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Articles by Sabarish V. Indran in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Mediante genética inversa para manipular el gen de Sociedades Nacionales del virus de la fiebre de Rift Valley MP-12 Cepa para mejorar la seguridad de la vacuna y la eficacia
Department of Pathology, University of Texas Medical Branch
A la inversa sistema de genética de la cepa del virus de la fiebre del Valle del Rift MP-12 vacuna es una herramienta útil para la creación de nuevas MP-12 mutantes con mayor atenuación e inmunogenicidad. Se describe el protocolo para la generación y caracterización de cepas mutantes Sociedades Nacionales.
Other articles by Sabarish V. Indran on PubMed
Bicaudal D1-dependiente Trata De Citomegalovirus Humano Tegumento Proteína Pp150 En Células Infectadas Por Virus
Asamblea de virión humana del citomegalovirus (HCMV) ocurre en el núcleo y el citoplasma de las células infectadas. El HCMV virion tegumento proteína pp150 (ppUL32) es una proteína esencial de HCMV y ha sugerido a desempeñar un papel en la fase citoplásmica de Asamblea HCMV. Para definir su papel en el ensamblaje viral e identificar proteínas de la célula huésped que interactúan con pp150 durante el ensamblaje viral, se utilizaron el análisis de dos híbridos de levadura para detectar una interacción entre pp150 y Bicaudal D1 (BicD1), una proteína se piensa para desempeñar un papel en el tráfico en la vía secretora. BicD1 se sabe que interactúan con el motor de la dineína complejo y la GTPasa de Rab6. La interacción entre pp150 y BicD1 fue confirmada por coimmunoprecipitation y fluorescencia de resonancia la transferencia de energía. Agotamiento de BicD1 con short hairpin RNA (shRNA) causada virus menor rendimiento y un defecto en el tráfico de pp150 del compartimiento de ensamblaje viral citoplásmica (AC), sin alterar el tráfico a la AC de otra proteína esencial del tegumento, pp28 o el complejo de la glicoproteína viral gM/GN La terminal C de BicD1 ha demostrado previamente para interactuar con el GTPase Rab6, sugiriendo un papel potencial para el tráfico vesicular Rab6-mediada en Asamblea HCMV. Finalmente, la sobreexpresión de N terminal de BicD1 truncado actúa de una manera dominante negativo y conduce a la interrupción de la AC y una disminución en la Asamblea de virus infeccioso. Este fenotipo era similar a la que observado siguiente la sobreexpresión de dynamitin (p50) y proporciona evidencia adicional morfogénesis de la Asamblea de AC y virus eran dependientes dineína.
Un Papel Para El Pequeño GTPase Rab6 En Asamblea Del Citomegalovirus Humano
En humanos-citomegalovirus (HCMV)-células infectadas, la localización de la proteína viral pp150 del compartimiento de la Asamblea de virus (AC) depende de su interacción directa con la proteína celular Bicaudal D1 a través de un mecanismo dependiente de microtúbulos y dineína. Descubrimos que el pequeño que GTPase Rab6 también interactúa indirectamente con pp150 a través de su interacción con Bicaudal D1. Inhibición de la actividad Rab6 en células infectadas HCMV había interrumpido el tráfico intracelular de pp150, reduciendo significativamente la producción de virus infeccioso sin afectar a la formación de la CA, reclaman una función importante para este celular GTPasa en la localización intracelular de pp150 durante el ensamblaje del virus.
