マウスはおそらく補償の再吸収カルシウム強化された上流ネフロン セグメント ループのヘンレ直接再吸収 SGK1 依存型 Na(+) 障害ネフロン、塩の損失、および強化された Na(+) のアルドステロン敏感な遠位部から可能性がありますなどに （とその上流ネフロン セグメント内の Ca(2+)) の再吸収。
血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 耐糖能の塩感受性を仲介します。
過剰な塩分の摂取量は末梢グルコース取り込み、こうして耐糖能を損なうことが低下します。細胞のグルコース取り込みの刺激を伴います phosphatidylinositide 3-キナーゼ （PI 3 K）-依存活性化蛋白質キナーゼ B/Akt の。PI 3 k のさらなるキナーゼ下流血清と糖質コルチコイド誘導性プロテインキナーゼ (SGK) 1 日における hmgb1 の発現であるミネラルコルチコイドしで、したがって、塩分の摂取量によって downregulated です。SGK1 ノックアウト マウス (水道水 (コントロール) または 1% 食塩水 （高塩） への無料アクセスは、sgk1(-/-)) とその野生型の同腹仔 (sgk1(+/+)) できました。 SGK1 の塩依存性グルコース取り込みにおける役割を探索するには西部のしみが付くことによると高塩を減少し、doca (DOCA; 35 mg/kg 体 wt) SGK1 蛋白質豊富骨格筋および sgk1(+/+) マウスの脂肪質のティッシュで増加しました。Sgk1(+/+) マウスにグルコース (3 g/kg 体 wt) の腹腔内投与は一過性制御 (23 mg の/dl の +/-164) 動物のよりも有意に高い値 ([グルコース] p, max) 高塩 （39 mg の/dl の +/-281） に近づいて血漿グルコース濃度増加。DOCA [グルコース] p、最大制御 sgk1(+/+) マウスが有意な減少 [グルコース] p、最大高塩 sgk1(+/+) マウスにおける、スピロノラクトン (50 mg/kg 体 wt) 逆転効果を大幅に修正しなかった。[グルコース] p、max sgk1(-/-) マウス高塩に鈍感と制御 sgk1(+/+) マウスで有意に高いだった。取り込みの 2-デオキシ - d-[1, 2-(3) H] グルコース骨格筋・脂肪組織に sgk1(+/+) マウスにおける sgk1(-/-) マウスよりも有意に小さかったおよび高塩 sgk1(+/+) マウスで減少しました。トランスフェクション HEK 293 のセル アクティブ (S422D) SGK1 がない非アクティブ (K127N) SGK、刺激フロレチン感受性グルコース取り込み。結論としては、高塩分 SGK1 依存性細胞のグルコース取り込みが低下します。SGK1 したがって食塩摂取量と耐糖能異常の間のリンクに参加しています。
鈍化 DOCA/高塩誘導蛋白尿と SGK1 欠けている遺伝子をターゲットとしたマウスの腎尿細管間質損傷。
ミネラルコルチコイド腎細管 Na(+) を刺激する、塩の食欲を高めるため、血圧を上昇および腎線維化の開発を支持します。腎細管 Na(+) および塩の食欲に及ぼすミネラルコルチコイド血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ 1 （SGK1） を伴います。キナーゼは、非常に fibrosing 組織で表されます。現在の実験は、こうして SGK1 腎線維化に関与を探検。この終わりは、SGK1 ノックアウト マウスに (sgk1 (-/-)) とその野生型の同腹仔 (sgk1 (c++/cli +)) desoxycorticosterone 酢酸 （DOCA） 移植された-リリース ペレットと提供された 1% 食塩水飲料水として 12 週間。治療 Na(+) で sgk1 と流体と Na(+) の摂取量と尿の出力流体の大幅な増加につながって (+/+) マウス、sgk1 の鈍化の影響 (-/-) マウス。血圧の増加両方遺伝子で似たような程度の最初の 7 週間以内が 5 週間以内に、それはさらに増加 sgk1 でのみ (+/+) マウス。クレアチニン ・ クリアランスを大幅に変更していないが、蛋白尿は、sgk1 で劇的に増加 (+/+) マウス、sgk1 で大幅に鈍化する効果 (-/-) マウス。明らかに 12 週間の治療後の組織学マーク間質線維と sgk1 から腎臓の炎症の糸球体硬化症と尿細管間質損傷 (+/+) マウス、sgk1 からではなく (-/-) マウス。結論としては、SGK1 の欠如 DOCA/高塩誘導蛋白および腎線維化に対して保護します。
食塩感受性高血圧は高脂肪飼料誘導に対する血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ SGK1 に欠けているマウスの抵抗。
ミネラルコルチコイド強化式とインスリン刺激は腎上皮性 Na + アクティブに活動の血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ SGK1、) チャネル (ENaC)。塩欠乏ダイエット、SGK1 ノックアウト マウス下 (sgk1-/-) その野生型の同腹仔よりはるかに多くの NaCl 排泄する (sgk1 c++/cli +) と低血圧になります。現在の実験は、SGK1 高食塩摂取と高脂肪食高血圧効果に参加するかどうかを検討します。Sgk1 腎 SGK1 蛋白質豊富 +/+ マウスは、高脂肪の食事後有意に上昇だった。コントロール ダイエット、水分摂取量、血圧、尿流率と尿中 Na + 下、K + および Cl 排泄 sgk1 - で類似していた/- と sgk1 +/+ マウス。標準のダイエット、高塩分下 (1% 塩化ナトリウムの飲酒 25 日間の水) 同様に増加した水分摂取量、尿流率と尿中 Na +, K +、および Cl 排泄 sgk1-/- と sgk1 c++/cli + マウスの血圧を大幅に変更せず。高脂肪の食事だけで （17 週） 大幅に水分摂取量、尿流率、尿中 Na +, K +、または Cl 排泄または血漿アルドステロン濃度が増加血漿インスリン、総コレステロール、トリグリセリド濃度および遺伝子型の両方で同じ程度の収縮期血圧は変わりませんでした。追加塩の摂取量 (1 %nacl 飲酒で水 25 日間)、高脂肪の食事の上に高インスリン血症や高脂血症を与えないが、水分摂取量, 尿流率および尿中 NaCl 排泄は、sgk1-はるかに多く増加/- より sgk1 で c++/cli + マウス。さらに、高脂肪食を受信動物では、追加の塩の取入口血圧 sgk1 でのみ増加 +/+ (132 ± 3 mmHg) をマウスではなく sgk1-/-マウス （120 4 mmHg の +/-) しかし。こうして SGK1 の欠如結合高脂肪高食塩食の高血圧に対する保護します。
動作するシナプスから: 定義された神経型設計された GABAA 受容体の急速な変調。
哺乳類で、特定のニューロンまたはネットワーク動作への貢献を識別する重要な課題です。ここで定義された細胞集団におけるシナプス抑制の急速な変調方式を有効にするこのプロセスを容易にアプローチについて説明します。バインディング ゾルピデム GABAA 受容体の機能を強化、全身アクティブ アロステリック変調器の gamma2 サブユニットはフェニルアラニン残基 (Phe77) が必要です。この残渣イソロイシンに変更マウスはゾルピデムに敏感です。によって Cre recombinase 誘起 （つまり、Ile77 Phe77 の交換は、） gamma2 サブユニットのスワッピング ゾルピデム感度 GABAA 受容体の選択したセルの種類を復元できます。私たちは、小脳のプルキンエ細胞はそのアクションを一意に区別しようとするときどこゾルピデム急速に重要な運動障害誘導でこのメソッドのパワーを発揮します。これは分子結合して多くの神経回路を調査するため貴重されます薬理学的手法が対象となるセル アブレーションの明白な利点があります。
血清および糖質コルチコイド誘導性キナーゼ SGK1 グルココルチコイド刺激胃酸分泌での役割。
グルココルチコイド胃酸分泌, 消化性潰瘍の開発を優遇効果を刺激します。推定上のメカニズムが関与する様々 な上皮チャネルやトランスポーターを刺激する血清と糖質コルチコイド誘導キナーゼ (SGK1) が含まれます。本研究は胃酸分泌に及ぼすグルココルチコイドに SGK1 の貢献を検討しました。胃腺機能 SGK1 欠けている遺伝子をターゲットとしたマウスから分離した (sgk1 (-/-)) とその野生型の同腹仔 (sgk1 (c++/cli +))、H (+)-分泌 （DeltapH/分） 2'、7'--ビス (carboxyethyl)-5 (6) carboxyfluorescein (BCECF) を活用した判断した-蛍光、SGK1 トラン スクリプト レベル in situ hybdridization と発現の免疫組織化学とリアルタイムのポリメラーゼの連鎖反応による KCNQ1 チャネルで。SGK1 トラン スクリプト レベル 10 マグカップ/g 体重 （BW） の 4 日間処理によって強化された/日デキサメタゾン (DEX)。治療前に DeltapH/min sgk1 で類似していた (-/-) と sgk1 (+/+) マウス。デックス増加 DeltapH/分約 4 倍で sgk1 (c++/cli +) マウスと約 2 倍で sgk1 (-/-) マウス効果廃止 K (+)/H (+) の存在下で atp アーゼ阻害剤オメプラゾール (50 microM）。35 ミリメートルにローカルに於いて濃度の増加 (Na(+)) を取り付け強化 DeltapH/分、さらに DEX によって刺激される可能性がないと sgk1 間有意差はなかった (-/-) と sgk1 (c++/cli +) マウス。カルバコール (100 microM) およびフォルスコリン (5 microM) 刺激胃酸分泌 sgk1 での類似の程度 (-/-) と sgk1 (c++/cli +) マウス。結論としては、SGK1 基底とサイクリック AMP 刺激の胃の H(+) の分泌の必要はありませんが H(+) 分泌刺激時の糖質コルチコイドによって参加しています。グルココルチコイドと SGK1 の及ぼす細胞外に於いて濃度の増加に添加されていないおよびしたがってに於いてチャンネルの刺激を伴うことがあります。
海馬 θ リズムとそのカップリング γ 振動がパルブアルブミン陽性ニューロンへの高速抑制を必要とします。
海馬シータ (5-10 Hz) とガンマ (35-85 Hz) の振動抑制のネットワーク gaba 作動性介在ニューロンの上によって異なります。ただし、直接および細胞型特異の干渉抑制のための方法の欠如リンク シナプスおよび細胞プロパティ ネットワーク機能を持つヘルプより良い洞察を防ぎました。ここでは、我々 遺伝子改変マウスを生成 (パルブアルブミン陽性 (PV +) 介在ニューロンのシナプス抑制された蒸散 PV-Deltagamma(2))。海馬フィールド ポテンシャルおよび単位レコーディング ca1 マウスの自由にその θ リズムは強くこれらのマウスで減少したを明らかにしました。シータ ・ ガンマ振動の特徴的なカップリングが θ リズムのみの削減によって考慮することがより強く PV-Deltagamma(2) マウスで変更されました。驚いたことに、γ 振動が変更されていません。これらのデータは PV + 介在ニューロンへのシナプス抑制がシータ - とそのカップリングの不可欠の海馬律動ガンマ γ 振動が、ないであることを示します。Intrahippocampal ネットワークがこれらの効果に貢献するかもしれないことを示唆して、遺伝子組み換えを模倣した計算の海馬神経回路網モデルにおける律動の似たような変化が得られました。
プルキンエ細胞のシナプス抑制前庭小脳の運動学習の統合を仲介します。
フィード フォワード抑制プルキンエ細胞上には、40 年前最初記載されたが、我々 は少しどのように抑制性介在ニューロンの動物行動における小脳の機能に貢献を理解します。どの GABA(A) で受容体を介するシナプス抑制はプルキンエ細胞から選択的に削除されますマウス線 （PC Deltagamma2） を使用して、フィード フォワード抑制分子層の介在からが前庭眼反射の適応を調節する.運動パフォーマンス ベースラインの減損は比較的軽度であったが、前庭動眼反射の位相を適応し、利得の適応を統合する能力が強く侵害されました。プルキンエ細胞単純スパイクの異常パターン中と誘発の代償性眼球運動の不在で示した。当社実験データのモデリングに基づくフィード フォワード抑制のプルキンエ細胞の活動、微細パターンを制御することにより、小脳と前庭核ニューロンの可塑性の誘導できることを提案する.
GABA（A）受容体と選択した神経型のリモートコントロールにより小脳回路の勉強
GABA（）分子層の介在により、小脳プルキンエ細胞（MLIs）の受容体を介する抑制が細胞レベルで熱心に研究されているが、この抑制が小脳に依存する動作を制御するかは不明推移している。我々は、行動レベルでMLI - プルキンエ細胞シナプスの機能を調べるために2つの相補的なアプローチを実装しています。最初のアプローチでは、恒久的に遺伝的にプルキンエ細胞（PC-Deltagamma2マウス）からシナプス後GABA（）受容体を除去することによってシナプスに抑制速いシナプス伝達を妨害した。我々は強くプルキンエ細胞の活動の時間パターンを破壊することによって、おそらく前庭occular反射（VOR）の小脳学習障害MLI - プルキンエ細胞シナプスの慢性的な中断を見つけました。しかし、PC-Deltagamma2マウスではベースラインVOR反射は軽度の影響でした。確かにPC-Deltagamma2マウスではプルキンエ細胞の活動のMLI制御はどちらのシステムを補償する継続的な運動タスクに、またはその関与していないであることを示唆している、全く運動失調や歩行異常を示さないその損失。後者の可能性を調べるために、我々は別の遺伝的技術を開発し、我々はGABA（）受容体モジュレーターゾルピデム（PC-γ2·スワップ·マウス）の急速な操作に選択的に敏感なMLI - プルキンエ細胞のシナプスを作りました。腹腔内ゾルピデム注射後数分では、これらのPC-γ2·スワップ·マウスは、リアルタイムのモーター制御にMLI-プルキンエ細胞シナプスの実質的な寄与を明らかにし、重度の運動機能異常を開発しました。シナプスのGABA作動性入力と同じシナプスにおけるGABA作動性入力の高速可逆変調の細胞型に選択的な永続的なノックアウトでは、両方の戦略を追求する方法を示しています充実したビューを提供します。
マウス小脳皮質の分子層におけるシナプスの Gaba 作動性の定量的な組織。
小脳皮質、分子層の介在神経 (星状とバスケット細胞) gaba 作動性入力プルキンエ細胞およびお互いとおそらく他の介在を提供します。プルキンエ細胞シナプスに介在ニューロンで Gaba 抑制分子の層で主に検討しました。本研究では, gaba 作動性介在ニューロンの対のプルキンエ細胞の樹状突起のシナプスの比を定量的に評価するのに相補的な減法混色戦略を使用しました。GABAA 受容体 α 1 サブユニット (GABAARalpha1) が選択的に Cre/loxP システムを用いたプルキンエ細胞からが削除されたマウス モデルを生成しました。Α 1 サブユニットの削除私たちの GABAAR 密度介在クラスターを決定できるように、プルキンエ細胞からの GABAAR 骨材の完全な損失の結果。補完的なアプローチでは、GABA シナプスのプルキンエ細胞の抑制性のシナプス後サイトの特定のマーカーとしてアルファ ジストログリカンを使用して衝突の密度を決定しました。これらの逆のアプローチを組み合わせること、シナプス介在ニューロンによって受信したすべての gaba 作動性シナプス分子層の約 40 ％ を表すことを見つけた。特に、この割合は生後発達中に安定であったを示す同期シナプス形成。純粋な gaba 作動性シナプス介在ニューロンに量に基づき、相互抑制重要なまだ主おろそかには、計算の役割、小脳の皮質に果たさなければならないことを提案する.
Ro 15 4513 アルコール誘発鎮静における αβγ2 型 GABA(A) 受容体を介してマウスと拮抗します。
エチルアルコール （エタノール） 多くの分子標的の神経系、鎮静剤の低されているこれらのサイトで、その効力と比べています。これはエタノールの結合サイトを発見することは困難しました。酸 （GABA） A 型受容体サブタイプ提案エタノール拮抗 Ro 15 4513、確立された γ 2 サブユニット依存型ベンゾジアゼピン サイト、最近報告された δ サブユニット依存型 Ro 15-4513/エタノール結合部位の γ-アミノ酪で 2 つの推定されるバインディング サイトがあります。ここでは、我々 は Ro 15-4513 これら 2 つのサイトでの in vivo での役割の明確化を目指した。我々 の野生型マウスにおけるエタノール アクション Ro 15 4513 による拮抗作用がテストに依存していたことが見つかりました： オープン フィールド テスト エタノール誘発効果が Ro 15 4513 敏感だったとエタノール誘発抗不安作用のためのいくつかのテストを示したに対し 1.5 1.8 g/kg のエタノールによって誘起される軽い鎮静の元 Ro 15-4513 敏感であった。Ro 15 4513 によるエタノール誘発鎮静の拮抗作用は GABA(A) 受容体 δ サブユニット欠損マウスでの影響を受けなかった。対照的に、Ro 15-4513 ベンゾジアゼピン サイトの強く減らされた親和性と GABA(A) 受容体 γ 2 サブユニット F77I ノックイン マウス線 （γ2I77 マウス） をテストするとき我々 エタノール誘発鎮静がもはや Ro 15 4513 かっさいだったことを見つけた。確かに、γ2I77 マウスだけでなく、野生型マウス尾状被殻と中隔の領域で特に Ro 15 4513 左として [3 H] の高親和性結合の小さい割合と比較して、これらの残留のサイトどうやらエタノールの拮抗作用に関与していないしていた。結論として、Ro 15 4513 γ 2 サブユニット依存型ベンゾジアゼピン サイト アクションによるエタノールの鎮静効果を廃止を見つけた。
パルブアルブミン陽性CA1介在ニューロンは、空間操作に必要されていますが、いない参照メモリの
皮質回路のパルブアルブミン陽性GABA作動性介在ニューロンは、認知機能を制御するために仮定されています。直接このアイデアをテストするために、我々は機能的にマウスの海馬CA1から選択パルブアルブミン陽性介在を削除しました。我々は、パルブアルブミン陽性の介在は、空間参照用に不要ですが、空間的作業記憶に必須であることがわかった。
Γ 2 依存型変調を介して仲介される 2 つの GABAA 受容体ベンゾジアゼピン サイト リガンドのアクション。
強力な催眠鎮静ゾルピデムとメイン抑制性神経伝達物質受容体の痙攣 methyl-6,7-dimethoxy-4-ethyl-β-carboline-3-carboxylate (DMCM) 法ベンゾジアゼピン サイトへのバインドによって主に、五量体 γ-アミノ酪酸型受容体 (GABA(A))。このバインディングは、批判的に GABA(A) 受容体 γ 2 サブユニットの野生型 F77 残基によって異なります。マウス γ 2 サブユニット F77I 点変異 (γ2I77 マウス線) とその低用量で最も堅牢な行動アクションと同様にこれらの配位子の高親和性ナノモル結合を失います。興味深いことに、γ2I77 マウス他 GABA(A) 受容体の可能な結合部位を介して媒介これらの物質の行動を研究するためのツールを提供します。リガンド オートラジオグラフィーによる実験では, 線条体と中隔に濃縮残留 γ 2 サブユニット依存型ベンゾジアゼピン サイト バインディングのかなりの量の γ2I77 マウスの脳のセクションでを発見しました。ゾルピデムだけ弱く影響をこの残留バインド マイクロモル濃度とのみ高ゾルピデムの線量 (≥ 40 mg/kg) モーターの調整 γ2I77 マウスで鎮静と赤字を引き起こした。DMCM γ2I77 マウス前脳における GABA(A) 受容体のセカンダリ、低親和性の非ベンゾジアゼピン結合部位を介して敵対行動をしていた、この薬はまた、完全に残留ベンゾジアゼピン サイト ラベリング避難。行動テストでは、DMCM の高用量 (20 mg/kg) 鎮静と変調恐怖学習でした。DMCM、しかしないゾルピデム組換え GABA(A) α 1/6β3 受容体のリガンド結合と電気生理学的アッセイを用いた検討アゴニストとして行動しました。我々 の結果は、γ 2 サブユニットを含むベンゾジアゼピン GABA(A) 受容体を介してサイトに媒介されていません高用量の DMCM とゾルピデムのあまり知られているアクションをハイライト表示します。
GABA(A) 受容体 γ 2 サブユニット パルブアルブミン ニューロンからの除去には広範な行動の変化が発生します。
Αβγ2 型 GABA(A) パルブアルブミン (Pv) 細胞受容体によって速いシナプス抑制の行動の意義を検討しました。GABA(A) 受容体 γ 2 サブユニット遺伝子は Cre/loxP 組換えによる Pv 陽性ニューロンの選択的に活性化されました。結果の太陽光発電 Δγ2 マウスは出生後の最初の週に比較的健全なだった;しかし、表現される Cre を始めとして、徐々 に開発したマウス幅広い表現型変化の低体重、運動障害、振戦など減少の不安レベル、音響驚愕の反射と障害者の空間学習の痛みが減少する感度と欠乏プレパルス抑制。それにもかかわらず、削除が致死、されマウスも、1 年後の死亡率の増加を表示してされませんでした。T-butylbicyclophosphoro [(35) S] thionate を用いたオートラジオグラフィー GABA(A) 受容体パルブアルブミン ニューロンの高レベルが含まれる中枢神経系の地域で唯一の α と β サブユニットとの増加量を示唆しました。BAC 遺伝子導入を使用して、我々 Pv Δγ2 表現型のいくつかはいくつかの Pv の細胞 （視床網様核のニューロンと小脳の Pv 陽性ニューロン） に戻って野生型 γ 2 サブユニットのためによって選択的に減少。これは少ない重度障害運動能力と Pv Δγ2 マウスと比較して空間的な学習の生産が、他のすべての財政赤字に残った。我々 の結果は Pv 陽性ニューロン鎮痛効果感情的な行動や感覚運動統合モーターの調整などの多様な行動様式のために高速の Gaba 抑制の普及の意義を明らかにします。
化学遺伝学：神経活動の迅速な操作のための受容体 - リガンドペア
神経回路の機能解剖に向かって、新たな遺伝学的ツールの数はそのまま哺乳類の脳回路の遺伝学的に定義されたニューロンのサブタイプの迅速かつ可逆的な操作を有効にして開発されている。 optogeneticsの画期的な技術と並んで、受容体 - リガンドのペアは、化学遺伝学を用いた神経活動を調節するために補完的なアプローチを提供しています。
