Translate this page to:
Chinese
In JoVE (2)
Other Publications (19)
- Thyroid : Official Journal of the American Thyroid Association
- Cancer Gene Therapy
- Cancer Gene Therapy
- Endocrinology
- Endocrinology
- American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology
- Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
- Clinical Endocrinology
- Endocrinology
- Radiology
- PloS One
- Analytical Chemistry
- Journal of Nuclear Medicine : Official Publication, Society of Nuclear Medicine
- Molecular Cancer Therapeutics
- Genetic Testing and Molecular Biomarkers
- Endocrinology
- Pituitary
- Clinical Cancer Research : an Official Journal of the American Association for Cancer Research
- Journal of the American Chemical Society
Automatic Translation
This translation into Chinese was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Shey-Cherng Tzou in JoVE
JoVE Immunology and Infection
鼠标垂体免疫原的制备诱导实验性自身免疫性垂体炎
Department of Pathology, The Johns Hopkins University
可以复制自身免疫性垂体炎在小鼠体内，小鼠垂体蛋白提取物注射。
JoVE Immunology and Infection
SJL小鼠诱导实验性自身免疫性垂体炎
Department of Pathology, The Johns Hopkins University
该视频演示了如何诱导自身免疫性垂体炎SJL小鼠，以及如何组织病理学来评估其严重性。
Other articles by Shey-Cherng Tzou on PubMed
研究小鼠甲状腺炎： 从流式细胞器官的新见解。
自身免疫性疾病的发病机制是经常研究小鼠模型，其中疾病结果传统上由光镜评估。若要确定是否数字成像技术提高了可靠性的病理学评估，和流式细胞术是否适用直接对小鼠甲状腺，我们研究了 395 CBA/J 小鼠 3 周后甲状腺球蛋白免疫和 192 接种 CBA/J 小鼠。数字成像大大改善组织病理学评估的可靠性 (r = 0.988，95%的置信区间： 0.980-0.992，p < 0.0001），和流式细胞术对小鼠甲状腺可能已成功执行。我们还发现正常甲状腺所载比预期的高数的造血细胞间质中。我们建议数字成像技术提供了更好的方法，估计疾病的结果，和那流式细胞术在目标器官水平执行比在外周淋巴器官上时执行更密切地反映自身免疫发病机制。这些方法还应适用于其它器官系统自身免疫性的攻击，如心、 外分泌和其他内分泌的对象。
嵌合抗 CD3 受体对哺乳动物细胞的抗肿瘤免疫刺激的稳定表达。
CD80 或 CD86 肿瘤细胞共刺激分子的表达可以产生排斥反应的免疫原性，但不是很差的免疫原性肿瘤。我们先前已表明抗 CD3 单链抗体的细胞表面上表示可以直接激活 T 细胞。因此，我们调查是否抗 CD3"受体"可以提高 CD86 介导排斥反应的低免疫原性肿瘤。抗 CD3 细胞受体的表达增加了膜近端"分隔"域包含单链抗体和嵌合体受体跨膜域之间的糖基化网站的介绍。糖基化位点的垫片清除减少由于增加脱落的细胞表面受嵌合体表面表达。诱导的 T 细胞增殖的抗 CD3 受体表达水平的嵌合蛋白，并不相关，而是取决于垫片的物理性能。抗 CD3 受体有效诱导细胞毒性 T 细胞，而与 CD80 或 CD86 共表达是需要生成 T 细胞增殖和分泌白细胞介素-2。虽然 CD86 的表达没有不大大拖延 B16 F1 低免疫原性肿瘤生长，抗 CD3 受体与 CD86 的表达产生 50%的小鼠和野生型 B16 F1 肿瘤细胞诱导重要防护完整肿瘤被拒。我们的研究结果显示分隔域可以极大地影响表面表达和嵌合抗体受体的生物活性。抗 CD3 受体产生强烈的抗肿瘤活性和 CD86 对肿瘤细胞表明这种战略可能有益基因介导低免疫原性肿瘤的治疗。
半抗原定向靶向受体单链抗体。
人工重组受体可用于有选择地针对成像和治疗剂对基因表达的站点。若要评估这种做法，我们开发转基因高度在单元格上表达单链抗体 (抗体) 半抗原 4-ethoxymethylene-2-phenyl-2-oxazoline-5-one (phOx)。PhOx 酶共轭创建通过共价键附加 phOx 分子聚乙二醇 (PEG)-修改病理性。表示 phOx 单链抗体，但不是控制单链抗体受体的细胞有选择性地被杀后暴露于 ss 酶与 phOx 和 PEG (phOx-β G-PEG) 和葡糖苷酸药物前体葡糖苷酸 (p-羟基苯胺芥末 β-D-结合，HAMG） 的 p-苯胺芥末衍生化。有针对性地的激活的 HAMG 制作旁观者的混合人群包含少则 10 %phox 受体阳性细胞中的受体阴性细胞杀死。B16 F1 黑色素瘤肿瘤在体内稳定表示了功能性 phOx 单链抗体受体。治疗的小鼠建立 phOx beta G-聚乙二醇与 HAMG phOx 受体阳性肿瘤显著 (P < 或 =.0005) 抑制肿瘤生长与 β G 聚乙二醇和 HAMG 或前体药物单独治疗。phOx 是血清，暗示替代半抗原可能更适合体内的应用程序不稳定。我们的研究结果显示治疗剂可以针对人工半抗原受体在体外和体内。人工目标细胞受体的表达可能允许治疗或成像分子到站点的转基因表达的优惠传递。
甲状腺类二、 主要组织相容性复杂分子的表达不会导致自发性甲状腺炎，但轻度增加其严重性后免疫接种。
类二、 主要组织相容性复合 (MHC) 分子经典表达抗原递呈细胞造血沿袭的上皮细胞与自体免疫也描述了。在这方面，但是，它仍然值得商榷类二 MHC 分子是否启动事件或而是自身免疫性攻击的后果。此外上, 皮类二表达自身免疫性的攻击开始后的作用是未知的。我们生成反式激活类二因子，主调节器类二 MHC 途径中的所有基因的表达在甲状腺滤泡细胞转基因小鼠。研究使用队列的 245 CBA/J 小鼠 (野生型和 118 127 转基因），两者在基底条件 (n = 63) 和鼠标甲状腺球蛋白免疫后不同时间点 (n = 182)。在基底条件下，转基因小鼠类似于野生型控件，没有发展自发的自身免疫性甲状腺炎，尽管对甲状腺细胞类二 MHC 分子的异常表达。经过免疫的甲状腺炎是 8%在转基因控件 （95%置信区间从 1.8 13.4%； 比任何时候都更严重P = 0.033)，特别是在疾病的华丽阶段。这些研究结果表明类二 MHC 分子对上皮细胞的表达不是不足以启动自身免疫，但轻度调节对靶器官已有既定的攻击自身免疫性。
白细胞介素 (IL)-12-驱动原发性甲状腺功能减退： 对比两个 Th1 细胞因子 （白细胞介素-12 和干扰素 γ） 的作用。
白细胞介素-12，原型 T helper 1 细胞因子，已牵连的器官特异性自身免疫性疾病，如桥本甲状腺炎发病机制中但报道的淋巴细胞性甲状腺炎小鼠模型中给予相互抵触的结果。若要确定白细胞介素-12 在甲状腺内的慢性、 当地生产的影响，我们创建了表达白细胞介素-12 p70 甲状腺球蛋白基因启动子的转录调控下的转基因小鼠。转基因发达生长迟缓、 温和的原发性甲状腺功能减退症和甲状腺轻度淋巴细胞浸润。甲状腺功能减退症是与钠碘转运体，部分是由于白细胞介素-12 的直接影响 thyrocyte 增加增加 mRNA 水平有关。后鼠标甲状腺次优剂量免疫、 白细胞介素-12 转基因小鼠发达国家是更加频繁和严重比在野生型 littermates 中观察到的淋巴细胞性甲状腺炎。如图所示的转基因和控件类似的干扰素 γ 水平独立的干扰素，白细胞介素-12 的促进疾病的疗效。这些研究结果突出显示两个 T helper 1 细胞因子的对比鲜明的角色和甲状腺 hormonogenesis 报告白细胞介素-12 的新作用。
作为 Sjögren 肺部疾病模型小鼠的白细胞介素-12 过度表达。
白细胞介素-12 (IL-12），Th1 促炎性细胞因子，据说 Sjögren 综合征在增加。以评估当地的 Th1/Th2 放松的效果，我们生成的 overexpresses 在肺部的白细胞介素-12 的转基因小鼠模型。白细胞介素-12 转基因小鼠发达国家支气管和肺泡的异常情况，与那些在 Sjögren 患者肺组织中找到惊人地相似。病理，肺异常开始在大约 4 mo 的年龄和支气管周围的淋巴细胞浸润的特点是、 腔内定期酸席夫碱阳性碎片、 增加细胞增殖在肺泡的区域，和增加间质和肺泡巨噬细胞。就功能而言，翻译成这些异常下跌纤毛清除功能 (P < 0.05 与野生型 littermates) 和增加氧化应激 (P < 0.01）。病理和功能异常被伴随肺自然杀手 (NK) 细胞发生重大变化。在人生的第一个月期间 NK 细胞的数量是白细胞介素-12 转基因三倍高于野生型肺 （所有淋巴组织细胞与 5%的 20%）。NK 细胞内稍纵即逝的时间 （从 30 至 50 天的年龄），然后下降达到大约 2%跌至谷底天 50，并仍将这些低级别之后。这种新的小鼠模型突出的白细胞介素-12 开始 Sjögren 综合征的作用。
Toll 样受体 MyD88 和肥大细胞的 Fc 受体途径调解在甲状腺疾病中观察到的甲状腺功能失调。
细菌感染和其他病理条件诱使下丘脑-垂体-甲状腺轴，统称为甲状腺疾病 (新技术信息系统) 的复杂系统功能紊乱。探索发病的细菌拉杆，我们注射结核分枝杆菌提取或大肠杆菌脂多糖小鼠缺乏 Toll 样受体或可结晶片段 （Fc） 受体通路的关键组成部分。在野生型小鼠细菌的组件引起甲状腺功能减退症下丘脑和甲状腺功能障碍的要素的特点。此拉杆甲状腺功能减退症并不会在小鼠缺乏 MyD88 适配器或中那些带有大量减少肥大细胞的发展。甲状腺功能减退响应 LPS，不过，被恢复重组后与肥大细胞来自骨髓的野生型捐助者。除了细菌组件之外，整个免疫球蛋白致甲状腺功能减退症 ＊ 突破性野生型小鼠，但不是在那些缺乏活化 Fc 受体或肥大细胞。研究表明 Toll 样的联系和 Fc 受体信号转导及甲状腺功能，发现小鼠拉杆肥大细胞的作用。
在自身免疫性 Hypophysitis 的新型抗原。
垂体自身抗体在自身免疫性 hypophysitis 和其他条件中找到。它们是垂体自身免疫的一个标志，但目前临床价值有限。用于其检测缺乏足够的敏感性和特异性，主要是因为没有已知致病性垂体 autoantigen(s) 和因此不发达国家基于抗原的免疫分析方法。
自身免疫性 Hypophysitis SJL 小鼠的： 从一种新的动物模型的临床见解。
自身免疫性 hypophysitis (AH) 是罕见的但人们日益认识到垂体的疾病。其抗原是未知的和管理是困难的因为它通常被误诊为 nonsecreting 腺瘤。通过免疫女性 SJL/J 小鼠用鼠标垂体提取物，我们建立了新的小鼠模型的实验啊。免疫的小鼠开发严重淋巴细胞浸润垂体前叶的密切模仿人类的病理。在实验的 AH 的早期阶段，垂体扩大，符合报告的演示文稿 hypophysitis 病人的压缩症状。在华丽的阶段中，肾上腺功能不全和垂体抗体制订了垂体病理强相关。在后期阶段，随后进行了甲状腺功能减退症，和脑垂体变得萎缩。使用免疫血清作为探针在二维免疫印迹法屏幕跟质谱法，我们确定了可作为垂体自身抗体靶抗原的几种蛋白质。这些研究结果提供的啊，发病机制的新见解，并建立发展新型诊断标志物和药物治疗学的平台。
Immunoproteasome 高效表达是甲状腺 Oncocytes 和原发性甲状腺功能减退症的发病机制的基础： 在人类和小鼠的研究。
Oncocytes （Hürthle 单元格） 甲状腺有肿瘤和自身免疫性疾病。他们有一个独特的外观，丰富的颗粒状嗜酸性细胞质和 hyperchromatic 核的特点。其发病机理一直，到目前为止，未知。
保利 (乙二醇) 通过基于单元格的 Anti-poly(ethylene Glycol) 酶联免疫吸附试验的测量。
保利 (乙二醇) (聚乙二醇 PEG) 越来越多地用于临床和实验医学。然而，定量化聚乙二醇和乙二醇的小分子仍然繁琐和不令人满意。在此报告中，我们稳定表达功能的 anti-PEG 抗体 BALB 3T3 细胞 (3T3/alphaPEG） 制定竞争酶联酶联免疫吸附法 (ELISA) 表面上为聚乙二醇量化。AlphaPEG 单元格涂层板绑定素 PEG(5K) （CH(3)-PEG(5K)-biotin) 和 CH 3 PEG (5 K)-(131) 我比传统的 anti-PEG 抗体涂层板更有效。PEG (2、 5、 10 或 20 kDa) 和 CH 3-PEG(5K)-生物素的已知的量之间的竞争绑定允许可重现竞争曲线的施工。AlphaPEG 基于单元格的竞争酶联免疫吸附法测量分别由 PEG(2K)、 PEG(5K)、 PEG(10K)、 PEG(20K)，并在浓度低至 58.6、 14.6、 3.7、 3.7、 PEG(5K) 和 14.6 ng/mL，衍生化的小分子。值得注意的是，血清或牛血清白蛋白的存在加强 PEG 测量 alphaPEG 基于单元格的竞争酶联免疫吸附法。最后，我们在这里展示 alphaPEG 基于单元格的竞争酶联免疫吸附法准确划定 PEG(5K) 的药代动力学、 媲美由血液中放射性的 CH 3-PEG (5 K) 静脉滴注后的直接测量-(131) 我到小鼠。这种定量投资策略可能提供一种简单和敏感方法量化聚乙二醇和乙二醇的小分子在体内。
发展无创成像的乙二醇普遍 Anti-polyethylene 乙二醇记者基因探针。
记者基因可以提供有关的特异性和基因或细胞疗法疗效的重要信息。虽然记者基因越来越多地用于实验和临床研究，可以通过多个成像技术追踪基因和细胞体内高度具体但 nonimmunogenic 的记者仍在等待开发。在这项研究，我们构建了交付通过图像基因表达或单元格的光学成像、 磁共振成像和小动物银龙多才多艺和 nonimmunogenic 基因
乙二醇代理商的内吞作用增强了癌症成像和抗癌的功效。
在成像和抗癌治疗癌症越来越多地使用乙二醇纳米粒子和大分子。这些代理的效力受体介导的内吞作用然而，尚未明确定义。在这里，我们开发了配对的吞和 nonendocytic 的受体，以直接、 毫不含糊地评估这个问题。低密度脂蛋白受体 (LDLR) 或截断 LDLR 缺乏 NPXY 吞母题 (DeltaLDLR) 已被替换 anti-polyethylene 乙二醇抗体 （alphaPEG） 的窗体吞 alphaPEG LDLR 和 nonendocytic alphaPEG DeltaLDLR 受体的配体结合域。HCC36 细胞表面上的在相似的水平稳定表达的受体。HCC36/alphaPEG-LDLR 的单元格，但不是 HCC36/alphaPEG-DeltaLDLR 细胞、 迅速 endocytosed 聚乙二醇-量子点和聚乙二醇脂质体阿霉素 (锂-都喜哈嘎) 体外和体内。锂电没有被大大更毒的 HCC36/alphaPEG-LDLR 细胞比向 HCC36/alphaPEG-DeltaLDLR 细胞。HCC36/alphaPEG-LDLR 肿瘤也积累大大更多乙二醇近红外探测器 (PEG-NIR797) 和聚乙二醇-脂质体-(111) 中比 HCC36/alphaPEG-DeltaLDLR 肿瘤在体内。此外，锂电没有更重要的被抑制 HCC36/alphaPEG-DeltaLDLR 肿瘤与既定的 HCC36/alphaPEG-LDLR 肿瘤生长。我们的数据显示，乙二醇的内吞作用探针和药物提高癌症成像和抗癌的功效，指示吞的受体癌症成像探测器和增敏药物设计的卓越目标。
通过一个简单的膜芯片的多个单核苷酸多态性的同时检测。
屏幕多个单核苷酸多态性 (SNPs) 的技术可能是非常宝贵的预测疾病病人的敏感性或治疗干预措施作出反应。这项研究，我们制订了一个芯片，可在同一时间准确检测四个单核苷酸多态性。此芯片是低成本和简便，因为它使用类似于点杂交检测协议并不需要复杂的工具。若要建立此芯片，我们可以设计和涂抹到尼龙膜上人类血管紧张素原、 胆固醇酯转运蛋白和载脂蛋白 E.特定单核苷酸多态性的寡核苷酸探针此芯片检测到相应的单核苷酸多态性怀内的血管紧张素原、 胆固醇酯转运蛋白和载脂蛋白 E 序列从 20 的捐助者。重要的是，SNPs 检测到由我们直接测序结果，与完全匹配的芯片从而突出显示此芯片的准确性。最后，我们的芯片是多个 SNP 筛查的有力工具和未来完善患者检测及疾病相关基因的潜力。
从垂体扩张到空蝶鞍： 疾病进展的自身免疫性 Hypophysitis 小鼠模型。
淋巴细胞 hypophysitis 有一个可变的临床课程，认为肿胀的演示文稿在垂体腺垂体萎缩和空蝶鞍所采取的。数据中的病人，不过，是紧缺人才培养和矛盾。要更好地定义的 hypophysitis 课程，我们使用一种基于垂体蛋白注入 SJL 小鼠的实验模型。33 小鼠的队列被分为三组： 与垂体蛋白质乳化佐剂 ； 在接种了 18 例六个控件被注射佐剂只 ；剩下九个控件未经处理。小鼠是跟达 300 d，总共有 106 MRI 扫描，如，头颅磁共振成像 （MRI），在不同的时间点来关联影像学和病理学的调查结果被杀害。空蝶鞍被界定为减少垂体体积大于 2 sd 低于平均量。所有免疫小鼠的磁共振成像显示垂体卷在疾病的早期阶段有显著扩大。卷然后逐渐下降在大多数情况下 （14 18，78%），免疫接种后由 d 300 达到空蝶鞍值。在少数情况下 （四 18，22%），减少是如此迅速和明显，促使缺血坏死伴出血，模仿垂体卒中患者称为条件的中部地区。在控件中观察到没有放射或病理变化。总体而言，这些结果表明 hypophysitis 的演变是复杂的但可导致，通过不同的路线，到空蝶鞍的发展。
垂体和鞍内生殖细胞瘤一例系统性自身免疫反应。
生殖细胞中蝶鞍很难从自身免疫性 hypophysitis 区分开来，因为类似的临床和病理特点。然而，这一区别，是由于不同处理的这两种疾病的病人护理的关键。我们提出与尿崩症和生长迟缓，并发现有内部-和上文-鞍区大众 11 岁女孩的报案。垂体穿刺活检的初步检验显示弥漫性淋巴细胞浸润的腺垂体和缺席胎盘碱性磷酸酶的表达，导致 hypophysitis 和糖皮质激素治疗的诊断。由于缺乏临床和放射反应，检讨是垂体的标本，揭露这次分散的 c 试剂盒和 Oct4 积极生殖细胞瘤细胞的存在。订正的诊断提示开始放疗所致的垂体群众失踪。免疫学研究表明病人的血清承认生殖细胞瘤病人自己的细胞，所表达的抗原以及垂体生长激素像抗原和系统性抗原 Sjögren 综合征抗原 B 和 α-烯醇化酶等。研究首先报告垂体和鞍内生殖细胞瘤，患者全身抗体的存在，并提醒我们弥漫性淋巴细胞浸润的垂体及垂体抗体并不总是表示诊断自身免疫性 hypophysitis。
体内正电子发射断层显像蛋白酶活性的疏水性产品从 Noninhibitory 蛋白酶底物的一代。
制定蛋白酶活动可以帮助在预后预测与设计个性化的、 基于蛋白酶的抑制剂的病人中的一种成像技术和前体药物靶向治疗。
葡糖苷酸基于活动的近红外结合俘获探测器成像 β 酶在深部组织中的表达。
Β 酶是一个有吸引力的记者和前体转化酶。近红外 (NIR) 探测器成像的 β 酶活动的发展将使估计的记者表达和个性化葡糖苷酸前体药物治疗肿瘤临床前研究的理想。然而，近红外光谱葡糖苷酸探测器尚无。这项工作，我们制定 β 酶活性检测的两个荧光探针，（包含红外 820 染料) 的近红外光谱范围，可见范围 [含异硫氰酸荧光素 (FITC)]，另一个通过利用 difluoromethylphenol-葡糖苷酸结构 (TrapG) 到陷阱附近活性的酶 fluorochromes。TrapG 的葡萄糖醛酰基债券 β 介导酶水解生成便于亲偶 β 酶表示站点附近的荧光附件的高活性烷组。异硫氰酸-TrapG 有选择性地被困但不是牛血清白蛋白或非 β 酶表达 CT26 单元格用作控件上纯净的 β 酶或 β 酶表达 CT26 单元格 （CT26/mβG）。Β-酶活性异硫氰酸-TrapG 不干扰 β 酶活性，并可标记旁观者附近 β 酶蛋白。异硫氰酸-TrapG 和近红外 TrapG 专门拍摄 CT26/mβG 的皮下肿瘤，但只有近红外 TrapG 能想象 CT26/mβG 肿瘤深埋在肝脏移植。因此近红外 TrapG 可能会提供一个宝贵的工具可视化 β 酶活性的影响。
