Translate this page to:
Japanese
In JoVE (1)
Other Publications (3)
Automatic Translation
This translation into Japanese was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Travis D. Baughan in JoVE
JoVE Neuroscience
小脳性運動失調のマウスモデルを評価するための単純な複合表現型のスコアリングシステム
1Department of Biochemistry, University of Washington, 2Department of Neurology, University of Washington, 3Division of Genetics, Departments of Pediatrics and Cellular and Molecular Medicine, and the Institute for Genomic Medicine, University of California, San Diego - Rady Children’s Hospital
私たちは、小脳性運動失調症のマウスモデルにおける疾患の重症度の迅速かつ高感度定量のためのプロトコルについて説明します。対策は、後肢抱茎の、レッジの試験、歩行や脊柱後などがあります。このプロトコルは、効果的に影響を受けたと非罹患個体を区別し、時間の経過に影響を受ける個人の進行を検出する。
Other articles by Travis D. Baughan on PubMed
ひと好中球フラボチト クロム B558 の機能性エピトープ。
mAb NL7 精製フラボチト クロム b(558)、ホストの防衛や炎症の重要に対して提起されました。NL7 gp91(phox) フラボチト クロム b(558) サブユニット イムノブロットによって認識し、グリセリンの好中球および好中球膜へのバインドします。バクテリオファージ表示解析によるエピトープ マッピング NL7 （gp91(phox) の 498)EKDVITGLK(506) の領域。 結合すること示されて無料のセル アッセイ、NL7 NADPH オキシダーゼの in vitro 活性化は濃度依存的に阻害し、酸化酵素の基板ミカエリス定数 (K(m))。 限界効果があったmAb NL7 p47(phox)、p67(phox)、または Rac の転流プラズマ膜を阻害していないそのエピトープ gp91(phox) 転座の細胞質の要因とは無関係にバインド。ただし、アセンブリ NADPH オキシダーゼ複合体の後 mAb NL7 エピトープをバインドがスーパーオキシド生成を阻害しなかった。三次元の gp91(phox) コーン硝酸レダクターゼ テンプレート上の C 末端ドメインのモデリング NL7 エピトープに近い提案 p47(phox) 結合部位から大幅な分離が、提案の NADPH 結合部位を示唆しています。我々 は結論、（498)EKDVITGLK(506) セグメント gp91(phox) のゾル性細胞質の表面に存在してオキシダーゼ関数、しかしない基板または細胞内のコンポーネントのバインドの重要な領域を表します。
SMN2転写産物のトランススプライシングを強化し、単一のベクターシステムの開発
RNAのモダリティは、再直接病原性のpre-mRNAのスプライシングのイベントへの強力な手段として開発されています。彼らは臨床応用に向かって移動すると、in vivoでのこれらの分子の効率を改善することが重要です。脊髄性筋萎縮症（SMA）はSMN1の損失によって引き起こされます。 SMN2と呼ばれるほぼ同一のコピー遺伝子が選択的スプライシングに起因する機能性タンパク質の低レベルを生成します。我々は以前にトランススプライシングRNA（tsRNA）がリダイレクトSMN2スプライシングを報告した。今我々は内因性のスプライス部位間の競争を軽減することがトランススプライシングの効率を高めたことを示している。単一のベクター系は、アンチセンス（ASO-tsRNA）をブロックSMN tsRNAとスプライス部位を表明し開発されました。 ASO-tsRNAベクトルが大幅にSMAマウスの中枢神経系内では、プライマリSMA患者の線維芽細胞におけるSMNのレベルを上昇し、in vitro snRNPアセンブリにSMN依存増加した。これらの結果は、ASO-tsRNA戦略はトランススプライシング機構と大幅にin vivoでのトランススプライシング活性を高めるための手段への洞察を提供することを示しています。
脊髄性筋萎縮症の動物モデルにおけるSMNのレベルを上げるターゲットイントロンプレッサーと二官能性RNAの配信
脊髄性筋萎縮症（SMA）は、生存運動ニューロン-1（SMN1）の損失によって引き起こされる運動ニューロン疾患である。ほぼ同一のコピー遺伝子、SMN2は、機能性タンパク質の低レベルを生成するすべてのSMA患者に存在しています。 SMN2コード配列は、通常、フルレングスSMNを生成する可能性がありますが、SMN2由来の転写産物の約90％は選択的スプライシング、最終的なコーディングエクソン（エクソン7）を欠いている短縮タンパク質をエンコードします。 SMN2しかし、優れた治療標的である。以前に、私たちはSMNエクソン7と変調SMN2スプライシングをバインドしている二官能性低分子RNAを開発しました。二官能性RNAの効率を最適化するには、別のアンチセンス標的が必要でした。この目的のために、我々は遺伝的にその目標は、このシーケンスを推定イントロンのリプレッサーと開発官能性RNAのアイデンティティを検証した。イントロンリプレッサーと二官能性RNAのSR募集配列を介してSR蛋白質の動員の抑制：その結果、SMN誘導の2倍のメカニズムがあります。二官能性RNAは効果的にヒト初代SMA繊維芽細胞ではSMNの増加となりました。リード候補が2'-O-メチルRNAとして合成された、直接SMAマウスの中枢神経系に注入された。シングルRNA注射は、脳内および新生児のSMAマウスの脊柱全体SMNタンパク質の不法な堅牢な誘導することができました。 SMAの重症モデルでは、寿命が二官能性低分子RNAの配信後に延長された意味します。この技術は、SMAの治療の開発のための直接的な意味を持つだけでなく、異常なpre-mRNAのスプライシングに起因する疾患の多くに適しています。
