Activación Del Sistema Cardiaco De La Endotelina En El Ventrículo Izquierdo Se Hipertrofia Antes De La Aparición De Insuficiencia Cardiaca En TG (mREN2) 27 Ratas

Cardiovascular Research. Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11827687

Para caracterizar la angiotensina cardiaca y endotelina sistema (ET) en compensación la hipertrofia ventricular izquierda debido a la hipertensión arterial de larga data y a evaluar el papel de la angiotensina y ET conversión de enzimas en la mediación de los cambios observados de angiotensina y los niveles de ET, respectivamente.

Inhibición De La Fibrosis Ventricular Izquierda Por Tranilast En Ratas Con Hipertensión Renovascular

Journal of Hypertension. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11910312

Factores de crecimiento como transformar el factor de crecimiento beta (TGF-beta) se cree que tienen un papel esencial en la fibrosis cardiaca. Tranilast (N(3,4-dimethoxycinnamoyl) el Ácido antranílico) atenúa el aumento de la expresión de TGF beta mRNA in vitro.

Antagonismo Fisiológico Entre Ventricular Beta 1-adrenoceptores Y Alfa 1-adrenoceptores Pero No Prueba De Beta 2 - Y Función De 3-receptores Adrenérgicos Beta En Corazón Murino

British Journal of Pharmacology. May, 2002  |  Pubmed ID: 12010770

1. Murino aurícula izquierda carece de la función 2-receptores adrenérgicos beta inotrópicos. Investigamos si 2 beta-adrenoceptores están implicados en los efectos cardiostimulant de (-)-adrenalina en vencer espontáneamente a aurículas derecha y miocardio ventricular derecha ritmo de ratones C57BL6. También estudiamos un efecto inotrópico negativo de (-)-adrenalina. 2. Sinoauricular taquicardia, evocada por (-)-adrenalina era resistente al bloqueo por beta (2)-selectiva 118.551 ICI (50 nM) pero hostilizadas por beta (1)-CGP selectiva 20712A (300 nM). Este patrón era inafectada por el tratamiento previo con toxina pertussis (PTX, 600 microg kilogramo i.p. 24 h) que invierte Carbacol-evocado bradicardia, taquicardia. 3. Aumento de la fuerza ventricular por (-)-adrenalina y (-)-noradrenalina no fueron bloqueados por ICI 118.551 pero irritó al CGP 20712A. 4. Por el bloqueo de beta-adrenoceptores, (-)-adrenalina y (-)-noradrenalina deprimido fuerza ventricular (-lógica (50) M = 12.4 y 6,9). Los efectos de la cardiodepressant de (-)-adrenalina se irritó por Fentolamina (1 microM) y prazosina (1 microM) pero no por (-)-bupranolol (1 microM). Prazosina potenció los efectos inotrópicos positivos de (-)-adrenalina (en ausencia de los betabloqueantes) de - logEC (50) M = 6.2 - 6.8. 5. PTX-tratamiento reduce depresión Carbacol-evocado de fuerza ventricular en presencia de concentraciones de catecolaminas alta. Inhibición de la función ventricular de la proteína G(i) se verificó por 82% reducción de ribosilacion in vitro. PTX-tratamiento tendió a aumentar la potencia inotrópica positiva de (-)-adrenalina bajo todas las condiciones investigadas, incluyendo la presencia de ICI 118.551. 6. (-)-Adrenalina causa murino cardiostimulation a través de 1 beta-adrenoceptores pero no a través de beta 2-adrenoceptores. Los efectos inotrópicos negativos (-)-adrenalina están mediadas por ventricular 1-adrenoceptores alfa pero no a través de 3 beta-adrenoceptores. G(i) proteína tanto alfa 1-adrenoceptores refrenan (-)-adrenalina-evocado aumento ventricular derecha fuerza mediada a través de 1 beta-adrenoceptores.

Específicos (2) AR Betabloqueador ICI 118.551 Activamente Disminuye La Contracción a Través De Un G (i)-junto a La Forma De La Beta (2) AR En Miocitos Desde Falta De Corazón Humano

Circulation. May, 2002  |  Pubmed ID: 12034656

Hemos observado efectos inotrópicos negativos (noncatecholamine-bloqueo) directos del antagonista de receptores 2 adrenérgicos beta2 (AR) beta selectivos ICI 118.551 en miocitos desde falta de ventrículo humano. En este estudio nos caracterizar el efecto paralelamente en miocitos humana y en miocitos de animal donde los modelos beta (2) ARs o G(i) se sobreexpresa proteínas.

Proteína Repetición Ankyrin Cardiaca, Un Regulador Negativo De La Expresión Génica Cardiaca, Es Aumentada En La Insuficiencia Cardíaca Humana

Biochemical and Biophysical Research Communications. May, 2002  |  Pubmed ID: 12054667

Se ha aplicado la técnica de análisis de la representación de la diferencia del cDNA para detectar genes expresados diferencialmente en un modelo canino de insuficiencia cardiaca inducida por la estimulación. Identificamos el homólogo del canino de la proteína repetición ankyrin cardiaca (carpa) que se ha demostrado que intervienen en la regulación de la transcripción de genes cardiacas. Para confirmar la importancia para el fracaso del corazón humano, muestras de tejido cardíaco de corazones de donantes no falla y de explantado corazones de pacientes con insuficiencia cardíaca final fueron investigadas. Los niveles de mRNA y proteína de carpa aumentaron marcadamente en su defecto los ventrículos izquierdos. Curiosamente, alteraciones en la expresión de la carpa se restricción a tejido ventricular y no se observaron en los atrios. Fraccionamiento experimentos revelaron que la carpa se expresó predominante en los núcleos compatibles con la función propuesta de carpa como modulador de la transcripción. Juntos, estos hallazgos plantean la posibilidad de que había aumentada expresión de carpa ventricular puede desempeñar un papel en la patogenia de la insuficiencia cardíaca humana.

Beta-bloqueo Intracelular: Sobreexpresión De Galpha(i2) Deprime La Respuesta Beta-adrenérgico En Miocardio Intacto

Cardiovascular Research. Aug, 2002  |  Pubmed ID: 12123769

Se han observado niveles elevados de proteínas G inhibitorias en la insuficiencia cardíaca, pero su importancia fisiológica en la mediación de la disminución en la respuesta beta-adrenérgico es desconocida.

Efecto Del Genotipo CYP2D6 Sobre El Metabolismo De Metoprolol Persiste Durante El Tratamiento a Largo Plazo

Pharmacogenetics. Aug, 2002  |  Pubmed ID: 12172215

El metoprolol de betabloqueante selectivo beta1 se metaboliza predominante pero no exclusivamente por CYP2D6. Por el polimorfismo del gen CYP2D6, actividad de CYP2D6 varía considerablemente entre individuos. En consecuencia, después de que se encontraron concentraciones de plasma de metoprolol de administración a corto plazo varios doblan superior en otras pobres que en otras extensas. Sin embargo, actualmente no se sabe, si el impacto del polimorfismo del CYP2D6 persiste durante la terapia a largo plazo, desde los mecanismos alternativos de eliminación o metabolismo puede ser eficaz en esta configuración. El estudio consta de 91 pacientes caucásicos en tratamiento prolongado con metoprolol (mediana de la duración del tratamiento a 12.6 meses; dosis diaria media de drogas: 47.5 mg/día). Metoprolol y las concentraciones plasmáticas de alfa-OH-metoprolol se evaluaron por HPLC. Genotipado detecta los alelos nulos (* 0): * 3, * 4, * 5, * 6, * 7, * 8, * 12, * 14 * 15, los alelos * 9, * 10 y * 41 asociados con reducida actividad enzimática, así como los alelos completamente funcionales * 1 y * 2. Genotipo y alelo frecuencias fueron según frecuencias publicadas para la población alemana. El cociente metabólico del plasma de metoprolol/alfa-OH-metoprolol fue notablemente afectado por el genotipo (P < 0.0001). De acuerdo, mediana ajustada a las concentraciones plasmáticas de metoprolol fueron 6.2 y 3.9 veces mayor en los pacientes con * 0 / * 0 genotipos (n = 8) y genotipos intermedios (n = 10), respectivamente, en comparación con los dos alelos completamente funcionales (n = 31; P < 0.01). En Resumen, el pronunciado efecto del genotipo CYP2D6 persiste durante la terapia a largo plazo, afectando tanto cociente metabólico y la concentración plasmática de metoprolol.

Expresión De Proteínas RGS Diez En El Miocardio Humano: Caracterización Funcional De Una Regulación Al Alza De RGS4 En La Insuficiencia Cardiaca

Cardiovascular Research. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12176127

Proteínas RGS (reguladores de señalización de proteína G) negativamente regulan la función de la proteína G como GTPasa activación de proteínas. Controlando las proteínas heterotriméricas G pueden regular la contractilidad y la hipertrofia del miocardio. Hemos investigado la expresión de proteínas RGS en el corazón humano y si participan en la falta de cambios patofisiológicos en el corazón.

Ingeniería Del Tejido Cardiaco

Transplant Immunology. May, 2002  |  Pubmed ID: 12180846

Avances recientes en implantaciones de diferenciados cardiaca y no cardiaca células así como células madre adultas en el corazón sugieren que puede sustituirse por lo menos en parte la pérdida irreversible de los miocitos cardiacos viables que ocurre durante el infarto de miocardio. Se evaluó un enfoque alternativo por reconstitución in vitro de injertos de tejido cardíaco y les implantar como espontáneamente y contratación coherentemente los tejidos. Para ello nos hemos optimizado un método para generar el tejido del corazón de ingeniería tridimensional en forma de anillo (EHT) in vitro de miocitos cardiacos de rata neonatal. Cuando se someten a las medidas de fuerza isométrica en baños de órgano, estimulados eléctricamente EHTs exhiben un comportamiento de Frank-Starling, una respuesta inotrópica positiva a aumentos de calcio extracelular, inotrópico positivo y lusitropic ante la isoprenalina y una respuesta inotrópica negativa para el agonista muscarínico Carbacol ("acentuado antagonismo"). Contracción nerviosa tensión bajo cantidades de calcio máximo a 1-2 mN / mm2. Lo importante, tensión pasiva (descanso) es baja, produciendo una relación de tensión de activo/pasivo de aproximadamente 1.5 bajo basal y 14 bajo calcio máxima. Morfológicamente, EHTs representan una red tridimensional altamente interconectada de miocitos cardiacos asemejándose a flojo tejido cardiaco con una alta fracción de miocitos cardiacos binucleadas, eosina fuerte y núcleos alargados céntricos. La microscopia electrónica demostró bien desarrolladas estructuras sarcomeric, T-túbulos, vesículas SR, T-túbulo-SR-uniones, todo tipo de estructuras de tejido conectivas intercelulares y una membrana basal. Así, EHTs comprenden las propiedades morfológicas y funcionales del miocardio ventricular, intacto. Primeras experiencias de la implantación de EHTs en el peritoneo de las ratas Fischer 344 demostraron que EHTs sobrevivieron durante por lo menos 14 días, mantiene una red de miocitos cardiacos diferenciados y fueron fuertemente vascularizadas. Así, el EHTs puede servir como material para un enfoque de reemplazo de tejido nuevo.

Expresión Aumentada De La Cardiotrofina-1, En Su Defecto Los Corazones Humanos Es Acompañado Por La Abundancia De Proteína De Receptor 130 Glicoproteína Disminuida

Circulation. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12234945

Cardiotrofina-1 (CT-1), un miembro de la superfamilia de interleukin-6, es un potente inductor de la hipertrofia del cardiomiocito que prolonga la supervivencia del miocito. Aunque cardiaca expresión génica de CT-1 se sabe que alza en algunos modelos animales de insuficiencia cardíaca congestiva, el estado de activación del sistema CT-1 en pacientes con insuficiencia cardíaca congestiva es desconocido.

Injerto Cardíaco De Ingeniería Tejido Cardíaco En Ratas Singénicos

Circulation. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12354725

Injerto celular se ha convertido en un nuevo enfoque para tratar enfermedades cardíacas refractarias a la terapia convencional. Presumimos la supervivencia y la integración funcional y eléctrica de injertos puede mejorarse mediante ingeniería construcciones de tejido cardíaco in vitro antes de injerto.

Incremento En La Frecuencia Del Citocromo P450 2D6 Otras Pobres Entre Pacientes Con Efectos Adversos Asociados De Metoprolol

Clinical Pharmacology and Therapeutics. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12386645

El genotipo CYP2D6 es un determinante de las diferencias interindividuales en la depuración plasmática de metoprolol. Citocromo P450 2D6 (CYP2D6) otras pobres exhiben 3 a 10 veces más altas concentraciones plasmáticas después de la administración de metoprolol que otras extensas. Sin embargo, el impacto del genotipo CYP2D6 en la aparición de efectos adversos de metoprolol sigue siendo polémico. Este estudio examinado si la incidencia de otras pobres fue mayor en pacientes con metoprolol asociado efectos adversos que en la población alemana en general.

3D Diseñado Tejido Cardíaco Para La Terapia De Reemplazo

Basic Research in Cardiology. 2002  |  Pubmed ID: 12479248

Infarto de miocardio resulta irreversible pérdida de miocitos cardiacos e insuficiencia cardíaca. Tejido o célula injerto ofrece la posibilidad de volver a introducir elementos contráctiles en corazones deteriorada. Sin embargo, los miocitos cardiacos implantados permanecen físicamente y eléctricamente aislados de miocardio viable. Por consiguiente, la prueba de la función contráctil aumentada atribuible específicamente para procedimientos de injertos de células es escasa. En los últimos años, hemos desarrollado un nuevo método para generar el tejido del corazón Ingeniería tridimensional (EHTs) in vitro de polluelo embrionario o miocitos cardiacos de rata neonatal. EHTs comprenden las propiedades morfológicas y funcionales del miocardio intacto. Presumimos que EHTs, realizados in vitro en formas geométricas adecuadas, representan el injerto apropiados para la reparación de los tejidos in vivo con ventajas sobre células aisladas. Aquí describimos los resultados iniciales de los experimentos de la implantación de EHTs en el peritoneo de las ratas Fisher 344. EHTs sobrevivieron durante por lo menos 14 días, mantiene una red de miocitos cardiacos diferenciados y fueron fuertemente vascularizadas. Así, el presente estudio proporciona la primera evidencia de la viabilidad general de EHTs como material para un enfoque de reemplazo de tejido nuevo.

Evidencia De La Proteína Fosfatasa Inhibidor-1 Jugando Un Papel De Amplificador En Señalización Adrenérgicos En Miocitos Cardiacos

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Mar, 2003  |  Pubmed ID: 12514122

La proteína fosfatasa inhibidor-1 (PPI-1) inhibe la fosfatasa tipo-1 (PP1) sólo cuando fosforiladas por protein cinasa A y podría jugar un crucial papel en el equilibrio de fosforilación/desfosforilación. Rata cardiaca PPI-1 fue reproducido por reacción en cadena de polimerasa-transcriptasa reversa, expresado en Escherichia coli, evaluado en ensayos de fosfatasa y para generar un antisuero. Se construyó un adenovirus codificación PPI-1 y la proteína verde fluorescente (GFP) bajo promotores independientes citomegalovirus (AdPPI-1/GFP). Un virus sólo GFP (AdGFP) sirve como control. Tejido del corazón Ingeniería (EHT) de rata neonatal cardiomiocitos y miocitos cardiacos de la rata adulta (ARCMs) fueron utilizados como sistemas modelo. Expresión de PPI-1 se determinó en humanos ventricular muestras por Northern blots. En comparación con AdGFP, cardiomiocitos de rata neonatal AdPPI-1/GFP-infectados muestran una reducción del 73% en actividad PP1. EHTs infectados con AdPPI-1/GFP exhibieron quintuplique isoprenalina sensibilidad. ARCMs AdPPI-1/GFP-infectados muestran mayor celular acortando así como fosforilación fosfolamdano mejorada al ser estimulados con 1 nM isoprenalina. Los niveles de mRNA de PPI-1 se redujeron en 57 +/-12% no corazones con miocardiopatía isquémica y dilatada (n = 8 cada uno) en comparación con nonfailing corazones (n = 8). En Resumen, mayor expresión de PPI-1 incrementa la sensibilidad de la del miocito a isoprenalina, indicando que el PPI-1 actúa como un amplificador en la señalización de beta-adrenérgicos. PPI-1 disminución en su defecto los corazones humanos podría participar en la desensibilización del camino del campo.

Sobreexpresión De Tipo Salvaje Galpha (i) -2 Suprime Señalización Adrenérgicos En Miocitos Cardiacos

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Mar, 2003  |  Pubmed ID: 12631586

El papel de Galpha (i) -2 sobreexpresión en desensibilización de señalización adrenérgicos en la insuficiencia cardiaca es controvertida. Un enfoque basado en adenovirus fue utilizado para investigar si la sobreexpresión de Galpha (i) -2 deteriora estimulación beta-adrenérgico de niveles de actividad y campamento de ciclasa (AC) adenylyl en miocitos cardiacos de rata neonatal (NRCM) y acortamiento de la rata adulta miocitos ventriculares (ARVM) de la célula. Infección de NRCM con Ad5Galpha () -2 aumentó Galpha (i) -2 50-600% de manera dependiente de la dosis de virus. Sobreexpresión fue paralelo por la supresión de GTP-isoprenalina-estimulan AC 10-72% (P < 0.001) de una manera PTX-sensible. Isoprenalina-estimulado acortamiento de Ad5Galpha (i) -2-ARVM infectado fue atenuada por el 34% (P < 0.01). Ad5Galpha (i) -2/GFP (proteína fluorescente Galpha (i) -2, verde; bicistronic) fue construida para controlar la homogeneidad de la transfección y destino Galpha (i) sobreexpresión de-2 a los niveles encontrados en la insuficiencia cardiaca. En Galpha niveles de (i) -2 de 93% sobre control, actividad de AC estimulada isoprenalina y niveles de campo se redujeron en 17% y el 40% (P < 0.02), respectivamente. Estimulación beta1 y beta2-adrenérgicos se redujo de manera similar. Nuestros resultados sugieren que la inhibición de tónico Galpha (i)-2 sistema exposiciones de estimulado AC en miocitos cardiacos, (b) Galpha (i) -2-inhibición mediada es dependiente de la concentración y se produce en Galpha (i)-2 niveles vistos en insuficiencia cardíaca y (c) Galpha (i) -2-inhibición mediada afecta ambos beta1 y beta2-adrenérgicos estimulación de AC. Los datos de abogar por un papel importante, independiente de la Galpha (i)-2 aumento en la insuficiencia cardiaca.

Ingeniería Para La Terapia De Reemplazo De Tejido Cardíaco

Heart Failure Reviews. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12878835

La terapia celular es un nuevo concepto para reparar órganos enfermos. Para los pacientes con infarto de miocardio, insuficiencia cardíaca y enfermedades cardíacas congénitas terapias con células base podrían representar una cura potencial. El campo se puede subdividir en dos enfoques principalmente diferentes: (1) la implantación de células aisladas y (2) implantación de in vitro Ingeniería construcciones de tejido. Esta revisión se centrará en este último enfoque. Ingeniería del tejido cardiaco compone de los campos de las ciencias materiales y biología celular. En general, andamios materiales tales como gelatina, colágeno, alginato, o polímeros sintéticos y células cardíacas son utilizadas para reconstituir tejidos-como construcciones in vitro. Idealmente, estas construcciones Mostrar las propiedades del miocardio nativa como contracciones coherentes, baja tensión diastólica y sincitial propagación de potenciales de acción. Para ser aplicable para la reparación quirúrgica del tejido del miocardio enfermo Ingeniería construcciones deben tener la propensión para integrar y permanecer contráctil en vivo. Tamaño y características mecánicas de ingeniería construcciones son importantes para la reparación quirúrgica de defectos grandes del tejido. Uso acertado de la ingeniería de tejidos en los hombres dependerá de la utilización de un autólogo o no-immunogeneic fuente y andamio material de la célula para evitar inmunosupresión larga vida. Esta revisión le dará una visión general de recientes enfoques en la ingeniería del tejido cardiaco y sus primeras aplicaciones en vivo. Hablaremos de materiales y fuentes de células para la ingeniería del tejido cardiaco. Además, se abordarán los obstáculos del principio. Ingeniería del tejido cardiaco para la terapia de reemplazo tiene una perspectiva interesante, pero es en sus inicios. Su verdadero valor aún debe ser evaluado cuidadosamente.

Estimulación Beta-adrenérgico Induce La Expresión De Proteína Repetición De Ankyrin Cardiaca: Implicación Del Kinase De Proteína A Y De La Quinasa Dependiente De Calmodulina

Cardiovascular Research. Sep, 2003  |  Pubmed ID: 14499857

El ankyrin cardiaca repetir proteína (carpa), un cofactor de transcripción nuclear que regula negativamente la expresión génica cardiaca, aumenta en la insuficiencia cardiaca humana y en modelos animales de la hipertrofia cardiaca. El mecanismo por el cual carpa expresión está regulada y las consecuencias de la sobreexpresión de la carpa en la contractilidad cardiaca son desconocidos.

Hemo Oxigenasa-1 Y Su Producto De La Reacción, Monóxido De Carbono, Evitan Daños De Apoptosis Relacionadas Con Inflamación De Hígado En Ratones

Hepatology (Baltimore, Md.). Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14512878

Hemo oxigenasa-1 (HO-1), una enzima sensible al estrés que catabolizes heme en monóxido de carbono (CO), biliverdina y hierro, se ha demostrado previamente para proteger injertos de rechazo y de isquemia/reperfusión. Aquí investigamos el potencial protector de HO-1 en 5 modelos de lesión hepática inmune-mediada. Encontramos para arriba-regulación de ratones de HO-1 por cobalto-protoporfirina-IX (CoPP) protegido endógenas de apoptosis hígado daño inducido por el anticuerpo anti-CD95 (Ab) o d-galactosamina en combinación con cualquier anti-CD3 Ab, lipopolisacárido (LPS) o factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa). HO-1 inducción prevenir lesión hepática apoptótica, había medido por la inhibición de la activación de la caspasa 3, aunque no protegían a los ratones de caspasa-3-independiente daño hepático necrótico había causado por concanavalina una administración (Con A). Además, la sobreexpresión de HO-1 de transferencia génica adenoviral resultó en protección contra lesiones de hígado apoptótica, mientras que la inhibición de la actividad enzimática de la HO-1 lata-protoporfirina-IX (SnPP) derogó el efecto protector. Protección mediada por HO-1 parece apuntar directamente células parenquimatosas del hígado ya CoPP tratamiento protegido aislados hepatocitos primarios de apoptosis inducida por anti-CD95 in vitro. Además, el agotamiento de las células de Kupffer (KCs) no interfirió con el efecto protector en vivo. Administración de exógenos CO o tratamiento con el cloruro de metileno CO-releasing agente mímico el efecto protector de HO-1, mientras que el tratamiento con biliverdina exógeno o sobreexpresión de ferritina por transferencia génica adenoviral recombinante no hizo. En conclusión, HO-1 es un potente factor protector para el daño de hígado apoptótica mediada por citocinas y CD95. Inducción de HO-1 podría ser una modalidad terapéutica para enfermedades inflamatorias del hígado.

Acoplamiento Diferencial De M-cholinoceptors a Gi/Go-proteínas No Miocardio Humano

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14519434

Los receptores muscarínico (mAChRs) median sus principales efectos cardíacos por tos ferina sensible a la toxina proteínas G. Efectos fisiológicos difieren considerablemente entre la aurícula y ventrículo, y se desconoce hasta qué punto estas diferencias derivan selectivo del receptor g-Proteína acoplamiento o más eventos posteriores. Hemos caracterizado acoplamiento específico entre mAChRs y Gi/Go-proteína isoformas en miocardio auricular y ventricular por agonistas dependiente photoaffinity etiquetado con [(32) P] azidoanilido GTP (aaGTP) y la inmunoprecipitación en membranas sarcolemales desde terminal falta de corazones humanos. El importe total de mAChRs, según lo determinado por la unión específica de [3 H] QNB, fue significativamente mayor en el auricular derecho (RA +/-SEM, 959 + /-68 fmol/mg, n = 4) que en las membranas ventriculares izquierdas (LV, 582 +/-53 fmol/mg, n = 6). Estandarizados immunoblots reveló que Gialpha-2 era el subtipo predominante en ambas regiones. Una variante de empalme de 40 kDa de Goalpha (Goalpha-1 o Goalpha-3) era casi exclusivamente perceptible en RA Niveles de Gialpha-3 y una variante de empalme de 39 kDa de Goalpha (Goalpha-2) también fueron superiores en RA Enlace aaGTP basal fue mayor en RA que en LV para todos los subtipos de Gialpha/Goalpha. El Carbacol (10 micromol/l)-aumento inducido en el enlace de aaGTP fue significativamente mayor en RA que en LV Goalpha-1/3 (336 +-95% de LV, n = 4) y en Gialpha-3 (211 +-83%), disminuir para Gialpha-2 (42 +/-5%) y fue similar en ambas regiones para Goalpha-2 (130 +-62%). El acoplamiento diferencial de mAChRs en humanos RA y LV sugiere que la iniciación de diferentes respuestas fisiológicas a la estimulación mAChR comienza con la señal de clasificación en el nivel de proteína del receptor-G.

¿Cuál Es El Papel De La Señalización Adrenérgicos En La Insuficiencia Cardíaca?

Circulation Research. Nov, 2003  |  Pubmed ID: 14615493

Este informe aborda preguntas abiertas sobre el papel de los receptores beta-adrenérgicos en la función cardiaca y el fracaso. Cardiomiocitos expresan todos tres receptores beta-adrenérgicos subtipos-beta1, beta2 y, al menos en algunas especies, beta3. El subtipo beta1 es el más prominente y es principalmente responsable de cronotropa positiva y efectos inotrópicos de catecolaminas. El subtipo de beta2 también aumenta la función cardiaca, pero su capacidad para activar las vías de señalización nonclassical sugiere una función distinta del beta1 subtipo. En la insuficiencia cardiaca, se activa el sistema simpático, función y número de receptores cardiacos se disminuyen y se alteran los mecanismos posteriores. Sin embargo, a pesar de una gran cantidad de datos, todavía no sabemos si y en qué medida estas alteraciones son adaptable/protector o perjudicial, o ambos. Clínicamente, los antagonistas adrenérgicos representan el avance más importante en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca, pero todavía se discute si actúan bloqueando o resensitizing el sistema de receptores beta-adrenérgicos. Nuevas estrategias terapéuticas experimentales tienen como objetivo en la maquinaria de desensibilización del receptor y a pasos de señalización aguas abajo.

Ingeniería De Tejidos De Válvulas Cardíacas Aórtica

Cardiovascular Research. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14659789

G-proteínas Inhibitorias Y Su Papel En La Desensibilización De La Vía De Ciclasa Del Adenylyl En La Insuficiencia Cardiaca

Cardiovascular Research. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14659793

Insuficiencia cardíaca se acompaña de estereotipado alteraciones en la expresión génica cardiaca. Estos cambios son probablemente secundaria en la patogenesia y pueden considerarse como protección, por ejemplo, como mecanismos de ahorro de energía, pero al mismo tiempo, agravan la disfunción contráctil y el déficit de fracasar en miocitos cardiacos para responder a alteración hemodinámica necesita. Uno de los ejemplos mejor estudiados, paradigmáticos de esta dicotomía es la desensibilización heteróloga de la ciclasa del adenylyl cardiaca (AC) vía de señalización. Protege contra las consecuencias perjudiciales de la unidad adrenérgica excesiva, pero también mitiga el apoyo inotrópico más potente del corazón. Desensibilización se asocia con la regulación a la baja de los receptores beta-adrenérgicos, beta-adrenoceptor mayor quinasas y crecientes inhibitorias G alfa-subunidades proteicas, G(alphai). Mientras que generalmente se acepta un papel causativo del anterior, el papel del aumento G(alphai) ha permanecido controvertido durante muchos años. El presente artículo resume los hallazgos tempranos y novedosos que, a juicio de los autores, proporcionan la evidencia sólida para G(alphai) a desempeñar un papel importante en la adaptación de cardiaco AC a diversas condiciones patofisiológicas.

Norepinefrina Estimula Vascular Endothelial Growth Factor En Miocitos Cardiacos Rata Por Un Mecanismo Paracrino

Angiogenesis. 2003  |  Pubmed ID: 15166499

La noradrenalina tiene efectos estimulantes del crecimiento en miocitos cardiacos. El presente estudio en miocitos cardiacos cultivadas de rata neonatal probó la hipótesis que norepinefrina también estimula la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), un factor angiogénico importante. Según lo determinado por la reacción en cadena de polimerasa cardiaca miocitos y no-miocitos expresan todos tres isoformas del VEGF, de rata con la isoforma corta (VEGF 121) preferencial expresadas en no-miocitos. Cuando miocitos cardiacos fueron estimuladas con 1 micro M norepinefrina durante 24 h en la presencia o ausencia de la alfa específica - y el beta - adrenoceptor antagonistas prazosin y el propranolol, respectivamente, los niveles VEGF mRNA y empalme variante patrón no cambió, mientras que los niveles de mRNA de péptido natriurético atrial aumentaron de 3 a 4. CoCl(2) había quintuplicado los niveles de VEGF mRNA en miocitos cardiacos. Cuando los miocitos cardiacos son cultivadas con acondicionado medio de no-miocitos que habían sido estimulado con norepinefrina por 24 h que VEGF mRNA aumentaron 2. El aumento fue bloqueado por anticuerpos neutralizantes TGF-beta. Estos datos sugieren que la noradrenalina estimula la angiogénesis miocárdica por un mecanismo paracrino que consiste en no-miocitos cardiacos y TGF beta.

Efecto De La Amiodarona En Los Niveles Plasmáticos De Metoprolol

The American Journal of Cardiology. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15541258

En promedio, la concentración plasmática de metoprolol se duplica después de una dosis (1,2 g/día durante un período de 6 días) de carga de amiodarona. Sin embargo, la cuantía individual de esta interacción de drogas depende del genotipo CYP2D6.

Ingeniería Tejido Cardíaco Para La Regeneración De Corazones Enfermos

Biomaterials. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 14697865

Ingeniería del tejido cardiaco busca proporcionar corazón contráctil muscular construcciones para terapia de reemplazo en vivo. En presente de tejido cardiaco más intentos de ingeniería utilizan células de corazón de pollo embrionario y ratas neonatales y materiales de andamio. En los últimos años, que nuestro grupo ha desarrollado una novela técnica para diseñar construcciones basadas en colágeno/matrigel de músculo cardiaco, que llamado Ingeniería tejido cardíaco (EHT). EHT Mostrar propiedades morfológicas y funcionales del músculo cardíaco diferenciados y pueden construirse en diversa forma y tamaño de colágeno de tipo I, las proteínas de matriz extracelular (Matrigel((R))) y las células del corazón de ratas neonatales y pollo embrionario. Los primeros estudios de implantación en syngeneic ratas Fischer 344 aportaron pruebas de supervivencia de EHT e integración en vivo. Esta revisión se centrará en nuestra experiencia en la ingeniería del tejido fino del músculo cardíaco. Principalmente, construcción de EHT, requisitos de la matriz, posibles aplicaciones de diferentes tipos de células como las células madre, y se discutirán nuestras primeras experiencias de implantación. A pesar de muchas preguntas sin resolver y críticas, creemos que la ingeniería del tejido cardíaco en general tiene una perspectiva interesante para el reemplazo del mal funcionamiento del miocardio y la reconstrucción de malformaciones congénitas.

Nivel Disminuido De La Proteína Y La Fosforilación De La Proteína Fosfatasa Inhibidor-1 No Los Corazones Humanos

Cardiovascular Research. Jan, 2004  |  Pubmed ID: 14732205

La proteína fosfatasa inhibidor-1 (I-1) es un inhibidor potente y altamente específico de fosfatasas de tipo 1 (PP1) que es activo sólo en su proteína quinasa fosforila A PKA-forma. Disminuciones de la ablación 1,-1 sobreexpresión sensibiliza señalización adrenérgicos en el corazón. Es polémico si-1 expresión se altera en la insuficiencia cardíaca humana (HF), probablemente porque su detección en el corazón es difícil debido a su baja abundancia.

Humano Homocigótica R403W Mutante Cardiaca Miosina Presenta Desproporcionada Mejora De Propiedades Mecánicas Y Enzimáticas

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 15010274

La cardiomiopatía hipertrófica (FHC) se asocia a mutaciones en 11 genes que codifican proteínas sarcomeric. Mayoría de las familias presenta mutaciones en MYBPC3 y MYH7 codificación cardiaca miosina proteína C y de la cadena pesada de la betamiosina. Se han estudiado ampliamente las consecuencias de las mutaciones MYH7 a nivel molecular, pero se han conseguido resultados controvertidos con cualquier función motora de la miosina reducida o aumentada dependiendo del tipo o la homogeneidad de la miosina estudiado. En el presente estudio, aprovechó de la accesibilidad a un corazón explantado a analizar por primera vez las propiedades de la miosina mutante homocigótico humana. El paciente exhibió hipertrofia excéntrica con fracción de eyección seriamente deteriorada a trasplante de corazón y lleva una mutación homocigótica en MYH7 (R403W) y una variante heterozigótica en MYBPC3 (V896M). Análisis in situ del tejido ventricular izquierdo demostró desorden del miocito e hipertrofia y fibrosis intersticial. Ensayos de motilidad in vitro mostraron un pequeño pero significativo aumento deslizando velocidad de filamentos de actina marcado con fluorescente sobre humano mutante cardiaca miosina-superficie revestida en comparación con el control (+ 18%; P < 0.001). Miosina mutante exhibió un gran aumento en la máxima actividad de ATPasa activada por actina (+114%; P < 0.05) y Km para la actinia (cuarto %; P < 0.05) en comparación con control. Estos datos demuestran desproporcionada mejora de propiedades mecánicas y enzimáticas de la miosina mutante humana. Esto sugiere la utilización ineficiente del ATP y reducida eficiencia mecánica en el tejido del miocardio del paciente, que podría jugar un papel importante en el desarrollo del fenotipo FHC.

Formación De Complejos Moleculares Por N-metil-D-aspartato Receptor Subunidad NR2B Rianodina Receptor Y 2 En Rata Neonatal Miocardico

The Journal of Biological Chemistry. May, 2004  |  Pubmed ID: 15010472

El receptor N-metil-d-aspartato (NMDA) es un canal de cationes de glutamato cerrado prevalente en las membranas postsinápticas de las neuronas del sistema nervioso central. El complejo del receptor del neurotransmisor se piensa para representar un tetrámero donde variable NR2 o NR3 polipéptidos forman heteroméricos asambleas con una subunidad NR1 obligatoria. Recientemente, hemos demostrado que los miocitos cardiacos de ratas perinatales expresan transitoriamente la subunidad del receptor NMDA NR2B, desconoce la función de que en el corazón. Para caracterizar la proteína NR2B cardiaca, determinamos su distribución subcelular y socios de la interacción molecular específica. Immunostaining de rebanadas de tejido de corazón de rata y agudo disociado miocitos cardiacos, el NR2B antígeno fue localizado en las bandas Z sarcomeric. Mediante inmunoprecipitación de detergente-solubilizado NR2B proteína y posterior análisis empleando el tiempo de desorción/ionización láser asistida por matriz de espectrometría de masas de vuelo, el receptor de rianodina 2 fue identificado como un socio de interacción molecular del polipéptido NR2B cardiaco. Las diferencias en el reconocimiento de anticuerpos indican que el polipéptido NR2B cardiaco lleva una terminal C estructuralmente alterada en comparación con la variante de NR2B en sistema nervioso central. Basado en su localización y la interacción de la proteína, la función de proteína cardiaca de NR2B puede relacionarse con mechanosensitivity o juegan un papel en la regulación del aparato contráctil del corazón neonatal.

Efectos De La Estimulación Crónica De Endotelina-1 En La Función Contráctil Del Miocito Cardiaco

American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15020300

Endotelina-1 (ET-1) tiene efectos inotrópicos positivos agudas, pero consecuencias de ET-1 aumento crónico en la función contráctil de miocitos cardiacos son en gran parte desconocidas. En el presente estudio, los efectos del tratamiento a largo plazo con la ET-1 (10 nM) para 5 días en tanto fuerza de desarrollo [fuerza de la contracción (FOC)] y cinética de contracción se determinaron en el tejido cardíaco reconstituido de células cardíacas de rata. Fuerza isométrica se midió ante concentraciones acumulativas de CA e isoprenalina. ET-1 aumentada FOC basal por 64 +/-11% (P < 0.05), asociada con una respuesta contráctil significativamente embotada a CA e isoprenalina. Por otra parte, ET-1 significativamente había prolongada relajación (62 + /-3 vs 53 +/-2 ms). ET(A) selectiva (BQ-123) y bloqueo de los receptores ET(B) (BQ-788) demostraron que efectos de ET-1 en la función contráctil fueron mediadas por el subtipo del receptor ET(A). Efectos de ET-1 fueron prevenidos por cotratos con Ro31-8425, un inhibidor de la PKC, o dimethylamiloride, un inhibidor del intercambiador Na(+)/H(+). En contraste con el tratamiento a largo plazo de la ET-1, cambios en parámetros contráctiles no fueron observados después del tratamiento de ET-1 durante 3 horas antes de la medición de la fuerza. Estos datos sugieren que el estímulo crónico de ET-1 tiene dos efectos sobre la contractilidad: mejora de la fuerza basal pero la debilitación de la cinética de la contracción e inotrópico capacidad de respuesta a la estimulación de los receptores beta-adrenérgicos. Las vías de señalización implicadas incluyen receptores ET(A), PKC y el intercambiador de Na(+)/H(+). Los actuales resultados in vitro mencionan la posibilidad que ET-1 puede ejercer efectos tanto adaptativos y desadaptativas en el miocardio de fallar en la cual existe acumulación local de ET-1.

Transferencia De Genes De S100A1: Una Estrategia Para Fortalecer La Ingeniería Injertos Cardiacos

The Journal of Gene Medicine. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15079813

Terapia de reemplazo de tejido cardíaco, aunque un nuevo enfoque prometedor para el tratamiento potencial de insuficiencia cardiaca, sigue sufriendo un apoyo insuficiente contráctil al miocardio falla. Aquí, exploramos una estrategia para mejorar las propiedades contráctiles del tejido del corazón Ingeniería (EHT) por transferencia de genes de S100A1.

Tratamiento De Ouabain Se Asocia Con Regulación Al Alza De Fosfatasa Inhibidor-1 Y Na + / Intercambiador De Ca(2+) Y Sensibilización Beta-adrenérgico En El Corazón De Rata

Biochemical and Biophysical Research Communications. May, 2004  |  Pubmed ID: 15110776

Glicósidos cardíacos son ampliamente utilizados en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca congestiva. Mientras que el mecanismo del efecto inotrópico positivo después de aplicación aguda de glicósidos cardíacos se explica por el bloqueo de la Na + / K +-bomba, poco se sabe sobre las consecuencias de una terapia prolongada. Aquí trataron a ratas Wistar macho durante 4 días con infusiones continuas de ouabain (6,5 mg/kg/día) o 0.9% NaCl (control) via minipumps osmótico. Impulsado eléctricamente (1 Hz, 35 grados C) músculos papilares de ratas tratadas con ouabain exhibieron más corto tiempo de relajación (-15%) y un doble aumento en la sensibilidad del efecto inotrópico positivo de isoprenalina. La densidad y la afinidad de los adrenoceptores beta1 y beta2, así como los niveles de mRNA y proteína de estimulantes (G(s)alpha) e inhibitorio (G (i) alfa-2, G(i)alpha-3) G-proteínas eran inafectadas por ouabain. Del mismo modo, SR-Ca2 +-ATPasa 2A, su, expresión del receptor de rianodina así como el oxalato-estimulado 45Ca-absorción de vesículas de membrana se mantuvo sin cambios. Sin embargo, abundancia de ARNm de la proteína fosfatasa inhibidor-1 (I-1) y el Na + / Ca2 +-intercambiador (NCX) se incrementaron en 52% y 26%, respectivamente. 1 Juega un papel de amplificador en señalización cardiaca. Downregulation de 1 en la insuficiencia cardiaca humana se asocia con la desensibilización de la vía de señalización adrenérgico. Los datos actuales sugieren que el aumento inducido por ouabain-1 expresión podría ser al menos parcialmente responsable de la isoprenalina mayor sensibilidad y mayor expresión de NCX para la relajación acelerada después de ouabain crónica en este modelo.

Genotipo CYP2D6: Impacto Sobre Los Efectos Adversos Y No Respuesta Durante El Tratamiento Con Antidepresivos-un Estudio Piloto

Clinical Pharmacology and Therapeutics. May, 2004  |  Pubmed ID: 15116051

Tratamiento con antidepresivos se asocia con frecuencia de efectos adversos o respuesta clínica insuficiente. Varios antidepresivos son metabolizados por el citocromo P450 (CYP) 2 6. La actividad de esta enzima varía notablemente entre individuos de pobres ultrarrápida del metabolismo en base el polimorfismo del gen CYP2D6. Este estudio de la Asociación investigó si la distribución del genotipo CYP2D6 difiere de la población alemana blanca en no respondedores o en pacientes con marcados efectos adversos durante el tratamiento con antidepresivos metabolizados por CYP2D6.

[Bloqueadores Beta En Insuficiencia Cardiaca. Cuándo, Cuánto Y Qué Sustancia]

Medizinische Monatsschrift Für Pharmazeuten. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15646690

Debilitación Del Sistema Ubiquitina-proteasoma Por Mutantes De Proteína C Unión Miosina Cardiaca Truncado

Cardiovascular Research. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15769446

Más mutaciones de gene (cMyBP-C) proteína C de unión de miosina cardiaca, lo que provocando la cardiomiopatía hipertrófica (FHC) dan lugar a proteínas c-terminal truncado. Sin embargo, truncada cMyBP-Cs eran imperceptibles en tejido miocárdico de pacientes FHC. En este estudio, investigamos si truncado cMyBP-Cs sujetas a degradación acelerada por el sistema lisosoma o ubiquitina-proteasoma (UPS).

Efectos Funcionales Diferenciales De Ambas Isoformas Del Receptor De 5-HT4 En Cardiomiocitos Adultos

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Aug, 2005  |  Pubmed ID: 15950987

Receptores de serotonina 5-HT4 presentan en miocitos atriales humana y se han propuesto para contribuir a la generación de la fibrilación auricular. Sin embargo, los receptores 5-HT4 han sido hasta ahora sólo en humanos y atrios de cerdo y están ausentes desde el corazón de pequeños animales de laboratorio, como rata, cobaya, conejo y rana, que limita la configuración experimental para el estudio de sus propiedades funcionales. En este estudio, hemos desarrollado un sistema de expresión de adenovirus para examinar las propiedades de dos variantes de empalme de receptores 5-HT4 humano, h5-HT4(b) y h5-HT4(d), expresado en cardiomiocitos adultos desprovisto de receptores 5-HT4 nativa. Cuando se expresan en la línea de células murinas HL-1 de origen atrial, ambos receptores causaron la unión específica de la antagonista selectivo 5-HT4 GR113808 y activación cyclase del adenylyl en presencia de la serotonina (5-HT, 1 microM). Cuando se expresan en cardiomiocitos ventriculares recién aislados de rata adulta, una estimulación de la L-tipo Ca2 + corriente (ICa, L) por 5-HT (100 nM) fue revelado. Ambos efectos fueron bloqueados por GR113808. En células HL-1, el receptor de h5-HT4(d) encontraron para acoplarse más eficientemente a cyclase del adenylyl que la h5-HT4(b). Tratamiento de toxina pertussis (250 ng/ml para 5 h) potencia el efecto estimulante del 5-HT en ICa, L en miocitos de rata expresando el h5-HT4(b) pero no el receptor h5-HT4(d), indicando un acoplamiento probable de la isoforma (b) Gs y Gi/o proteínas. Adenoviral expresión de las isoformas de h5-HT4 receptor en miocitos cardiacos adultos proporciona un medio valioso para la exploración de las cascadas de señalización del receptor en situaciones normales y patológicas.

Endotelina-1 E Isoprenalina Co-stimulation Causa Falla Contráctil Que Se Revierte Parcialmente Por La Inhibición De MEK

Cardiovascular Research. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16040022

Las quinasas quinasa activada por mitógeno (MEK)-quinasas regulada por señal extracelulares (ERK) se activa por agonistas como las catecolaminas o endotelina-1 (ET-1) y se ha implicado en patología cardiaca, como la progresión de la hipertrofia cardiaca a la falta de señalización. El propósito del presente estudio, realizado en un modelo in vitro de falla contráctil, fue evaluar si la inhibición de MEK previene el deterioro funcional.

Cuestionar La Pertinencia De Circulación Células Progenitoras Cardiaca En Regeneración Cardiaca

Cardiovascular Research. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16253213

Ingeniería Tisular Del Miocardio

Circulation Research. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16339494

Para crear un corazón artificial es uno de los sueños más ambiciosos del joven campo de la ingeniería de tejidos, un sueño que, cuando públicamente anunció en 1999 (iniciativa de vida alrededor de Sefton M.), provocó tanta compasión como escepticismo en la prensa científica y laica. Hoy en día, es justo afirmar que el campo está todavía muy lejos de haber construido el "corazón bioartificial." Sin embargo, se ha avanzado sustancialmente en los últimos 10 años, y existe una perspectiva realista para crear equivalentes de músculo de corazón tridimensional que no sólo pueden servir como modelos experimentales, pero también podrían ser útil para la regeneración cardíaca.

Papel Clave De La Miosina Cadena Ligera (MLC) Quinasa MLC2a Fosforilación Mediada Por En El Efecto Inotrópico Positivo 1-adrenérgico Alfa En Atrio Humana

Cardiovascular Research. Jan, 2005  |  Pubmed ID: 15621049

Mecanismos de la respuesta inotrópica positiva a alfa (1)-estimulación adrenérgica en pleno siguen siendo mal entendida, pero evidencia reciente en músculo papilar rata sugiere un papel importante de la fosforilación de la cadena ligera (MLC2) regulador de la miosina. Este estudio investigada alfa (1) - adrenérgicos efectos contráctiles y el papel de la quinasa MLC (MLCK) - fosforilación dependiente de MLC2 en tiras de músculo auricular humano.

Alteraciones Del Sistema Preproenkephalin En Hipertrofia Cardiaca Y Su Papel En La Conducción Auriculoventricular

Cardiovascular Research. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16376326

El objetivo de este estudio fue investigar alteraciones del sistema opioide endógeno en la hipertrofia cardiaca, para dilucidar los mecanismos de la expresión génica de preproenkephalin (ppENK) y para evaluar los efectos de opioides endógenos en la contractilidad del miocardio y de la conducción auriculoventricular.

Atorvastatina Desensibiliza Beta-adrenérgico Señalización En Miocitos Cardiacos Vía Reducción Isoprenilación De Subunidades Gamma De La Proteína G

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16467371

Las estatinas ejercen efectos pleiotrópicos, independiente del colesterol reduciendo isoprenilación de GTPasas monoméricas. Aquí examinamos si las estatinas también reducen isoprenilación de subunidades gamma de heterotriméricas G-proteínas y afectan de tal modo beta-adrenérgico de señalización y regulación de la fuerza en miocitos cardiacos. Miocitos cardiacos de rata neonatal (NRCM) fueron tratados con atorvastatina (0.1-10 micromol/l; 12-48 h) y examinados para cyclase del adenylyl g-proteína alfa-(Galpha), (Gbeta), beta- y gamma-(Ggamma) subunidades y acumulación del campo de la regulación. Tejido del corazón Ingeniería (EHT) de NRCM se utilizó para evaluar consecuencias contráctiles. En NRCM tratados con atorvastatina, una segunda banda de Ggamma3 con un menor peso molecular aparente apareció en el citosol y las fracciones de partículas que estuvo ausente en NRCM tratados con vehículo, pero también visto después de GGTI-298, un inhibidor de geranilgeranil transferasa. En paralelo, Gbeta acumulado en el citosol y se redujo el contenido celular total de Galphas. En NRCM tratados con atorvastatina, se redujo el efecto campo-aumento de isoprenalina. Asimismo, el efecto inotrópico positivo de isoprenalina fue insensible y reducido después del tratamiento con atorvastatina. Los efectos de atorvastatina fueron suprimidos por mevalonato y/o geranilgeranil pirofosfato, pero no por FARNESIL PIROFOSFATO o escualeno. En conjunto, los resultados de este estudio muestran que atorvastatina desensibiliza NRCM a la estimulación beta-adrenérgico por un mecanismo que implica reducción isoprenilación de Ggamma y posterior reducción en el contenido celular de Galphas.

Acoplamiento Eléctrico De Hojas De Células Del Miocito Cardiaco Al Corazón

Circulation Research. Mar, 2006  |  Pubmed ID: 16543504

Injertos De Tejido De Corazón Ingeniería Mejoran La Función Sistólica Y Diastólica En Corazón De Rata Infartado

Nature Medicine. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16582915

El concepto de regenerar el miocardio enfermo por la implantación de la ingeniería del tejido del miocardio es intrigante, pero convincente se carecen de pruebas que los tejidos del corazón pueden ser generados en un tamaño y con propiedades contráctiles que prestarían apoyo considerable a falta de corazones. Aquí creamos (grueso/diámetro grande, 1-4 mm/15 mm), generación de fuerza dirigido tejido del corazón de las células del corazón de rata neonatal. Ingeniería corazón tejido formado capas gruesas de músculo cardiaco cuando se implanta en infartos del miocardio en ratas inmune-se han suprimido. Cuando evaluaron 28 días más tarde, diseñado tejido cardíaco mostró inmediato acoplamiento eléctrico al miocardio nativo sin evidencia de inducción de la arritmia. Por otra parte, tejido cardíaco Ingeniería había prevenido más dilatación, causados por engrosamiento sistólico de la pared de segmentos del miocardio infartados y mejora acortamiento fraccional de la zona del corazón infartado en comparación con controles (operación simulada y construcciones noncontractile). Así, nuestro estudio proporciona evidencia que los injertos de tejido cardíaco contráctil grandes pueden construirse in vitro, pueden sobrevivir después de la implantación y pueden apoyar la función contráctil del corazón infartado.

Ingeniería Del Músculo Del Corazón: Una Actualización Sobre La Terapia De Reemplazo De Músculo Cardiaco

Cardiovascular Research. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16697358

Ingeniería de músculo cardiaco pretende dar miocardio funcional para reparar corazones enfermos y desarrollo cardíaco modelo, fisiología y enfermedad in vitro. Se han establecido varias tecnologías instrumentales en los últimos 10 años para crear el miocardio funcional. Aunque ninguna de las tecnologías empleadas en la actualidad produce a una combinación perfecta de músculo cardíaco natural, se puede esperar que los equivalentes de músculo del corazón humano estará disponibles después de la puesta a punto del tejido actualmente establecido conceptos de ingeniería. Esta revisión proporciona una actualización sobre el estado del músculo cardiaco ingeniería y su utilización en regeneración cardiaca. Se discute la aplicación de células madre, incluida la asignación de material autólogo de la célula, tecnologías transgénicas que pueden mejorar la estructura del tejido, así como engraftment en vivo y conceptos de la vascularización. También tocamos en aspectos legales y económicos que tienen que ser considerados antes de miocardio Ingeniería eventualmente puede aplicarse en pacientes y discutir quién puede ser un posible receptor.

Papel De La Calcineurina Y Proteína Fosfatasa-2A En La Regulación De La Fosfatasa Inhibidor-1 En Miocitos Cardiacos

Biochemical and Biophysical Research Communications. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16774736

Inhibidor 1 (I-1) es un inhibidor de la proteína fosfatasa 1 (PP1), la fosfatasa de Ser/Thr predominan en el corazón. No-phosphorylated I-1 está inactivo, mientras que-1 fosforilados por la proteína quinasa A (PKA) en Thr35 es un potente inhibidor de PP1. No se han establecido las fosfatasas que dephosphorylate 1Thr35 y así desactivar 1 en el corazón. Aquí sobreexpresa 1 en miocitos cardiacos de rata neonatal con adenovirus recombinantes y determinada fosforilación de-1 y del objetivo principal proteínas de PKA/PP1 en el corazón, fosfolamdano (PLB), por Western blot con anticuerpos phospho-específicos. Incubación con la ciclosporina de inhibidor de la calcineurina A o Ácido okadaico, utilizado en una concentración de inhibición preferencial fosfatasa 2A (PP2A), aumentó significativamente-1Thr35 (aproximadamente 2-a seis) y fosforilación de PLB Ser16 (aproximadamente 2 veces). Los resultados indican que la calcineurina y PP2A actúan para mantener un bajo nivel basal de fosforilada (activo) I-1 en miocitos cardiacos de la vida. Calcineurina puede constituir una diafonía entre vías dependientes de calcio y campamento.

El Efecto Inotrópico Alpha1-adrenérgico MLCK-mediada En El Miocardio Auricular Negativamente Es Modulada Por Señalización PKCepsilon

British Journal of Pharmacology. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16783412

El presente estudio examinó el papel de la quinasa de cadena ligera de miosina (MLCK), isoenzimas PKC y inositol 1,4,5-trifosfato (receptor IP(3)) en el efecto inotrópico positivo de alfa (1)-estimulación adrenérgica en miocardio auricular. Medimos los efectos inotrópicos de la fenilefrina (0.3-300 microM) en preparaciones atriales izquierdas aisladas (1 Hz, 37 grados C, CA, de 1,8 mM 0,3 microM nadolol) de ratones machos de FVB de 8 semanas (n = 200). Fenilefrina concentración-dependiente aumentó la fuerza de la contracción de 1.5+/-0.1 a 2.8+/-0.1 mN (media +/-SEM, n = 42), que se asoció con mayor MLC-2a fosforilación en serina 21 y 22 de 67% y translocación de PKCepsilon pero no PKCalpha a membrana (+ 30%) y Miofilamento (+ 50%) fracciones.Inhibición de MLCK ML-7 o wortmannin había desplazada en derecho de la curva de respuesta a la concentración de la fenilefrina, reducir su efecto inotrópico en 10 microM en 73% y 81%, respectivamente. El compuesto KIE1-1 (500 nM), una intracelular actuando PKCepsilon péptido inhibidor de translocación, prevenir el desplazamiento de PKCepsilon y aumentada el máximo efecto inotrópico de fenilefrina en un 40%. En contraste, inhibición de desplazamiento Ca(2+)-dependiente PKC (KIC1-1, 500 nM) no tuvo ningún efecto. Chelerythrine, un inhibidor de la PKC, disminuyó la fuerza basal sin cambiar el efecto inotrópico de fenilefrina. La IP(3) del receptor blocker 2-APB (2 y 20 microM) concentración-dependiente disminuyó fuerza basal, pero no afectó la curva de respuesta a la concentración de la fenilefrina. Estos resultados indican que se requiere para el efecto inotrópico positivo de alfa (1) activación de MLCK-estimulación adrenérgica, que el PKCepsilon de Ca(2+)-independiente modula negativamente este efecto, y que PKCalpha y IP(3) de la activación del receptor no participa.

Optimización De Ingeniería Tejido Cardíaco Para Aplicaciones Terapéuticas Como El Músculo Cardíaco De Sustituto

Circulation. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16820649

Tejido cardiaco Ingeniería propone que el músculo cardíaco para regeneración cardiaca. Aquí, presumimos que Ingeniería corazón tejido (EHT) puede mejorarse mediante el uso de poblaciones celulares de corazón mixto, cultura en condiciones definidas sin suero y libre Matrigel, y fusión de unitarios EHTs músculo cardíaco multi-unidad reemplaza.

Determinantes Moleculares De La Alteración De Ca2 + En Fibrilación Auricular Crónica Humana

Circulation. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16894034

Anormal Ca2 + manejo puede contribuir al deterioro contractilidad auricular y arritmogénesis en fibrilación auricular crónica humana (cAF). Aquí, se evaluaron los niveles de la fosforilación de proteínas claves implicadas en alterada Ca2 + manejo y contractilidad en pacientes de la cAF.

Altas Dosis De Metotrexato En La Leucemia Linfoblástica Aguda Pediátrica: Impacto De ABCC2 Polimorfismos En Las Concentraciones Plasmáticas

Clinical Pharmacology and Therapeutics. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17112803

El transportador de clase adenosina trifosfato vinculante cassette (ABC) ABCC2 (MRP2 [multirresistencia relacionados con proteína 2] o cMOAT [transportador de aniones orgánicos multiespecíficas con canalículos]) está involucrado en el transporte hacia el exterior celular y la eliminación de metotrexato. Presumimos que las variaciones genéticas comunes pueden contribuir a la variabilidad de la farmacocinética de dosis altas de metotrexato.

La 2988G > Un Polimorfismo Afecta a Empalmar De Un Minigene De CYP2D6

Clinical Pharmacology and Therapeutics. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17112815

Reduce La Respuesta Contráctil a Estimulación Alpha1-adrenérgica En Atrios De Ratones Con Inhibición De Crónica Cardiaca Calmodulina Kinasa II

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17292391

El efecto inotrópico positivo sostenido de agonistas de receptores alfa-adrenérgicos en el corazón se asocia con un pequeño aumento de transitorios de CA intracelulares junto con una mayor sensibilización de los miofilamentos a CA. La CA multifuncional y proteína quinasa dependiente de calmodulina II (CaMKII) podría contribuir a este efecto, que afectan a la liberación de CA (receptor de rianodina) o por un mecanismo de absorción (a través de fosfolamdano [PLB] y SR Ca ATPasa). Aquí examinamos el papel de CaMKII en el efecto inotrópico positivo de la fenilefrina agonista de receptores alfa-adrenérgicos en atrios izquierdos aislado de un modelo de ratón genético de inhibición de la CaMKII cardiaca (AC3-me). En comparación con atrios de wild-type (WT) o AC3-C (péptido codificado), AC3-me atria demostró las anormalidades siguientes. Fosforilación de PLB en Thr17, un conocido destino CaMKII, fue significativamente menor (aproximadamente 20%). Potenciación de post-REST (30 s, 1HZ, 37 grados de C) de la fuerza estaba ausente (AC3-C, 190% de amplitud pre-rest). Fuerza basal era aproximadamente un 20% menor a 1,8 mM CA, pero normal en alta concentración de CA (> 4.5mm). El máximo efecto inotrópico positivo de fenilefrina, que fue más pronunciado en las frecuencias bajas en aurículas WT y AC3-C, perdió su dependencia de la frecuencia (1 Hz a 8 Hz). Así, el efecto de la fenilefrina se redujo en aproximadamente 50% a 1 Hz, pero era normal a 8 Hz. Los tres grupos mostraron a una relación de frecuencia fuerza negativa y no difirieron en la aceleración del dependiente de la frecuencia de relajación. Nuestros datos indican un papel de CaMKII en potenciación post-rest y el efecto inotrópico positivo de estímulo alfa-adrenérgico a bajas frecuencias.

Regulación De La Síntesis De Campo Cardiaca Y La Contractilidad Por Nucleósido Difosfato Quinasa B/G Proteína Beta Gamma Dímero Complejos

Circulation Research. Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17363702

Proteínas heterotriméricas G son reguladores fundamentales de la contractilidad miocárdica. Además el intercambio de PIB/GTP inducida por el receptor, subunidades alfa de la proteína G pueden activarse por una transferencia de fosfato mediante un complejo asociado a membrana plasmática de la quinasa de nucleósido difosfato B (B NDPK) y betagamma-dímeros de la proteína de G (Gbetagamma). Para investigar el papel fisiológico de esta transferencia de fosfato en los cardiomiocitos, generamos un dímero Gbeta1gamma2 llevando el intercambio de un solo aminoácido en la su-266 intermedio fosforilada en la subunidad beta1 (Gbeta1H266Lgamma2). Por vía recombinante expresado Gbeta1H266Lgamma2 se integraron en heterotriméricas G proteínas en cardiomiocitos de rata pero eran deficientes en la fosforilación de Gbeta intermedia. En comparación con Gbeta1gamma2 de tipo salvaje (Gbeta1WTgamma2), la sobreexpresión de Gbeta1H266Lgamma2 suprimido formación campo basal hasta un 55%. Una disminución similar en la producción de campo basal se produjo cuando la formación de complejos NDPK B/Gbetagamma fue atenuada por la caída de NDPK B mediada por siRNA. En cardiomiocitos de rata adulta expresando Gbeta1H266Lgamma2, la contractilidad basal fue suprimida por aproximadamente el 50% que correlacionó asimismo reducir los niveles basales de campamentos y había reducido Ser16-fosforilación de fosfolamdano. En presencia de los receptores beta-adrenérgicos isoproterenol agonista, la formación total del campo y la contractilidad fueron significativamente inferiores en Gbeta1H266Lgamma2 que en los cardiomiocitos expresando su Gbeta1WTgamma2. Sin embargo, la relativa inducida por el isoproterenol aumentada no fue afectada por Gbeta1H266Lgamma2. Concluimos que la activación del receptor independiente de proteínas G vía NDPK B/Gbetagamma complejos requiere la fosforilación intermedia de subunidades de beta de la proteína G en su-266. Nuestros resultados destacan la actividad de la cinasa de la histidina de NDPK B para Gbeta y demuestran su contribución a la regulación del receptor independiente de síntesis de campo y de la contractilidad en cardiomiocitos intactos.

Células Madre Embrionarias Para La Ingeniería Del Músculo Cardiaco

Trends in Cardiovascular Medicine. May, 2007  |  Pubmed ID: 17482096

El objetivo de la ingeniería del tejido cardiaco es doble: (1) para proporcionar tejido cardiaco tridimensional para restaurar la función de corazones enfermos y (2) desarrollar bancos de ensayo mejorado para la validación de destino y sustancia. Ambos conceptos se han demostrado con éxito por varios grupos utilizando células inmaduras corazón primario, pero estas células son esencialmente postmitotic, imposibilitando la aplicaciones in vitro clínicas y a gran escala. Identificación de una fuente renovable de la célula por lo tanto es uno de los objetivos claves en el campo. Las células madre embrionarias (ES) son candidatos atractivos porque pueden propagar en grandes cantidades, tienen una sólida capacidad de diferenciarse en miocitos cardiacos y pueden obtenerse de los seres humanos. Aislamiento clásico de ES las células de la celda interior masa está asociada con la destrucción del embrión respectivo. Así, tecnologías alternativas para generar líneas de células madre con propiedades de celda ES inevitablemente se pedía. Esta revisión analiza la utilidad de células madre embrionarias en la ingeniería del tejido cardiaco y tecnologías alternativas, conservación de embriones para obtener células madre embrionarias.

Reproducibilidad De La Ecocardiografía Transtorácica En Pequeños Animales Utilizando Equipo Clínico

Coronary Artery Disease. Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17496492

La ecocardiografía transtorácica se ha empleado para evaluar dimensiones ventriculares izquierdas y función en pequeños animales. El objetivo de este estudio fue identificar los límites de la ecocardiografía transtorácica en un modelo de rata Wistar utilizado por evaluar la variabilidad intraobservador, variabilidad interobservador y la variabilidad diaria de exámenes, lo que implica registros y mediciones.

Niveles De Disminución De La Fosforilación De Cardiaca Miosina-obligatoria Proteína C En La Insuficiencia Cardíaca Humana Y Experimental

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Aug, 2007  |  Pubmed ID: 17560599

Cardiaca miosina-obligatoria proteína C (cMyBP-C) es un importante regulador de la contractilidad cardiaca y su fosforilación por PKA es un mecanismo que contribuye a un mayor gasto cardiaco en respuesta a la estimulación beta-adrenérgico. Es actualmente desconocido si insuficiencia cardiaca altera cMyBP-C fosforilación. El presente estudio determinó el nivel de cMyBP-C fosforilada en su defecto los corazones humanos y en un modelo canino de insuficiencia cardiaca inducida por la estimulación. Un anticuerpo policlonal dirigido contra el sitio de fosforilación principales de cMyBP-C (Ser-282) se generó y su especificidad fue confirmada por fosforilación de PKA con isoprenalina en cardiomiocitos y perfusión Langendorff ratón corazones. Salió el tejido del miocardio ventricular de (i) los pacientes con insuficiencia terminal (hHF; n = 12) y nonfailing los corazones de donantes (hNF; n = 6) y (ii) perros con insuficiencia cardiaca de fase final rápido-estimulación-inducida (DH; n = 10) y controles simulada (dNF; n = 10) fueron utilizados para la cuantificación del total cMyBP-C y fosfo-cMyBP-C por Western Blot. Los niveles de la proteína total de la cMyBP-C fueron similares en hHF y hNF así como en DH y dNF. En contraste, la proporción de fosfo-cMyBP-C a los niveles totales de cMyBP-C fueron > 50% reducido en hHF y > 40% reducido en DH. Resumiendo, los niveles de la fosforilación de la cMyBP-C están disminuidos notablemente en insuficiencia cardíaca humana y experimental. Así, la comprometida la función contráctil del corazón falla podría ser en parte atribuible a niveles reducidos cMyBP-C fosforilación.

Adenovirus-entregado Short Hairpin RNA Dirigidos a PKCalpha Mejora La Función Contráctil En Tejido Cardíaco Reconstituido

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17628588

PKCalpha ha demostrado ser un regulador negativo de la contractilidad y canceladura del gene PKCalpha en ratones protegido contra la insuficiencia cardíaca. Pequeña interferencia (si) RNAs median por ARN de interferencia (ARNi) de silenciamiento del gen y pueden utilizarse para la caída PKCalpha en cardiomiocitos. Sin embargo, la eficacia de transfección de (si) RNAs de lipofection tiende a ser bajas en células primarias. Para hacer frente a esta limitación, hemos desarrollado un vector adenoviral (AV) conducción short hairpin (sh) RNAs contra PKCalpha (Ad-shPKCalpha) y evaluar su potencial para silenciar PKCalpha en miocitos cardiacos de rata neonatal y en los tejidos del corazón Ingeniería (EHTs), que se asemejan a miocardio funcional in vitro. Un absurdo codificación AV (Ad-shNS) sirve como control. PCR cuantitativa y Western Blot demostraron que 90% inferior PKCalpha-mRNA y 50% menos proteína de PKCalpha en células infectadas con Ad-shPKCalpha. EHTs fueron infectadas con Ad-shPKCalpha día 11 y sometidas a las medidas de fuerza isométrica en baños de órgano 4 días más tarde. Media tensión de la contracción fue > 50% mayor en Ad-shPKCalpha comparado con EHTs Ad-shNS-infectados, basal y estimulada de CA o isoprenalina condiciones. Tensión de la contracción se correlacionó negativamente con los niveles de mRNA de PKCalpha. En Resumen, AV-entregado shRNA había mediada altamente eficiente caída de PKCalpha en miocitos cardiacos y contractilidad mejora en EHTs. Los datos apoyan un papel de PKCalpha como un regulador negativo de la contractilidad miocárdica y demuestran que EHTs junto con AV-entregado shRNA son un modelo útil para la validación de destino.

Proteína De Unión a Miosina Cardiaca C Es Necesaria Para La Relajación Completa En Miocitos Intacto

Circulation Research. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 17823372

El papel de la proteína de unión a miosina cardiaca C (cMyBP-C) en la contracción cardiaca no queda completamente resuelto. Ablación experimental de cMyBP-C por diversos medios dio lugar a cambios incompatibles en Ca2 + sensibilidad y velocidad creciente de la fuerza de las preparaciones de piel. Para evaluar cómo estos efectos se integran en un contexto del miocito intacto, living, investigamos las consecuencias de la ablación de la cMyBP-C en miocitos ventriculares y atrios izquierdos de ratones de cMyBP-C knock-out (KO) en comparación con wild-type (WT). A las 6 semanas, KO miocitos exhibieron hipertrofia leve que llegó a ser más pronunciada por 30 semanas. Células aisladas de KO exhibieron marcadamente menor longitud del sarcómero diastólica (SL) sin cambio diastólica Ca2 +. El menor SL en KO fue abolido en parte por la actina-miosina ATPasa inhibidores 2, 3-butanedione monoxima o blebbistatin, indicando la interacción actina-miosina residual en diástole. La relación entre citosólica Ca2 + y SL demostró que las células KO comenzaron a contrato inferior Ca2 + sin llegar a un máximo superior, produciendo un área más pequeña del diagrama de fase-plano. Tanto el acortamiento del sarcómero y el Ca2 + transitorio fueron prolongados en KO. KO aislado dejado atria exhibió un marcado aumento en sensibilidad externa Ca2 + y, en contraste con WT, continuada desarrollando la fuerza de contracción baja micromolar Ca2 +. Tomados en conjunto, la consecuencia principal de la ablación de la cMyBP-C fue un defecto en la relajación diastólica y un rango dinámico más pequeño de la célula grasa, los cuales resultan probablemente de la sensibilidad de los miofilamentos mayor Ca2 +. Nuestros resultados indican que la cMyBP-C funciona como una restricción en la interacción actina-miosina en Ca2 baja + y SL corta para permitir la completa relajación durante la diástole.

Desarrollo De Un Biológico Ventricular Ayudar a Dispositivo: Datos Preliminares De Un Modelo Animal Pequeño

Circulation. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17846298

Ingeniería corazón tejido (EHT) puede ser generado de cardiomiocitos y proteínas de matriz extracelular y utilizado para reparar defectos de músculo de corazón local en vivo. Aquí, presumimos que forma corazón músculo construcciones pueden generadas mediante el uso de una tecnología novedosa de EHT-casting y aplicarse como corazón-abrazando cardiacos injertos en vivo.

Estimulación Beta-adrenérgico a Largo Plazo Conduce a Downregulation De Proteína Fosfatasa Inhibidor-1 En El Corazón

European Journal of Heart Failure. Nov, 2007  |  Pubmed ID: 17921049

Desensibilización de la vía beta-adrenoceptor/campamento/PKA es un sello de insuficiencia cardíaca. Inhibidor-1 (I-1) actúa como un amplificador condicional de señalización adrenérgicos aguas abajo de PKA inhibiendo fosfatasas de tipo 1 en la forma fosforilada de PKA. 1 O en su defecto corazones y así probablemente contribuye a desensibilización beta-adrenérgico. Para probar si downregulation 1 es una consecuencia de la excesiva unidad adrenérgico en la insuficiencia cardiaca, las ratas fueron tratadas vía minipumps con isoprenalina 2,4 mg/kg/día (ISO) o 0.9% NaCl durante 4 días. Como era de esperar, ISO crónica relación de corazón-a-peso incrementado en aproximadamente el 40% y abolió la respuesta inotrópica ISO aguda en los músculos papilares en aproximadamente 50%. En el corazón de tratados con ISO-1 los niveles de mRNA y proteína disminuyeron en un 30% y 54%, respectivamente. Esto fue acompañado por fosforilación fosfolamdano disminución (-40%), una Diana de-1 y una reducción en la captación de 45Ca2 + (-54%) en vesículas de membrana. En particular, fosfolamdano fosforilación correlacionó significativamente con los niveles de la proteína-1 que indica una relación causal. Concluimos que 1 regulación a la baja en la insuficiencia cardiaca es probablemente una consecuencia de la creciente unidad adrenérgica simpática y participa en la desensibilización de la cascada de señalización adrenérgico.

Ingeniería Del Tejido Cardiaco: Un Punto De Vista Clínico

Future Cardiology. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 21526914

Ingeniería del miocardio puede utilizarse para reparar los defectos del miocardio. Aunque no clínicamente aplicables aún, iniciales estudios en roedores han demostrado la viabilidad de la reparación del miocardio basada en vivo de ingeniería de tejidos. En orden para tratamiento restaurativo a evolucionar hacia una modalidad de tratamiento funcional, ingenieros de tejido debe generar miocardio humano de tamaño suficiente y con la función contráctil pertinente para reemplazar o reparar defectos del miocardio. Esto requiere la identificación de forma escalable y fuente de cardiomiocitos idealmente autólogo, así como el desarrollo de estrategias para superar las limitaciones de tamaño. Vamos a otras cuestiones fundamentales relativas a la asignación de las células humanas adecuadas para ingeniería de tejidos del miocardio y discutir la traducción del tejido miocárdico presente conceptos de ingeniería en ensayos preclínicos y clínicos.

Hormona Tiroidea Regula Desarrollo Titin Isoforma Transiciones Mediante El Fosfatidilinositol 3-quinasa / Vía AKT

Circulation Research. Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18096819

Titins, proteínas del sarcómero gigante con funciones principales mecánica/señalización, se expresan en 2 clases principales de la isoforma en el corazón mamífero: N2B (3000 kDa) y N2BA (> 3200 kDa). Un interruptor de la isoforma dramático ocurre durante el desarrollo cardíaco, de titin de N2BA fetal (3700 kDa) expresado antes del nacimiento de una mezcla de isoformas de N2BA/N2B más pequeño encontrado postnatal; corazón de rata adulta tiene casi exclusivamente N2B titin. El interruptor de la isoforma, que puede invertirse en la insuficiencia cardíaca crónica humana, altera la mechanosignaling y la distensibilidad del miocardio. Aquí se determinan factores regulan este interruptor utilizando, como sistema modelo, culturas de cardiomiocitos primario preparadas de ratas embrionarias. En el cultivo, la media N2B porcentaje inicialmente fue del 14% y aumentó en aproximadamente 60% dentro de 1 semana, que se asemeja a la conmutación en vivo. La transición de la isoforma de titin era independiente de la hipertrofia de la endotelina-1-inducida del miocito y no fue alterada por la estimulación, detención contráctil o estiramiento de la célula; sin embargo, fue moderadamente deteriorada por la disminución de la rigidez del sustrato y fuertemente dependiente de los componentes del suero. Angiotensina II promovió significativamente la transición. La proporción media de N2B en culturas de 1 semana de edad cayó 20% al 25% en medio de hormona reducido, pero además de 3,5, 3'-triyodotiroacético-l-tironina (T3) restaurado casi la proporción a que se encuentra en cultivo. Este efecto de T3 no fue prevenida por bisfenol A, un inhibidor específico de la vía clásica genómica de acción de T3. En contraste, el interruptor de titin podría estar estancado por fosfatidilinositol 3-quinasa inhibidor de la LY294002, que disminuyó la proporción de transcripciones N2B mRNA en horas y suprimido un rápido aumento de T3-inducida de la fosforilación de Akt. También, angiotensina II, pero no tramo de endotelina-1 o celular, mejorado la fosforilación de Akt. Así, aunque la rigidez de la matriz modula titin desarrollo isoforma transiciones, estas transiciones se regulan principalmente a través de la fosfatidilinositol 3-quinasa/Akt-dependiente señalización desencadenada particularmente por T3 a través de una vía de acción rápida.

La Inhibición De La Aldehído Deshidrogenasa Tipo 2 Atenúa La Acción Vasodilatadora De La Nitroglicerina En Las Venas Humanas

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18272654

Estudios recientes sugieren que la aldehído deshidrogenasa mitocondrial (ALDH) 2 está implicado en bioactivación vascular de la nitroglicerina (NTG). Sin embargo, ni la expresión de la enzima ALDH2, ni su papel funcional en la bioactivación GTN ha sido reportado en el objetivo principal droga en los seres humanos, a saber, los vasos de capacitancia. Hemos investigado si la ALDH2 se expresa en las venas humanas, y si la inhibición de la enzima atenúa los efectos de nitroglicerina en estos vasos. Se determinó la expresión de la enzima ALDH2 y la actividad deshidrogenasa en las venas humanas mediante la reacción en cadena de la polimerasa-transcriptasa, Western Blot y microscopía de inmunofluorescencia. En experimentos in vitro de contracción se realiza en presencia o ausencia del hidrato de cloral ALDH inhibidores, cianamida, y ethoxycyclopropanol. Las curvas de concentración respuesta se determinaron para la fenilefrina alfa-agonista, la nitroglicerina, y la directa donador de NO NONOate dietilamina (DEA-NONOate). ALDH2 expresión se limita en gran medida a células del músculo liso como se determina por microscopía de inmunofluorescencia confocal. Respuesta contráctil a la fenilefrina no se vieron afectados por todos los inhibidores de la ALDH probados. En claro contraste, los inhibidores de la ALDH redujo significativamente la potencia de la nitroglicerina en aproximadamente un orden de magnitud (P &lt;0,01). Ninguno de los inhibidores de la afectada la potencia del directo donador de NO DEA-NONOate, lo que descarta efectos no específicos de la cascada de señalización de NO. En los vasos de capacitancia humanos, ALDH2 es una enzima clave en la biotransformación de la nitroglicerina medicamentos de uso frecuente antianginoso.

ATP-binding Cassette Transporters Humana De Insuficiencia Cardíaca

Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. May, 2008  |  Pubmed ID: 18392808

Trifosfato de adenosina-binding cassette (ABC) transporters participan en el transporte de energía dependen de sustratos a través de las membranas biológicas. Nuestra hipótesis es que su expresión se altera durante el fracaso del corazón humano, sugiriendo una base fisiopatológica. Cuantificación de ácido ribonucleico mensajero de todos conocidos transportistas de ABC reveló múltiples alteraciones en la expresión del transportador de ABC no corazones humanos (clasificación III-IV de la New York Heart Association) en comparación con controles nonfailing. Se trata de una pérdida de canales de cloruro de ABCC7 y un aumento de la expresión de las subunidades reguladoras del canal K(ATP) ABCC8. Por otra parte, se expresó ABCG2, una bomba de eflujo de xenobióticos, drogas, a niveles mucho más altos no corazones en comparación con el control nonfailing corazones. ABCG2 fue encontrado en cardiomiocitos y células endoteliales capilares cardiacas. Experimentos en células transfectadas estable con ABCG2 humano revelaron que la rosiglitazona de agonista peroxisome proliferator-activada fue transportado por ABCG2 pero también inhibió la exportación de la prototípica ABCG2 sustrato pheophorbide A (IC(50) 25 microM). Estos resultados sugieren que expresión de transportador ABC alterada no corazones podría contribuir a la conductancia del canal deteriorada o afecte la disposición cardiaca de drogas.

Señalización Adrenérgicos En Corazón Falla-adaptarse O Morir

Nature Medicine. May, 2008  |  Pubmed ID: 18463653

La Respuesta Lenta De La Fuerza Para Estirar En El Miocardio Auricular Y Ventricular Del Corazón Humano: Relevancia Funcional Y Mecanismos Subcelulares

Progress in Biophysics and Molecular Biology. Jun-Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18466959

Carga mecánica es un importante regulador de la fuerza cardiaca. Estiramiento humanos trabéculas atriales y ventriculares produce un aumento de fuerza bifásico: un aumento inmediato (mecanismo de Frank-Starling) seguido por un aumento más lento (fuerza de respuesta, SFR lenta). En el ventrículo, el SFR era inafectado por antagonismo AT-ET-receptor y, por la inhibición de la proteína-cinasa-C, PI-3-quinasa y NO-sintasa, pero atenuada por la inhibición de la Na + / H +-(NHE) y Na + / Ca2 + (NCX) de intercambio. En el atrio, sin embargo, ni NHE - ni NCX-inhibición afectados el SFR. Tramo suscitó un gran NHE-dependiente [Na +] aumentar en ventrículo pero solamente un pequeño, NHE-independiente [Na +] aumentar en atrio. Tramo activado no selectivo canales contribuyen al desarrollo de la fuerza basal en el atrio pero no ventrículo y no participaron en el SFR en cualquier tejido. Curiosamente, la inhibición de los receptores o pre-solicitud de angiotensina II y endotelina-1 reduce el SFR atrial. Además, estiramiento mayor fosforilación de la miosina 2 (MLC2) y la inhibición de la quinasa de cadena ligera de miosina (MLCK) atenúa el SFR en aurícula y ventrículo. Así, en el corazón humano miocardio ventricular y atrial exhiben un SFR estirar-dependiente que podría servir para ajustar el gasto cardíaco a mayor carga de trabajo. En el ventrículo, hay un robusto NHE-dependiente (pero de la angiotensina II y endotelina-1-independiente) [Na +] i un aumento que se traduce en un [Ca2 +] i y fuerza aumentan vía NCX. En el atrio, por otro lado, hay un aumento de fuerza de angiotensina II y endotelina-dependiente (pero NHE y NCX-independiente). Aumento Miofilamento Ca2 + sensibilidad mediante la fosforilación de MLCK-inducida de MLC2 es un nuevo mecanismo que contribuye al SFR en aurícula y ventrículo.

Angiotensina II Y Fosforilación De Cadena Ligera De Miosina Contribuyen a La Respuesta Inducida Por Estiramiento Lento Fuerza Humana Miocardio Auricular

Cardiovascular Research. Sep, 2008  |  Pubmed ID: 18503051

Tramo es un importante regulador de la función. Los efectos funcionales de tramo en aurícula humana, sin embargo, son poco conocidos. Así, nos caracteriza la respuesta fuerza inducida por estiramiento en atrio humana y evaluó los mecanismos celulares subyacentes.

Bisoprolol Vs Carvedilol En Pacientes Ancianos Con Insuficiencia Cardiaca: Lógica Y Diseño Del Estudio CIBIS-ELD

Clinical Research in Cardiology : Official Journal of the German Cardiac Society. Sep, 2008  |  Pubmed ID: 18542839

Insuficiencia cardíaca crónica (ICC) es una enfermedad generalizada con deterioro grave calidad de vida y un pronóstico pobre. Los betabloqueantes son el pilar fundamental de la terapia CHF; sin embargo son bajo receta y bajo dosificado en la práctica clínica. Esto es particularmente evidente en pacientes ancianos, que pueden ser debido a un temor de efectos secundarios o la intolerancia. Los betabloqueantes más no han sido adecuadamente probados en pacientes con ICC diastólica, que es particularmente común en pacientes de edad avanzada. Finalmente, los datos comparativos sobre el uso de diferente bloqueadores beta en pacientes con ICC están escasas.

Ratones De Fosfatasa Inhibidor-1-deficientes Están Protegidos De Las Arritmias Inducidas Por Catecolaminas Y La Hipertrofia Del Miocardio

Cardiovascular Research. Dec, 2008  |  Pubmed ID: 18689792

Fosfatasa inhibidor-1 (I-1) es un amplificador condicional de señalización adrenérgicos aguas abajo del kinase de proteína A inhibiendo fosfatasas de tipo 1 sólo en su forma fosforilada de PKA. 1 O en su defecto corazones y así contribuye a desensibilización beta-adrenérgico. No está claro si esto debe ser visto como una respuesta predominantemente adversa o protección.

Corazón De Rata Descargada En Vivo Expresa Un Fenotipo Hipertrófico De La Repolarización Cardiaca

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18721926

Cardiaca descarga con izquierda dispositivos de asistencia ventricular se utiliza cada vez más para tratar a pacientes con insuficiencia cardíaca severa. Descarga se ha demostrado para mejorar la función sistólica y diastólica, pero se desconoce su impacto en la repolarización de miocitos ventricular izquierda. Descargado corazones exhiben patrones similares de la expresión génica como corazones sometidos a una mayor carga hemodinámica. Por lo tanto presumimos que también descarga cardiaca replica las alteraciones del potencial de acción y las corrientes iónicas repolarizante subyacentes encontradas la sobrecarga de presión inducida por hipertrofia cardiaca. Descarga ventricular izquierda fue inducida por el trasplante heterotópico cardiaco en ratas macho singénicos de Lewis. Potenciales de acción y las corrientes subyacentes de K + y Ca2 + fueron investigadas usando la técnica de patch-clamp de células completas. RT-PCR en tiempo real fue utilizada para cuantificar la expresión del mRNA de Kv4.2, Kv4.3 y KChIP2. Descarga marcado había prolongado de potenciales de acción cardiacos y suprimió la amplitud de varias repolarizante K + corrientes, en particular de la transitoria hacia fuera K + actual I(to), en tanto epicárdico y fibroelastosis miocitos. La reducción de I(to) se asoció con niveles significativamente más bajos de mRNAs Kv4.2 y Kv4.3 en miocitos epicárdico y KChIP2 mRNA en miocitos endocárdica. Concomitante, el tipo L Ca2 + actual aumentó en miocitos de corazones descargada. Colectivamente, estos resultados demuestran que la izquierda descarga ventricular inducen una profunda remodelación de la repolarización cardiaca con prolongación del potencial de acción, regulación a la baja de corrientes de K + repolarizan y upregulation del tipo L Ca2 + actual. Esto indica que rata descargado corazones en vivo expresan un fenotipo hipertrófico de la repolarización cardiaca el nivel molecular y celular.

Activación De Reguladores Negativos De La Vía Del Factor Inducible Por La Hipoxia (HIF) En Humanos Final Insuficiencia Cardíaca

Biochemical and Biophysical Research Communications. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18782560

El factor de transcripción inducible por la hipoxia HIF es inducido a principios de la isquemia miocárdica aguda en humanos, pero se desconoce si esta activación de HIF persiste durante la insuficiencia cardíaca crónica. El sistema HIF se caracterizó en el miocardio ventricular izquierdo de 18 explantados falta corazón y corazón de donante no falla 11 por análisis cuantitativo de la RT-PCR y occidentales. Los niveles de mRNA de HIF-1alfa disminuyeron significativamente mientras que su aHIF natural transcripción antisentido fue casi el doble más alto (p < 0,01) en su defecto miocardio que en corazones de control. Por otra parte, frente a corazones de donantes una expresión significativamente mayor de HIF-3alpha, que puede actuar como un inhibidor competitivo de la actividad de HIF-1/2alpha y PHD3, que en la hidroxilación de los residuos del prolyl dirige subunidades de HIF-alfa hacia la degradación proteasomal, observó en el miocardio de fallar. Aunque los reguladores negativos de HIF fueron inducidos, la vía HIF obviamente permanece activada en la insuficiencia crónica de corazón humana, porque los genes de Diana HIF prototipo, como ABCG2, VEGF y BNIP3, fueron inducidos significativamente.

Descarga Mecánica Del Corazón De Rata Implica Cambios Marcados En El Equilibrio De Proteína Cinasa-fosfatasa

Journal of Molecular and Cellular Cardiology. Dec, 2008  |  Pubmed ID: 18848565

Mecánico descarga de no corazones por izquierda dispositivos de asistencia ventriculares (LV) regularmente se utiliza como puente al trasplante y puede conducir a una mejoría sintomática. Este último se ha asociado con alteración fosforilación de proteínas reguladoras cardiacas, pero se desconoce los mecanismos subyacentes. Aquí, probamos si descarga cardiaca altera la fosforilación de la proteína afectando el equilibrio correspondiente de la cinasa-fosfatasa. Descarga cardiaco y reducción de la masa del VI fueron inducidos por el trasplante heterotópico de corazón en ratas durante dos semanas (n = 8). Corazones nativos in situ de los animales receptores fueron utilizados como controles (n = 8). Los estacionaria proteína quinasa A (PKA) o Ca(2+)-calmodulin-dependiente de la proteína quinasa II (CaMKII) fosforilación niveles de fosfolamdano (PLB, Ser(16) y Thr(17)) y troponina I (TnI, Ser(23/24)) fueron disminuidos por 40-60% en corazones descargada. Constantemente, en esos corazones actividad PKA fue disminuida por aproximadamente el 80% y la actividad de proteína fosfatasa 2A y 1 fue aumentado en 50% y 90%, respectivamente. Por el contrario, la actividad de la CaMKII era aproximadamente 60% mayor, lo que puede servir como una compensación parcial. Estos datos indican que la descarga cambia el equilibrio de la cinasa-fosfatasa hacia neto desfosforilación de PLB y TnI. Este cambio también puede contribuir a la reducción de los niveles de la fosforilación de fosfoproteínas cardiacas observadas en los corazones humanos enfermos después de Davi.

Ecocardiografía De Contraste Miocárdico En Tiempo Real Para Evaluar La Perfusión Y Función En Ratas Wistar Infartado Y Saludable

Ultrasound in Medicine & Biology. Jan, 2008  |  Pubmed ID: 17854980

Ecocardiografía de contraste miocárdico en tiempo real (MCE) es una perfusión no invasiva de método, mientras que técnicos y resolución de problemas afectan su aplicación en animales pequeños. Por lo tanto, hemos investigado la viabilidad de MCE en configuraciones cardiovasculares experimentales que implican miocardio infartado y saludable en ratas. Examinaron a ratas Wistar macho de 25 bajo anestesia volátil (2,5% isoflurano) con la ecocardiografía 2D convencional de alta resolución (2DE) y en tiempo real MCE (7.500 Sonos con transductor de 15 MHz, Philips Medical Systems, Andover, MA, USA) en el eje corto de vista. Agente de contraste (SonoVue, Bracco, Milán, Italia) fue infundido como un bolo en una vena sublingual. Intensidad de la señal de fondo-resta contraste (SI) se midió off-line en seis segmentos telesistólico y equipada para una curva exponencial (variante aleatoria gamma). Pico derivada SI posteriormente fue calculado y Comparado con el movimiento de la pared y cantidades medidas funcionales común (izquierda end-diastolic diámetro ventricular [DDVI], área acortamiento [AS]). Las grabaciones fueron realizadas antes y 14 días después de la ligadura de (LAD) descendente anterior izquierda. Infarto inducida por anormalidades del movimiento de la pared anterior (WMA) en todos los animales (16 acinético, hypokinetic 9) aumentó DTDVI (9.1 +/-0.6 vs 7.9 +/-0,6 mm, p < 0.001), reducido como (36.1 +/-10.0 vs 59.5 +-4.1%, p < 0.001) y reducido SI segmentaria anterior (0.4 + /-0,4 dB acinético / 1.7 +-1.7 dB hypokinetic vs 15,8 +/-10,9 dB preinfarct, p < 0.001 / p < 0.001). SI segmentaria en segmentos normokinetic permaneció invariable. Área en riesgo (defecto de perfusión) correlacionaron bien con WMA (r = 0.838). Estos datos confirman alta resolución MCE en tiempo real como una herramienta racional para evaluar la perfusión miocárdica de ratas Wistar. Por lo tanto puede ser una herramienta de diagnóstico útil para la investigación cardiovascular in vivo en animales pequeños.

Estimulación Beta-adrenérgico Y Función Del Miocardio En El Corazón

Heart Failure Reviews. Dec, 2009  |  Pubmed ID: 19110970

El sistema nervioso simpático proporciona el estímulo más poderoso de la función cardiaca, provocada por la norepinefrina y epinefrina y sus receptores beta-adrenérgicos postsinápticos. Más de 30 años después del primer uso del practolol en pacientes con insuficiencia cardíaca betabloqueadores ahora son el pilar del tratamiento farmacológico de la insuficiencia cardíaca crónica. Muchos aspectos de su mecanismo de acción se entienden bien, pero otros permanecen sin resolver. Esta revisión se centra en una serie de preguntas que son claves para la evolución en el campo. ¿A qué y cuál es el papel de desensibilización beta-adrenérgico, un sello del corazón? ¿Es parte de esta adaptación predominante beneficiosa y por lo tanto debe ser reforzado, otra parte principalmente desadaptativas y por lo tanto un objetivo para los antagonistas? ¿Qué lecciones pueden extraerse de los estudios en ratones modificados genéticamente, que a partir de estudios genéticos (fármaco)? Por último, ¿qué objetivos prometedores aguas abajo de los receptores beta-adrenérgicos que van más allá del actual bloqueo neurohumoral?

Tratamiento Con Atorvastatina Parcialmente Protege El Corazón De Rata De Efectos Nocivos De La Catecolamina

Cardiovascular Research. Apr, 2009  |  Pubmed ID: 19136528

Atorvastatina "blunts" la respuesta de cardiomiocitos a catecolaminas reduciendo isoprenilación de subunidades gamma de G. Examinamos si atorvastatina ejerce efectos similares en vivo y protege al corazón de rata de efectos nocivos de las catecolaminas.

Captura Adenylyl Cyclases Como Objetivos Potenciales De La Droga

Nature Reviews. Drug Discovery. Apr, 2009  |  Pubmed ID: 19337273

AMP cíclico (cAMP) es un importante mediador de señalización intracelular. Se genera en los mamíferos por nueve membrana-limitan y cyclases un adenylyl soluble (ACs), cada uno con distintos patrones de regulación y expresión. Aunque muchos medicamentos inhiben o estimulan la actividad de AC a través de los respectivos receptores aguas arriba del G-acoplados a proteínas (por ejemplo, receptores opiáceos o beta-adrenérgicos), ACs no se han sido objetivos de los medicamentos. En la última década los estudios sobre las funciones fisiológicas de las diferentes isoformas de AC mamíferos así como avances en el desarrollo de inhibidores selectivos-isoforma de la AC y activadores sugieren ACs podría ser dianas farmacológicas útiles. Aquí discutimos el potencial terapéutico de la isoforma selectivos compuestos en varios contextos clínicos, incluyendo el dolor neuropático, trastornos neurodegenerativos, insuficiencia cardíaca congestiva, asma y contracepción masculina.

Un Nuevo Polimorfismo En El Promotor Del Gen Humano De La Calmodulina III Es Un Gen Modificador Potenciales Para La Cardiomiopatía Hipertrófica

European Heart Journal. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19429631

La cardiomiopatía hipertrófica (FHC) es causada por mutaciones en genes que codifican proteínas sarcomeric. Penetrancia incompleta sugiere la existencia de genes modificadores. Calmodulina (CaM) podría ser de importancia dado el papel clave de CA para el crecimiento y la función contráctil cardiaca. Puede afectar cualquier variante que afecta a la función o expresiones de la CaM en la expresión clínica de FHC.

Absurdo-mediado MRNA Decaimiento Y Ubiquitina-proteasoma Sistema Regular Cardiaca Niveles Mutante De La Proteína C De Miosina-obligatoria En Ratones Cardiomyopathic

Circulation Research. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19590044

Las mutaciones en el gen MYBPC3 codificación proteína miosina cardiaca (cMyBP)-C son causas frecuentes de la miocardiopatía hipertrófica, pero los mecanismos que conducen de mutaciones enfermedad siendo esquivos.

Factor De Crecimiento Vascular Hepatocitos O De Transferencia De Factor De Crecimiento Endotelial Gene Maximiza La Madre Mesenquimáticas a Base De Células De Salvamento Del Miocardio Tras Un Infarto Agudo De Miocardio

Circulation. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19752375

Células madre mesenquimales (MSC), basados ​​en estrategias regenerativas fueron investigados para el tratamiento de infarto agudo de miocardio y mejorar la función ventricular izquierda.

Atrogin-1 Y MuRF1 Regulan Los Niveles De MyBP-C Cardíacos a Través De Diferentes Mecanismos

Cardiovascular Research. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 19850579

La cardiomiopatía hipertrófica (FHC) es causada con frecuencia por cardiaca miosina-obligatoria proteína C (cMyBP-C) mutaciones genéticas, que deben resultar en mutantes c-terminal truncado. Sin embargo, mutantes truncados no fueron detectados en el tejido miocárdico de pacientes FHC y se degradación rápidamente por el sistema ubiquitina-proteasoma (UPS) después de la transferencia de genes en miocitos cardiacos. Puesto que la diversidad y especificidad de la regulación de la UPS mienten en E3 ubiquitina ligasas, investigamos si las ligasas de E3 músculo-específico anillo atrogin-1 o del músculo del dedo protein-1 (MuRF1) medie degradación de truncan cMyBP-C.

Constitutivamente Activa Fosfatasa Inhibidor-1 Mejora La Contractilidad Cardiaca En Ratones Jóvenes Pero Es Nocivo Catecolaminérgicos Estrés Y Con El Envejecimiento

The Journal of Clinical Investigation. Feb, 2010  |  Pubmed ID: 20071777

Fosfatasa inhibidor-1 (I-1) es un elemento amplificador distal de señalización beta-adrenérgico que funciona previniendo la desfosforilación de objetivos posteriores. 1 Está regulada en los corazones de la falla humana, mientras que la sobreexpresión de una forma mutante constitutivamente activa (I - 1 c) invierte la disfunción contráctil en ratón fallando corazones, sugiriendo que yo - 1 c puede ser un candidato para la terapia génica. Hemos generado ratones con expresión condicional restringida en cardiomiocitos de - 1C (contemplado en el presente como ratones dTGI - 1C) sobre un fondo-1-deficiente. Ratones adultos jóvenes dTGI - 1 c exhibieron mayor contractilidad cardiaca pero exagerada disfunción contráctil y la dilatación ventricular con infusión de catecolaminas. Telemétricas grabaciones de ECG revelaron taquicardia ventricular inducida por catecolaminas típica y muerte súbita. Doxiciclina alimentación había apagada expresión de restricción de cardiomiocitos - 1C y revertir todas las anormalidades. Corazones de ratones dTGI - 1C mostró hiperfosforilación de fosfolamdano y el receptor de rianodina y esto se asoció con un mayor número de catecolaminas inducida por Ca2 + chispas en miocitos aislados. Ratones de edad dTGI - 1C desarrollaron espontáneamente un fenotipo cardiomyopathic. Estos datos fueron confirmados en una línea independiente segundo ratón transgénico, que expresan a un mutante de larga duración-1 que no podría ser fosforilado y tal modo inactivo por PKC-alfa (I-1S67A). En conclusión, la expresión condicional de I - 1 c o 1S67A mejorado fosforilación de estado estacionario de llave 2 Ca2 +-regulación de las enzimas del retículo sarcoplásmico. Esto se asoció con mayor función contráctil en animales jóvenes pero también con las arritmias y la miocardiopatía adrenérgica estrés y con el envejecimiento. Estos datos se deben considerar en el desarrollo de nuevas terapias para la insuficiencia cardíaca.

Myeloperoxidase Actúa Como Un Mediador De Citosinas De Fibrilación Auricular

Nature Medicine. Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20305660

Observación clínica y ex vivo estudios han establecido una asociación fuerte entre la fibrilación auricular y la inflamación. Sin embargo, si la inflamación es la causa o la consecuencia de la fibrilación auricular y que mediadores inflamatorios específicos pueden aumentar la susceptibilidad de las aurículas fibrilación auricular siendo esquivos. Aquí proporcionamos evidencia clínica y experimental para la participación mecanicista de mieloperoxidasa (MPO), una enzima Hem abundantemente expresado por los neutrófilos, en la patofisiología de la fibrilación auricular. Ratones deficientes en MPO pretratados con angiotensina II (AngII) para provocar la activación del leucocito demostrada la baja abundancia de tejido auricular de la MPO producto 3-chlorotyrosine, disminución de la actividad de las metaloproteinasas de la matriz y blunted fibrosis auricular en comparación con los ratones de tipo salvaje. A aurícula derecha estimulación electrofisiológica, ratones deficientes en MPO estaban protegidos de la fibrilación auricular, que se revirtió cuando MPO fue restaurado. Los seres humanos con fibrilación auricular tenían mayores concentraciones plasmáticas de MPO y una mayor carga MPO en aurícula derecha tejido en comparación con individuos desprovisto de fibrilación auricular. En las aurículas, MPO colocalized con marcado aumento de la formación de 3-chlorotyrosine. Nuestros datos demuestran que MPO es un requisito crucial para remodelación estructural del miocardio, llevando a una mayor vulnerabilidad a la fibrilación auricular.

[Vernakalant: Un Fármaco Antiarrítmico Nuevo Para La Conversión Rápida De La Fibrilación Auricular a Ritmo Sinusal]

Deutsche Medizinische Wochenschrift (1946). May, 2010  |  Pubmed ID: 20446233

Vernakalant es una droga intravenosa antiarrítmica novela prometedora para la conversión rápida de la fibrilación auricular a ritmo sinusal. Bloquea varias corrientes de iones importantes en potencial de acción cardíaco incluyendo IKr. Su diferencia con fármacos antiarrítmicos tradicionales es un efecto preferencial en las aurículas, alcanzado por una inhibición de corrientes repolarizante de iones de potasio I(Kur), que es específico del auricular, y I(to), que afecta predominante a la repolarización auricular, ya que hay poco potencial de la meseta. Además vernakalant bloquea corrientes de iones de sodio dependientes de voltaje y la frecuencia (I(Na)). Así los potenciales de acción rápidos en la fibrilación auricular se dirigen particularmente por vernakalant: Esto conduce a una tasa de conversión a ritmo sinusal en alrededor del 50% de los ataques de inicio reciente (menos de 7 días) de la fibrilación auricular. Edad, género, función del órgano y medicación concomitante parecen no tener ninguna influencia clínicamente significativa sobre la farmacocinética de vernakalant. El número de pacientes incluidos en los estudios aún es demasiado pequeño para proporcionar una respuesta definitiva sobre su toxicidad cardiaca. Sin embargo, una tendencia demostrada a proarrhythmia y poco experiencia con esta nueva droga demandas PRECAUCIÓN incluso después de que ha sido aprobado oficialmente.

Desarrollo De Una Plataforma De Detección De Drogas Dirigido Tejido Cardíaco

Circulation Research. Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20448218

Ingeniería de tejidos puede proporcionar avanzados modelos in vitro para pruebas de drogas y, en combinación con la reciente tecnología de células madre pluripotentes inducidas, enfermedad de modelado, pero técnicas disponibles son inadecuadas para un mayor rendimiento. Objetivo: Aquí, presentamos un nuevo método miniaturizado y automatizado basado en el tejido del corazón Ingeniería (EHT).

¿Fosfatasa-1-inhibitor-1: Amplificador O Atenuador De Estrés Catecolaminérgicos?

Basic Research in Cardiology. Sep, 2010  |  Pubmed ID: 20526608

Myomasp/LRRC39, Una Proteína Específica Del Músculo Y Corazón, Es Un Nuevo Componente De La Banda M Sarcomeric Y Participa En La Detección De Estiramiento

Circulation Research. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20847312

La banda M representa una estructura transversal en el centro de la banda a sarcomeric y proporciona un anclaje para los filamentos gruesos de miosina que contienen. En contraste con otras estructuras sarcomeric, por ejemplo, el Z-disco, sólo pocas proteínas M-banda-específicas se han identificado hasta la fecha, y su composición molecular exacta sigue siendo confuso.

Los Nuevos Donantes HNO, 1-nitrosocyclohexyl Acetato, Aumenta La Fuerza Contráctil En Miocitos Ventriculares Normales Y β-adrenergically Desensitized

Biochemical and Biophysical Research Communications. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20946877

Disfunción contráctil y respuesta disminuida a los agonistas β-adrenérgicos se caracterizan por no corazones. Nitroxilo químicamente donado (HNO) mejora la contractilidad no corazones y así puede tener potencial terapéutico. Sin embargo, hay una necesidad de donantes farmacológicamente convenientes. En este estudio probamos si el donante HNO puro y acción prolongada, 1-nitrosocyclohexyl acetato (NCA), afecta la fuerza contráctil en normal y patológico ventricular miocitos (VMs) así como en aislados de corazones. VMs fueron aislados de ratones ya sea sometido a la infusión de la isoprenalina (ISO; 30 μg/g / día) o al vehículo (0.9% NaCl) durante 5 días. Acortamiento del sarcómero y Ca2 + transitorios fueron medidos simultáneamente usando el sistema de IonOptix. Fuerza de la contracción de corazones aislados se midió mediante un sistema Langendorff-perfusión. NCA aumentaron sarcómero pico acortamiento por + 40-200% de una manera dependiente de la concentración (EC50 ∼55 μM). Eficacia y potencia no difirieron entre VMs ISO normal y crónica, a pesar del hecho de que este último muestra una respuesta inotrópica marcadamente disminuida a la aguda estimulación β-adrenérgica con ISO (1 μM). NCA (60 μM) aumentó pico sarcómeras acortamiento y amplitud transitoria de Ca2 + por ∼200% y ∼120%, respectivamente, lo que sugiere efectos sobre la sensibilidad de los miofilamentos Ca2 + tanto retículo sarcoplásmico (SR) Ca2 + ciclismo. Lo importante, NCA no afectó contenido diastólica de Ca2 + o SR Ca2 +, según lo determinado por la aplicación rápida de la cafeína. NCA (45 μM) aumentó la fuerza de la contracción en un 30% en corazones aislados. En conclusión, NCA mayor fuerza contráctil en VMs normales y β-adrenergically desensitized así como en corazones aislados de ratón. Este perfil requiere más investigaciones de este donante HNO en el contexto de la insuficiencia cardíaca.

¿Es La Clave De Fosforilación De Receptor De Rianodina a La Lucha O La Respuesta De Vuelo E Insuficiencia Cardíaca?

The Journal of Clinical Investigation. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 21099119

En situaciones de estrés el corazón late más rápido y fuerte. Según marcas y sus colegas, esta respuesta es, en gran parte, consecuencia de la facilitación Ca² + liberación intracelular Ca² + tiendas mediante el receptor de rianodina 2 (RyR2), probablemente debido a aumentos de catecolamina-inducida en RyR2 fosforilación en serina 2808 (S2808). Si se mantiene la estimulación de catecolaminas (por ejemplo, como ocurre en la insuficiencia cardiaca), RyR2 se convierte hiperfosforilada y "agujereado," conduce a arritmias y otra patología. Esta "hipótesis de RyR2 agujereada" es muy controvertida. En esta edición de la JCI, marcas y sus colegas informan sobre dos nuevas líneas de ratón con mutaciones en S2808 que proporcionan fuerte evidencia que apoya su teoría. Por otra parte, los experimentos revelaron una influencia de modificaciones de redox de RyR2 que puede explicar algunas discrepancias en el campo.

MicroARN-199b Apunta La Kinasa Nuclear Dyrk1a En Un Bucle De Auto-amplificación Promover Señalización Calcineurina/NFAT

Nature Cell Biology. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 21102440

MicroRNAs (miRs) son una clase de monocatenario, no codificante RNAs de alrededor de 22 nucleótidos de longitud. Cada vez más pruebas implica miRs en procesos de la enfermedad del miocardio. Aquí mostramos que miR-199b es un gen objetivo directo de calcineurina/NFAT que aumenta en expresión en ratón y humano insuficiencia cardíaca y apunta a la nuclear NFAT quinasa doble especificidad tirosina-(Y)-fosforilación regulada quinasa 1a (Dyrk1a), constituyendo un mecanismo de avance de alimentación patógeno que afecta la expresión génica calcineurina responden. Ratones mutantes overexpressing miR-199b, o haploinsufficient para Dyrk1a, están sensibilizados para señalización de calcineurina/NFAT o sobrecarga de presión y cardiomegalia inducida por estrés de mostrar a través de la expresión reducida de Dyrk1a. La inhibición in vivo de miR-199b por un antagomir específico había normalizado Dyrk1a expresión, disminución de la actividad nuclear de NFAT y causó marcada inhibición e incluso revocación de hipertrofia y fibrosis en modelos de ratón de la insuficiencia cardíaca. Nuestros resultados revelan que microRNAs afectan la señalización celular cardiaca y la expresión génica e implicar miR-199b como una diana terapéutica en la insuficiencia cardiaca.

Firmas De MicroRNA Común En Remodelación Cardiaca Hipertrófica Y Atrófica Inducidas Por Cambios En La Carga Hemodinámica

PloS One. 2010  |  Pubmed ID: 21151612

Sobrecarga mecánica lleva a hipertrofia cardiaca y descarga mecánica a atrofia cardiaca. Ambas condiciones producen cambios transcripcionales similares incluyendo una reexpresión de genes fetales, a pesar de las diferencias obvias en el fenotipo. MicroRNAs (miRNAs) se discuten como reguladores del superordinate de redes globales gen actúa principalmente a nivel traslacional. Aquí, presumimos que conjuntos definidos de miRNAs pueden determinar la dirección de las respuestas de plasticidad de cardiomiocitos.

El Sistema Ubiquitina-proteasoma Y Decaimiento Absurdo-mediado Del MRNA En La Miocardiopatía Hipertrófica

Cardiovascular Research. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 19617224

Miocardiopatías representan una causa importante de morbimortalidad cardiovascular debido a insuficiencia cardíaca, arritmias y muerte súbita. Mayoría de las formas de la cardiomiopatía hipertrófica (HCM) es familiar con un modo dominante de un autosoma de herencia. En los últimos 20 años, la base genética de la enfermedad ha sido ampliamente extendida. HCM se considera como un sarcomeropathy que implica mutaciones en proteínas sarcomeric, más a menudo de beta-miosina cadena pesada y proteína de unión a miosina cardiaca mutaciones C. 'sin sentido', más común en la antigua, se asocian con proteínas disfuncionales estable integradas en el sarcómero. 'Absurdo' y mutaciones frameshift, más común en el segundo, se asocian con bajos niveles de mRNA y proteína derivados el alelo enfermo, a haploinsufficiency del alelo sano restante. Los dos sistemas de control de calidad responsables de la eliminación de los afectados mRNAs y proteínas son el decaimiento absurdo-mediado de mRNA (NMD) y el sistema ubiquitina-proteasoma (UPS), respectivamente. Esta revisión analiza aspectos clínicos y genéticos de HCM y el papel de NMD y UPS en la regulación de proteínas mutantes, evidencia de deterioro de UPS como un factor patógeno, así como terapias potenciales para HCM.

Efectos Secundarios Cardiovasculares De Tratamientos Contra El Cáncer: Una Declaración De Principios De La Asociación De Insuficiencia Cardíaca De La Sociedad Europea De Cardiología

European Journal of Heart Failure. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 21169385

Las reducciones en la mortalidad y la morbilidad se logra entre los pacientes de cáncer con terapias actuales representan un logro importante. Sin embargo, teniendo en cuenta sus mecanismos de acción, muchos agentes anticáncer tenga una posibilidad significativa de efectos secundarios cardiovasculares, incluyendo la inducción de la insuficiencia cardíaca. La magnitud de este problema sigue siendo confusa y no es evidente de los ensayos clínicos actuales de emergentes agentes dirigidos, que generalmente debajo-representan pacientes mayores y aquellos con comorbilidades significativas. También puede aumentar el riesgo de eventos adversos, cuando nuevos agentes, que con frecuencia se modulan vías de supervivencia, se utilizan en combinación con otros o con otros quimioterápicos citotóxicos convencionales. La medida a que la supervivencia y crecimiento caminos en la célula del tumor (que buscamos para inhibir) coinciden con los de células cardiovasculares (que intentamos preservar) es una incógnita pero que llegará a ser cada vez más importante con el desarrollo de nuevos tratamientos contra el cáncer dirigidos a rutas de señalización intracelular. No queda claro si se pueden predecir posibles problemas cardiovasculares del análisis de tales mecanismos de señalización básicas y qué Evaluación preclínica debe realizarse. La selección de pacientes, optimización de los regímenes terapéuticos, monitoreo de la función cardiovascular durante el tratamiento y el manejo de efectos secundarios cardiovasculares es probable que cada vez más importante en pacientes con cáncer. Este documento resume las deliberaciones de un taller Interdisciplinario organizado por la Asociación de insuficiencia cardíaca de la sociedad europea de Cardiología (celebrada en Bruselas en mayo de 2009), que reunió a los médicos que trabajan en cardiología y Oncología y quienes participan en ciencia básica, traslacional y farmacéutica.

Inhibidor De La Fosfatasa-1-1 En Señales Fisiológicas Y Patológicas Receptores β-adrenérgicos

Cardiovascular Research. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21354993

Control de eventos de fosforilación-desfosforilación de proteínas se produce a través de la regulación de proteínas quinasas y fosfatasas. Fosfatasa tipo 1 (PP-1) proporciona la principal actividad de serina/treonina proteína fosfatasas en el corazón. Inhibidor-1 (I-1) fue la primera molécula endógena encontrada para inhibir específicamente PP-1. En particular,-1 es activada por el campo dependiente de proteína quinasa A (PKA), y la prevención subsecuente de la desfosforilación de destino por PP-1 proporciona amplificación distal de señalización de receptores β-adrenérgicos (β-AR). 1 Resultó para ser regula y hypo-fosforilada en insuficiencia cardíaca experimental y humano pero hiperactivo en fibrilación auricular humana, implicando 1 en la patogenia de la insuficiencia cardiaca y arritmias. En consecuencia, el potencial terapéutico de 1 en la insuficiencia cardiaca y arritmias recientemente ha sido abordado por la generación y análisis de varios modelos de ratón genético-1. Esta revisión resume y analiza estos datos, destaca parcialmente controversias sobre si-1 debe reforzarse terapéutico o inhibido y sugiere direcciones futuras para entender mejor el papel funcional de 1 en la señalización de la β-AR fisiológica y patológica.

Valoración a La Dosis Objetivo De Bisoprolol Vs Carvedilol En Pacientes Ancianos Con Insuficiencia Cardíaca: El Ensayo CIBIS-ELD

European Journal of Heart Failure. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21429992

Los betabloqueantes diferentes con distintos perfiles farmacológicos son aprobados en la insuficiencia cardiaca, sin embargo, siguen estando infrautilizadas y underdosed. Aunque potencialmente de importancia de salud pública importante, si un agente es superior en términos de tolerabilidad y dosificación óptima no ha sido investigada. El objetivo de este estudio fue, por tanto, comparar la tolerabilidad y efectos clínicos de dos bloqueadores beta probada en pacientes ancianos con insuficiencia cardiaca.

Traqueal Tejido De Ingeniería Bioartificiales Con Culturas Del Fibroblasto-mesenquimal Células Híbridas En Hidrogeles De Colágeno

Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21098511

Apuntamos a proporcionar la primera in vitro e in vivo prueba de concepto para un novela tejido traqueal, tecnología de la ingeniería. Presumimos que podría generarse bioartificiales tráquea (BT) de fibroblastos y colágeno hidrogeles, mecánicamente apoyado por osteogenically inducida por madre mesenquimal (MSC) de las células en forma de anillo 3D-hidrogel culturas y aplicación en un modelo experimental de lesión de tráquea de rata. Tejido en forma de tubo se construyó a partir de mezclas de rata fibroblastos y colágeno en los moldes de la fundición por encargo. El tejido fue caracterizado histológicamente y mecánicamente. Tejido en forma de anillo fue construido a partir de mezclas de MSCs de rata y colágeno y fundió a los tubos tejido-dirigida para funcionar como refuerzo. Rigidez del refuerzo biológico fue realzada por la inducción de la diferenciación osteogeneic en MSCs. osteogénico diferenciación se evaluó mediante la evaluación de la secreción de osteocalcina (OC), cuantificación de depósito de calcio (Ca) y ensayos mecánicos. Finalmente, BT fue implantado para superar un defecto traqueal inducida quirúrgicamente. Se construyó una estructura de tres capas de tejido tubular compuesta de una red interconectada de fibroblastos. Colapso del tejido fue prevenida por la colocación de refuerzo de tejido en forma de anillo que contienen MSC alrededor de las construcciones tubulares. Inducción osteogénica resultó en alta secreción de OC, depósito de Ca alta y construir mayor rigidez. En última instancia, cuando se implantó el BT, destinatarios ratas fueron capaces de respirar espontáneamente.

Distinción Entre Las Dos Poblaciones De Células Islote-1-positivas En Corazones De Diferentes Cepas Murinas

Stem Cells and Development. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 20942609

Expresión de islote-1 identifica las poblaciones de células progenitoras en corazones murinos embrionarios, fetales y neonatal que son capaces de dar lugar a todos los linajes de células cardiacas ex vivo e in vivo. Usando immunohistochemistry sistemática, investigamos si las células islote-1-positivas están presentes en el corazón de ratón adulto desde la perspectiva de su posible utilidad terapéutica. Se evaluaron la presencia, localización y naturaleza de las células del islote-1-positive en ratones de cepas diferentes edades y condiciones. Las células islote-1-positive estaban presentes en el corazón de ratón del día postnatal 1 a la edad adulta joven. Dependiendo de la cepa, estas células se organizaron en 1 o 2 tipos de racimos localizados a áreas restringidas, a una distancia de 6% - 35% de la longitud de corazón desde la base. El primer tipo de clúster estuvo presente en todas las cepas y consistió en las células derivados de la cresta neural que forman los ganglios cardiacos. El número de células permanecido estable (unos pocos cientos) de neonatal hasta la edad adulta y las variaciones fueron observadas entre las cepas con respecto a su persistencia a largo plazo. El segundo tipo de clúster era esencialmente presentes en 129SvJ o cepas de ratones Balb/C y ausente de las otras cepas probadas (C57BL/6J, C3H, SJL). Consistió en las células que expresan la actinia sarcomeric altamente ordenada, coherente con su tener identidad de cardiomiocitos. Estas células desaparecieron en animales mayores de 4 meses. Ni el número ni el tipo de células islote-1-positivas varió con el tiempo en un modelo murino de miocardiopatía dilatada. Nuestros estudios demuestran que las células islote-1-positivas son relativamente pocos en número en corazón adulto murino, están localizado en áreas restringidas y algo inaccesibles y pueden representar tanto cresta neural y linajes de cardiomiocitos.

El Efecto De La Diferenciación Osteoblástica Células Madre Mesenquimales En Las Propiedades Mecánicas De Ingeniería Tejido óseo

Tissue Engineering. Part A. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21548844

Las células madre mesenquimales (MSCs) puede dar lugar a osteoblastos y por lo tanto se han sugerido como una fuente de células para la ingeniería de hueso. Aquí la hipótesis de diferenciación osteoblástica de MSC y maduración puede ser apoyada por culturas tridimensionales en hidrogeles de colágeno (hidrogel cultura) para finalmente dar lugar a mecánicamente robusto tejido bone-like. Primero comparamos la eficacia de la diferenciación osteoblástica de MSCs usar suplementos de osteoinductores (β-glicerofosfato, vitamina C y dexametasona), en una cultura de hidrogel y en una cultura de dos dimensiones (2D cultura) determinando parámetros sustituto para la diferenciación osteoblástica, incluyendo la secreción de osteocalcina (OC) y la deposición de calcio (Ca). A continuación construye tejidos de hueso-como en forma de anillo con MSCs en las culturas de hidrogel y evaluó su mecánica (análisis de tensión-tensión), bioquímica molecular (secreción de OC, deposición de Ca y los niveles de mRNA de Runx2/osterix) y morfológicas (von Kossa tinción) propiedades. Las secreciones de la OC y deposiciones de Ca fueron significativamente mayores en las culturas de hidrogel que en las culturas 2D, sugiriendo la mejor diferenciación osteoblástica y maduración en las culturas de hidrogel. Colágeno base de hidrogel en forma de anillo similar a hueso tejidos acondicionado con suplementos de osteoinductores desarrollados propiedades biomecánicas mejoradas, incluyendo tejido alta rigidez y fuerza de la explosión final, bioquímica/molecular superior y signos morfológicos suelen encontradas en hueso mineralizado. Estos resultados pueden ser aprovechados no sólo para generar bioartificiales hueso, pero también para dilucidar los mecanismos básicos de la fisiología ósea.

1 La Folistatina-como En La Insuficiencia Cardíaca Sistólica Crónica: Un Marcador De Remodelado Ventricular Izquierdo

Circulation. Heart Failure. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21622850

La folistatina tipo 1 (FSTL1) es una glicoproteína extracelular en suero humano. Trabajo reciente sugiere que el FSTL1 es secretada en respuesta a lesiones isquémicas y que su sobreexpresión es protector en el corazón y la vasculatura.

El Golpe Va En: Músculo Del Corazón Humano De Células Madre Pluripotentes

Circulation Research. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21700948

Diferenciación Terminal, Avanzada Maduración Organotypic Y Modelado De Crecimiento Hipertrófico En Ingeniería Tejido Cardíaco

Circulation Research. Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21921264

Ingeniería del tejido cardiaco debe proporcionar modelos de músculo de corazón in vitro "realista" y tejido sustituto para la reparación del miocardio. Para cualquier aplicación, ingeniería de miocardio debe mostrar características del miocardio nativa, incluyendo la diferenciación terminal, organotypic la maduración y el crecimiento hipertrófico.

Tejido De Corazón Humano Diseñado Como Una Herramienta Versátil En Investigación Básica Y Toxicología Preclínica

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 22028871

Progenie de células madre embrionarias humanas (hESC) tienen gran promesa como sustitutos para las células primarias humanas, particularmente si estos últimos no están disponibles como en el caso de cardiomiocitos. Sin embargo, altas plataformas experimentales contenidas faltan que permiten la función de cardiomiocitos derivados de hESC a estudiarse en condiciones relativamente fisiológicas y estandarizadas. Aquí describimos un protocolo sencillo y robusto para la generación de tejido del corazón humano de ingeniería basadas en fibrina (hEHT) en un formato de 24 pocillos con una población no seleccionada de diferenciadas células madre embrionarias humanas que contiene 30-40% positivo α-actinina miocitos cardiacos. EHTs humanas comenzados a mostrar las contracciones coherentes 5-10 días después del vaciado, alcanzada regular (media 0,5 Hz) y fuertes contracciones (media 100 µN) hasta por 8 semanas. Exhibieron una densa red de cardiomiocitos longitudinalmente orientados, interconectados y Cruz-estriado. Contracciones espontáneas de hEHT fueron analizadas por la grabación de vídeo-óptico automatizado y mostraron respuestas cronotrópico calcio y la isoprenalina agonista β-adrenérgico. Los compuestos proarrítmico E-4031, quinidina, procainamida, cisaprida y sertindol ejercieron robustas, dependiente de la concentración y reversibles disminuciones en la velocidad de relajación e irregular batiendo en concentraciones que recapitulan los resultados en ensayos de canales hERG. En conclusión, este estudio establece hEHT como un simple modelo in vitro para la investigación del corazón.

Estrés Adrenérgico Revela Septal Hipertrofia Y Proteasoma Deficiencia En Heterozigóticos Orientada Mybpc3 Knock-in Ratones

Journal of Muscle Research and Cell Motility. Nov, 2011  |  Pubmed ID: 22076249

Cardiomiopatía hipertrófica (HCM) se caracteriza por hipertrofia septal asimétrica y a menudo es causada por mutaciones en el gen MYBPC3 codificación proteína miosina cardiaca C. En contraste con los seres humanos, que ya se ven afectados en el estado heterozigótico, modelos de ratón desarrollan el fenotipo principalmente en el estado homocigótico. Pruebas de trabajo de la cultura de célula indicaron que proteasoma alterada función contribuye a la patogénesis de HCM. Aquí probamos en dos modelos de ratón dirigidos Mybpc3 heterozigótico si estrés adrenérgico desenmascara una disfunción cardiaca específica del fenotipo y proteasoma. El primer modelo lleva una mutación humana de Mybpc3 (Het-KI), el segundo es un heterocigoto Mybpc3 knock-out (Het-KO). Ambos modelos se compararon a los ratones de tipo salvaje (WT). Ratones fueron tratados con una combinación de isoprenalina y fenilefrina (ISO/PE) o NaCl durante 1 semana. Mientras que la ISO/PE inducida por hipertrofia ventricular izquierda (HVI) con espesor de pared posterior aumento en una medida similar en todos los grupos, aumentó grueso septo solamente en Het-KI y Het-KO. ISO/PE no afectó la actividad de tipo quimotripsina proteasomal o nivel β5-subunidad de la proteína en Het-KO o ratones de tipo salvaje (WT). Por el contrario, ambos parámetros fueron marcadamente menores en Het-KI y negativamente correlacionado con el grado de HVI en Het-KI sólo. En conclusión, estrés adrenérgico reveló hipertrofia septal en ambos modelos de ratón heterozigótica de HCM, pero proteasoma disfunción sólo en ratones Het-KI, que llevan un alelo mutante y mímico de cerca HCM humana. Esto apoya la hipótesis que la debilitación de la proteasoma contribuye a la patofisiología de HCM.

Sistemas Proteolíticos Defectuosos En Ratones Mybpc3 Orientada Con Hipertrofia Cardiaca

Basic Research in Cardiology. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22189562

Varias líneas de evidencia sugieren que las alteraciones del sistema ubiquitina-proteasoma (UPS) y la vía de la autofagia-lisosoma (ALP) pueden estar involucrados en enfermedades cardíacas. Poco se sabe, sin embargo, en la miocardiopatía hipertrófica (HCM). Este estudio estudió estas vías en dos modelos de ratón de HCM que difieren principalmente por la presencia o ausencia de proteínas mutantes truncadas. Se realizaron análisis en homocigóticas orientada Mybpc3 knock-in (KI) ratones, portadoras de una mutación de HCM y exhibiendo bajos niveles de proteína de unión a miosina cardiaca mutante C (cMyBP-C) y en Mybpc3 orientada ratones knock-out (KO) no expresando cMyBP-C, sirviendo así como un modelo de insuficiencia de cMyBP-C puro. En el desarrollo postnatal temprano de la hipertrofia cardiaca, ambos modelos mostraron altos niveles de proteínas ubiquitinated y mayor proteasomal actividades. Para supervisar específicamente la capacidad de degradación de la UPS con la edad, los ratones fueron cruzados con ratones transgénicos que sobreexpresan Ub (G76V)-GFP. UB (G76V)-los niveles de la proteína GFP fueron cuatro veces mayores en 1-year-old KI, pero no KO ratones, sugiriendo una debilitación de UPS específica en los ratones que expresaban truncan cMyBP-C. Mientras que los niveles de la proteína de marcadores ALP claves fueron mayores, sugiriendo la activación de la ALP en ambos ratones mutantes, sus niveles de mRNA no difirió entre los grupos, subyace algo defectuosa degradación mediada por ALP. Análisis de proteínas clave regulado en la insuficiencia cardíaca no reveló alteraciones específicas en ratones KI y KO. Nuestros datos sugieren la activación (1) UPS en desarrollo postnatal temprano de la hipertrofia cardiaca, deterioro de UPS (2) específico en ratones del KI viejo que lleva una mutación de HCM y (3) defectuoso ALP como un mecanismo común en ratones transgénicos con hipertrofia cardiaca.