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Articles by Tiffany M Schmidt in JoVE
Une préparation isolée rétinienne pour enregistrer la réponse de Lumière génétiquement marqués cellules ganglionnaires rétiniennes
Tiffany M Schmidt, Paulo Kofuji
Department of Neuroscience, University of Minnesota
Cet article fournit une description de la manière de disséquer et d'enregistrer à partir de la préparation isolée de la rétine chez la souris. En particulier, nous décrivons comment enregistrer les réponses de lumière provenant d'une population de cellules ganglionnaires marqués par fluorescence et par la suite identifier et d'analyser sa morphologie.
Other articles by Tiffany M Schmidt on PubMed
Aperçus Nouveaux Dans Non-formation D'image Traitement Visuel Dans La Rétine
Cellscience. Jul, 2008 | Pubmed ID: 20577651
Un petit sous-ensemble de cellules ganglionnaires de la rétine se projetant vers le noyau suprachiasmatique et autres zones du cerveau, est impliqué dans la non-formation d'image à la lumière des réponses visuelles de l'environnement tels que le réflexe pupillaire à la lumière, des adaptations saisonnières dans la physiologie, l'inhibition de la libération photique nocturne de mélatonine, et la modulation du sommeil, la vigilance et l'activité. Ces cellules sont intrinsèquement photosensibles (ipRGCs) et d'exprimer une photopigment opsine-like appelé mélanopsine. Deux études récentes utilisant sélective ablation génétique de ipRGCs démontrer le rôle clé de ces cellules rétiniennes internes dans la transmission de signaux de luminance dans le cerveau en cas de non-formation d'image du traitement visuel. Ces résultats progresser notre compréhension de l'organisation fonctionnelle d'un nouveau système photosensory dans la rétine des mammifères, ce qui démontre des rôles bien définis pour ipRGCs dans circadien et d'autres fonctions homéostatiques liés à la luminosité ambiante.
Intrinsèques Et Extrinsèques Réponses Légères Sous Mélanopsine Exprimant Cellules Ganglionnaires Durant Le Développement De Souris
Journal of Neurophysiology. Jul, 2008 | Pubmed ID: 18480363
Mélanopsine (Opn4) est un photopigment trouve dans un sous-ensemble de cellules ganglionnaires de la rétine (CGR) de ce projet pour différentes zones du cerveau. Ces neurones sont intrinsèquement photosensibles (ipRGCs) et sont impliqués dans nonimage formant des réponses à la lumière de l'environnement tels que l'entraînement du réflexe pupillaire et circadienne de la lumière. Des données récentes indiquent que ipRGCs réagissent à la lumière à la naissance, mais des questions demeurent quant à savoir si et quand ils subissent d'importantes modifications fonctionnelles. Nous avons utilisé la transgenèse bactérienne chromosome artificiel de concevoir une lignée de souris dans lequel la protéine fluorescente verte améliorée (EGFP) est exprimée sous le contrôle du promoteur mélanopsine. Immunomarquage double pour EGFP et mélanopsine démontre leur colocalisation dans les cellules ganglionnaires de la rétine de souris mutantes. Des enregistrements électrophysiologiques de ipRGCs chez la souris nouveau-nés (jour postnatal 0 [P0] à P7) ont démontré que ces cellules ont répondu à la lumière avec la dépolarisation petite et lente. Cependant, à partir de P11, nous avons observé ipRGCs qui ont répondu à la lumière avec un début plus et plus vite (<1 s) et le décalage (<1 s) la dépolarisation. Ces rapides, les plus grandes dépolarisations ont été observées dans la plupart des ipRGCs par adulte précoce. Toutefois, sur demande d'un cocktail d'inhibiteurs synaptiques, nous avons constaté que toutes les cellules ont répondu à la lumière avec l'apparition lente (> 2,5 s) et le décalage (> 10 s) de dépolarisation, révélant la valeur intrinsèque, les réponses de lumière mélanopsine médiation. Le extrinsèque, cône / tige influence sur ipRGCs en corrélation avec leur stratification dendritique vaste dans la couche plexiforme interne. Collectivement, ces résultats démontrent que ipRGCs faire usage de la mélanopsine de la phototransduction avant l'ouverture des yeux et que ces cellules d'intégrer davantage les signaux provenant de la rétine externe comme la rétine mûrit.
Les Différences Fonctionnelles Et Morphologiques Entre Intrinsèquement Photosensibles Cellules Ganglionnaires Rétiniennes
The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Jan, 2009 | Pubmed ID: 19144848
Un sous-ensemble de cellules ganglionnaires de la rétine des mammifères exprimer la mélanopsine photopigment et sont intrinsèquement photosensibles (ipRGCs). Ces cellules sont impliquées dans la non-formation d'image à la lumière des réponses visuelles de l'environnement, tels que la lumière du réflexe pupillaire, des adaptations saisonnières dans la physiologie, l'inhibition de la libération photique nocturne de mélatonine, et la modulation de sommeil, la vigilance et l'activité. Les études morphologiques ont confirmé l'existence d'au moins trois sous-populations distinctes de ipRGCs, mais les études de la physiologie de ipRGCs au niveau de la cellule unique ont porté principalement sur les cellules M1, les dendrites qui stratifient uniquement dans sublamina un (OFF sublamina) de la rétine couche interne plexiforme (IPL). Peu de travaux ont été faite pour comparer les propriétés fonctionnelles des cellules M1 à celles des cellules M2, les dendrites qui stratifient uniquement dans sublamina B (sur sublamina) de l'IPL. L'objectif de l'étude était de comparer la morphologie, intrinsèque réponse à la lumière, et les propriétés membranaires intrinsèques des cellules M1 et M2 dans la rétine de la souris. Ici nous démontrons supplémentaires différences morphologiques entre les cellules M1 et M2 ainsi que les caractéristiques physiologiques distinctes à la fois des réponses intrinsèques de lumière et les propriétés membranaires intrinsèques. Cellules M2 affiché une arborisation dendritique plus complexe et plus grande résistance à l'entrée, encore montré une plus faible sensibilité à la lumière et la baisse des réponses lumineuses maximales que les cellules M1. Ces données indiquent une hétérogénéité morphologique et fonctionnelle entre ipRGCs.
Rôle Du Canal Potentiel De Récepteur Transitoire Liées à Melastatin TRPM1 Dans La Rétine : Indices Des Chevaux Et Des Souris
The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Sep, 2009 | Pubmed ID: 19776258
Influence Pathway Différentiel Cône Sur Intrinsèquement Photosensibles Rétiniennes Sous-types De Cellules Ganglionnaires
The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Dec, 2010 | Pubmed ID: 21123572
Un petit sous-ensemble des cellules ganglionnaires de la rétine des mammifères exprimer la mélanopsine photopigment et sont intrinsèquement photosensibles (ipRGCs). Ces cellules sont des conduits primaires à travers laquelle les informations photique est retransmis à la non-formation d'image centres visuels qui médient comportements tels que l'entraînement de lumière pupillaire réflexe et circadien. M1 et M2 cellules comprennent des sous-populations distinctes morphologiques de ipRGC, et possèdent la diversité physiologique dans leurs propriétés membranaires intrinsèques et intrinsèques réponses lumineuses. En outre, les données indiquent maintenant que tous les ipRGCs recevoir des informations photique à partir de tiges ou des cônes de signalisation par l'intermédiaire synaptiques. Il a récemment été rapporté que les cellules hors de stratification M1, paradoxalement, reçoivent d'entrée de la voie dans le sublamina Le Off de la couche plexiforme interne. Le but de la présente étude était d'examiner les conséquences fonctionnelles de la voie de signalisation des cellules cône M1 et M2. L'utilisation d'outils pharmacologiques et unicellulaires enregistrements de réponses synaptiques chez la souris de type sauvage et la mélanopsine-nulle, nous avons constaté que la voie Sur constitue le primaire d'entrée synaptique excitatrice à la fois les cellules M1 et M2. Cette entrée a été beaucoup plus influent dans l'élaboration des réponses à la lumière et les propriétés évoquées repos de la membrane de cellules que les cellules M1 M2. Ces résultats indiquent une dépendance différentielle surprenante sur cône médiation phototransduction par sous-populations ipRGC. Ces résultats suggèrent également que les sous-types ipRGC signaler diverses informations photique à diverses organisations non-formation d'image centres visuels.
Phototransduction Intrinsèque Persiste Dans Mélanopsine Exprimant Cellules Ganglionnaires Faute Diacylglycérol-sensibles Subunits TRPC
The European Journal of Neuroscience. Mar, 2011 | Pubmed ID: 21261756
Chez les mammifères, intrinsèquement photosensibles cellules ganglionnaires de la rétine (ipRGCs) médiation différents non-formation d'image réponses photiques, comme photoentrainment circadien, pupillaire réflexe suppression de la lumière et la mélatonine pinéale. ipRGCs directement répondre à la lumière de l'environnement par l'activation du mélanopsine photopigment suivie par l'ouverture d'un non identifiée sélective de cations canal. Les études dans les systèmes d'expression hétérologues et dans la rétine natif ont fortement impliqué diacylglycérol-sensibles récepteurs transitoire des canaux potentiels contenant TRPC3, TRPC6 et TRPC7 sous-unités dans la mélanopsine-évoqué la dépolarisation. Nous montrons ici que les réponses évoquées mélanopsine électriques persistent en grande partie dans ipRGCs enregistrés à partir postnatale précoce (P6-P8) et adultes (P22-P50) des souris dépourvues de l'expression des sous-unités TRPC3, TRPC6 ou TRPC7 fonctionnels. Multiélectrodes array (MEA) enregistrements effectués à P6-P8 étapes dans des conditions qui empêchent les influences de tige / cône photorécepteurs montrent comparables sensibilité à la lumière des réponses mélanopsine-évoqués dans ces lignées de souris mutantes en comparaison de type sauvage (WT) les souris. Patch-clamp de ipRGCs de souris adultes qui n'ont pas TRPC3 ou TRPC7 sous-unités montrent intrinsèques des réponses à la lumière évoqués équivalentes à celles enregistrées chez les souris WT. Persistance de la intrinsèques des réponses à la lumière évoqués a été également noté dans ipRGCs manquent TRPC6 sous-unités, même si avec des magnitudes beaucoup plus petites. Ces résultats démontrent que la dépolarisation mélanopsine-évoquée dans ipRGCs n'est pas médié par l'une des TRPC3, TRPC6 ou sous-unités de canaux TRPC7 seuls. Ils suggèrent également que la voie de signalisation comprend mélanopsine TRPC6 contenant canaux hétéromères dans les rétines matures.
Structure Et Fonction Des Bistratified Intrinsèquement Photosensibles Cellules Ganglionnaires Rétiniennes Chez La Souris
The Journal of Comparative Neurology. Jun, 2011 | Pubmed ID: 21452206
Une sous-population de cellules ganglionnaires de la rétine (CGR) exprime la mélanopsine photopigment, ce qui rend ces cellules intrinsèquement photosensibles (ipRGCs). Ces cellules sont essentielles pour l'entraînement circadien compétente, réflexe pupillaire à la lumière, et d'autres non-imaging-formant photiques réponses. La recherche a maintenant démontré la présence de sous-populations de plusieurs ipRGC basée sur la stratification dendritique dans la couche interne plexiforme (IPL), ceux monostratified dans le sublamina Off (M1), ceux monostratified dans le Sur sublamina (M2, 4,5), et ceux bistratified la fois dans la marche et l'arrêt sublaminae (M3). Malgré les preuves que les cellules M1 et M2 sont des sous-populations distinctes de ipRGC distinctes basées sur les propriétés morphologiques et physiologiques, l'inclusion des cellules M3 comme un sous-type distinct est restée controversée. Mis à part l'identification des cellules M3 comme une sous-population morphologique de ipRGC, à ce jour il n'ya eu aucune des descriptions fonctionnelles de la physiologie cellulaire M3 ou entrées synaptiques. Nos données fournissent la première description approfondie des propriétés des cellules M3 structurelles et fonctionnelles. Nous rapportons que les cellules M3 forment une population hétérogène morphologiquement, mais qui est physiologiquement homogène avec des propriétés similaires à celles des cellules M2.
Cellules Ganglionnaires Rétiniennes Intrinsèquement Photosensible : Nombreux Sous-types, Diverses Fonctions
Trends in Neurosciences. Nov, 2011 | Pubmed ID: 21816493
Pendant des décennies, bâtonnets et les cônes étaient censés être les seuls photorécepteurs de la rétine chez les mammifères. Toutefois, une population de cellules atypiques ganglionnaires rétiniennes photoréceptrices (CGR) exprime la melanopsin photopigment et est intrinsèquement photosensibles (ipRGCs). Ces ipRGCs sont cruciales pour relayer l'information lumineuse de la rétine au cerveau pour contrôler le rythme circadien photoentrainment, réflexe pupillaire de lumière et le sommeil. ipRGCs ont été initialement décrites comme une population homogène uniquement impliquée dans la signalisation irradiance pour fonctions forme non graphiques. Des travaux récents, cependant, a découvert que les ipRGCs sont inopinément diversifiés aux niveaux moléculaires, cellulaires et fonctionnels et pourrait même être impliqués dans la formation de l'image. Cette revue résume notre compréhension actuelle de la diversité des ipRGCs et leurs divers rôles dans la modulation de comportement.
Des Cellules Ganglionnaires Rétiniennes Intrinsèquement Photosensibles Positives Melanopsin : De Forme à La Fonction
The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Nov, 2011 | Pubmed ID: 22072661
Melanopsin confère une photosensibilité intrinsèque à une sous-classe des cellules ganglionnaires rétiniennes (ipRGCs). Généralement considérés comme des détecteurs de rayonnement, ipRGCs cible de nombreuses régions du cerveau impliquées dans la vision non-formation d'images. ipRGCs intégrer leurs informations lumière intrinsèques, melanopsin-mediated avec tige/cône signaux transmis par l'intermédiaire de connexions synaptiques à influencer les comportements dépendant de la lumière. Premières observations indiquent la diversité parmi ces cellules, et récemment plusieurs sous-types spécifiques ont été identifiés. Ces sous-types diffèrent par la forme morphologique et physiologique, contrôlant les fonctions distinctes qui vont du rythme biologique, via photoentrainment circadienne, à protection réponses comportementales, y compris la constriction de la pupille et éviter la lumière et vision même formation d'images. Dans cette revue Mini-Symposium, nous allons discuter de certaines découvertes récentes qui mettent en valeur la diversité sous forme et fonction de ces récemment découvert des photorécepteurs atypiques.
