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Articles by Sophie Boddington in JoVE

 JoVE General

Labeling hESCs und hMSCs mit Eisenoxid-Nanopartikel für Non-Invasive in vivo-Tracking mit MR-Bildgebung


JoVE 685 3/31/2008

Contrast Agent Research Group at the Center for Molecular and Functional Imaging, Department of Radiology, University of California San Francisco

Für die Bewertung von neuen Stammzelltherapien ist es wichtig, nicht-invasiv Spur der injizierten Zellen in vivo. Dieses Video zeigt Ihnen, wie Sie humanen mesenchymalen und embryonalen Stammzellen mit Eisenoxid-Kontrastmittel in vivo für die nachfolgenden MR-Bildgebung in vivo-Label.

 JoVE General

Labeling Stammzellen mit fluoreszierenden Farbstoffen zur nicht-invasiven Detektion mit Optical Imaging


JoVE 686 4/02/2008

Contrast Agent Research Group at the Center for Molecular and Functional Imaging, Department of Radiology, University of California San Francisco

Dieses Video zeigt Techniken für die Kennzeichnung von menschlichen embryonalen Stammzellen und mesenchymalen Stammzellen mit fluoreszierenden Farbstoffen. Diese Technik kann für eine in vivo Verfolgung der transplantierten Stammzellen mit optischen Bildgebung und zur histopathologischen Korrelation mit Fluoreszenzmikroskopie eingesetzt werden.

Other articles by Sophie Boddington on PubMed

Postoperative Evaluation Komplexer Aortovisceral Und Aortorenal Rekonstruktionen Durch Magnetresonanz-Angiographie

Zelle Kennzeichnung Mit Der Positiven MR-Kontrastmittel Gadofluorine M

Der Zweck dieser Studie war, grenzenlose menschliche Monozyten mit Gadofluorine M durch einfache Inkubation für nachfolgende Zelle Darstellung mit 1,5 und 3 T. Gadofluorine M zeigt eine hohe r(1)-Relaxivity und ist spontan durch Makrophagen phagozytierte. Menschliche Monozyten wurden mit Gadofluorine M-Cy bei unterschiedlichen Konzentrationen inkubiert und Inkubation Mal und MR-Tomographie bei 1,5 bis 3 T Erhöhung der zeitlichen Abständen nach dem Etikettieren Eingriff unterzogen. R1-Entspannung-Preise und r1-Relaxivities der beschrifteten Zellen und nicht-Label-Steuerelemente wurden ermittelt. Zelluläre Kontrast Agent Aufnahme wurde von Fluoreszenzmikroskopie untersucht und quantifiziert durch ICP-AES. Effiziente Zelle Kennzeichnung wurde nach der Inkubation der Zellen mit 25 mM Gd Gadofluorine M für 12 h, wodurch eine maximale Aufnahme von 0,3 Fmol Gd/Zelle ohne Beeinträchtigung der Zellviabilität erreicht. Fluoreszenzmikroskopie Internalisierung der fluoreszierenden Kontrastmittel durch Monozyten bestätigt. Die r1-Relaxivity der beschrifteten Zellen war 137 mM(-1)s(-1) bei 1.5 T und 80.46 mM(-1)s(-1) auf 3 T.-Imaging-Studien zeigten stabile labeling für mindestens 7 Tage. Menschliche Monozyten können effektiv für MR-Tomographie mit Gadofluorine M. Potential in-vivo Zelle-Tracking-Anwendungen enthalten Zielgruppenadressierung von entzündlichen Prozessen mit Gadofluorine-markierten Leukozyten oder Überwachung der Stammzell-Therapien für die Behandlung von Arthritis beschriftet werden.

Anterior Schichtung Der Ausgeschiedenen 18F-FDG in Der Blase Auf PET/CT: Häufigkeit Und Ursache

Ziel: Das Ziel unserer Studie war, um zu bestimmen, der Häufigkeit und Ursache von anterior Schichtung der ausgeschiedenen 18F-FDG in der Blase über PET/CT-Abschluss: Anterior Schichtung der ausgeschiedenen FDG in der Blase ist allgemein gesehen auf PET/CT scannt mit i.v. jodierten Kontrastmaterial hergestellt und ist aufgrund der Verschiebung des FDG ausgeschiedenen jodierten Kontrast Material; Dieses Phänomen kann FDG-avid Blase Krankheit entlarven.

Herr Imaging Des Eierstockkrebs Mit Folat-Rezeptor-bezogene Kontrastmittel

Wegen seiner Überexpression in vielen menschlichen Tumoren ist der Folat-Rezeptor (FR) ein vielversprechendes Ziel für tumorspezifische Imaging.

Verbesserte Fluoreszenz Indocyanine Green in Vitro Und in Vivo Nach Einfacher Kühlung Verfahren

Indocyanine Green (ICG) ist ein Kontrastmittel verwendet für die Erkennung von Angiogenesis mit optischen Bildgebung (OI). Der Zweck dieser Studie war zu untersuchen, ob Kühlung Verfahren die Signalausbeute von ICG mit OI erhöhen. Testproben von 0,05 und 0,02 mM ICG in 60 % und 40 % DMSO DMEM unterzog OI mit vier verschiedenen Temperaturen (5, 37, 55 und 75 Grad C). Außerdem unterzog sechs athymischen Ratten mit Antigen-induzierte Arthritis der Gelenke Knie und Knöchel OI vor und nach der Injektion von ICG (10 mg/ml, Dosis 15 mg/kg) auf zwei getrennte Tage mit und ohne Kühlung der Gelenke. Die fluoreszierenden Signale der Prüflinge und arthritischen Gelenke wurden gemessen und ausgewertet für erhebliche Unterschiede vor und nach dem Abkühlen mit einem t-Test. In-vitro-Studien zeigten eine starke negative Korrelation zwischen ICG Temperatur und Fluoreszenzsignal. Die mittlere Fluoreszenzsignal arthritische Gelenke (gemessen in Effizienz) war 0.345 vor ICG-Injektion, 4.55 nach ICG-Injektion und vor Abkühlung und 9.71 nach ICG-Injektion und nach dem Abkühlen. Fluoreszenzsignal Verbesserung der arthritischen Gelenken mit ICG erhöhter OI Bildern deutlich erhöht, nach dem Abkühlen (p = 0,02). Die Signalausbeute von ICG kann erheblich gesteigert werden, durch die Kühlung der Ziel-Pathologie. Die primäre Ursache der die Temperaturabhängigkeit des ICG ist verbesserte collisional abschrecken mit steigender Temperatur. Diese einfache Methode der Kühlung möglicherweise sofort hilfreich, die Fluoreszenz-Signalausbeute in aktuellen ICG erhöhter OI-Studien bei Patienten zu erhöhen.

Erkennung Von Postoperativen Granulationsgewebe Mit ICG-verbesserte Integrierte OI- / X-ray System

Die Entwicklung von postoperativen Granulationsgewebe ist eines der wichtigsten postoperativen Risiken nach der Operation der Lendenwirbelsäule. Diese Granulationsgewebe möglicherweise dauerhaft oder neue klinische Symptome oder eine Follow-up-Operation erschweren. Ein sensible nichtinvasive bildgebendes Verfahren, das diese Granulationsgewebe am Krankenbett diagnostizieren könnte, würde helfen, geeignete Therapien zu entwickeln. Damit war der Zweck dieser Studie zu schaffen eine schnelle und günstiges Bildverarbeitungs Tool für die Diagnose von Granulationsgewebe nach Lendenwirbelsäule Chirurgie, über eine neue integrierte optische Bildgebung (OI) / x-ray imaging-System und das FDA-zugelassenen fluoreszierenden Kontrastmittel Indocyanine Green (ICG).

Optische Bildgebung Der Zellulären Immuntherapie Gegen Prostatakrebs

Der Zweck dieser Studie war es, Fluorophore beschriftet, Tumor-gerichteten natürliche killer (NK) Zellen menschlichen Prostatakrebs Xenografts mit optischen Bildgebung (OI) zu verfolgen. NK-92-ScFv (MOC31)-Zeta Zellen gezielt an die Epithelzellen Adhäsion Molekül (EpCAM) Antigen auf Prostatakrebszellen und nontargeted NK-92 elterlicher Zellen wurden mit der Nah-Infrarot-Farbstoff beschriftet haben (1, 1'-Dioctadecyl-3,3, 3', 3'-Tetramethylindodicarbocyanine). Die Fluoreszenz, Lebensfähigkeit und Zytotoxizität der beschrifteten Zellen wurden ausgewertet. In der Folge 12 athymischen Ratten mit Prostatakrebs Xenografts unterzog OI scannt vor und bis zu 24 Stunden Injektion hat-mit der Bezeichnung elterliche NK-92-Zellen oder NK-92-ScFv (MOC31)-Zeta-Zellen. Die Tumor-Fluoreszenz-Intensität wurde gemessen und zwischen den vor- und postinjection-Scans und zwischen den beiden Gruppen mit t-Tests verglichen. OI-Daten wurden mit Fluoreszenzmikroskopie bestätigt. In vitro Studien zeigte eine deutliche Steigerung der Fluoreszenz von beschrifteten Zellen gegenüber unbeschriftete-Steuerelemente, die über einen Zeitraum von 24 Stunden ohne jede wesentliche Änderung in der Rentabilität beibehalten. In-vivo Studien zeigten eine signifikante Erhöhung Tumor Fluoreszenz bei 24 Stunden Injektion von Tumor-gerichteten NK-92-ScFv (MOC31)-Zeta Zellen aber nicht elterliche NK-Zellen. Ex Vivo OI scannt und Fluoreszenzmikroskopie bestätigt eine bestimmte Ansammlung von NK-92-ScFv (MOC31)-Zeta Zellen aber nicht elterliche NK-Zellen in Tumoren. Tumor-gerichteten NK-92-ScFv (MOC31)-Zeta Zellen zu Prostatakrebs Xenografts mit OI verfolgt werden konnte.

Verminderte Aorten Wachstum Und Mittleren Aortalen Syndrom Bei Patienten Mit Neuroblastom Nach Strahlentherapie

CT-Follow-up Langzeitstudien sind bei pädiatrischen Patienten erforderlich, die intraoperative Strahlentherapie (IORT) und externen Strahl Strahlentherapie (externer Strahlentherapie), vaskuläre Toxizitäten einzuschätzen und bestimmen Sie die genaue Komplikation-Rate erhalten haben.

Optische Bildgebung Der Peri-tumorale Entzündung Bei Brustkrebs

Peri-tumorale Entzündung ist eine gemeinsame Tumor-Antwort, die spielt eine zentrale Rolle bei der Tumorinvasion und Metastasierung und entzündliche Zelle Einstellung ist wichtig, diesen Prozess. Der Zweck dieser Studie war es, festzustellen, ob die injizierte fluorescently beschriftete Monozyten im murinen Brusttumoren sind gesammelt und mit optischen Abbildung sichtbar.

Eine Optische Bildgebende Verfahren, Stem Cell Migration in Einem Modell Der Immun-vermittelte Arthritis Zu überwachen

Das Ziel dieser Arbeit ist es, ein optisches bildgebendes Verfahren zu etablieren, das Überwachung der Integration von mesenchymalen Stammzellen (MSC) in arthritischen Gelenken ermöglichen würde. Unser Ansatz basiert auf der ersten Entwicklung eine Kennzeichnung Technik des MSC mit der Leuchtstofffärbung gefolgt von tracking-die Zelle Migration Kinetik von der räumlichen Verteilung der die Fluoreszenz in optische Bilder (OI) haben. Der experimentelle Ansatz beinhaltet zunächst die in-vitro-OI des MSC mit beschriftet begleitet von Fluoreszenz-Mikroskopie-Messungen zur Lokalisierung des Signals innerhalb der Zellen zu etablieren. Danach hat-mit der Bezeichnung MSC wurden in Polyarthritic injiziert, athymischen Ratten und die Signal-Lokalisierung in den Versuchstieren wurde über mehrere Tage beobachtet. Die experimentellen Ergebnisse zeigen, die in die Zellmembran integriert. Tat-Label MSC-Lokalisierung in den Knöchel arthritischen Gelenken wurde beobachtet, mit OI, die darauf hinweist, dass diese Methode angewendet werden kann, um die MSC in arthritischen Gelenken zu überwachen.

Menschliche Embryonale Stammzellen Cell-derived Cardiomyocytes Mit Indocyanine Grün Für Nichtinvasive Tracking Mit Optischen Abbildung Beschriften: FDA-kompatible Alternative Zur Glühwürmchen Luciferase

Menschliche embryonale Stammzellen Cell-derived Cardiomyocytes (hESC-CMs) haben die Fähigkeit zur Verbesserung der myokardialen Funktion nach Transplantation in eine ischämische Herz gezeigt; jedoch sind die funktionalen Vorteile vorübergehend möglicherweise aufgrund schlechter Zelle Aufbewahrung. Eine diagnostische Technik, die transplantierten hESC-CMs zu visualisieren, könnte könnte dazu beitragen, um Stammzellen Lieferung Techniken zu optimieren. So war der Zweck dieser Studie eine Kennzeichnung Technik für Zellkulturen und hESC-CMs mit der FDA-zugelassenen Kontrast Agent Indocyanine grün (ICG) für optische Bildgebung (OI) zu entwickeln. Zellkulturen wurden beschriftet mit 0.5, 1.0, 2.0 und 2.5 mg/ml ICG für 30, 45 und 60 min bei 37 Grad C. längs OI Studien mit Zellkulturen und hESC-CMs durchgeführt wurden. Der Ausdruck der Oberfläche Proteine wurde mit Immunfluoreszenz-Färbung bewertet. Zellkulturen mit 2 mg ICG/ml 60 min beschriftet erreicht maximale Fluoreszenz. Längsschnittstudien ergab, dass das Fluoreszenzsignal Kontrollen an 120 h postlabeling entspricht. Das Fluoreszenz-Signal des Zellkulturen und hESC-CMs auf 1, 24 und 48 h war signifikant höher verglichen, um die Daten (p < 0,05) precontrast. Immunzytochemie offenbart Eigentumsvorbehalt zellspezifische Marker Oberfläche und nukleare postlabeling. Diese Daten zeigen, dass Zellkulturen und hESC-CMs mit ICG beschriftet eine deutliche Fluoreszenz bis zu 48 h zeigen und mit OI visualisiert werden können. Das Kennzeichnung Verfahren beeinträchtigt nicht die Lebensfähigkeit oder funktionelle Integrität der Zellen. Die Technik kann hilfreich für die Beurteilung der verschiedenen Zustellrouten um die Verteilung von transplantierten hESC-CMs oder andere Stammzell-Vorläuferzellen zu verbessern sein.

Brust-Krebs: MR Imaging Des Folat-Rezeptor Ausdruck Mit Der Folat-spezifische Nanopartikel P1133

Zur Bewertung der Fähigkeit des Folat-Rezeptors (FR)-gezielte ultrasmall superparamagnetischen Eisenoxid (USPIO) P1133 FR-spezifische Erweiterung der Brustkrebse auf Magnetresonanz (MR) Bilder bereitstellen.

Indocyanine Grün-verbesserte Bildgebung Der Antigen-induzierten Arthritis Mit Einem Integrierten Optischen Bildgebung/Radiographie-System

Eine kombinierte Indocyanine grün-verbesserte optische Bildgebung/Radiographie-System zum Nachweis von arthritischen Gelenken in einem Rattenmodell der Antigen-induzierten Arthritis zu bewerten.

In-vivo Magnetresonanz-Bildgebung Und Optische Bildgebung Vergleich Lebensfähig Und Nicht Lebensfähiges Mesenchymaler Stammzellen Mit Einem Bifunktionelle Label

Der Zweck dieser Studie war es, praktikable und nicht lebensfähiges Bilabeled mesenchymale Stammzellen (MSCs) vergleichen in arthritischen Gelenken mit Magnetresonanz-Bildgebung (MRI) und optische Bildgebung (OI). MSCs wurden mit Ferucarbotran beschriftet und Tat. MRI und OI Bilabeled Zellen wurden mit Kontrollen verglichen. Sechs Ratten mit Arthritis empfangen intraartikuläre Injektionen von Bilabeled lebensfähigen MSCs in das rechte Knie und nicht lebensfähiges MSCs in das linke Knie. Tiere unterzog MRI und OI preinjection und 4, 24, 48 und 72 Stunden auftrat. Die Ergebnisse wurden mit einem gemischten Zufallseffekte Modell und Fisher Wahrscheinlichkeit analysiert. Bilabeled-MSCs zeigte erhöhte MRI und OI-Signale, die im Vergleich zu unbenannten Steuerelemente (p <.0001). Nach der intraartikuläre Injektion Bilabeled MSCs verursacht erhebliche T2 und T2 * Auswirkungen auf MRI und Fluoreszenz auf OI bis zu 72 Stunden auftrat (p <.05). Es gab keinen signifikanten Unterschied zwischen lebensfähig und nicht lebensfähiges MSC-Signal in den Knie-Gelenken; jedoch einige der lebensfähigen Zellen zu einer angrenzenden entzündeten Sprunggelenk migriert (p <.05). Immunohistochemistry bestätigte lebensfähigen MSCs im rechten Knie und Knöchel Gelenke und nicht lebensfähiges MSCs im linken Knie. Tragfähige und nicht lebensfähiges Zellen konnte nicht mit MRI oder OI Signalintensität differenziert werden aber wurden differenzierte basiert auf ihrer Fähigkeit, in-vivo migrieren.

Kennzeichnung Von Menschlichen Embryonalen Stammzellen-Cell-derived Cardiomyocytes Für Das Tracking Mit MR-Tomographie

Menschlicher embryonaler Stammzellen (hESC) können Cardiomyocytes (CM), generieren die vielversprechende Behandlungen für Kardiomyopathien bei Kindern zu bieten. Jedoch Herausforderungen für Übersetzung klinischer Ergebnis aus dem Verlust von transplantierten Zellen aus Ziel-Sites und hohe Zelltod. Ein bildgebendes Verfahren, das Bauteilqualität und wiederholt transplantierten hESC-CM überwacht könnte führen Verbesserungen bei der Transplantation Techniken und Therapien zu fördern.

N250 Gehirn Potenzial, Persönlich Vertraut Und Neu Erlernten Gesichter Und Objekte

Ereignisbezogene Potenziale beschäftigt hatten gezeigt, dass beim Teilnehmer für ein neuartiges Ziel Gesicht überwachen, die Präsentation der eigenen Gesicht eine verstärkte negative Gehirn Potenzial in den hinteren Kanälen ca. 250 ms nach Reiz auftreten entlockt. Hier, wir untersuchen, ob das eigene Gesicht N250 Wirkung auf andere sehr bekannte Objekte, verallgemeinert insbesondere Bilder des Teilnehmers Hund und eigenem Auto. In unseren Experimenten, die Teilnehmer wurden gebeten, für ein pre-experimentally unbekannten Ziel-Gesicht (Joe), ein Ziel-Hund zu überwachen (Experiment 1: Joes Hund) oder ein Ziel-Auto (Experiment 2: Joes Auto). Die Ziel-Gesicht und Objekt-Reize wurden präsentiert mit Nichtziel-Folien, die neuartige Gesicht und Objekt Reize, das Gesicht des Teilnehmers, ihren eigenen Hund (Versuch 1) und dem eigenen Auto enthalten (Experiment 2). Die konsistente Ergebnisse über den beiden Experimenten waren die folgenden: (1) das N250 Potenzial differenziert die Ziel-Gesichter und Objekte aus der Nichtziel-Gesicht und Objekt-Folien und (2) Obwohl er nicht-Ziele, das eigene Gesicht und eigene Objekte produziert die Antwort eine N250, die gleich in der Größenordnung der Ziel-Gesichter und Objekte nach dem Ende des Versuchs war. So ist wie seine Reaktion auf persönlich vertraut und vor kurzem vertrauten Gesichter und Objekte angegeben, die N250-Komponente eine empfindliche Index individuierte Darstellungen im visuellen Gedächtnis.

Kennzeichnung Von Humaner Mesenchymalen Stammzellen Mit Fluoreszierenden Kontrastmittel: Den Biologischen Auswirkungen

Diese Studie soll die Wirkung bestimmen von humanen mesenchymalen Stammzellen (hMSC) Kennzeichnung mit der Leuchtstofffärbung habe und das Eisenoxid-Nanopartikel-Ferucarbotran auf Chondrogenesis.

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