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Articles by Raymond R. Mattingly in JoVE
JoVE Clinical and Translational Medicine
종양의 4D 라이브 세포 이미징을위한 MAME 모델 : Microenvironment 상호 작용 영향을 미치는 악성 진행
1Department of Pharmacology, Wayne State University, 2Barbara Ann Karmanos Cancer Institute, Wayne State University
우리는 그들의 microenvironment에서 유방 종양 세포와 다른 세포 간의 상호 작용의 실시간 라이브 세포 이미징을위한 3D coculture 모델을 개발했습니다 그 침략적 표현형에 충격 진행. 이 모델들은 invasiveness에 연루 paracrine 유발 proteolytic, 케모카인 / 시토킨 및 키나제 경로를 타겟으로하는 의약품에 대한 잠복기 화면으로 사용할 수 있습니다.
Other articles by Raymond R. Mattingly on PubMed
높은 RhoA 활동 RhoA 다운-규제 Laminin-2에 의해 유도 부드러운 근육 Myogenesis 반면 Undifferentiated 중간 엽 세포 표현 형을 유지 한다
라운드 배아 중간 엽 세포 확산/신장 시 부드러운 근육 (SM) 세포로 분화 가능성이 있다 (양, Y., K.C. 팔 머, N. Relan, C. Diglio 및 L. Schuger. 1998입니다. 개발입니다. 125:2621-2629; 양, Y., N.K. Relan, 검사가 Przywara 및 L. Schuger. 1999입니다. 개발입니다. 126:3027-3033; 양, Y., S. Beqaj, P. 켐 프, I. 아리엘과 L. Schuger. 2000. J. Clin입니다. 투자. 106:1321-1330). 개발 폐에이 과정은 laminin (LN)-2 (Relan, N.K., Y. Yang, S. Beqaj, 세영 광부 및 L. Schuger peribronchial 축적에 의해 자극 됩니다. 1999. 제이 셀 Biol. 147:1341-1350). 여기 우리 LN-2 RhoA 활동 다운을 조절 하 여 기관지 myogenesis를 자극 한다는 표시. 기술, immunoblotting, 및 역전사 PCR 나타난 undifferentiated 배아 중간 엽 세포에서 RhoA, 작은 GTPase 신호 단백질은 풍부한는 고의 수준을 SM myogenesis 함께 감소. 기능성 연구 agonists 및 활성화 및 지배 긍정적이 고 부정적인 플라스 미드를 생성 하는 Rhoa의 길 항 제를 사용 하 여 시연 높은 RhoA 활동 라운드 undifferentiated 중간 엽 세포 표현 형을 유지 하는 데 필요한 했다. 이 부분에서 myogenic 전사 인자 혈 청 반응 요인 (SRF) 지역화를 제한 하 여 중간 엽 세포 세포질에 주로 달성 했다. LN-2에 있지만 활동과 빠르게 감소 하는 Rhoa의 세포 외 매트릭스의 다른 주요 구성 요소에 확산 되 면 핵에 SRF의 전 결과. 세포 신장과 SRF 전 지배적인 긍정적인 Rhoa의 overexpression에 의해 방해 했다. 일단 셀 받았다 SM 차별화, 업-레 귤 레이 션 RhoA 활동의 SM 유전자 발현을 억제 하는 대신 유도. 따라서, 우리의 연구 빼앗아 LN-2와 RhoA SM myogenesis 조절 새로운 메커니즘을 제안 합니다.
유방암 세포에서 Erk1/2 정품 인증 17 베타 Estradiol 유발 메커니즘. Her2과 PKC-델타에 대 한 역할입니다
물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 (Erk/MAPK)의 활성화는 에스트로겐 (E(2))에 대 한 중요 한 신호 전달 이벤트-세포 증식을 중재 합니다. 최근 우리 그룹 등에서 연구 Erk의 영구 정품 인증 셀 마이그레이션 및 종양 진행에 중요 한 역할을 한다. 그러나 영구 Erk 활성화에 대 한 책임 신호 장치를 마더보드에 특징 되지 않습니다 완전히,. 이 연구에서는 E(2) MCF-7 유 방 암 종 세포에서 Erk의 느린 하지만 영구 활성화 유도 보여 주었습니다. (2) E-유도 된 Erk 활성화가 제안 하는 새로운 단백질 합성에 의존 E (2)-유도 된 성장 인자 Erk 활성화에 큰 역할. 때 MCF-7 셀 E(2)과 HER-2 단일 클론 항 체 (herceptin), E (2)의 60-70%의 존재 취급 했다-유도 된 Erk 활성화 차단 됩니다. 또한 때 치료 MCF 7 셀에 노출 됐다 바른된 매체에서 E (2)-셀, Erk 활동 크게 향상 된 처리. 또한 Erk 활동 또는 immunoprecipitation 통해 바른된 매체에서 heregulin (HRG) 고갈에 의해 그녀의 2에 대 한 항 체에 의해 차단 되었습니다. 반면, 표 피 성장 인자 수용 체 (Ab528) 항 체만 E (2)의 10-20% 차단-유도 된 Erk 활성화, 제안 하는 E (2)-유도 된 Erk 활성화 HRG의 분 비와 그녀의 활성화를 통해 주로 중재-autoctine/paracrine 메커니즘에 의해 2. 지배적인 부정적인 돌연변이 또는 상대적으로 특정 PKC 델타 억제제 rottlerin에 의해 신호 PKC 델타 중재의 저해 차단 (2) 전자의 대부분-Erk 활성화를 유발 하지만 TGF 알파 유도 된 Erk 활성화에 영향을 주지 않습니다. Farnesyl과 (Ftase-1) 또는 지배적인 부정 (N17)의 저해에 의해 Ras의 대비 저해 하 여-Ras, 크게 E(2)-및 TGF 알파 유도 된 Erk 활성화 저해. 다운스트림 신호 공개이 평가 E (2)-유도 된 Erk 활성화 HRG/그녀의-2/PKC-델타/Ras 통로 종양 진행의 초기 단계에 있는 E (2) 종속 성장 촉진 효과 대 한 중요 한 될 수 있는 중재.
3-Allylfarnesol로 바 스타 틴과 결합 하 여 치료에 의해 A10 혈관 평활 근 세포의 증식의 강력한 억제, 단백질 Farnesyltransferase의 억제제
3-히 드 록 시-3-methylglutaryl-CoA reductase와 따라서 콜레스테롤의 합성을 억제 하는 스타 틴은 현저 하 게 심혈 관 질환의 치료에 효과적입니다. 지질 프로 파일에 그들의 유리한 효력 이외에이 약 또한 동맥 경화 증의 특징은 혈관 부드러운 근육의 확산을 방지할 수 있습니다. 우리는 스타 틴 닢 prenylation를 방지 하 고 따라서 중요 작은 GTPases 혈관 부드러운 근육 세포의 기능을 억제 가설. 우리가 따라서 A10 혈관 부드러운 근육 세포의 성장 및 그들의 Ras와 RhoB 단백질의 상태에로 바 스타 틴의 효과 분석 했습니다. 우리가 찾을 수 있는 < = 1 또는 Microm로 바 스타 틴 potently A10 문화와 높은 농도의 확산을 억제 (> 또는 = 3 microM) apoptosis를 유도 합니다. 우리는 또한 3-allylfarnesol (3-alFOH)과 farnesyl (FTI)의 억제제의 효과 테스트. 데이터 표시는 비록 > = 10 또는 microM 3 alFOH cytostatic 효과 대 한 필요, 3 microM 3-Alfoh의 동작을 크게로 바 스타 틴도 nanomolar 수준으로 potentiated 수 있습니다. 로 바 스타 틴 및 3 alFOH 멤브레인의 업 레 귤 레이 션 및 Rhob의 relocalization cytosolic 구획 원인 성분 전시 하는 것이 있습니다. 이 relocalization는 prenylation의 저해를 반영 하기 위해 추정 Rhob의 결합된 3-alFOH 그리고로 바 스타 틴 치료의 proapoptotic 작업과 연관 시킵니다. 이러한 데이터 RhoB, 심혈 관 질환에 귀중 한 약리 대상 수 있으며 스타 틴, 특정 Ftis의 조합 값 초과 세포 증식을 특징으로하는 질환의 치료에 있을 수 있습니다 것이 좋습니다.
Ser916/898에서 Ras GRF1 교환 비율의 인 산화 Ras 대뇌 피 질에 시그널링의 활성화를 보여준다
세포내 칼슘과 heterotrimeric G 단백질에서 G 베타 감마 subunits의 방출을 증가 의해 규제 됩니다, Ras GRF1 exchange 요소 신경 Ras의 활성화에 중요 한 역할을 한다. G 단백질 결합 수용 체의 활성화는 특정 떠들고 잔류물에서 Ras grf1의 인 산화 증가 자극. 처음이 사이트를 식별할 수 (해당 Ser(898) 쥐 순서로), 마우스 순서로 ser(916)는 muscarinic 수용 체에 의해 Ras grf1의 Ras exchange 요소 활동의 전체 활성화에 대 한 필요 합니다. Ras grf1은 높은 조 난 신호 교환 비율에 비해 쥐 뇌에서 표현 되 고 증가 여기 시연 (32) P 없이 뇌 Ras grf1의 ser(898)에 단백질 키 니 아 제 대답 인 산화의 Ras-GRF1 ser(916)에서의 활성화에 따라는 또한 PC12 세포에서 Ras 의존 neurite 파생물의 최대한 유도 필요. 선택적으로 ser(916/898)에 phosphorylated 때 Ras grf1를 인식 하는 (되 나 2152) 항 소설 체 transfected COS 7 PC12 세포의 고도 쥐 개 조각에서 생 단백질의 두 모델 시스템에 서양 blotting에 의해 Ras grf1의 레 귤 레이트 된 인 산화를 확인 했다. 간접 confocal 면역 형광 항 체 2152 시연 반응성 Ras GRF1 phosphorylated는 조건 에서만 사용 하 여 ser(916/898)에서 transfected PC12 세포의. 쥐 뇌의 대뇌 피 질의 조각 confocal 면역 형광 Ras-GRF1, ser(898)에서의 광범위 하 고 선택적 인 산화를 공개 했다. 전 두 엽 피 질에이 지역에 있는 neurotransmission에서 Ras 활성화 및 신호 전달에 대 한 역할을 지 원하는 수지상 트리에서 Ras grf1의 눈에 띄는 인 산화가 했다.
물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 약물에 저항력이 신경 세포에 신호
Cytotoxic 약물을 광범위 하 게 내재 또는 인수 저항 화학 요법 주요 제한 사항입니다. 이러한 저항에 기여 하는 많은 메커니즘이 있습니다. Neuroblastomas 증거는 성장 인자 신호에 대 한 응답 변경 취득된 약물 저항에 연결 된 수 있습니다. 핵을 세포 막에서 성장 인자 신호를 전송 하는 유비 쿼터 스 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 (MAPk) 캐스케이드 세포 주기 진행과 확산의 규제의 주 메커니즘을 제공 합니다. 우리 인간의 신경 세포 독 소 루비 topoisomerase-2 억제제 및 S adenosylhomocysteine 가수분해 효소의 억제제 MDL 28842 획득된 약물 저항 및 활성화와 Mapk의 핵 전 감소 사이의 관계는 것으로 나타났습니다.
세포 표면 수용 체 활성화 P21 활성 Ras 및 PI3 Kinase 종속 여러 경로 통해 니 1
p21 활성화 kinases (산 소통) Ste20 처럼 떠들고 트레오닌 단백질 kinases 성장 제품군의 첫 번째 확인 된 포유류 회원 했다. 이 연구에서 우리는 PAK1 carbachol, lysophosphatidic (LPA), 표 피 성장 인자 (EGF) 산과 phorbol에 의해 자극 될 수 있다 표시 12-myristate 13-아세테이트 (PMA) 여러 독립 및 경로 중복에 의해. 지배적인 부정적인 Ras, Rac, 및 Cdc42 저해 이러한 agonists의 모든 PAK1 활성화 활성 Rac1 및 Cdc42 maximally 어떤 처리 든 지 없는 경우에서 pak1를 활성화 하는 데 충분 했다. 활성 Ras muscarinic 수용 체 자극에 의해 potentiated 수 있는 pak1의 약한 활성화 유도. EGF 수용 체 티로신 키 니 아 제, phosphatidylinositol 3-키 니 아 제 (PI3 kinase) 및 단백질의 억제제를 사용 하 여 연구 키 니 아 제 C (PKC) 밝혀 모든 셀 표면 agonists의 독립적인 PKC, EGF 자극 PI3 kinase 종속 통로를 자극 하는 PAK1, 그리고 pak1의 muscarinic 수용 체 자극 그는 주로이 EGF R 종속 메커니즘을 통해 중재의 경로 통해 pak1를 활성화할 수 없습니다. LPA에 의해 pak1의 활성화 PI3 kinase와 EGF 수용 체의 독립 했지만 지배 음수가 Rhoa에 의해 저해 되었다. 이 결과 pak1의 활성화에 여러 Ras 종속 경로 식별합니다.
Gbetagamma Subunits P21 활성화 키 1 (PAK1) PI3 Kinase와 Akt 하지만 법의 활성화를 통해 Rac1/Cdc42 독립적으로 자극
P21 활성화 키 (박세리) 가족과 동종 효 모 살 균 20 (Ste20)은 다양 한 세포 형태학, 확산, 생존 등의 세포 응답을 조절 합니다. 이 연구에서 우리는 Gbetagamma subunits에 의해 pak1의 활성화 검사. Co-transfection Gbeta1gamma2 또는 Gbeta1gamma5 COS7 셀의 pak1의 길 항 제에 관계 없이 활성화를 유도 하기에 충분 했다. 지배/네거티브 Rac, Cdc42, 또는 Ras의 표현이 Gbetagamma 종속 활성화를 억제 하지 않았다. Phosphoinositide 3-kinase (PI3 kinase) 활동 및 Akt의 지배/부정적인 형태의 식 억제 Wortmannin PAK1 Gbetagamma에 의해 유도의 활성화를 파기 하기에 충분 했다. 이 결과 공개 PAK1 Gbetagamma에 의해 자극 PI3 kinase와 Rac1 또는 cdc42를 요구 하지 않는 Akt 경로 통해 발생할 수 있습니다.
TNF-알파 중재 Apoptosis 정상적인 인간의 전립선 상피 세포와 종양 세포 라인
이 연구에서 우리는 성장과 정상적인 인간의 전립선 상피 세포 (NP) 및 전립선 종양 세포 선 PC3 Lncap에 있는 apoptosis의 규제에서 TNF-알파의 역할 비교. LNCap 셀 선 TNF-알파 유도 성장 검거와 apoptosis에 매우 민감한 반면 NP 및 PC3 셀 저항 했다. NP 및 PC3 셀의 저항 TNF-알파와 내성 세포 치료 동행 했다-Kbalpha의 인 산화와 NF Kb의 전 핵으로 NF-kB 생존 통로 통해 중재 했다. TNF-알파-kB 민감한 LNCap 세포에서의 인 산화를 유도 하지 않았다. LNCap 셀의 감도 Z-VAD-CH2 F LNCap 셀 및 유도 저항 감도 TNF-알파 반전으로 시스테인 프로 테아 제 모두 참여. TNF-알파에 감정의 차이 NP의 apoptosis 유발 하 고 정상적인 전립선 조직에 영향을 주지 않고 전립선 암 치료에 대 한 흥미로운 가능성을 제공 하는 특정 전립선 종양 세포.
Angiotensin II 직접 활동을 자극 하 고 급속 한 시간 코스와 쥐 근 관에서 나 K Atpase의 인 산화를 변경 합니다
우리는 없음-K-ATPase 쥐 근 관에서 중앙 2 세 이전에 관찰 된 것 보다 훨씬 빠르게 활성화 직접 증거를 제시. 특히, 우리는 0.1과 1 nM 중앙 2 차 추가 gramicidin 4. 존재 하는 세포 외 나트륨의 증가에 대 한 응답 세포내 나트륨 축적 속도 둔화에 2 분 노출 표시 이러한 데이터에서 우리 중앙 II 직접 속도 제한에서 나 K ATPase 활동 자극 보여 세포내 나트륨의 농도. 이러한 같은 조건 하에서 중앙 2 근 위 tubules 노출 32 P 나 K Atpase의 알파 소 단위 tryptic 다이제스트에서 생성 된 여러 개의 phosphopeptides에 통합 금액 변경. 나 K ATPase 전체 셀 lysates ouabain 선호도 열에 의하여 분리 되었고 SDS 페이지의 개별 subunits로 구분 됩니다. 나 K Atpase의 e 2 나 란에 열에 바인딩된 및 e1에 Na + ATP를 사용 하 여 그것의 형태를 변경 하 여 eluted 했다. 나 K ATPase 세포에서 분리 된 중앙 2 차 없음-K-ATPase 컨트롤 셀에서 절연 중앙 II ouabain Na K Atpase의 선호도 감소 제안 보다 ouabain 선호도 열에서 더 쉽게 eluted 취급. 따라서 중앙 II 빠른 속도로 2 분에 나 K ATPase 활동 자극 또는 적은 수 인 산화와 Na K Atpase의 형태 변화를 포함 하는 메커니즘에 의해. Na K Atpase의 신속한 직접 정품 인증에 대 한 생리 적 역할은 나트륨 reabsorption 동안 세포내 나트륨의 큰 컨트롤 하는 것이 좋습니다.
인 생 표현과 단백질 키 니 아 제 A 종속 산화 Guanine 염기의 인간 배아 신장 293 세포에 Ras GRF1 요소를 교환 합니다
우리가 이전에 보고 된 물질 활성화 단백질 kinases p44 Ras 종속 활성화와도 되 나 세포 외 신호 규제 kinases (ERK) 1과 2 (ERK1/2), p42 transiently 인간 배아 신장 (HEK) 293 셀 단위로 Gs 결합 된 세로토닌 수용 체를 통해 중재. 반면 Gi Gq 결합 수용 체 Ca2 바인딩에 의해 Ras-GRF1 (CDC25Mm) 라는 guanine 염기 교환 요소 (GEF)를 통해 Ras를 활성화 하기 위해 표시 되었습니다 + calmodulin의 N 단자 IQ 도메인, Gs 결합 수용 체를 통해 Ras 활성화 메커니즘을 완전히 이해 되지 않습니다. 우리 보고 HEK293 세포에 Ras-grf1의 생 표현 합니다. 세로토닌 자극 HEK293 세포 transiently ser916에 인 Gs 결합 5-HT7 유발 수용 체 단백질 키 니 아 제 A 종속 산화 생 인간의 Ras ser927에 grf1의 고 transfected 마우스 Ras grf1의 표현. Ras GRF1 overexpression 기저 및 세로토닌을 자극 ERK1/2 인 산화 증가. Ser916 돌연변이 (Ser916Ala)을 억제 하거나 (Ser916Asp/Glu) 인 산화를 흉내 낸 이러한 효과 변경 되지 않았다. 그러나, 아미노산 1-225, 포함 하는 Ca2 삭제 + calmodulin 바인딩 IQ 도메인 Ras grf1에서 기저와 세로토닌 자극 ERK1/2 인 산화를 감소. 또한, 세로토닌 치료 안정적 5-HT7 수용 체를 표현 하는 HEK293 세포의 증가, 그리고 세로토닌 유도 ERK1/2 인 산화는 Ca2 + 된 [Ca2 +]-종속. 따라서, 캠프 및 Ca2 + Ras 향해 활동 guanine 염기 교환 요소의 활성화를 통해 5-HT7 수용 체 자극 후 Ras 종속 ERK1/2 활성화에 기여할 수 있습니다.
활성 P21 활성화 키 니 아 제 1 MCF10A 유 방 상피 세포에서 Anoikis를 받고 구출
단백질 kinase, PAK1, 인간의 유방암에 overexpressed 및 침입과 확산의 유도 통해 악성 종양의 원인이 될 수 있습니다. 이 연구에서 우리는 그것은 또한 신 생물의 초기 단계를 조절 수 있는지 테스트 분리 된 MCF10A 유 방 상피 세포의 생존에 pak1의 역할 검사. MCF10A 셀 받아야 anoikis, caspase 3와 poly(ADP-ribose) 효소 (PARP)의 분열에 의해 측정 된 8 시간 이상의 부 대 후. 생 Akt, PAK1, 그리고 나쁜 연결 된 MCF10A 셀의 phosphorylated 하지만 이러한 인 산화 이벤트 초연의 첫 8 시간 동안 모두 손실 됩니다. Constitutively 활성 PAK1 또는 Akt의 식 caspase 3 PARP 분리 된 MCF10A 셀에서의 분열을 억제합니다. 공동-overexpression 또는 지배 음수가 pak1와 활성 Akt의 지배적인 부정적인 Akt와 활성 pak1의 anoikis에 여전히 표시 되지 않습니다. 따라서, Akt와 pak1는 적어도 부분적으로 독립적인 경로 통해 생존을 향상. Anoikis의 PAK1 종속 규칙 식 지배 음수가 pak1의 증가 constitutively 활성 저해 PAK1 caspase 9 활성화 하는 동안 업스트림 caspase 9, 분열 초기 apoptotic 캐스케이드에에서 발생할 가능성이 높습니다. 이 결과 활성화 된 PAK1 anoikis MCF10A 상피 세포에서의 탄압에 대 한 역할을 지원합니다.
물질 활성화 단백질 키 니 아 제/세포 외 신호 통제 키 니 아 제 키 니 아 제 억제제 PD184352 (CI-1040) 선택적으로 악성 Schwannoma 셀 라인에 Apoptosis를 유도 한다
1 형 (NF1) 물어보세요 neuroectodermal 종양에 일반적인 autosomal 지배적인 장애 이다. N f 1 종양 억제기 유전자 GTPase 활성화 도메인 Ras 비활성화에 대 한 포함 하는 neurofibromin를 인코딩합니다. 친 화력 정화 N-Ras NF1 환자 (ST88-14, NF90-8 줄)에서 두 개의 독립적인 neurofibrosarcoma 셀 라인에서 Ras의 주된 활성화 isoform 수를 보였다. N f이 1이 세포 또한 시연된 제정 활동 증가 세포 외 신호 규제 kinases 1과 2 (ERK1, 2)의 물질 활성화 (지도) 단백질 kinases neurofibromin 식 (STS-26T)을 유지 관리 하는 산발적 인 악성 schwannoma 셀 라인에 비해. 따라서, 지도 키 니 아 제 키 니 아 제 (MEK) 억제제 NF1 치료에 대 한 합리적인 접근 있을 수 있습니다. MEK 억제제 PD98059 ['2-아미노-3'-methoxyflavone], PD184352 (CI-1040 라고도 함) [2-(2-chloro-4-iodo-phenylamino)-N-cyclopropylmethoxy-3,4-difluoro-benzamide] 및 U0126 [1,4-diamino-2,3-dicyano-1,4-bis (2-aminophenylthio) 부 타 디 엔] 모든 생산 3 셀 라인의 확산의 억제 농도 따라 다릅니다. 개별 MEK 억제제 모든 세 개의 셀 라인에서 비슷한 효과 했다. 그러나, pd184352의 antiproliferative 효과 ERK1, 2 지도 키 니 아 제 활동의 제거와 밀접 하 게 상관. Pd98059는 u0126와 PD184352 cytotoxic 했다 반면 주로 cytostatic. 만 PD184352 형태학, DEVDase, procaspase 3 분열 및 인구 sub-G(0)/G(1) DNA 내용을 데 모양을 활성화 하 여 표시 된 모든 세 줄에 apoptosis 유도. 세포 생존에 MEK 억제제의 차동 영향 p53 상태 또는 ERK5 경로 대 한 효과에 의존 했다. Pd184352는 또한 기본 쥐 Schwann 세포를 proapoptotic. 따라서, 비록 PD184352 효과적으로 neurofibrosarcoma 셀, 정상적인 Schwann 세포에 미치는 영향 클리닉에서의 유용성을 제한할 수 있습니다.
무기 수은 억제 T 세포 수용 체-중재 신호 변환에 위도의 활성화
약간의 매우 낮은 수준에서 수은 중독과 관련 된 분자 메커니즘으로 알려져 있다. 비록 메커니즘을 알 수 없는 동물 그럼에도 불구 하 고 연구 수은 낮은 수준의 면역 시스템을 타겟팅 할 수 있습니다. 무기 수은 (Hg2 +) 매우 낮은 (하지만 비 독성) 수준에서 수 있습니다 면역 시스템 항상성 중단, 그 유전자 취약 설치류에 특이 한 면역 질환 관련 된 결함이 있는 T-세포의 기능을 개발. T 림프 구 기능 밀접 하 게 T 세포 수용 체에 결합 하 여. 우리는 이전에 분자 수준에서 낮은 농도의 Hg2 + 방해 Ras 및 ERK 지도 키 니 아 제 활성화를 방해 하 여 T 세포 수용 체에서 신호 보고. 이 보고서에서 우리는 Hg2 +, Ras 실패 하기 때문에 제대로 활성화 될 낮은 농도에 노출 하는 T 세포에서 T 세포 신호 전달 경로의 중요 한 스 캐 폴딩 요소 phosphorylated 제대로 될 활성화 T 세포 (LAT) 실패에 대 한 링커 Ras의 업스트림을 표시 하 여 그 결과 따라 확장 합니다. Hypo-인 산화 위도 발생 하기 때문에 업스트림 위도, 위도 반응성 티로신 키 니 아 ZAP 70도 제대로 Hg2 + 치료 세포에서 활성화의.
Ras GRF1 Exchange 요소 조정 H 조-Ras 및 Rac1 신경 형태 제어를 활성화 합니다
Ras GRF1 exchange 요소 별도 도메인을 통해 h 조-Ras 및 Rac1 guanine 염기 교환 비율 (GEF) 활동을 규제 했다. H 조-Ras 및 Rac1 활성화 시 냅 스가 소성에 연결 된 및 따라서 Ras grf1의 함수 학습 및 메모리의 기초가 되는 신경 신호 전달 경로에 기여할 수 있는. PC12 phaeochromocytoma 세포의 형태학에 GEF 활동 중 하나만 포함 된 Ras GRF1 및 잘림 돌연변이의 효과 정의 했습니다. Ras GRF1 형태학 효과 유도 하기 위해 h 조-Ras coexpression이 필요 합니다. Ras GRF1 플러스 h 조-Ras 유도 소설, 확장 된 형태 PC12 세포의 소마 크기 사진 증가 및 neurite 확장 특징 이었다. 포함 된 Ras GEF 도메인, GRFdeltaN, 플러스 h 조-Ras Ras grf1의 잘림 돌연변이 neurite 확장을 생산 하지만 소마를 확장 하지 않았다. 이 neurite 확장 지도 키 니 아 제 활성화의 저해에 의해 차단 되었습니다 하지만 지배적인 부정적인 Rac1 또는 Rhoa의 독립 했다. Rac GEF 도메인, GRFdeltaC, 포함 된 Ras grf1의 잘림 돌연변이 h 조-Ras와 cotransfections에서 확장 된 표현 형을 생산. 셀 확장 wortmannin 또는 Rac1 또는 Akt의 지배적인 부정 형태에 의해 저해 되었다. GRFdeltaC H Ras.gtp에에서 바인딩합니다 두 풀 다운 분석 실험 세균 lysates와 coimmunoprecipitation에 의해 HEK293 세포에서. 이러한 결과 h 조-Ras 및 Ras grf1에 의해 Rac1 조정된 활성화 신경 세포 크기의 중요 한 컨트롤러 수 있습니다 것이 좋습니다.
Neurofibromatosis에 대 한 신흥 안티 종양 치료를 위한 분자 표적에 1을 입력 합니다
물어보세요 유형 1 (NF1)은 가장 일반적인 암 predisposition 증후군. NF1 환자 임상 발현의 별자리와 함께 제시 하 고 특정 양성 및 악성 종양 개발의 증가 위험을가지고. 이 질병에서 neurofibromin, Ras에 대 한 단백질 (GAP)을 활성화 하는 GTPase 인코딩 유전자 내의 돌연변이 발생 합니다. 이 단백질의 기능 손실을 타협 Ras 비활성화 탈 선 성장과 확산 신경도가 머리 유래 세포, 그리고 궁극적으로, 종양의 형성에 이르게. N f 1 관련 된 악성 종양의 현재 관리는 방사선, 외과 절단 및 cytotoxic 약물을 포함 한다. 이러한 전략의 제한 된 성공을 드라이브 종양 형성 및 진행 분자 변화를 더욱 명료 하 게 하는 연구원을 자극 했다. 이 논의 어떻게 세포내 신호 분자, 세포 표면 수용 체와 종양 microenvironment 구성 가능한 치료 목표는 뿐만 아니라 다른 인간 암에 n f 1 관련 악성 종양 뿐만 아니라 관련성이 있을 수 있습니다 하는 강조 표시 됩니다.
Epac 랩에 독립적인 ERK1/2 인 산화 HEK293 세포에서 Gs 결합 수용 체 자극에 의해 유도
세로토닌 활성화 Ras 및 Ras 종속 ERK1/2 인 산화에 HEK293 세포 표현 G(s)-알 수 없는 메커니즘을 통해 5-HT(4) 또는 5-HT(7) 세로토닌 수용 체 결합. Ras 종속 ERK1/2 활성화를 위해 모두 Epac/랩 종속 및-독립적인 경로 제안 되었습니다. Epac overexpression 또는 Epac 특정 8-CPT-2'-O-Me-cAMP 랩 활성화에도 불구 하 고 ERK1/2 인 산화를 발생 하지 않았다. 데이터는 PLCepsilon 또는 DAG 종속 Ras Ras 종속 ERK1/2 인 산화에 Ras GRP 가족의 조달에 대 한 역할을 지원 하지 않았다. 그러나, 세로토닌 생 및 재조합 Ras-GRF1, 증가의 인 산화 자극 [Ca(2+)](i) Ca(2+) 및 calmodulin 종속 ERK1/2 인 산화 발생. 다른 신호 전달 경로 G(S)에 의해 쓰일 것-다양 한 격리 HEK293 세포에 수용 체에 결합 하 여.
합성, 생화학, 및 세포의 평가 Farnesyl Monophosphate Prodrugs Farnesyltransferase 억제제로
특정 farnesyl diphosphate (FPP) 유사 체는 잠재적인 항 암 약물 대상 단백질 farnesyltransferase (FTase)의 강력한 저 해제 하지만 이러한 화합물 약물 후보로 적합 하지 않습니다. 따라서, phosphoramidate prodrug 파생 상품 FPP 기반 FTase 저 해제의 monophosphate 유도체의 합성 되었습니다. 스스로 monophosphates Ftase의 해당 FPP 유사 체 보다 훨씬 더 강력한 억제제를 했다. Prodrug 5b의 효과 (3 allylfarnesyl monophosphate의 파생) Rhob의 prenylation와 인간의 악성 schwannoma 셀 라인 (STS-26T)에서 세포 주기 평가. 조합 치료 1-3 microM 5b 플러스로 바 스타 틴 1 microM 유도 된 RhoB prenylation의 중요 한 저해와 1 Microm에서 이러한 약물의 조합 또한 중요 한 세포 주기 G1 체포 결과. 실제로, 조합 낮은 50 Nm로 바 스타 틴,로 바 스타 1 microM 5 c 또는 250 nM 틴 + 50 nM 5 c 높은 cytostatic STS-26T 세포 배양에서 했다.
낮고 무 독성 무기 수은 부담 감소 BCR 중재 신호 변환
유비 쿼터 스 환경 중 금속 오염 물질 수은 (Hg)은 자가 면역 질환에 기여 하는 요인으로 연루 되어 강력한 immunomodulator. 그러나, 그것에 의하여 Hg를 시작 하거나 특히 생화학/분자 수준에서의 면역 응답을 영 속 된 장치를 마더보드에 제대로 이해 남아 있다. 최근 작품 장애인 B 세포 수용 체 (BCR) 신호 강도와 면역 질환 사이의 관계를 설립 했다. 이전 연구에서 우리는 마우스에서 WEHI-231 B 세포 (hg(+2))를 방해 BCR 중재 성장 제어 BCR 신호 강도 hg(+2)에 의해 손상 되었다 제안 무기 수은의 noncytotoxic 농도 나타났습니다. 세포 외 신호 통제 키 니 아 제 (ERK) 1, 2 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 (MAPK)는 B 세포에서 여러 전사 인자를 활성화 합니다. ERK의 인 산화는 BCR의 신호 통합의 필수 노드 역할을 합니다. 따라서 ERK 활성화 진도 BCR 신호 강도 대 한 운영 통계로 사용 됩니다. 서양 blotting 고 인 관련 cytometry를 사용 하 여, 우리는 이제 속도 론 및 ERK MAPK 활성화 BCR 중재의 진도 WEHI-231 셀과 hg(+2)의 낮은 및 nontoxic 부담에 노출 된 지 라 B 셀에 감쇠 현저 하 게 보여줍니다. 그러나, Hg(+2) 업스트림 요소 또는 주요 단백질 티로신 키 니 아 Syk 수준 이상의 BCR 신호 전달 경로의 요소에 오히려 ERK MAPK 있지만 직접 행동 하지 않는 것. 우리의 데이터 hg(+2)의 행동의 사이트에 플라즈마 멤브레인 지역화 아주 잘 수 있습니다 것이 좋습니다. 이러한 연구 결과 자가 면역 질환의 병 인 hg(+2)와 감쇠 BCR 신호 강도 사이의 연결을 지원합니다.
Angiotensin II Ligands E 2.의 붕괴를 방 아 쇠를 키네틱 응답을 증가 하 여 Digoxin 선호도 열에서 나 K Atpase의 차입을 자극
우리는 앞서 쥐 근 tubules angiotensin의 농도와 치료 II (중앙 II) 직접 없음 K ATPase 활동을 자극 하는 변경 것 어떻게 나 K ATPase 이후에 ouabain 선호도 열에서 eluted 관찰 했다. 우리가 테스트 여부를 중앙 II은 차입 ligands E의 붕괴를 방 아 쇠에 대 한 응답 속도 높입니다이 연구 (2)-P, Na-K-Atpase의 또는 이후에 크기를 줄임으로써 기능 특성의 변화를 의미 하는 Na K ATPase 다른 단백질과 상호 작용 하는 방식에 변화를 제안 하는 SDS와 eluted. 우리는 새로운 digoxin 선호도 열과 쥐 AT(1a) 수용 체 coexpress 주머니 쥐 신장 (확인) 셀 소설 줄 고 있는 야생-타입 쥐 알파 (1)-isoform Na K Atpase의 또는 잘림 돌연변이 NH(2) 종착역의 처음 32 아미노산 누락 활용. 우리가 어떻게 쥐 신장 microsomes 바인딩할 digoxin 선호도 열에서 elute 하 고 이기종 수준과 그들이 출시 digoxin ligands E (2)-피 Incubating 확인의 붕괴를 방 아 쇠에 대 한 응답 속도에 시연 세포 중앙 ii 자극 소 야생-타입 쥐 알파 (1)-단위 뒤이어 차입 키네틱 응답 ligands 나중 SDS와 eluted 금액에 영향을 주지 않고 E (2)-P의 충 치 발생을 증가 의해 특징입니다. 반면, 2 차 중앙 자르기 돌연변이의 운동 응답에 영향을 주지 않습니다 했지만 SDS와 eluted 금액 감소. 이러한 데이터 중앙 II 그것의 NH(2) 종점을 포함 한 장치를 마더보드에 의해 Na K Atpase의 상호 다른 단백질의 두 키네틱 속성을 조절 하시기 바랍니다.
물어보세요에 Apoptosis 유도 소설 Farnesyl 전이 억제제로 바 스타 틴의 조합에 의해 1 악성 말 초 신경 칼 집 종양 세포 라인을 입력 합니다
물어보세요 유형 1 (NF1) neurofibromin (Nf) 단백질 기능 손실에 의해 구동 되는 유전 질환 이다. Nf 직접 Ras 신호를 통제 하는 Ras GTPase 활성화 단백질 도메인에 포함 되어 있습니다. 수많은 임상 발현 Nf 및 Ras 활동의 감소와 관련이 있습니다. Ras 단백질 prenylated 트래픽 및 기능적으로 대상 멤브레인과 지역화 해야 합니다. 따라서, Ras NF1 치료에 대 한 잠재적인 치료 대상 이다. 우리는 효능 테스트의 두 소설 farnesyl 전이 억제제 (FTIs), 1과 2를 하거나로 바 스타 틴와 함께 두 NF1 악성 말 초 신경 칼 집 종양 (MPNST)에 셀 라인, NF90 8, ST88-14. 1, 2, 또는 바 스타 틴 단일 치료 했다 Ras prenylation 또는 MPNST 세포 증식에 영향을 주지 않습니다. 그러나, 1 또는 2로 바 스타 틴 (FTI/로 바 스타 틴)와 낮은 micromolar 조합 Ras prenylation에서 MPNST 셀 라인 2 개 감소. 또한,이 FTI/로 바 스타 틴 조합 치료 세포 증식을 감소 하 고 콘텐츠 형태소 분석, procaspase-3/7 정품 인증, 미토 콘 드 리아 멤브레인의 손실과 sub-G(1) DNA와 세포의 축적에 의해 그림과 같이 apoptotic 응답을 유도. 거의 감지할 수 없는 독성 Schwann 세포 FTI/로 바 스타 틴 조합 치료 다음과 정상 쥐에서 관찰 되었다. 이러한 데이터 지원 가설 조합 FTI 플러스로 바 스타 틴 요법 NF1 Mpnsts에 대 한 잠재적인 치료 될 수 있습니다.
P21 활성화 키 니 아 제 1 탈 선 세포 생존 및 Pericellular 베이스에서 인간의 유방암의 Premalignant 진행에 대 한 3 차원 문화 모델을 조정
P21 활성화 키 1 (PAK1)의 overexpression는 인간의 유방암의 진행 하는 동안 발생합니다. 우리 인간의 유 방 상피 세포 라인의 MCF10 시리즈의 premalignant 진행에 pak1의 역할을 조사 했습니다. PAK1 식 및 활성화 수준 premalignant 진행 증가 및 식 음이 지배 (DN) pak1의 감소 세포 증식 및 마이그레이션/침략. 3 차원 (3d) 문화를 오버레이 재구성된 지하실 막 MCF10 시리즈 생산 premalignant 진행을 위한 체 외 모델. MCF10AneoT 셀 일부 spheroids 비정상적인 루멘 개발과 형태 형성. Mcf10입니다.AT1 선 루멘을 형성 하지 않은 비정상적인 팽창이 클러스터의 비정형과 형태학 전시. Mcf10입니다.DCIS 셀 dysplastic 성장 전시. DN-pak1의 식 3D 교양 MCF10A, 식은, AT1 구조, 부분 귀선 premalignant 형의 제안에 루멘 형성을 추진 하지만 AT1 구조의 비정형 신진 또는 ductal 암 종 원래의 구조에서의 dysplastic 성장에 영향을 미치지 않았다. 탈 선 베이스 유 방 암 진행과 침략의 또 다른 중요 한 특징 이다. DN-PAK1 또는 pak1의 노크 다운 pericellular 베이스 DQ 콜라겐 4 3D 문화에의 감소. Rac1의 억제제로 세포의 치료는 또한 pericellular 베이스 줄어들고이 감소 활성화 된 PAK1 식으로 반전 했다. 우리의 결론은 overexpressed 및 활성화 된 pak1의 탈 선 세포 생존 및 유 방 암 진행에 베이스 키 코디 네이 터를 될 수 있습니다.
두 개의 독립적인 NF1 악성 말 초 신경 칼 집 종양 셀 라인 팬 ErbB 억제제 CI-1033으로의 확산의 억제
물어보세요 유형 1 (NF1) neuroectodermal 조직의 비정상적인 증식 및 특정 종양, 특히 neurofibromas는 악성 말 초 신경 칼 집 종양 (MPNSTs)으로 진행 될 수 있습니다의 개발에 의해 특징입니다. N f 1 종양의 치료에 대 한 효과적인 약물 치료는 현재 사용할 수 없습니다 및 MPNSTs 가진 환자에 대 한 예 후 불량 한 것입니다. Neurofibromin의 손실 표 피 성장 인자 수용 체 (EGFR)의 증가 식으로 연관 시키고 ErbB2 tyrosine kinases와 이러한 kinases NF1 종양 관련 pathologies vivo에서 홍보 표시 되었습니다. 우리가 보여 여기 NF1 MPNST 셀 EGFR 식 상부는 EGF NF1 MPNST 셀 라인에 비해 더 민감한 동안 선택적으로 n f 1 MPNST 세포 증식을 억제 하는 EGFR 억제제 gefitinib의 기능 한계입니다. 우리는 또한 NF1 MPNST 확산 활성화 Erbb2과 연관 시키고 팬 ErbB 억제제 CI-1033 (canertinib)의 nanomolar 농도 의해 억제 될 수를 보여줍니다. 따라서 EGFR Erbb2를 타겟팅 vivo에서 n f 1 MPNST 종양 성장 억제를 위한 효과적인 전략을 증명할 수 있습니다.
E Cadherin 셀 접합 복원 모두 전자 Cadherin 표현의 Ras 변형 유 방 상피 세포에서 ERK 지도 키 니 아 제 활성화의 억제 필요합니다
E cadherin 정상적인 유 방 상피 세포 형태를 유지 하는 주 역할 셀 접착 접합부의 주요 구성 요소입니다. 유 방 및 Ras의 활동을 규제 하는 다른 암 종종 다운 또는 mislocalized 전자 cadherin 표현을 발견. E cadherin 접합의 파괴와 운동 성 세포의 필연적인 이득 상피 대 엽 전환 (응급)로 알려진 프로세스에 기여. 적용 전자 cadherin 식이나 Ras 신호 변환 통로의 억제 효과가 여러 oncogene 변형 및 암 파생 셀 라인에서 귀선 응급의 원인에 표시 되었습니다. 이 연구에서는 우리가 MCF10A 인간 유 방 상피 세포 및 Ras 구동 신호 통로의 저해에 의해 활성화 된 h 조-Ras 또는 N Ras 응급 복구에 대 한 테스트를 변형 된 파생 상품 조사. 우리의 결과 시연 저해 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 (MAPK) 니, 하지만 하지 PI3 kinase, Rac, 또는 myosin 빛 체인 니 완전히 전자 cadherin 셀 접합 및 적당 한 h 조-라스 식 셀 라인에서 상피 형태학을 복구할 수 있었다. MCF10A 셀 활성화 된 h 조-Ras 또는 N Ras의 고급 식으로 변형, 전자 cadherin 접합 복원 전자 cadherin 적용된 reexpression와 MAPK kinase의 억제를 모두 필요 합니다. E cadherin 혼자의 적용된 식 엽 형에서 귀선을 유도 하지 않았다. 우리의 결과 Ras 변환 전자 cadherin 접합 중단, 두 mislocalization E-cadherin 표면과 깊은 셀 외부로 발생 효과 감소 전자 cadherin 식 두 개 이상의 독립적인 작업에는 것이 좋습니다.
협력: Farnesyl 전이 억제제와 스타 틴 단백질 Prenylation를 차단 합니다
Farnesyl 전이 억제제 (FTIs)는 지금까지 임상 실험에서 단일 에이전트로 값 제한을 입증 했다. 이 PharmSight anti-hypercholesterolemic 에이전트 또한 단백질 prenylation를 차단 하는 "스타 틴" 클래스와 함께에서 사용 될 때 체 외에서 가장 효과적인 Ftis의 새로운 그룹의 사용에 초점을 것입니다. 우리는 최근 이러한 소설 Ftis로 바 스타 틴과 함께에서 Ras prenylation 줄이고 유도 악성 말 초 신경 칼 집 셀에서 apoptotic 응답을 보였다. 이러한 새로운 Ftis와 함께 스타 틴의 조합 다양 한 종양 및 기타 증식 질환에 대 한 심오한 시너지 cytostatic 및 cytotoxic 효과 생성할 수 있습니다. 이후 병원에서 스타 틴을 용납 잘 조합 이렇게 in vivo 모델에서 테스트 해야 하는 것이 좋습니다.
N-Ras에서 Neurofibromin 역할 중재 악성 말 초 신경 칼 집 종양에 AP-1 규정
Plexiform neurofibromas Neurofibromatosis 유형 I (NF1) 악성 말 초 신경 칼 집 종양 (MPNST)으로 변형 되 고의 5% 위험을가지고 있는 환자에서 일반적으로 발견 된다. Ras GTPase 활성 단백질 (RasGAP) 및 Ras의 부정적인 레 귤 레이 터는, neurofibromin의 NF1 유전자 코딩 번째 돌연변이 Ras 통로의 upregulation 발생. 우리 neurofibromin 결핍과 NF1 야생 타입 MPNST 셀 라인, STS-26t의 Sirna를 사용 하는 n f 1 표현의 그 최저의 시연 함으로써 MPNST 환자에서 셀 라인에서 Ras의 다운스트림 이펙터 간의 직접 연결 Ras/ERK1 2 통로 활성화 하 고 AP 1 바인딩과 활동 증가 설립. 우리는 이것이 처음으로 AP-1 transactivation neurofibromin 결핍 질병 관련 MPNST 셀 라인에 직접 연결 되어 있습니다 믿습니다. 이전에, 우리 N Ras constitutively NF1 환자에서 독립적인 Mpnsts에서 파생 된 셀 라인에서 활성화 된 것으로 나타났습니다. 우리는 따라서 AP 1 transcriptional 활동 deregulating에 N Ras 통로의 역할을 분석 하고자 했다. 우리는 STS-26T 클론 증가 조건에 따라 표현 금하는 N Ras 쇼 ERK1, 2, phosphorylated JNK 식 AP 1 활동 증가 수 반하는 phosphorylated 보여줍니다. 지도 키 니 아 제 경로 (ERK1, 2와 JNK) ST88-14, neurofibromin 불충분 한 MPNST 셀 라인에서에서 추가 조사 했다. 기저 활동 ERK1의 2만 아니라 JNK AP 1 활동 증가를 발견 했다. 이러한 실험은 더욱더 neurofibromin 손실과 Ras/지도 키 니 아 제 통로의 활동 증가 NF1 환자에서 Mpnsts에서 다운스트림 transcriptional 메커니즘 활성화 사이의 연결을 확인 했다.
인간의 유방암의 3 차원 오버레이 문화 모델 공개 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 키 니 아 제 억제제에 대 한 중요 한 감도
3 차원 (3D) 세포 배양에서 성장 종양 세포 cytotoxic 마약 기존의 2 차원 (2D) 문화에 그들의 반응에 비해 상대 저항을 전시 한다. 우리과 변종 (MCF10 dysplastic/암 형을 통해 정상 상피 (MCF10A 셀 모델링)에서 진행을 나타내는 인간 유 방 세포 라인의 2D 및 3D 문화에 대상된 에이전트와 독 소 루비의 효과 연구.DCIS 셀), 변종 표현에 의해 변형 Ras를 활성화 하 고 또한 하위 형식 기저 유 방 암 세포 라인 (MDA-MB-231). 결과 암 모델에서 보다 비 정상적인 세포에 더 큰 저항과 3D 문화 cytotoxic 에이전트 독 소 루비를 예상된 상대 저항을 보였다. 그러나, 타겟된 억제제에 대 한 응답이 더 복잡 했다. 억제 물질 활성화 한 단백질 키 니 아 제 키 (MEK) 1,4-diamino-2,3-dicyano-1,4-bis (methylthio) 부 타 디 엔 (U0126) 또는 2-(2-chloro-4-iodo-phenylamino)-N-cyclopropylmethoxy-3,4-difluoro-benzamide (CI-1040, PD184352)의 생산 유사한 차원에서 모든 MCF10 셀 라인의 성장 억제. 3D 문화에서 일반 모델과 비 암 모델 되었다 MEK 저해에 훨씬 더 민감한 반면 일부 저항 전시. MEK 저해를 증가 감도 또한 MDA-MB-231 셀 3d 2d에 비해 성장에 보였다. 반면, wortmannin, phosphatidylinositol 3'-니 활동의 저해가 했다 2D 또는 3d에 있는 세포의 성장에 중요 한 영향을 주지 않습니다. 우리의 결론은 그 3D 문화 모델 수만 모델링 하지 cytotoxic 치료 종양 세포의 상대적 저항 뿐만 아니라 그 운전 금하는 경로 효과적인 치료 방법을 수 있는 중요 한 대상된 억제제 3D 접근을 보다 잘 식별할 수 있습니다.
로 바 스타 틴과 함께에서 소설 Geranylgeranyl 전이 억제제 확산을 억제 하 고 STS-26T MPNST 세포의 Autophagy 유도
Prenylation 저 해제는 암에 대 한 잠재적인 치료 학으로 증가 관심을 얻고 있다. 초기 작품 farnesylation, 억제제에 초점을 하지만 더 최근에 geranylgeranyl 전이 억제제 (GGTIs) 그들의 잠재적인 antitumor 활동 생체 외 및 생체 조건에 대 한 평가를 시작 했습니다. 이 연구, nonpeptidomimetic GGTI, GGTI-2Z [(5-nitrofuran-2-yl)methyl-(2Z,6E,10E)-3,7,11,15-tetramethylhexadeca-2,6,10,14-tetraenyl 4 chlorobutyl (메 틸) phosphoramidate]로 바 스타 틴과 함께에서 하는 geranylgeranyl 전이 억제 되 나 개발 했습니다 난 (GGTase I)와 GGTase II/RabGGTase, farnesylation를 영향을 주지 않고. G(0)/G(1) 체포와 시너지 교양된 STS-26T 악성 말 초 신경 칼 집 종양 세포의 증식 억제에 조합 치료 결과. 우리 또한 조합에서 약의 antiproliferative 활동 autophagy의 컨텍스트에서 발생 합니다 보여 줍니다. 조합 치료에는 mcf10에서 autophagy 유도 한다.DCIS 모델 인간의 유 방 ductal 암 제자리의 그리고 1c1c7 murine은 셀, 그것 또한 확산을 감소. 같은 시간에 정상적인 불멸 하 게 Schwann 세포에서 감지할 수 없는 독성이 있다. 이러한 연구 GGTI-2Z autophagy의 유도 포함 하는 새로운 메커니즘을 통해 작동 될 수 있습니다 그리고로 바 스타 틴과 함께, antitumor 치료 학의이 클래스에 더 효과적인 전략을 개발 하기 위한 귀중 한 패러다임 될 수 있는 소설 geranylgeranyl 인산 파생 확립.
Farnesyl 전이 억제제와로 바 스타 틴에 의해 유도 된 중단된 Autophagy와 Nonapoptotic 죽음
노출 인간의 악성 말 초 신경의 종양 세포 선을 STS-26T, ST88-14, 및 NF90-8로 바 스타 틴 및 farnesyl 전이 억제제 (FTI)-1의 nanomolar 농도를 칼 집만 혼자 어느 약물을 세포 죽음을 유도. ST88 및 NF90-8 셀 받았다 apoptosis, 아직 하지 않았다 STS-26T 셀 죽어. FTI 1 cotreatment microtubule 관련 단백질-1 빛 체인 3 (LC3)의 분석에 의해 표시 된 대로 강력 하 고 지속적인 autophagic 응답 유도-STS-26T 문화에서 II 축적. LC3 양성 punctate 관광 명소의 광범위 한 colocalization 리소좀 관련 막 단백질 (램프)-1 및 램프-2 (후반 endosomes/리소좀의 마커) 용 매에서 관찰 되었다 또는 FTI 1 또는 바 스타 틴 치료 STS-26T 하지만 거의 colocalization로 바 스타 틴/FTI 1 cotreated 문화에 문화. 램프 2 식의 손실와 상관 cotreatment 프로토콜에 colocalization의 부재. Autophagic 플럭스 연구는로 바 스타 틴/FTI-1 cotreatment 저해 autophagic 프로그램 완료 표시. 반면, rapamycin cytostasis 하지만 생존 능력의 유지 관리와 관련 되었다 autophagic 응답을 유도. 이러한 연구 나타냅니다 STS-26T 셀으로 바 스타 틴의 그 cotreatment FTI 1는 조산 autophagic 프로그램 및 nonapoptotic 세포 죽음을 유도 하 고 있습니다.
Ser-11/Ser-18과 Ser-938 Angiotensin II 종속 인 산화는 E2 Conformations의 쥐 신장 Na, K ATPase 이동
신장 플라즈마 세포 막, Na, K Atpase의 단일 a-1 isoform를 포함 하는 동시에 EP2의 Na와 ATP 릴리스 digoxin의 그들의 비율에의 서로 다른 두 개의 sub-conformations를 포함 합니다. 어떻게든 angiotensin II (중앙 II)와 세포 치료 차동 digoxin 출시 속도 억제 하기 때문에 양쪽의 나 란 변경. 우리 중앙 II 출시 Ser-11/Ser-18과 Ser-938 인 산화를 증가 시켜 조절 하는 경우 테스트 합니다. 주머니 쥐의 신장 세포 AT1a 수용 체 및 중 알파-1.wild 형, 알파-1 co-expressing.S11A/S18A 또는 알파-1.S938A 세 사이트에서 인 산화 증가 치료 ± 10 nM 중앙 II 5 분 했다. Na, K ATPase Na, ATP, 그리고 마그네슘의 존재 digoxin 선호도 열에 바인딩 되었습니다. 30 MM NaCl 및 3mm ATP를 포함 하는 솔루션 eluted 바운드 치료 Na, K ATPase (인구 #1)의 ~ 20%. 셀 리안 ii 전처리 인구 #1 알파 1.wild 유형 및 알파 1의 차입 둔화.S938A, 하지만 알파-1.S11A/S18A 셀입니다. 바운드 Na, K ATPase (인구 #2)의 또 다른 50%는 이후에 150 mM NaCl 및 3mm ATP를 포함 하는 솔루션으로 두 단계로 eluted 됩니다. 앙 II 초기 속도 증가 하 고 알파 1.wild 타입, 하지만 하지-1 두 번째 단계를 둔화.S938A 셀입니다. 따라서, 2 차 중앙 차동 인 산화를 통해 두 가지 형태의 EP2 나 란 변경.
