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Articles by Sherree L. Friend in JoVE
JoVE Bioengineering
Analyser l'internalisation cellulaire de nanoparticules et de bactéries multi-spectrale par cytométrie de flux d'imagerie
1Department of Veterinary Microbiology and Preventive Medicine, Iowa State University, 2Amnis Corporation, 3Department of Chemical and Biological Engineering, Iowa State University
Dans cet article, nous décrivons une méthode utilisant multi-spectrale cytométrie de flux d'imagerie pour quantifier l'internalisation des nanoparticules ou des bactéries polyanhydride par des cellules RAW 264.7.
Other articles by Sherree L. Friend on PubMed
MiR-451 Protège Contre Le Stress Oxydant érythroïdes En Réprimant 14-3-3zeta
Le locus bicistronique microARN (miARN) miR-144/451 fortement exprimée au cours du développement de l'érythrocyte, bien que ses rôles physiologiques sont mal compris. Nous montrons que l'ablation miR-144/451 chez les souris causes érythrocytaire légère instabilité et une susceptibilité accrue aux dommages après l'exposition aux médicaments oxydants. Ce phénotype est profondément conservé, comme l'appauvrissement de miR-451 assortie au stress oxydant pour provoquer une anémie profonde dans des embryons de poisson-zèbre. Au moins certaines activités de protection de miR-451 proviennent de sa capacité à supprimer directement la production de 14-3-3zeta, une protéine de liaison phospho-sérine/thréonine qui inhibe l'accumulation nucléaire de facteur de transcription FoxO3, un régulateur positif de gènes anti-oxydant érythroïdes. Ainsi, dans les érythroblastes miR-144/451(-/-), 14-3-3zeta s'accumule, causant relocalisation partielle du FoxO3 du noyau au cytoplasme avec atténuation pour son programme transcriptionnel, y compris les gènes anti-antioxydants-encodage Cat et prise en charge Gpx1. ce mécanisme, la surexpression de 14-3-3zeta dans les fibroblastes et les cellules érythroïdes inhibe la localisation nucléaire et l'activité de FoxO3. En outre, shARN suppression du 14-3-3zeta protège érythrocytes miR-144/451(-/-) contre la destruction induite par le peroxyde et restaure l'activité de la catalase. Nos résultats définissent une nouvelle voie de miRNA réglementés qui protège contre le stress oxydant, les érythrocytes et illustrent de manière plus générale, comment un miRNA peut influencer l'expression des gènes en modifiant l'activité d'un facteur de transcription clé.
Concentrations De Protéines De Phase Aiguë Chez Les Chiens Atteints De Maladies Nasales
Les concentrations de protéine C - réactive (CRP), amyloïde sérique A, l'haptoglobine (Hp) et α 1-glycoprotéine acide ont été mesurées chez les chiens présentant des signes cliniques de maladie nasale et comparées à ceux des chiens en santé afin de déterminer l'expression de ces protéines en cas de maladie canine de nasale. Une différence significative (P < 0,001) entre le groupe symptomatique et le contrôle de groupe a été trouvé pour la CRP et Hp. Parmi les animaux avec la maladie nasale, une importante différence intergroupe (P < 0,05) a été trouvé dans l'expression de Hp entre chiens avec l'aspergillose et ceux atteints de rhinite chronique.
Développement D'anticorps Monoclonaux Recombinant Terrelysin Et Caractérisation D'expression Chez Aspergillus Terreus
Aspergillus terreus est un pathogène émergent qui affecte principalement les patients immunodéprimés atteints d'infections qui sont souvent difficiles à gérer de façon thérapeutique. Stratégies de diagnostic actuels se limitent à la détection de la croissance fongique, à l'aide de méthodes radiologiques ou biopsie qui souvent ne permet pas d'identification propres à chaque espèce. En conséquence, il y a un besoin crucial pour les techniques de diagnostic permettre l'identification précoce et spécifique de l'agent causal. Dans cette étude, nous décrivons les anticorps monoclonaux (ACM) mis au point pour un terrelysin recombinant précédemment décrite. Seize hybridomes de différents isotypes IgG ont été générées pour la protéine recombinante, dont sept ont démontré de réactivité à la protéine native dans les extraits des hyphes. Réactivité croisée analyse utilisant des hyphes extrait de 29 espèces de champignons, dont 12 espèces d'Aspergillus et 5 différentes souches d'a. terreus a montré que 3 mAbs (13 G 10, 15B5 et 10 4) étaient a. terreus spécifiques. Analyse de l'épitope démontré mAbs 13 G 10 et 10 4 reconnaissent le même épitope 'PSNEFE', tandis que mAb 15B5 reconnu l'épitope 'LYEGQFHS'. Temps parcours études ont montré que terrelysin expression était plus élevée pendant le début de la croissance des hyphes et considérablement réduit après l'expansion de mycélium. Immunolocalisation études ont montré que terrelysin est localisée non seulement au sein du cytoplasme des hyphes mais semblait être plus abondant à la pointe des hyphes. Ces résultats ont été confirmés dans les cultures à température ambiante, ainsi qu'à 37 ° C. En outre, terrelysin a été détectée dans le surnageant des cultures a. terreus. Ces observations suggèrent que terrelysin peut être un biomarqueur candidat pour l'infection par a. terreus.
Anticorps Monoclonaux Aux Antigènes Exogènes Des Hyphes Dérivé De L'agent Pathogène Opportuniste Aspergillus Terreus
Aspergillus terreus a été difficile d'identifier dans le cas d'aspergillose et identification clinique a été limitée à l'identification large des lésions d'aspergillose dans les organes affectés ou la détection des hydrates de carbone fongiques. En conséquence, il y a un besoin clinique afin d'identifier des biomarqueurs spécifiques qui peuvent servir à détecter la maladie invasive a. terreus. Anticorps monoclonaux (ACM) ont été mis au point une préparation partiellement purifiée de cytolytique antigènes des hyphes exogènes (HEA) dérivé du surnageant de culture d'a. terreus (CSN). Vingt-trois des isotypes IgG1 ACM murins ont été conçus et testés pour la réactivité croisée contre les extraits d'hyphes de 54 espèces fongiques. Seize MAbs se sont avérées être spécifique pour a. terreus. HEA ont été détectés dans les conidies, les hyphes et CSN d'a. terreus. HEA ont été exprimés en grande quantité dans les hyphes au cours des premiers stades de croissance d'a. terreus à 37 ° C, alors que la température ambiante l'expression de HEA a atteint un sommet de 4 à 5 jours. Cinétique d'expression de la HEA en CSN a montré un décalage, avec des sommets aux périodes ultérieures à température ambiante et à 37 ° C que dans les extraits d'hyphes. Sérum de fortification des expériences ont démontré que des composants de sérum humain n'inhibent pas la détection des épitopes HEA par MAb enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Immunoprécipitation et proteomic analyses ont démontré que 13E11 MAbs et 12 4 immunoprécipitée une aminopeptidase putatif leucine indéterminé (Q0CAZ7), tandis que MAb 19B2 reconnu un putatif dipeptidyl peptidase V (DPP5). À l'aide de confocal laser scanning microscopy des études ont montré que l'indéterminé leucine aminopeptidase est surtout localisée aux structures de la matrice extracellulaire, tandis que la dipeptidyl peptidase V se limitait principalement vers le cytoplasme.
Les Gènes Prédictifs Dans Le Tissu Sain Voisin Sont Préférentiellement Altérée Par SCNV Pendant Tumorigenèse Dans Le Cancer Du Foie Et Peut Limitation De Débit
En carcinome hépatocellulaire (CHC) gènes prédictifs de la survie ont été trouvés dans les deux normal adjacent (AN) et tumorales (TU) les tissus. Les relations entre ces deux ensembles de gènes prédictifs et le processus général de la tumorigenèse et progression de la maladie reste incertaine.
Séquentiel Transfert énergie Et électrons Dans Des Tableaux Axés Sur Les Polyisocyanopeptide Multichromophoric
Nous rapportons la synthèse et l'étude détaillée de photo-physique de quatre modèle chromophore côté chaîne polyisocyanopeptides : deux homopolymères de platine-porphyrine fonctionnalisés polyisocyanopeptides (Pt-porphyrine-PIC) et polyisocyanopeptides perylene-bis(dicarboximide) fonctionnalisés (PDI-PIC) et deux copolymères statistiques avec différentes proportions de molécules Pt-porphyrine et PDI, attachés à un squelette rigide, hélice polyisocyanopeptide. (1)H RMN et mesures de dichroïsme circulaire confirment que nos composés modèles conservent une architecture chirale en présence du chromophores. La combinaison du chromophores Pt-porphyrine et PDI permet le transfert de charge et/ou l'énergie se produise. Nous observons les voies d'excitation et de relaxation pour l'excitation sélective du chromophores PDI et Pt-porphyrine. Des études d'absorption de photoluminescence et transitoires sur la nanoseconde et picoseconde échelles lors de l'excitation du chromophores Pt-porphyrine dans nos assemblées multichromophoric spectacle des caractéristiques photophysiques similaires à ceux des monomères Pt-porphyrine. En revanche, excitation des résultats du chromophores pérylène dans une série d'énergie et les frais de transfert des processus avec les Pt-porphyrine groupe et formes supplémentaires de transfert de charge États, qui se comportent comme un état intermédiaire qui facilite le couplage électronique dans ces systèmes multichromophoric.
-Papier Microfluidique Onde Acoustique De Surface échantillon Livraison Et Ionisation Source Pour Spectrométrie De Masse Ambiante Rapide Et Sensible
On décrit une méthode de livraison et d'ionisation des surface échantillon onde acoustique qui nécessite peu ou aucun prétraitement de l'échantillon et qui peut fonctionner dans des conditions ambiantes. Cette technologie miniaturisée permet une analyse en temps réel, rapide et haut débit de composés de trace dans des mélanges complexes, particulièrement haute force ionique et échantillons visqueux qui peuvent être difficile pour les techniques d'ionisation classiques tels que l'ionisation par électronébulisation. Cette technique tire parti des ondes acoustiques de surface ordre élevé (SAW) les vibrations que les deux manipulent de petits volumes de mélanges liquides contenant trace analyte composés et parfaitement transfère des analytes de l'échantillon liquide en ions phase gaz pour l'analyse de spectrométrie de masse (MS). Drogues dans le sang total humain et du plasma et métaux lourds dans l'eau du robinet ont été détectés avec succès à des concentrations nanomolaires par un appareil de vaporisation et ionisation de scie de couplage avec un système de livraison des échantillons peu coûteux, sur support papier et le spectromètre de masse. L'unité d'ionisation scie miniaturisée exige seulement une modeste puissance de fonctionnement de 3 à 4 W et, donc, fournit une plate-forme d'ionisation viable et efficace pour l'analyse en temps réel d'une large gamme de composés.
Le Rôle De La Conduite De L'énergie Et Les États Délocalisées Pour La Séparation De Charge Dans Les Semi-conducteurs Organiques
La paire électron-trou créé par absorption de photons dans les systèmes organiques photoconversion doit surmonter l'attraction de Coulomb pour obtenir la séparation de charge à long terme. Nous montrons que ce processus est facilité par la formation de excités, les états de la bande délocalisés. Dans nos expériences sur des cellules photovoltaïques organiques, ces Etats ont été consultés pendant une courte période (<1 ps) par infrarouge excitation optique de paires électron-trou liés à l'hétérojonction. Modélisation atomistique a montré que les photons infrarouges promouvoir paires de charges liées à des états de la bande délocalisés, semblable à ceux qui sont formés juste après dissociation des excitons singulet, ce qui indique que cette loi stipule que la porte d'entrée pour la séparation de charge. Nos résultats suggèrent que la séparation de charge dans des systèmes efficaces de photoconversion organiques se fait par délocalisation de la charge à chaud à l'état plutôt que de l'énergie axée sur gradient intermoléculaire saut.
Sur Le Rôle De Regiodefects Unique Et Polydispersité En Semi REGIOREGULIERS : Défaut De Distribution, La Synthèse Des Chaînes Sans Défaut Et Un Modèle Simple Pour La Détermination De Cristallinité
Identifier la formation des structures dans des polymères conjugués semi-cristallin est la base fondamentale pour comprendre les processus électroniques dans ces matériaux. Bien que les corrélations entre les propriétés physiques, formation des structures et des paramètres de périphérique de REGIOREGULIERS, semi-cristallin semi (P3HT) ont été établies, il est resté difficile de démêler l'influence de régiorégularité polydispersité et poids moléculaire. Nous démontrons que le protocole synthétique plus couramment utilisé pour la synthèse de P3HT, la vie Kumada catalyseur transfert polycondensation (KCTP) avec Ni(dppp)Cl(2) comme catalyseur, conduit à REGIOREGULIERS chaînes avec un défaut de queue à queue unique (TT) réparti sur l'ensemble de la chaîne, contrairement à l'emplacement exclusif supposé jusqu'ici à la fin de la chaîne. Simulation et analyse NMR du groupe est utilisées pour quantifier cet effet. Une série entièrement exempt de matières P3HT avec différents poids moléculaires est synthétisée par les initiateurs de la nouvelle, solubles de nickel. Données sur la formation des structures en P3HT sans défaut, comme élucidé par diverses expériences calorimétriques et diffusion, permettent le développement d'un modèle simple pour estimer le degré de cristallinité. Nous trouvons très bon accord pour prédites et déterminés expérimentalement degrés de crystallinities atteindre ∼70 %. Pour le Ni (dppp) Cl (2)-initiés chaînes comprenant un distribué unité TT, la comparaison des crystallinities simulés avec mesures calorimétriques et optiques suggère fortement l'intégration de l'unité de TT dans le réseau cristallin, qui s'accompagne d'une augmentation de torsion de la colonne vertébrale. Polydispersité est identifiée comme un paramètre majeur déterminant la cristallinité dans la fourchette de poids moléculaire étudiée. Nous pensons que l'approche présentée et les résultats non seulement aidé à comprendre la formation des structures dans le P3HT mais sont généralement applicables aux autres polymères conjugués semi-cristallin ainsi.
