Die Phosphorylierung Von Säugetieren Eukaryotischen Translations-Initiations-Faktor 6 Und Die Saccharomyces Cerevisiae Homolog Tif6p: Beweise, Dass Die Phosphorylierung Von Tif6p Seine Nukleozytoplasmatischen Verteilung Reguliert Und Ist Für Die Hefe Das Zellwachstum Benötigt

Molecular and Cellular Biology. Sep, 2003  |  Pubmed ID: 12917340

Das Beihilfen Antikörper Diversifizierung Enzym Wird Durch Protein Kinase A Phosphorylierung Reguliert

Nature. Nov, 2005  |  Pubmed ID: 16251902

Antikörper, die von B-Linie Zellen produziert werden, bestehen aus Immunglobulin schwere (IgH) und leichte (IgL) Ketten, die amino-Terminal Variablen und Konstanten Regionen Carboxy-Terminal haben. In Reaktion auf Antigene werden B-Zellen zwei Arten von genomischen Veränderungen, Antikörper-Vielfalt zu erhöhen. Affinität für Antigen kann durch Einführung von Punktmutationen in Nabenschaltungen und IgL Variable Regionen durch somatische Hypermutation erhöht werden. Darüber hinaus können Antikörper-Effektor-Funktionen geändert werden, durch Ändern der exprimierten IgH constant Region Exons durch IgH Klasse Switch Rekombination (CSR). Somatische Hypermutation und die CSR erfordern das B-Zelle-spezifische Aktivierung induziert Cytidin Desaminase Protein (Hilfe), die diese Reaktionen durch seine einzelsträngige (ss) DNA-spezifischen startet Cytidin-Desaminase-Aktivität. Bei biochemischen Assays Replikation Protein A (RPA), eine SsDNA-verbindliches Protein, ordnet phosphorylierten Beihilfen von aktivierten B-Zellen und verbessert die Hilfe Aktivität auf transkribierte doppelsträngige (ds), die DNA, die somatische Hypermutation oder CSR deiner Sequenzen. Diese Hilfe-RPA-Verband, der Phosphorylierung erfordert, kann einen Mechanismus zum Zugang DsDNA Ziele in aktivierten B-Zellen Hilfe dürfend vorsehen. Hier zeigen wir, dass Hilfe von B-Zellen auf einem Konsens Protein Kinase A (PKA) Standort phosphoryliert wird und PKA der physiologischen Hilfe-Kinase ist. Hilfe von nicht-lymphoide Zellen kann so funktionell phosphoryliert werden, durch rekombinante PKA Interaktion mit RPA zu ermöglichen und fördern Deamination transkribierte DsDNA-Substrate. Darüber hinaus Mutation der großen PKA Phosphorylierung Website Hilfe behält SsDNA Deamination Aktivität, aber deutlich reduziert RPA-abhängige DsDNA Deamination Aktivität und stark beeinträchtigt die Fähigkeit der Beihilfen, CSR in-vivo-Effekt. Wir schließen, dass die PKA hat eine entscheidende Rolle in POSTTRANSLATIONELLE Verordnung Beihilfen Aktivität in B-Zellen.

Hilfe Bei Der Somatische Hypermutation Und Klasse Switch Rekombination

Current Opinion in Immunology. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16464563

Somatische Hypermutation und Klasse-Switch-Rekombination werden von der Deamination des Deoxycytosine in der DNA durch Aktivierung-induzierte-Desaminase, Beihilfen eingeleitet. Vor kurzem gab es viel Forschung in wie Beihilfen Ziele DNA in Teilregionen der Ig-Gene, die Beteiligung von Co-Faktoren und posttranslationale Modifikationen in diesem Prozess doppelsträngige, die Kooptation von DNA 'Reparieren' Mechanismen und Beihilfen Evolution.

Verordnung Der Aktivierung Induzierten Desaminase über Phosphorylierung

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2007  |  Pubmed ID: 17338181

Immunglobulin-gen-Diversifizierung durch somatische Hypermutation (SHM), Class Switch Rekombination (CSR) und gen Konvertierung ist abhängig von Aktivierung induziert Cytidin-Deaminase (AID). Sie ist daher eine einzelsträngige DNA-spezifische Cytidin-Desaminase, der vor allem in aktivierten Reifen B-Lymphozyten ausgedrückt wird. Hilfe scheint DNA Cytidin Deamination Immunglobulin-Heavy (IgH) zu katalysieren und leichte Kette (IgL) Variable Region (V) Exons und Nabenschaltungen wechseln (S) Region Sequenzen bzw. IgH und IgL somatische Hypermutation (SHM) und Nabenschaltungen Klasse Switch Rekombination (CSR) zu initiieren. Hier besprechen wir die Auswirkungen der jüngsten Studien, die die Rolle der Beihilfe Phosphorylierung in eine Verstärkung der Hilfen Aktivität in Bezug auf diese beiden Prozesse zu veranschaulichen.

Entwicklung Der Immunglobulin-schwere Kette-Klasse Wechseln Rekombination Mechanismus

Advances in Immunology. 2007  |  Pubmed ID: 17560275

Um eine optimale Immunantwort zu mounten, können Reife B-Lymphozyten Klasse exprimierten Antikörper vom IgM, IgG, IgA, oder IgE durch einen Prozess der Rekombination/Löschung genannt Immunglobulin schwere Kette (IgH) Klasse Switch Rekombination (CSR). CSR erfordert Aktivierung induziert Cytidin-Deaminase (AID), nachweislich, einzeln-angeschwemmte DNA als in-vitro-Substrat zu beschäftigen. IgH CSR erfolgt innerhalb und erfordert große, repetitive Sequenzen, genannt S-Regionen, die Teile der Keim Transkription Linieneinheiten (genannt "C(H) Gene") sind, die Promotoren, S Regionen und einzelne Nabenschaltungen constant Region Exons bestehen. CSR erfordert und unter der Regie von Keim Linie Transkription von teilnehmenden C(H)-Genen vor der CSR. Hilfe Deamination von Cytidines in S Regionen scheint zu S/Pausen-Doppelstrang (DSBs) erforderlich, um CSR initiieren führen. Zwei gebrochene S Regionen CSR abgeschlossen beitreten, nutzt die Aktivitäten der allgemeine DSB DNA-Reparaturmechanismen. In diesem Kapitel besprochen, dass unser aktuellen Wissen über die Funktion des S-Regionen, Keim Linie Transkription, Beihilfen und DNA-Reparatur in CSR. Wir stellen ein Modell für CSR in der Transkription durch S Regionen DNA Substrate bietet auf die Beihilfe DSB-induzierende Läsionen generieren kann. Wir diskutieren auch, wie die Phosphorylierung der Hilfe Interaktionen mit Cofaktoren vermitteln kann, die Erleichterung des Zugangs zu transkribierte S Regionen während der CSR und transkribierte Variable Regionen während des zugehörigen Prozesses der somatische Hypermutation (SHM). Schließlich diskutieren wir weiter im Rahmen dieses CSR-Modells, aktuelle Befunde, die darauf, dass die Synapsis und Beitritt S Region DSBs während CSR entwickelt haben hindeuten, um allgemeine Mechanismen zu nutzen, dass Funktion weithin beitreten chromosomalen DSBs getrennt.

Der Saccharomyces Cerevisiae 60 S Ribosom Biogenese Faktor Tif6p Wird Durch Hrr25p-vermittelte Phosphorylierung Reguliert

The Journal of Biological Chemistry. Apr, 2008  |  Pubmed ID: 18256024

Die Biosynthese von 60 S ribosomal Untereinheiten in Saccharomyces Cerevisiae erfordert Tif6p, die Hefe-Homolog von Säugetier-eIF6. Dieses Protein ist notwendig für die Bildung von 60 S ribosomal Untereinheiten, weil es für die Verarbeitung von 35 S Pre-rRNA zum Reifen 25 S und 5,8 S rRNAs notwendig ist. In der vorliegenden Arbeit mit Molekulare genetische und biochemische Analysen, wir zeigen, dass Hrr25p, eine Isoform der Hefe-Kasein-Kinase phosphorylates ich, Tif6p in vitro und in vivo. Tryptic Phosphopeptide Zuordnung von in-vitro-phosphoryliert Tif6p von Hrr25p und (32) P-markierten Tif6p isoliert von Hefezellen, gefolgt von massenspektrometrischen Analyse ergab, dass die Phosphorylierung auf ein einzelnes tryptic Peptid in Ser-174 aufgetreten ist. Saccharose gradient Fraktionierung und Coimmunoprecipitation Experimente zeigen, dass ein kleiner, aber bedeutender Teil der Hrr25p 66 S preribosomal Partikel gebunden ist, die gebundenen Tif6p ebenfalls enthalten. Erschöpfung der Hrr25p aus eine bedingte Hefe-Mutante, die nicht Tif6p phosphoryliert konnte Pre-rRNAs effizient verarbeiten was zu erheblichen Verringerung der Bildung von 25 S rRNA. Diese Ergebnisse zusammen mit unserer früheren Beobachtungen phosphorylatable Ser-174 für Hefe-Zellen-Wachstum und Rentabilität benötigt wird vorschlagen, dass Hrr25p-vermittelte Phosphorylierung von Tif6p spielt eine wichtige Rolle in der Biogenese von 60 S ribosomale Untereinheiten in Hefezellen.

Entwicklung Der Phosphorylierung-abhängige Regelung Der Aktivierung Induziert Cytidin-Deaminase

Molecular Cell. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18951095

Zusammenspiel der Aktivierung induziert Cytidin-Deaminase (AID) mit Replikation Protein A (RPA) ist vorgeschlagen worden, um Hilfe Zugang zu transkribierte Doppelstrang-DNA (ds), Immunglobulin-Leichtketten und schwere Kette Klasse Switch Rekombination (CSR) zu fördern. Maus-Hilfe (Magd) Interaktion mit RPA und in-vitro-Transkription-abhängige DsDNA Deamination erfordert Protein Kinase A (PKA) Phosphorylierung an Serin 38 (S38), und normale Magd CSR-Aktivitäten hängt S38. Zebrabärbling Beihilfen (zAID) katalysiert jedoch robuste CSR in Maus-Zellen trotz fehlender eine S38-Äquivalent PKA-Website. Hier zeigen wir bietet das Aspartat 44 (D44) in zAID ähnliche Funktionalität für in-vitro und in vivo als Magd S38 Phosphorylierung. Darüber hinaus Einschleppung einer PKA-Website eine zAID D44 Mutante machte es PKA von für die in-vitro-Aktivitäten und restauriert normale CSR-Aktivitäten. Auf der Grundlage dieser Ergebnisse erzielten wir Magd-Mutanten, die unabhängig von S38 Phosphorylierung ähnlich funktionieren. Vergleich von Knochenfischen und Amphibien und Säugetieren AIDs deutet auf evolutionäre Abweichung vom konstitutive PKA-regulierten RPA/Hilfe-Interaktion.

POSTTRANSLATIONELLE Regulierung Der Aktivierung Induziert Cytidin-Deaminase

Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences. Mar, 2009  |  Pubmed ID: 19010772

Die montierten Immunglobulin-Gene in die B-Zellen von Mäusen und Menschen werden durch unterschiedliche Prozesse bekannt als Klasse Switch Rekombination (CSR) und somatische Hypermutation, zur Diversifizierung der Antikörper-Repertoire verändert. Diese beiden DNA-Modifikation-Prozesse werden von B-Zell-spezifische Protein Faktor induziert durch Aktivierung Cytidin Deaminase (AID) initiiert. Hilfe wird post-translationally durch Phosphorylierung an mehreren Standorten geändert, obwohl funktionelle Bedeutung während der CSR war, nur für die Phosphorylierung an Serin-38 (S38 verwickelt hat). Obwohl mehrere Labors gezeigt haben, dass die Hilfe-Funktion über Phosphorylierung an S38 geregelt ist, ist die genaue biologische Rolle der S38 Phosphorylierung ein Thema der Debatte gewesen. Hier diskutieren wir unsere Interpretation der Bedeutung der Beihilferegelung über Phosphorylierung und auch zu diskutieren, wie diese Form der Beihilferegelung in höheren Organismen entwickelt haben.

Integrität Des Standortes Serin-38 Phosphorylierung Hilfe Ist Wichtig Für Klasse Switch Rekombination Und Somatische Hypermutation in Den Mäusen

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Feb, 2009  |  Pubmed ID: 19196992

Aktivierung induziert Cytidin-Deaminase (AID) ist eine einzelsträngige (ss) DNA-spezifischen Cytidin-Deaminase, die Ig schwere Kette (IgH) Klasse Switch Rekombination (CSR) und Ig somatische Hypermutation (SHM) von deaminating Cytidines in, bzw. initiiert, IgH-Schalter (S) Regionen und Ig Variable Region (V) Exon. Beihilfen, die auf Serin Rückstand 38 phosphoryliert wird, interagiert mit Replikation Protein A (RPA), eine SsDNA verbindliches Protein, Deamination transkribierte doppelsträngige DNA in vitro zu fördern, die zusammen mit anderen Beweis vorschlägt, dass Hilfe ebenso transkribierten Regionen in S und V Exons in-vivo zugreifen kann. Jedoch hat die physiologische Rolle von Beihilfen Phosphorylierung an Serin-Rückstand 38 (S38) und sogar die Forderung nach der S38-Rückstand in Bezug auf CSR oder SHM diskutiert worden. Um dieses Problem zu beheben, haben wir Gene targeting um eine endogene Maus Hilfe Locus zu generieren, die Beihilfen produziert in dem S38 durch Alanin (AID(S38A)), eine mutierte Form der Hilfe, die ähnliche katalytische Aktivität auf SsDNA als WT-Hilfe (AID(WT)). behält ersetzt B-Zellen, die homozygot für die Mutation AID(S38A) zeigen erheblich beeinträchtigt CSR und SHM, Korrelation mit Unfähigkeit der AID(S38A) Interaktion mit endogenen RPA. Darüber hinaus haben Mäuse-Haploinsufficient für AID(S38A) noch stark beeinträchtigte CSR CSR-Ebenen, die auf fast Hintergrundwerte reduziert mit Mäuse-Haploinsufficient für AID(WT), gegenüber. Diese Ergebnisse zeigen eindeutig, dass die Integrität der Site Hilfe S38 Phosphorylierung ist erforderlich für normale CSR und SHM bei Mäusen und befürworte eine Rolle für Beihilfen Phosphorylierung an S38 und RPA Interaktion bei der Regulierung von CSR und SHM.

Regelung Der Aktivierung Induziert Cytidin Desaminase DNA Deamination Tätigkeit in B-Zellen Durch Ser38 Phosphorylierung

Biochemical Society Transactions. Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19442251

Mensch und Maus-Ig-Gene sind diversifiziert in Reifen B-Zellen durch unterschiedliche Prozesse bekannt als Ig schwere Kette CSR (Klasse Switch Rekombination) und Ig Variable-Region Exon SHM (somatische Hypermutation). Diese DNA-Modifikation-Prozesse werden durch Beihilfen (induziert durch Aktivierung Cytidin-Deaminase), ein DNA-Cytidin-Deaminase überwiegend ausgedrückt in aktivierten B-Zellen eingeleitet. Hilfe ist post-transcriptionally über mehrere Mechanismen, einschließlich MicroRNA-Verordnung, Nucleocytoplasmic pendelt, Ubiquitination und Phosphorylierung reguliert. Unter dieser regulatorischen Prozesse wurde Hilfe Phosphorylierung an Ser(38) ein Schwerpunkt der besonders intensiven Studiums und des Diskurses. In dem vorliegenden Papier diskutieren wir aktuelle biochemische und Maus genetische Studien, die anfangen, die funktionelle Bedeutung der Beihilfe Ser(38) Phosphorylierung im Zusammenhang mit der Entwicklung dieses Verkehrsträgers Beihilfenregelung und die möglichen Rollen, die es bei aktivierten B-Zellen, während eine normale Immunantwort spielen kann zu erhellen.

Die RNA-Exosome Zielt Auf Die Hilfe-Cytidin-Desaminase Auf Beide Stränge Der Transkribierten Duplex DNA-Substrate

Cell. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21255825

Aktivierung induziert Cytidin-Deaminase (AID) initiiert Immunglobuline (Ig) schwere-Kette (IgH) Klasse Switch Rekombination (CSR) und Ig Variable Region somatische Hypermutation (SHM) in B-Lymphozyten, indem deaminating Cytidines auf Vorlage und nicht auf Vorlagen basierende Stränge transkribierte DNA-Substrate. Der Mechanismus der Hilfe Zugang zu der Vorlage-DNA-Strang, wurde insbesondere dann, wenn auf eine entstehende RNA-Transkript hybridisiert ein Rätsel jedoch. Wir jetzt implizieren die RNA Exosome, komplexe zelluläre RNA-Verarbeitung/Abbau, ins Visier nehmen Hilfe an beiden DNA-Stränge. In B-Linie-Zellen aktiviert für CSR verknüpft mit Hilfe der RNA-Exosome, sammelt IgH Switch Regionen in einer Weise Hilfe abhängig, und für optimale CSR ist erforderlich. Darüber hinaus vermitteln die komplexen zellulären RNA-Exosome und ein rekombinantes RNA Exosome Kernkomplex robuste Beihilfen - und Transkription-abhängigen DNA Deamination von beide Stränge der transkribierten SHM-Substrate, die in-vitro. Unsere Ergebnisse zeigen eine Rolle für nichtkodierende RNA-Überwachung-Maschinen bei der Erzeugung von Antikörper-Vielfalt.

Der Transkriptionsfaktor BATF Steuert Die Globalen Regulatoren Der Klasse-Switch Rekombination in B-Zellen Und T-Zellen

Nature Immunology. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21572431

Der Transkriptionsfaktor BATF steuert die Differenzierung der Interleukin 17 (IL-17)-Herstellung von T-Helferzellen (T (H) 17-Zellen) durch Regulierung der Expression des Transkriptionsfaktors RORγt Ziel selbst und RORγt Gene wie Il17. Hier berichten wir den Mechanismus durch welche, den, den, den BATF Steuerelemente in-vivo-Klasse-Rekombination (CSR) Switch. BATF direkt kontrolliert Ausdruck der Transkription Faktoren im T-Zellen Bcl-6 und c-Maf, die für die Entwicklung des follikulären Helfer T Zellen (T(FH)) erforderlich sind. Wiederherstellung T(FH) Zellaktivität zu in-vivo-Batf(-/-) T-Zellen benötigt Coexpression von Bcl-6 und c-Maf. In B-Zellen kontrolliert BATF direkt den Ausdruck sowohl Aktivierung induziert Cytidin-Deaminase (AID) und von Keimbahn Mitschriften der eingreifenden Heavy-Kette-Region und ständige schwere Kette Region (I(H)-C(H)). So BATF Funktionen bei mehreren Hierarchieebenen in zwei Zelltypen, Global geschaltete Antikörperantworten in-vivo zu regulieren.