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Articles by Sumita Bhaduri-McIntosh in JoVE

 JoVE Immunology and Infection

엡스타인 - 바 바이러스 성장 변화 Lymphoblastoid 전지 라인 구축


JoVE 3321 11/08/2011

1Stony Brook Children's Hospital, State University of New York at Stony Brook, 2Department of Pediatrics, State University of New York at Stony Brook, 3Department of Molecular Genetics, State University of New York at Stony Brook, 4Department of Microbiology, State University of New York at Stony Brook

우리는 엡스타인 - 바 바이러스를 사용하여 변형 B 세포 라인을 생성하는 방법을 설명합니다. 우리는 또한 감염 후 삼일 빠르면 변환을 받다 운명 B 세포를 식별할 수있는 소설 분석을 설명합니다.

Other articles by Sumita Bhaduri-McIntosh on PubMed

인간의 Herpesvirus 8: 신흥 바이러스 성 병원 체의 임상적 특징

셀 Lytically 엡 스타인-바 바이러스에 감염 면역 글로불린 EBV Seropositive 개인에 의해 감지 하 고 분리할 수 있습니다

엡 스타인-바 바이러스 (EBV) 용균성 주기 유전자 발현 EBV 연관 된 질환의 pathogenesis의 세포에서의 역할은 불완전 하 게 이해 된다. 물리적으로 lytically을 분리 하는 기능은 동일한 모집단에서 latently 감염 된 세포에서 유도 하 고 동시에 검사 하 크게 용균성 사이클 유도 자극 단일 세포 수준에서 EBV 감염 된 세포의 민감성을 제어 하는, 세포, 바이러스 성 및 환경 요인의 이해 강화 것 이라고. 이 연구는 latently 감염 된 B 세포에서 유도 된 흐름 cytometry 기반 시스템, 개인 EBV에 면역 인간 혈 청 면역 글로불린 정의상 사이의 차별을 하 고 물리적으로 별도 lytically를 사용할 수를 사용 하 여 보여 줍니다. 이 새로운 양적이 고 중요 한 기술을 사용 하 여, 용균성 주기 활성화에 대 한 두 개의 소설 관찰 되었다. 첫째, 히스톤 deacetylase 저 해제 하 여 활성화 용균성 사이클의 속도 론은 DNA 메 틸 전이 억제제에 의해 유도 보다 더 빠른. 용균성 주기 활성화를 처음 내 화 둘째, 산 처리 세포 유도 에이전트 후속 노출 시 유도 될 수 있다. 따라서, 용균성 사이클 유도 latently 감염 된 B 세포의 민감성 영구 세포질이 아니라 환경과 생리 적인 요인에 지배 또는 바이러스 성 유전자 변화입니다.

화 농성 Pericarditis는 연쇄 상 구 균 그룹에 의해 발생합니다

화 농성 pericarditis 포도 상 구 균, 연쇄 상 구 균 균 viridans streptococci Haemophilus 형, 혐 기성 박테리아 등 미생물에 의해 가장 자주 발생 하는 희귀 질병 이다. 우리 pyogenes 연쇄 상 구 균으로 인 한 화 농성 pericarditis의 특이 한 사례를 제시 하 고 Lancefield 그룹 연쇄 상 구 균 (가스), 우리 문학의 검토를 제공 합니다.

엡 스타인-바 바이러스 (EBV) 초기 용균성 항 원 혈 청 IgA 항 체는 기본 EBV 감염에 존재 합니다

기본 엡 스타인-바 바이러스 (EBV) 감염이 바이러스 capsid 항 원에는 IgM 항 체의 존재 및 EB 핵 항 원 항 체의 부재에 의해 특징입니다. 여기, 우리가 IgA 항 체는 1 차 감염에 대 한 표식 여부 조사 흐름 cytometry 기반 분석 결과 사용 하 여. 15 개인 기본 EBV 감염에서 혈 청 IgA 항 체 반응을 표현 초기 용균성 항 원 (EAs), HH514-16 Burkitt 림프 종 세포의 15%-55.6%로 15 건강 한 EBV seropositive 개인에서 혈 청 샘플에서 IgA 항 체 반응 셀 Eas의 0.02%-2%와 반면 (P <.0001). 1 차 감염에 IgA 항 체 Bam Z 엡 스타인-바 복제 활성기 (지 브라) (BZLF1)에 대 한 지시 했다 하 고 EA (BMRF1) Eas를 확산. 따라서, EBV Eas에는 IgA 항 체 기본 EBV 감염 시 생성 되 고 점 막 사이트에서 용균성 EBV 복제 결과로 자극 될 가능성이 있습니다. Ea IgA 항 체의 검출 기본 EBV 감염을 위한 진단 도구로 개발 될 수 있습니다.

레 퍼 토리와 면역 세포 반응성 헌 Lymphoblastoid 엡 스타인-바 바이러스 파생 셀 라인의 주파수입니다

주파수와 면역 세포, 총 엡 스타인-바 바이러스 (EBV) 쪽으로 면역 세포의 종류에 의해 상대적 기여의 레 퍼 토리에 대 한 질문에 대 한 답변-응답 및 건강 한 사람에서 이러한 응답 변형 되어 애매 격차를 분석 실험, 항 원 제시 세포 및 항 원 소스 이전 실험에 사용 되는 때문에 감독. 이 연구에서 우리는 면역 체계의 세포의 종류에 의해 생성 된 응답을 직접 비교할 수 있는 분석 결과 사용 하 여 이러한 질문을 해결. 이 단기 (20 시간) ex vivo 분석 결과 혈액 세포 헌 EBV 변형 lymphoblastoid 셀 라인 (LCLs)에 대 한 응답으로 인터페론-감마의 생산을 측정. 우리의 실험 명 가운데 응답에 변화를 정의 하 고 10 건강 한 EBV-순 진 사람에 게 서 10 건강 한 EBV 면역을 명확 하 게 구별 합니다. EBV 면역 명 응답 셀의 33%가 CD4(+) 하 고 43.3%는 이었다 CD8(+), 12.9% 감마 델타 T 세포를 했다. LCL 반응 CD8(+) T 세포 유사 하 게 반응 CD4 보다 1.7-fold 더 자주만 있었다 (+) T 세포. 감마 델타 T 세포에 의해 응답은 접을 높은 혈 청 부정 명에서 보다 seropositive. CD4(+) 및 감마-델타의 중요성을 강조 하는 우리의 연구 결과 T의 세포 응답 immunotherapy과 lymphomas EBV 관련 개발 predispose 수 있습니다 T 세포 인구에 있는 결함을 식별 하는 데에 영향을 미칠 및.

엡 스타인-바 바이러스 중재 Dysregulation 인간의 MicroRNA 식의

MicroRNAs (miRNAs)는 큰 작은 클래스 (약 22 nt) noncoding RNAs 부정적인 가장 자주 번역의 수준에서 유전자 발현을 조절 하 고 다양 한 프로세스 개발, 면역, 세포 주기 등 주요 레 귤 레이 터로 표시 되었습니다. 엡 스타인-바 바이러스 (EBV)은 적어도 20-2 자체 miRNAs 인코딩하 금하는 헤 르 페 스 바이러스 인간에서 지방 병. 셀룰러 miRNAs 암과 면역 경로에서 잘 설립 역할이 있고 여러 세포 miRNAs 직접 대상으로 바이러스 성 메시지. 또한, 여러 바이러스 세포 RNAi 유도 침묵의 진압 익스프레스. 여기 우리가 바이러스 있습니다 인코딩하거나 miRNA 표현의 억압을 활성화 제안 셀룰러 miRNA 식의 극적인 downregulation에서 기본 교양된 인간 B 세포 결과의 EBV 드 노 보 감염을 보여줍니다. 우리는 또한 단백질 modulatory microRNA 미르-146a, downregulated 초기 감염에 크게 upregulated 이상 약 바이러스 용균성 사이클의 유도 따라을 용균성 사이클의 진행에 억제 효과 가질 것으로 보인다 보여줍니다. 우리의 결과 EBV 셀룰러 miRNA 식에 상당한 효과가 있다.

자극 기간 및 응답 시간이 엡 스타인-바 바이러스의 재 활성화 용균성 사이클의 속도 독립적으로 영향

엡 스타인-바 바이러스 (EBV)는 용균성 사이클로 대기 시간-다른 메커니즘에 의해 작동 하는 여러 자극에 의해 다시 활성화할 수 있습니다. EBV 포함 된 셀 줄 다를 유도 하는 자극에 대 한 응답을 아직 모든 자극이 필요한 데 노 보 단백질 합성 (44). 이 단백질을 확인 하 고 때 그들은 필요한 결정 예비 중요 한 단계 EBV brlf1와 BZLF1, 재 활성화의 초기 바이러스 성 지표의 표현의 활성화를 위해 필요한 자극 및 응답 시간의 기간을 측정 하는 것. 여기 우리가 4 개 포함 하는 EBV 셀 라인 응답 다른 유도 요원을 다시 활성화 하는 EBV에 효과적인 자극 두 가지 주요 그룹으로 나눌 수 있습니다 보여줍니다. 히스톤 deacetylase 억제제 나트륨 산 및 trichostatin A 노출, 2 4 h 이상에서 비교적 긴 기간이 필요합니다. Phorbol 에스테 르, 글로불린 G (안티 IgG) 놀랍게도, 5-아 자-2'-deoxycytidine 15 분 또는 그 이하의 짧은 노출이 필요로 하는 고. 셀/바이러스 배경 응답 시간을 영향을 줍니다. EBV bzlf1와 BRLF1 유전자의 표현 Akata 셀 2 h anti-IgG로 치료 하지만 두 장기 및 단기 기간 자극 필요 HH514-16, 들의 삶 문의 또는 B95 8 셀에 BZLF1 및 BRLF1 식 활성화를 4 개 이상 시간 전에 감지할 수 있습니다. 따라서, 자극 기간 및 응답 시간이 독립 변수는. 나도 자극 기간도 응답 시간 용균성 사이클로 활성화 된 셀의 수에 의해 예측 될 수 있습니다. 이러한 실험 EBV의 용균성 주기 재로 이어지는 초기 이벤트에 새로운 빛을 나타냈다.

HDAC 저 해제에 의해 STAT3 Upregulation 표시 Burkitt 림프 종 세포 엡 스타인-바 바이러스 용균성 사이클 유도 내 화물

엡 스타인-바 바이러스 (EBV)와 바이러스 성 용균성 사이클 자체의 잠-용균성 스위치 공부에 근본적인 문제는 용균성 사이클 유도를 완벽 하 게 허용 하는 문화 시스템의 부족. 전략 대상 EBV 양성 종양 유도 화학 에이전트와 바이러스 성 용균성 사이클 비효율적 응답 자극에 의해 방해 하는 것. 생체 외에서, 가장 취약 셀 라인에도, 셀 latently EBV 감염의 50% 이상은 용균성 주기의 유도 내 화물. 내 화물 상태를 기본 메커니즘을 이해 하지 않습니다. 우리 분리 나트륨 산 HDAC 억제제는 치료 후 내 화 Burkitt 림프 종에서 파생 된 HH514-16 셀에서 용균성. 두 다루기 힘든 용균성-세포 인구 H3 히스톤의 hyperacetylation에 의해 유도 자극에 반응. 그러나, 호스트 세포 유전자 발현의 분석이 나타났다는 특정 세포 성적표 Stat3, Fos, 및 인터 루 킨-8 (IL-8) 우선적으로 다루기 힘든 셀 인구에서 upregulated IL 6는 용균성 인구에서 upregulated. STAT3 단백질 수준 또한 실질적으로 치료 또는 용균성 셀을 기준으로 내 화 세포에서 증가 했다. 드 노 보 식이이 증가 unphosphorylated STAT3 주로 결과. 단일 셀의 시험 STAT3 높은 수준의 내 화 상태와 강력 하 게 연결 했다 밝혔다. 내 화 상태가 용균성 셀 동일한 자극에 노출 하는 것 보다 다른 세포 응답을 전시 하는 셀의 독특한 subpopulation에서 매니페스트. 셀 용균성 유도 용균성 정품 인증을 받아야 하는 셀을 기준으로 내 화물의 특성을 식별 용균성 스위치에 숨겨진 EBV의 레 귤 레이 션의 더 나은 이해를 개발에 중요 한 단계는 것입니다.

엡 스타인-바 바이러스와 함께 감염 후 확산 하는 B 세포의 공략의 식별

엡 스타인-바 바이러스 (EBV)-구동된 B 세포 증식 호스트에 후속 지 속성에 중요 한 이며, B 셀 EBV 연관 된 질병의 발전에 주요 행사입니다. 따라서, 문의 앞에 B 세포의 확산 EBV 구동 초기 셀룰러 이벤트로 B 셀 EBV 연관 된 질병으로 이어질 수 있는 프로세스를 이해 하는 데 필수적 이다.

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