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Articles by Thomas Wucherpfennig in JoVE
JoVE Immunology and Infection
のカスタマイズアスペルギルスニジェールモルフォロジー
Institute of Biochemical Engineering, Technische Universität Braunschweig
正確に生成すると総合的に糸状菌の形態を特徴づけるための方法
Other articles by Thomas Wucherpfennig on PubMed
形態工学--浸透圧とコウジカビ ニジェール形態と生産性への影響。
コウジカビ ニジェール糸状菌幅広い食品から工業プロセスに製薬業界で広く使用されている株であります。この糸状の生物の最も陰謀的で、しばしば手に負えない特徴のひとつは、粘性の菌糸体培養条件に応じてからの密な球状ペレットに至るまでその複雑な形態です。最適な生産性は、特定の形態と強く相関関連づけ、このように高い作るプロセス制御に関する要求します。
アスペルギルスニジェールのバイオペレットによって改良された酵素の生産：チタン微粒子を用いて標的形態エンジニアリング
本研究では、液内培養における産業の作業馬アスペルギルスニジェール株のバイオペレットの形態のデザインについて説明します。新しいアプローチは、増殖培地にチタン微粒子の意図して添加（TiSiO（4）、8μm）を募集しています。としてフラクトフラノシダーゼ、グルコアミラーゼを生産する2つの組換え株を試験し、振とうフラスコ中のチタン強化培養による酵素力価は、150 U / mLの（フラクトフラノシダーゼの場合）および190から9.5倍にU / mLの（アミラーゼなど）に3.7倍増加したコントロールと比較して。これが正常に攪拌タンク反応器の改良酵素の生産に利用することができます。粒子によって刺激され、1080 U / mLの（フェドバッチ）、320 U / mLの（バッチ）の達成最後のグルコアミラーゼ活性は、従来の方法に比べて七倍高かった。強化された生産のための主な理由は、チタン酸バリウム粒子と真菌細胞の間に密接な関係だった。既に2.5を下回っg / Lのmicromaterialは、コアシェルのペレットが得中央に50から150μmの粒子の凝集体として埋め込まれた単一の粒子を含むペレットを、内側に発見されました。増加するチタン酸レベルでペレットサイズは300μmから1700μmの（コントロール）から減少した。 GFP発現の蛍光ベースの解像度は、コントロールの大きなペレットが200μmの表面層にのみアクティブになっていたことを明らかにした。一般的に真菌ペレットを観察し栄養と酸素の重要な侵入深さとマッチ。真菌ペレットを導出したチタン酸バリウム中のバイオマスは、しかし、完全にアクティブであった。これは小さなペレットを経由してバイオマス層だけでなく、コア·シェル構造体の薄型化によるものであった。また、また、作成した緩い内部ペレットの構造は、最大500μmの高い物質移動と侵入深さを可能にしました。コア·シェル型ペレットの作成が微粒子を添加することにより、以前に達成されていない、例えば、タルク又はアルミナで作られた。このため、本研究は、特に工業生産のための長い、強力な産業の関連性を持っているペレットベースのプロセスでは、糸状菌のオーダーメイド形態設計のための微粒子を使用するにはさらなる可能性を開きます。
