人間の男性生殖細胞におけるT型電圧駆動カルシウムチャネルサブユニットの同定と局在。複数のアイソフォームの発現

The Journal of Biological Chemistry. Mar, 2002  |  Pubmed ID: 11751928

低電圧作動、電圧作動性Ca（2 +）チャネルは、げっ歯類の雄性生殖細胞で発現されており、マウスの精子の先体反応の誘導に重要であると考えられている。しかし、ヒトでは、ほとんどが雄性生殖細胞またはそれらの関数の電圧作動性Ca（2 +）チャネルの発現が知られていない。我々は、人間の雄性生殖細胞における電圧作動性Ca（2 +）チャネルを活性化し、低電圧の発現を調べるためにin situハイブリダイゼーション、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応を使用し、パッチクランプ記録しています。私たちは、アルファ（1G）とアルファ（1H）の両方の完全長の転写産物は低電圧アクティブチャネルサブユニットはヒト精巣に発現していることを報告します。アルファ複数のアイソフォーム（1G）は精巣内に存在し、以前にヒトに記載されていないスプライス変異体を含むαの少なくとも二つのアイソフォーム（1H）、​​。アルファ（1G）とアルファ（1H）の両方の全てのアイソフォームの転写は、ヒトの精子形成細胞から単離されたmRNAの逆転写ポリメラーゼ連鎖反応によって検出された。アルファ（1G）とアルファ（1H）生殖細胞と精巣内の他の細胞型の両方のローカライズされた転写用のin situハイブリダイゼーション。精細管は、α（1H）内は主に生殖細胞で検出された。発生の現在の振幅と周波数のT-電流の発生に比較して低かったものの、全細胞パッチクランプ技術を使用して、我々は、単離されたヒト雄性生殖細胞ではT-型電位作動性Ca（2 +）チャネル電流を検出マウス雄性生殖細胞。我々はその結論低電圧作動電圧作動性Ca（2 +）チャネルは、人間の男性生殖系列の細胞で発現されています。

雄性生殖細胞における電圧駆動カルシウムチャネル

Reproduction (Cambridge, England). Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11866687

先体反応は、受精に重要なイベントです。先体反応の誘導のための現在のモデルでは、精子細胞膜のイオンチャネルのアゴニスト誘導ゲーティングによって仲介されるCaの必要流入（2 +）が組み込まれています。精子に電気生理学的手法を適用することの難しさは厳しく、これらの細胞における機能イオンチャネルの発現に関する研究を妨げている。しかし、ここ数年の間に、分子生理学的手法を用いて（未熟な精子形成細胞に適用される）の組み合わせは、Caの式（2 +）雄性生殖細胞におけるチャネルおよび先体反応の誘導における役割の両方を明らかにしています。今では体細胞で発生するものに似て電圧作動性Ca（2 +）チャネルの範囲は、精子に発現していること。表示されます。男性の齧歯類の生殖細胞は膜電位によって規制さと透明帯刺激精子の主のCa（2 +）流入メカニズムを提供している低電圧活性化（T型）チャネルを表現しています。人間の精子では、同様のチャンネルが明らかに表明したが、先体反応の誘導にそれらの機能はまだ確立されていないされています。その他、高電圧活性化チャネルの範囲は、齧歯類とヒト精子に存在しているように見えますが、その役割はまだわかっていません。このレビューでは、構造と電圧作動性Ca（2 +）チャネルの特性が概説されていると雄性生殖細胞での発現と機能のための証拠が組み立てられ、説明されています。

透明帯とプロゲステロン誘発性Ca2 +シグナル伝達とヒト精子の先体反応

Journal of Andrology. May-Jun, 2002  |  Pubmed ID: 12002428

ヒト精子細胞内[Ca2 +の]（[Ca2 +の] I）によってプロゲステロン刺激強度のエンコーディング

The Biochemical Journal. Jun, 2003  |  Pubmed ID: 12614198

プロゲステロンは二相性のCa（2 +）流入と人間の精子の結果先体反応を誘導する。我々は、細胞によって刺激の強さのエンコーディングを調べるために（投与量およびそれ以前の受容体脱感作）刺激を変化させるために2つの手順を使用しているの[Ca（2 +）]（[Ca（2 +）の（I））。一過性の先体反応と振幅（ただし動力学）の[Ca（2 +）]（i）の応答（人口測定）の範囲でシグモイド用量の感度を示し、0.3 NM-3マイクロモル、約300nmで飽和（ED（50）約30 nM）を。持続的な応答の振幅は3マイクロモルで飽和。単一細胞イメージングは​​、一時的と持続的の両方の[Ca（2 +）]（i）の応答の振幅が非常に用量依存性であることが、発生と動態のその頻度は、主に用量に依存したこと。示された蛍光測定は、確認したプロゲステロン誘発性の[Ca（2 +）]（i）の流入は、3マイクロモルのプロゲステロンが無効であることの二番目以降のアプリケーションでは、脱感作の対象となった。しかし、3 nMで、30 nMの3マイクロモルのプロゲステロンの順次追加は発生する過渡の[Ca（2 +）]（i）の応答を各濃度に対する応答の振幅と持続時間3マイクロモルのプロゲステロンは、非前処理細胞と比較して減少して。単一細胞イメージングは​​、前処理が応答した細胞の割合に影響を及ぼさなかったことを明らかにしたが、同様に人口の応答に単一セルの応答は、[Caの遅いコンポーネントの脱感作の効果と一致して小さかったと著しく持続時間が減少（2 +）]（i）の一時的な。私たちは、投薬量又は脱感作によって変化プロゲステロンの刺激の強さは、アナログの[Ca（2 +）]（i）の信号によりエンコードされている。結論先体反応の用量依存性は、したがってませプロゲステロン応答細胞の数ではなく、 '定数'の応答の人口のエキソサイトーシスの確率の変化によって決定されます。

ヒトにおけるPrefertilizationイベントを学ぶに生理学的およびプロテオミクスアプローチ

Reproductive Biomedicine Online. Oct-Nov, 2003  |  Pubmed ID: 14753177

本研究では成熟した人間の精子が受精のために準備する方法、細胞および分子の用語で、理解し、第二に、卵と精子との間の最初のシグナルの相互作用に関与しているどのような要因を識別するために、まず目指しています。これらの目標を達成するために、アプローチの組み合わせは、単一細胞イメージング、パッチクランプやプロテオミクスなど、使用されています。単一細胞イメージングは​​精子で応答をシグナリングに隠された複雑性と異質性を明らかにする。単一細胞レベルで細胞生理学の特性は、パッチクランプによるイオンチャネルの発現と機能の研究など、将来の目的でなければなりません。プロテオミクス実験は男性の特定のサブグループでは、globozoospermiaを有するもの、例えば蛋白質発現の欠陥を識別することを目的としている。 prefertilizationイベントのより良い理解は、非生殖補助治療、男性不妊のための薬剤ベースの治療法の開発が可能になります。

卵母細胞へのアプローチをシミュレートするためにプロゲステロン勾配によるヒト精子の刺激。の[Ca（2 +）]（i）の振動と鞭毛暴行に周期的な遷移の誘導

The Journal of Biological Chemistry. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15322137

プロゲステロンは、哺乳動物の卵子を取り囲む卵丘マトリックスのマイクロモル濃度で存在する。卵母細胞へのアプローチをシミュレートするためにプロゲステロンの濃度勾配にヒト精子の暴露（0-3マイクロモル）は、〔Ca（2 +）]（i）は、多くの細胞では、遅い振動が重畳された際に徐々に開発の増加を誘導した。の[Ca（2 +）]（i）の振動がしばしば非常に低プロゲステロン（<10 nm）で開始し、その頻度は濃度の後続の上昇中に変化していませんでした。振動も発生しましたが、細胞の非常に小さい割合では、プロゲステロンの段アプリケーション（3マイクロモル）に応答して。プロゲステロンが削除された場合は、の[Ca（2 +）]（i）の振動がしばしば永続化またはすぐに再開しました。低Caと灌流（2 +）入浴培地（無添加のCa（2 +））は（3 +）の[Ca（2 +）]（i）の振動を防ぐことはできませんでしたが、彼らはEGTAまたはLaを添加することにより廃止することができる。 。小胞体/小胞体のCa阻害薬（2 +）-ATPアーゼまたはイノシトール三リン酸シグナリングは〔Ca（2 +）]（i）の振動が、その周波数と振幅の両方に影響を与えたリアノジン受容体の薬理学的操作に影響を及ぼさなかった。 BODIPY FL-Xリアノジンライブ精子の染色は主に頭と中間ピースの尾部に結合するリアノジンの局在を示した。の[Ca（2 +）]（i）の振動は先体反応を誘導するが、振動、振動の周期と同期して交互に鞭毛のビートモードを生成する細胞ではなかった。の[Ca（2 +）]（i）のピーク時に精子の頭部の毛の曲げと横方向の動きが顕著中の[Ca（2 +）]（i）の谷と比較して増加した。この活性の交互パターンは、透明帯への浸透を容易にする可能性があります。これらの観​​察は、プロゲステロンの[Ca（2 +）]（i）ヒト精子のシグナル伝達と受精時の精子 "動作"の調節にプロゲステロンの以前に認識されていない効果を同定珍しいと複雑な店舗媒介を開始示しています。

ヒト精子の遅いカルシウム振動

The Biochemical Journal. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 14606954

我々は細胞内Ca2 +プロゲステロン（3マイクロモル）で刺激したヒト精子のシグナリングを調査するために、単一細胞イメージングを使用しています。約である。細胞のプロゲステロンの9％は、記録時間（20-30分）持続した1から4分の周期で、ゆっくりと反復的な[Ca2 +の] I（細胞内Ca2 +濃度）の振動の活性化を引き起こした。精子細胞にT-およびL-型電位作動性Ca2 +チャネルをブロックしますニフェジピンとの前処理は、振動の特性を変更するが、彼らが観察された細胞の割合が減少していませんでした。ベイK 8644またはFPL64176による刺激による[Ca2 +の] I細胞の5-10％の振動が、その周波数（周期4-5分）で低かった。 E（K）（カリウム平衡電位）で膜電位をクランプするバリノマイシンの応用（1マイクロモル）は、細胞膜電位と電圧駆動のコンダクタンスの活性化により、機構に関与していないことを示す、細胞を振動での活動を変更しなかった精子[Ca2 +の] iの振動が生成されます。

グループIII代謝型グルタミン酸受容体の活性化は、骨髄間質細胞におけるCa2 +の流入と一酸化窒素合成酵素活性を阻害する

Journal of Cellular Physiology. Aug, 2005  |  Pubmed ID: 15799084

一酸化窒素（NO）は骨の生理機能に重要である。中枢神経系の構成では、Ca（2 +） - カルモジュリンがNO合成酵素活性を調節しないとグルタミン酸シグナリングが密接にリンクされています。 L-グルタミン酸シグナリングが骨に発生し、骨の調節に関与しているので、骨由来の細胞におけるNO合成酵素のL-グルタミン酸の効果を検討した。 L-グルタミン酸と骨髄間質細胞の治療は40％、基礎NO合成酵素の活性を低下させません。イメージングは​​、L-グルタミン酸は、急速に、通常はローカライズされたゆっくりと可逆落下の原因となったことが示された[Ca（2 +）]（I）。この効果は、細胞膜のCa（2 +）の流入を阻害することによって、そのグルタミン酸作用を発揮し、細胞内Ca（2 +）店舗の破壊に耐性が外ラ（3 +）または細胞外のCa省略（2 +）に敏感であった。 L-グルタミン酸のような効果の唯一の以前の記述は、網膜内のグループIII受容体、mGluR6、の活性化を介してです。ウエスタンブロット法とRT-PCRを用いて、我々はmGluR6タンパク質と骨髄間質細胞における転写産物を検出しました。 NOS活性に及ぼすL-グルタミン酸の効果および[Ca（2 +）]（i）の骨髄間質細胞に、グループIII mGluRの阻害剤、（S）-2 - アミノ-2 - メチル-4 - phosphonobutyric酸によって廃止された。膜電位の記録があったこと、同様に網膜mGluR6活性化、L-グルタミン酸誘発性膜過分極の影響（-16 + / - 2 mV）に、また、グループIII mGluRの阻害に感受性であった。 L-グルタミン酸は、cAMPレベルに影響を及ぼさなかった。我々は、骨髄間質細胞に、グループIII代謝型グルタミン酸受容体の活性化を締結NOのの[Ca（2 +）]（i）と抑制の発生を減らすことは、Ca（2 +）透過性細胞膜のチャネルを阻害する。これらの観​​察結果は、直接骨L-グルタミン酸、骨の成長と規制中心のプロセスにシグナルをリンクします。

ヒト精子の区分カルシウムシグナリング - 受精におけるプロゲステロンの役割を再評価？

Human Reproduction (Oxford, England). Oct, 2005  |  Pubmed ID: 15980011

プロゲステロンは、卵母細胞の近傍にマイクロモル濃度で存在する。ヒト精子細胞内カルシウム濃度の二相性の上昇を生成します（[Ca（2 +）の（I））とプロゲステロンの刺激により先体反応を起こし、ホルモンが関連して先体反応の二次誘導または "プライマー"として機能することを示唆している透明帯を持つ。しかし、プロゲステロンのヒト精子の感度は、多くの細胞が受精する能力を損なうこと、途中で先体反応を受けることができるようになっている。我々は、精子のアプローチとして検出された卵母細胞の刺激、小説応答の結果をシミュレートし、プロゲステロン勾配にヒト精子を公開することが示されている。の緩やかな上昇の[Ca（2 +）]（i）は、発生した時に、多くの細胞では、の[Ca（2 +）]（i）の振動が重畳されています。応答のこのパターンを示す細胞が先体反応を受けるのではなく、〔Ca（2 +）]（i）の山と谷に関連付けられている鞭毛の活動が交互に表示されません。精子頭部の後部のCa（2 +）店は、明らかに "の[Ca（2 +）]（i）の発振器"として機能し、このような複雑な信号を生成します。先体反応と鞭毛のビートが別のCa（2 +）店舗によって規制されている（ⅰ）（ⅱ）これらの店舗は、別のアゴニストによって異なるメカニズムを介して動員されています。とするためのスイッチとしてin vivoでの行為（iii）のプロゲステロン：我々はそれを提案する鞭毛のビートモードを制御する発振器。

受精における精子：現在の理解と今後の研究の方向性

Human Fertility (Cambridge, England). Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16393824

プロゲステロンによって誘発される先体反応および個々の人間の精子のカルシウム応答の細胞内との関係の動態

Biology of Reproduction. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 16957023

3マイクロモルでプロゲステロンは細胞内カルシウムの相性（一時的かつ持続的な）増加（の[Ca（2 +）]（i））はプロゲステロンによって誘発される先体反応（AR）のための前提条件であると考えられているヒトの精子、でトリガされます。ほとんどは、ARの発生、遅延、および補完の特性にどのように関連するかについては知られているように、プロゲステロン誘発性の[Ca（2 +）]（i）の信号を、我々は個々の生きている人間の精子の蛍光顕微鏡を用いてこれらのイベントを検討した。カルシウムイメージング動態やの[Ca（2 +）]（i）のその振幅を示している先体反応のとアクロソーム-無傷の細胞、内の先行プロゲステロン誘発性カルシウム応答の振幅に差は認められなかった後、先体状態の直接評価信号がARの重要な決定要因ではありません。プロゲステロンの刺激後に時間を変化させることでARを逮捕するために細胞外カルシウムのキレート化が最大のARは初期の一時的なカルシウム流入中ではなく持続的なカルシウム応答時に、すぐに次のプロゲステロンの刺激が発生したことを明らかにした。酸性オルガネラプローブLysoTracker DND-99とdapoxyl（2 - アミノエチル）スルホンアミド（DAE）をで染色することにより、リアルタイムで先体分散に従うことをしようとすると、原因で細胞集団の不均一なラベリングに決定的証明した。驚くべきことに、染料は、多くの場合、先体に閉じ込められますが、ヒトの精子細胞の唯一の集団が十分に酸性のアクロソームが含まれていることを示唆している全体の精子の頭部を、染色していませんでした。

一次骨髄間質細胞における血清によって誘発される細胞内Ca2 +振動のキャラクタリゼーション

Journal of Cellular Physiology. Mar, 2006  |  Pubmed ID: 16245308

細胞内Ca2 +シグナル伝達が細胞機能に重要であり、[Ca2 +の] iの振動が内の拡張、グローバルな上昇を必要とせずにCa2 +の敏感なプロセスの配列の正確かつ長期変調を可能に[Ca2 +の] I。我々が検討してきた[Ca2 +の]私は文化の中での増殖と分化を促進するために必要なものに濃度でウシ胎児血清（FCS）成分まで露出した初代ラット骨髄間質細胞内シグナル伝達。自発的な[Ca2 +の] iのシグナルが観察されませんでしたが、百分の一への暴露FCSは41に定期的に、持続的なCa2 +の振動を誘発した+ / - 細胞の3％。 FCS誘起振動の発生率は0.5％で用量依存的、飽和であった。これらの振動は、ミトコンドリア膜電位の100 NM-1マイクロモルのタプシガルギンまたは放電でのCa 2 +ストアの破壊によって逮捕され、50マイクロモルの2 - アミノethoxydiphenylホウ酸（2-APB）とホスホリパーゼCの阻害によりIP3受容体の遮断に敏感であったマイクロモルU73122 5と。振動は、Ca2 +の阻害EGTAまたはLA3と流入以下の周波数と振幅が減少した+がニフェジピン（1-10マイクロモル）とベイK 8644（300 nM）のに十分に敏感であった。誘導の責任係数（S）[カルシウム+] iの振動が熱を20mMジチオエリトリトールのジスルフィド結合の減少の影響を受けない、安定しており、30kDaの分子量フィルタによって保持されます。血清は10％-15％培地で日常的に存在する培養条件下で維持[/ V]と骨髄間質細胞は持続的な振動を示した。これは、骨髄間質細胞におけるアゴニスト誘発Ca2 +の複雑な信号の最初のデモンストレーションである。我々は、Ca2 +振動が文化の中でこれらの細胞で絶えず発生し、細胞の増殖と分化の潜在的に重要な調節因子であると結論した。

ヒト骨芽細胞における機械受容2PK +チャネルTREK-1の発現

Journal of Cellular Physiology. Mar, 2006  |  Pubmed ID: 16250016

TREK-1はまた、脂質​​、遊離脂肪酸（アラキドン酸を含む）、温度、細胞内pH、揮発性麻酔薬を含む、臨床的に関連する化合物の範囲に敏感である2 - 細孔ドメインカリウムチャネルファミリー（2PK +）の機械受容メンバーである。 TREK-1は、例えば、それは休止細胞の膜電位と電気的興奮性を制御する上で重要な役割を果たすと考えられている神経系、心臓、平滑筋などの興奮性組織で高レベルで発現することが知られている。本報告では、我々は、ヒト由来骨芽細胞およびMG63細胞はTREK-1 mRNAおよび蛋白質を確認するためにRT-PCR、ウエスタンブロットおよび免疫組織化学を使用しています。さらに、TREK2cとTRAAKチャネルの遺伝子発現を示しています。また、全細胞パッチクランプ電気生理学は、TREK-1株は多くの類似点は、現在のこれらの細胞は外側カリウム "バックグラウンド·リークを"整流、自発的にアクティブに発現していることを示しています。外向き電流はTEAとBa2 +の大部分は小文字を区別しないで、リゾホスファチジルコリンのアプリケーション（LPC）に敏感です。さらに、ブロッキングTREK-1チャネル活性は、骨細胞増殖をアップレギュレートすることが示されている。それはそのヒト骨芽細胞は機能的に明示TREK-1と、これらのチャネルは、ヒト骨芽細胞の静止膜電位に、少なくとも部分的に寄与すると結論される。我々は、骨のリモデリングにつながる、メカノにTREK-1の役割の可能性を仮説を立て。

精子数をカウントするとこれ以上アップ追加されません。新しい方程式の時間か？

Reproduction (Cambridge, England). Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17504912

精子の機能不全が不妊の最も一般的な原因ですが、我々は診断の貧しい人々のメソッドと驚くほど効果的な治療（生殖補助技術を除く）を持っています。このレビューでは、基本的な精液分析の有用性に挑戦し、新しいパラダイムが即座に必要とされると主張している。我々は潜在的に男性の診断を向上させるために、サブ肥沃なカップルの管理を合理化するために自宅でのスクリーニングの使用について説明します。さらに、我々は、精子機能の新たなバイオマーカーの開発を可能にするプロテオミクスでは、たとえば、フィールド内の最近の進展を概説しています。この新しい知識は、マシンとして精子の我々の理解を変革し、精子の機能不全を有する男性の非ART治療法につながる可能性があります。

ヒトの精子の先体のエキソサイトーシスの動的な解像度

Journal of Cell Science. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18522990

心尖​​部精子の頭部に核を囲む単一の大規模な小胞（アクロソーム）のエキソサイトーシス - 哺乳類の受精に不可欠なステップでは、精子先体反応（AR）です。透明帯の浸透（卵を投資している）と配偶子の融合に必要な膜成分の外部化を促進するかもしれない要因のリリースの両方で結果先体とプラズマ膜のヒューズ、。体細胞のエキソサイトーシスは、迅速なプロセスです - ミリ秒以内に、通常、完全な - まだ先体酵素は、帯の浸透を通じて必要とされる - 分の期間。ここでは、タイムラプス蛍光顕微鏡を使用して、個々のライブ精子でリアルタイムで発生する、この重要な、複雑なイベントの最初の研究を紹介します。先体内容とセルの頂点で開始急激な膜融合は、先体内容の非常にゆっくりと分散（最大12分）が続いている内側の先体膜のショーのために別個のプローブの同時イメージング。途中で彼らの先体を失う細胞が（自発的なAR）、卵の服を貫通する能力を損なうことは、すでに運動性および生存率の低下にさらされているものです。刺激によって誘発されるAR（プロゲステロンまたはA23187）を受けて細胞が割合残っている運動（プロゲステロン）で、実行可能なままになります。これらの知見は、ARはエキソサイトーシスの適応性の高い形式であることを示唆している。

プロゲステロンによって媒介されるヒト精子走化性の分子機構

PloS One. 2009  |  Pubmed ID: 19997608

精子走化性は、5月の向きは、卵表面に精子するメカニズムを誘導する化学物質である。プロゲステロンのピコモル濃度勾配（P）、卵を取り囲む卵丘細胞から分泌される主要なステロイド成分は、ヒトの精子を集めています。シグナル伝達分子の薬理学的阻害、セカンドメッセンジャーと走化性シグナル伝達の活性化の濃度の測定：Pによって媒介される精子の走化性の分子機構を解明するために、我々は様々な戦略のアプリケーションを組み合わせたものです。我々のデータは、TMAC-cAMP依存PKA経路は蛋白質チロシンリン酸化（赤道帯と鞭毛）とカルシウム動員（続いて、最初に起動されている、応答の古典的なシグナル伝達経路の数を巻き込む、イベントのシーケンスのためのモデルを提供IP（3）RとSOCチャネル）を介して、SGC-cGMPの-PKGカスケードのに対し、後にアクティブになります。これらのイベントは、化学誘引物質の発生源に向かって精子方向につながる。結果は、走化性などの生理的プロセスで行われるシグナル伝達経路の理解に寄与する分子機構を提案する。

ケシRhoeasの自家不和合性は、Ca2 +とKの透過性非特異的陽イオンコンダクタンスをアクティブにします+

Plant Physiology. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21177472

細胞応答は、シグナル伝達に依存しています。植物細胞において、細胞質ゾルの遊離カルシウムの主要なセカンドメッセンジャーであり、イオンチャネルは、生理的な反応を介在する上において重要な役割を果たしています。自家不和合性（SI）は、自家受精を防ぐために重要な遺伝的制御メカニズムです。それは、互換性のない花粉の拒絶反応をトリガーする "自己"の認識を、許可するように雌しべと花粉からS-行列式にマッチするとの相互作用を使用しています。ケシ属のrhoeasでは、S-決定はPrsSとPRPSです。 PrsSは、システインに富むタンパク質小さな小説であり、PRPは小さな新規膜貫通タンパク質である。互換性の花粉とPrsSの相互作用には互換性がなく互換性がない花粉にプログラム細胞死、その結果、S-特定の細胞質ゾルの遊離カルシウムの増加とアクチン細胞骨格の変化を刺激する。ここでは、PrsSは互換性がなく、互換性のある花粉プロトプラストにおける花粉粒の細胞膜コンダクタンスのSI-特異的活性化を促進することを示すために花粉プロトプラストのクランプホールセルパッチを使用しています。 SI-活性化コンダクタンスは電圧活性化を必要としませんが、それは電圧に敏感です。それは、二価カチオンの（Ba（2 +）≥のCa（2 +）> MG（2 +））に透過性であり、一価イオンのK（+）とNH（4）（+）と-100の負電圧で強化されていますmVです。 Ca（2 +）のコンダクタンスは、La（3 +）ではなく、ベラパミルによってブロックされています。K（+）電流が小文字を区別しないテトラエチルアンモニウムクロリドとCa（2 +）を必要としません。我々は、SI-刺激コンダクタンスが非特異的陽イオンチャネルまたは一価および二価の陽イオンの透過性の可能性がある2コンダクタンスを表すことができることを提案する。我々のデータは、生物学的に重要な応答が関与するシグナル応答カップリングへの洞察を提供しています。 PrsSは、イオンチャネル活性の変化を誘発するタンパク質のまれな例を示します。