Sintasa Inducible Del óxido Nítrico Desempeña Un Papel En LPS-inducida Por La Hiperglucemia Y La Resistencia a La Insulina

American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11788371

Los mecanismos moleculares que subyacen a la endotoxina inducida por resistencia a la insulina siguen siendo poco claras. La endotoxina o lipopolisacárido (LPS) de la inyección es un potente estimulador de la óxido nítrico sintasa inducible (iNOS). Este estudio en ratas, con el inhibidor específico de la iNOS aminoguanidina, investigó el papel de la iNOS en la endotoxina inducida por la hiperglucemia y la resistencia a la insulina. LPS de inyección llevado a la hiperglucemia, resistencia a la insulina y el aumento de la expresión de iNOS proteína y la actividad. Aminoguanidina impedido LPS-inducida por la hiperglucemia sin afectar los niveles de insulina y la expresión de la iNOS. Aminoguanidina atenuó la resistencia a la insulina inducida por LPS, reflejada por el requisito de una tasa de infusión de glucosa superior para mantener euglucemia durante un estudio clamp hiperinsulinémico. Aminoguanidina completamente bloqueado la producción hepática de glucosa elevada LPS-y también inhibe LPS-inducida por el aumento en las actividades hepáticas de glucógeno fosforilasa y fosfoenolpiruvato carboxiquinasa (PEPCK) la expresión del ARNm, las enzimas clave para la glucogenólisis y la gluconeogénesis, respectivamente. Por lo tanto, estos datos demuestran un papel importante para iNOS en resistencia a la insulina inducida por LPS, evidenciado por la atenuación de la inducida por LPS hiperglucemia y la inversión de aumento de la producción de glucosa hepática por aminoguanidina. El efecto protector de aminoguanidina en resistencia a la insulina es probablemente por la atenuación de la producción de glucosa hepática a través de su inhibición de las enzimas clave para la glucogenólisis y la gluconeogénesis, incluyendo la fosforilasa del glicógeno y PEPCK.

Comparación Del Ensayo Del Cometa, Microscopía Electrónica, Y Citometría De Flujo Para La Detección De La Apoptosis

The Journal of Histochemistry and Cytochemistry : Official Journal of the Histochemistry Society. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12810838

Diferenciación de la apoptosis de la necrosis es un desafío en las células individuales y en los tejidos del parénquima. Las técnicas disponibles, incluyendo in situ TUNEL (Terminal desoxirribonucleótido transferasa mediada dUTP Nick-X de fin de etiquetado) citometría de tinción, el ensayo de escalera del ADN, y el flujo, sufren de una baja sensibilidad o de una alta tasa de falsos positivos. Este estudio, utilizando un modelo de células Jurkat, en un principio se evaluó la especificidad de la prueba del cometa neutro y citometría de flujo en comparación con el patrón oro, la microscopía electrónica, para la detección de la apoptosis y necrosis. Ensayo cometa Neutral apoptosis distinguida de la necrosis en las células Jurkat, como lo demuestra la puntuación de un cometa mayor en las células apoptóticas y la puntuación de un cometa casi cero en las células necróticas. Estos resultados fueron consistentes con los de la microscopía electrónica y citometría de flujo. Por otra parte, utilizando ratas con lesión de la quemadura o la isquemia / reperfusión, se han creado modelos de la apoptosis del tejido muscular esquelético y cardíaco, respectivamente, se aplicó la prueba del cometa para detectar la apoptosis en estos músculos. Ensayo cometa Neutral fue capaz de detectar cambios apoptóticos en ambos modelos. En las muestras de músculo de las ratas con lesión de la quemadura o la isquemia-reperfusión, la puntuación del cometa era mayor que la de las muestras de músculo de sus respectivos controles. Estos estudios confirman la consistencia de la prueba del cometa para la detección de la apoptosis en las células individuales y proporcionar evidencia de su aplicabilidad como un método adicional para la detección de la apoptosis en las células del parénquima.

Sobre Regulación De Los Receptores De Acetilcolina Durante La Infusión Subcrónica De Pancuronio Es Causada Por Un Mecanismo Postranscripcional Relacionados Al Desuso

Critical Care Medicine. Feb, 2004  |  Pubmed ID: 14758171

En contraste con la teoría clásica de que el bloqueo competitivo de los receptores de acetilcolina induce la regulación del receptor, estudios recientes muestran que el bloqueo irreversible de los receptores de acetilcolina con alfa-bungarotoxina disminuye el número receptor de la acetilcolina en cuestión de horas. Este estudio investigó los efectos iniciales del bloque competitivo de los receptores acetilcolina con la reversible, relajante muscular competitivo, pancuronio.

Esteroideos Relajantes Musculares No Despolarizantes No Simulan Los Efectos De Los Glucocorticoides En El Receptor De Glucocorticoides Mediada Por La Transcripción En Células Del Músculo Esquelético

Anesthesiology. Jun, 2004  |  Pubmed ID: 15166588

Burn Deteriora Lesiones Insulina Estimulada Por La Akt / PKB Activación En El Músculo Esquelético

American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. Mar, 2005  |  Pubmed ID: 15536206

Las bases moleculares subyacentes quemaduras o críticos enfermedad inducida por resistencia a la insulina aún no se hayan esclarecido. Catabolismo proteico muscular es una característica ubicua de la enfermedad crítica. Akt / PKB juega un papel central en las acciones metabólicas de la insulina y es un regulador fundamental de la hipertrofia y atrofia de los músculos esqueléticos. Por lo tanto, examinó los efectos de lesiones por quemaduras en la insulina estimula la Akt / PKB activación en el músculo esquelético. La insulina estimula la fosforilación de Akt / PKB fue significativamente atenuada en quemados en comparación con el simulacro que quemaron las ratas. La insulina estimula la Akt / PKB actividad de la quinasa, a juzgar por el ensayo inmunológico quinasa complejo y estado de fosforilación del sustrato endógeno de la glucógeno sintasa Akt / PKB, la quinasa-3beta (GSK-3beta), se vio afectada significativamente en las ratas quemadas. Además, la insulina negado sistemáticamente a aumentar la fosforilación de p70 S6 cinasa, otro efector corriente abajo de Akt / PKB, en ratas con lesiones por quemaduras, mientras que la fosforilación de p70 S6 cinasa se incrementó por la insulina en los controles. La expresión de la proteína Akt / PKB, la GSK-3beta y p70 S6 cinasa no fue modificado por la lesión de la quemadura. Sin embargo, la insulina estimula la activación de ERK, una paralela a la vía de señalización Akt / PKB, no se vio afectada por la lesión de la quemadura. Estos resultados demuestran que perjudica quemaduras insulina estimula la Akt / PKB activación en el músculo esquelético y sugieren que la atenuada Akt / PKB activación puede estar implicado en el metabolismo trastornado y desgaste muscular observado después de la quemadura.

Inducible De óxido Nítrico Sintasa Y Donante De NO Provocar El Receptor De Insulina Sustrato-1 Degradación En Células Del Músculo Esquelético

The Journal of Biological Chemistry. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15805118

La inflamación crónica juega un papel importante en la resistencia a la insulina. Inducible de óxido nítrico sintasa (iNOS), un mediador de la inflamación, se ha implicado en muchas enfermedades humanas, incluyendo la resistencia a la insulina. Sin embargo, los mecanismos moleculares por los cuales la iNOS resistencia a la insulina media siguen siendo en gran parte desconocido. Aquí nos demuestran que la exposición al donador de NO de iNOS o transfección de insulina reduce sustrato del receptor (IRS) -1 expresión de la proteína sin alterar el nivel de ARNm en cultivos de células musculares esqueléticas. Donador de NO aumento de IRS-1 ubiquitinación, y los inhibidores del proteasoma bloquean la reducción de NO inducida por los donantes en el IRS-1 de expresión en cultivos de células musculares esqueléticas. El efecto de donador de NO en el IRS-1 de expresión era independiente de cGMP y acentuado por el estrés oxidativo concomitante, lo que sugiere una implicación del estrés nitrosativo. Inhibidores de la fosfatidilinositol-3 quinasa, mamíferos objetivo de rapamicina, y la quinasa c-Jun amino-terminal no pudo bloquear un donador de NO inducida por la reducción del IRS-1, mientras que los inhibidores de prevenir la insulina estimula la disminución del IRS-1. Por otra parte la expresión de iNOS fue mayor en el músculo esquelético de pacientes diabéticos (ob / ob) en comparación con los ratones delgados ratones de tipo salvaje. la interrupción del gen iNOS o el tratamiento con un inhibidor de la iNOS mejorado deprimido IRS-1 de expresión en el músculo esquelético de pacientes diabéticos (ob / ob) los ratones. Estos resultados indican que la iNOS reduce IRS-1 de expresión en el músculo esquelético a través de proteasoma mediada por la degradación y, por tanto puede contribuir a la resistencia a la insulina relacionada con la obesidad.

Espectroscopia De RMN De Protones Muestra Lípidos Se Acumulan En El Músculo Esquelético En Respuesta a La Quemadura De Trauma La Apoptosis Inducida Por

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16126910

Grabar un traumatismo provoca hipermetabolismo y pérdida de masa muscular a través de una mayor degradación de proteínas celulares y la apoptosis. Resonancia magnética nuclear de protón (1H RMN) puede detectar los lípidos celulares in vivo. Para examinar los efectos locales de quema en el músculo esquelético, se realizó en vivo 1H NMR en ratones 3 días después del trauma de quemadura, y ex vivo de alta resolución, spinning magia de ángulo (1) H RMN en muestras intactas extirpados musculares de ratones antes y 1 y 3 días después de grabar. Estas muestras se analizaron para determinar los núcleos de apoptosis utilizando un terminal deoxynucleotidyl transferasa mediada dUTP nick fin de etiquetado (TUNEL) ensayo. Para confirmar nuestra RMN y los resultados de biología celular, se utilizó el análisis de transcriptoma para demostrar que el trauma quemadura altera la expresión de genes implicados en el metabolismo de los lípidos y la apoptosis. Nuestros resultados demuestran que los resultados de lesiones por quemadura en una acumulación de lípidos intramiocelulares localizada, que a su vez es acompañado por quemadura inducida por la apoptosis y la disfunción mitocondrial, como se ve por la regulación de los genes de la apoptosis y la regulación a la baja de los genes que codifican para la oxidación de lípidos y la peroxisomal proliferador de activador del receptor gamma coactivador PGC-1 beta. Por otra parte, los mayores niveles de protones metileno bisallylic acilo grasos (2,8 ppm) y los protones de vinilo (5,4 ppm), en relación con los resultados del ensayo de TUNEL, sugieren además que los resultados de Traumas y Quemaduras en la apoptosis. En conjunto, nuestros resultados proporcionan una nueva visión de los cambios locales fisiológicos que ocurren en el músculo esquelético después de un traumatismo grave quemadura.

La Apoptosis De Adipocitos Después De Una Lesión Por Quemadura Se Asocia Con Alteración De Metabolismo De La Grasa

Journal of Burn Care & Research : Official Publication of the American Burn Association. May-Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16679908

Quemar lesión a menudo se asocia con el metabolismo lipídico anormal, incluyendo la hiperlipidemia, la desensibilización a las respuestas lipolíticas a las catecolaminas, y la reducción en el tamaño del tejido adiposo blanco. Entender los mecanismos biológicos para la disminución de la masa grasa a pesar de la desensibilización a las catecolaminas es importante tanto para el estudio del metabolismo de lípidos y para el estudio de su relación con la resistencia a la insulina concomitante. Utilizando el tejido adiposo del epidídimo de machos adultos ratas Sprague-Dawley después de la lesión por quemadura (n = 102) o el simulacro de lesiones por quemadura (n = 102), hemos probado la hipótesis de que una lesión en todo el cuerpo quema provoca la apoptosis en ese tejido. En 1, 3 y 7 días después de 40% a 50% cuerpo quemaduras a la rata, el tejido adiposo epidydimal se recogió y se evaluaron los cambios apoptóticos y propiedades lipolíticas. Para la apoptosis, paraformaldehído-fijo secciones de tejido fueron analizadas in situ mediante TDT mediada por dUTP nick-X de fin de etiquetado (TUNEL) tinción y homogeneizados de tejido fueron analizadas por la fragmentación del ADN mediante inmunoensayo enzimático y la ligadura-mediada por la escalera de la reacción en cadena de polimerasa ensayo. Adipocitos aislados fueron estimuladas con Isoprotenerol, y la producción de glicerol se midió como un reflector de la eficacia de la lipólisis. Tejido adiposo del epidídimo mostró aumento de la apoptosis manifiesta por la tinción de TUNEL positiva y el aumento de la fragmentación del ADN mediante inmunoensayo enzimático en el día 3 y 7 después de la lesión por quemadura. La fragmentación del ADN fue confirmada por el ensayo de polimerasa en cadena ligadura-mediada por la escalera de la reacción. Esta elevada fragmentación del ADN persistió en los animales quemados desde el día 3 hasta el día 7 después de la lesión por quemadura, al final del período de observación. Aumento de la apoptosis se correlacionó con una disminución en el contenido de ADN y el peso del tejido en los epidídimo. En el nivel funcional, una disminución significativa en la inducida por el isoproterenol actividad lipolítica (producción de glicerol) se observó que casi el 50% de nivel de control en el día 3 y 7, pero no se redujo a 1 día. La apoptosis de los adipocitos pueden jugar un papel en el metabolismo lipídico alterado, incluyendo hiperlipidemia en sujetos quemados.

Rutas Mitocondrias, Retículo Endoplasmático, Y Alternativa De La Muerte Celular En Enfermedades Críticas

Critical Care Medicine. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17713398

Las células que mueren se distinguen por sus rasgos bioquímicos y morfológicos y se categorizaron en tres subtipos: la apoptosis, oncosis (necrosis), y la muerte celular con la autofagia. Cada uno de estos tipos de muerte celular juega un papel crítico en la morfogénesis de tejidos durante el desarrollo normal y en la patogénesis de las enfermedades humanas. Teniendo en cuenta que la homeostasis del tejido es controlada por el complejo equilibrio entre la degeneración y la regeneración, es esencial para comprender los mecanismos de las diferentes formas de muerte celular para establecer y mejorar las intervenciones terapéuticas para la prevención y el rescate de estas células trastornos relacionados con la muerte. Crítica de la enfermedad, incluyendo sepsis, traumatismos y lesiones por quemaduras, a menudo se complica por el síndrome de disfunción orgánica múltiple y se acompaña de muerte celular aumentó en los tejidos del parénquima y no parenquimatoso. La evidencia acumulada sugiere que la muerte celular aumentada juega un papel importante en la insuficiencia de órganos en la enfermedad crítica. Se discuten los posibles enfoques terapéuticos para la prevención de la muerte celular, muerte celular por apoptosis en particular.

El Papel Principal De La Isquemia Funcional, La Evidencia Cuantitativa Para El Mecanismo De Dos Hits, Y La Fosfodiesterasa-5 En El Tratamiento Con Inhibidores De La Distrofia Muscular Del Ratón

PloS One. 2007  |  Pubmed ID: 17726536

Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) se caracteriza por el daño muscular y un aumento de flujo anormal de sangre después de la contracción muscular: el estado de la isquemia funcional. Hasta ahora, sin embargo, la relación causa-efecto entre la patogénesis de la isquemia DMD y funcional no está claro. Se examinaron (i) si la isquemia funcional es necesaria para provocar la contracción inducida por daño miofibra y (ii) si la isquemia funcional por sí solo es suficiente para inducir el daño.

La Obesidad Inducida Por La Resistencia a La Insulina Y La Hiperglucemia: Factores Etiológicos Y Los Mecanismos Moleculares

Anesthesiology. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18580184

La obesidad es una causa importante de diabetes de tipo 2, clínicamente evidenciado como la hiperglucemia. La homeostasis de la glucosa alterada es causada por la transducción de señal defectuosa a través de las proteínas de señalización de insulina, lo que resulta en la captación de glucosa por el músculo disminuido, lipogénesis alterada, y la salida de aumento de la glucosa por el hígado. La etiología de este trastorno en la señalización de la insulina se relaciona con un estado inflamatorio crónico, que conduce a la inducción de la óxido nítrico sintasa inducible y la liberación de altos niveles de óxido nítrico y especies reactivas de nitrógeno, las cuales causan modificaciones postraduccionales en las proteínas de señalización. Hay diferencias sustanciales en los mecanismos moleculares de resistencia a la insulina en el músculo en comparación con el hígado. Las hormonas y citoquinas de los adipocitos puede mejorar o inhibir tanto la detección glucémico y señalización de la insulina. La función del sistema nervioso central en la homeostasis de la glucosa también se ha establecido. Terapias multifacéticas encaminadas a corregir las anomalías inducidas por la obesidad, tanto en sistema nervioso central y tejidos periféricos puede resultar beneficioso.

Combinado Fuera De Resonancia Y La Relajación T2 En El Marco Giratorio De Contraste Positivos Imágenes De Resonancia Magnética De La Infección En Un Modelo Murino De Grabación

Journal of Magnetic Resonance Imaging : JMRI. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 21031524

Para desarrollar nuevos resonancia magnética (RM) los métodos de imagen para controlar la acumulación de macrófagos en la inflamación y la infección. Positivo contraste RM es una alternativa a la RM con contraste negativo, aprovechando el desplazamiento químico inducido por la ultra-pequeño superparamagnéticas de óxido de hierro (USPIO) nanopartículas de moléculas de agua cercanas. Se introduce una nueva combinación de fuera de resonancia (ORI) positivo de contraste de MRI y T (2ρ) la relajación en el marco giratorio (ORI-T (2ρ)) para MR positivo cambio de imagen de USPIO.

Nítrico Inducible Sintasa De óxido Alivia La Resistencia a La Insulina Del Músculo Esquelético, Pero No Altera Inesperados Bajos Niveles De Glucosa En Sangre Después De Lesiones Por Quemaduras En Ratones C57BL / 6

Metabolism: Clinical and Experimental. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 21816442

Lesiones por quemadura se asocia con respuestas inflamatorias y las alteraciones metabólicas, incluida la resistencia a la insulina. Deterioro de sustrato receptor de insulina-1 (IRS-1)-mediada por la transducción de señales de insulina es un componente importante de la resistencia a la insulina en el músculo esquelético después de lesiones por quemaduras. Para investigar más a fondo los mecanismos moleculares que subyacen a lesiones por quemadura inducida por la resistencia a la insulina, se estudia el papel de la sintasa de óxido nítrico inducible (iNOS), un importante mediador de la inflamación, quemadura en la resistencia a la insulina inducida por el músculo en ratones deficientes en iNOS. De grosor completo de tercer grado, lesiones por quemaduras que comprende el 12% de la superficie corporal total se produjo en C57BL de tipo salvaje y deficientes en iNOS / 6 ratones. La activación de la insulina estimula (fosforilación) de la RI, el IRS-1 y Akt fue evaluada por inmunotransferencia e inmunoprecipitación. La insulina estimula la captación de glucosa por el músculo esquelético se evaluó ex vivo. Grabar la inducción de la iNOS daño causado en el músculo esquelético de ratones de tipo salvaje. El aumento de la expresión de iNOS en paralelo al aumento de la resistencia a la insulina, como lo demuestra disminución de la fosforilación de la tirosina y el IRS IR-1, IRS-1 de expresión, la insulina estimula la activación de la fosfatidilinositol 3-quinasa y Akt / PKB, y la insulina estimula la captación de glucosa en el músculo esquelético del ratón. La ausencia de la iNOS en los ratones genéticamente modificados significativamente disminuido lesiones por quemadura inducida por resistencia a la insulina en el músculo esquelético. En ratones de tipo salvaje, la prueba de tolerancia a la insulina reveló de cuerpo entero resistencia a la insulina en los ratones quemados en comparación con el simulacro que quemaron los controles. Este efecto fue revertido por la deficiencia de la iNOS. Inesperadamente, sin embargo, los niveles de glucosa en la sangre se deprimieron tanto en ratones de tipo salvaje y deficientes en iNOS después de la lesión por quemadura. La interrupción del gen de iNOS mejorado el efecto de la quemadura en el IRS-1 mediada por la señalización de insulina en el músculo esquelético de ratones. Estos hallazgos indican que la iNOS juega un papel importante en la quemadura de las lesiones inducidas por la resistencia a la insulina del músculo esquelético.