Translate this page to:
Italian
In JoVE (1)
Other Publications (6)
Automatic Translation
This translation into Italian was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Vaibhav B. Shah in JoVE
JoVE Immunology and Infection
In uncoating vitro di HIV-1 Cores
Department of Pathology, Microbiology and Immunology, Vanderbilt University School of Medicine
Uncoating è un passo essenziale nella fase iniziale del ciclo di vita di HIV-1 ed è definito come lo smontaggio del guscio capside e il rilascio del complesso ribonucleoproteina virale (vRNP). In questo studio dimostriamo tecniche per isolare nuclei intatti da HIV-1 virioni e per quantificare la loro uncoating
Other articles by Vaibhav B. Shah on PubMed
Beta-glucano Attiva Microglia Senza Indurre La Produzione Di Citochine in Modo Dectin-1-dipendente
Le microglia sono le cellule fagocitiche mononucleate residente che sono critiche per risposte innate e adattive all'interno del SNC. Come altre cellule del sistema immunitario, le microglia riconoscono e sono attivati da vari modelli molecolari associati al patogeno. beta-glucani sono pathogen-associated molecular patterns presenti all'interno delle mura delle cellule fungine che sono conosciuti per innescare le risposte protettive in un numero di cellule del sistema immunitario. Nel tentativo di comprendere meglio le risposte microgliali beta-glucani e i percorsi di risposta sottostante, abbiamo cercato di determinare se Dectin-1, un importante beta-glucano recettore recentemente identificato nei leucociti, svolge un ruolo simile in attivazione indotta da beta-glucano in microglia. In questo studio, abbiamo una relazione che Dectin-1 è infatti espressa sulla superficie della microglia primaria murina, e impegno del recettore con particelle beta-glucano ha provocato un aumento della fosforilazione della tirosina della chinasi della tirosina della milza, una caratteristica caratteristica della via di segnalazione di Dectin-1. Inoltre, la fagocitosi delle particelle beta-glucano e successiva produzione intracellulare di specie reattive dell'ossigeno sono stati anche mediata da Dectin-1. Tuttavia, a differenza di in macrofagi e cellule dendritiche, microgliali beta-glucano-mediata attivazione non ha risultato notevole produzione di citochine o chemochine; così, l'interazione della microglia Dectin-1 con glucano provoca una risposta univoca. I nostri risultati suggeriscono che il pathway Dectin-1 può svolgere un ruolo importante nell'immunità antifungina nel SNC.
Vav1 E PI3K Sono Richiesti Per La Fagocitosi Del Beta-glucano E Superossido Successiva Generazione Di Microglia
Le microglia sono le cellule immunitarie innate residente che sono fondamentali per la risposta immunitaria innata e adattiva all'interno del SNC. Riconoscono e sono attivati da pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) presenti sulla superficie dei patogeni. beta-glucani, la PAMP principali presenti all'interno di pareti della cellula fungine, sono riconosciuti da Dectin-1, che media numerosi eventi intracellulari richiamati dai beta-glucani in diverse cellule immunitarie. In precedenza, vi abbiamo mostrato che Dectin-1 Media fagocitosi del beta-glucano e la produzione di superossido successive in microglia. Qui, segnaliamo che il fattore di scambio di nucleotide della guanina Vav1 come pure fosfoinositide-3 chinasi (PI3K) sono mediatori a valle di quello che è ormai riconosciuto come la via di segnalazione Dectin-1. Sia Vav1 e PI3K sono attivati dopo stimolazione della microglia con beta-glucani, e le due proteine sono necessarie per la fagocitosi delle particelle glucano e per la produzione di superossido successive. Mostriamo anche che Vav1 funzioni a Monte di PI3K è richiesta per l'attivazione di PI3K. Insieme, i nostri risultati forniscono un importante spaccato gli aspetti meccanicistici di attivazione della microglia in risposta ai beta-glucani.
Beta-glucano Attenua La Produzione Di Cytokine TLR2 E TLR4 Mediate Da Microglia
Microglia, le cellule immunitarie residente del cervello, vengono attivati in risposta a qualsiasi tipo di lesione CNS, e la loro attivazione è fondamentale per mantenere l'omeostasi all'interno del SNC. Tuttavia, nel corso di patologie infiammatorie, sostenuta risultati attivazione microglia in danni ai circostanti cellule neuronali. beta-glucani sono ampiamente riconosciuti gli immunomodulatori, ma i meccanismi molecolari sottostanti le loro azioni immunomodulatorie non sono state completamente esplorati. Abbiamo segnalato in precedenza che beta-glucani attivano le microglia attraverso Dectin-1 senza indurre significative quantità di citochine e chemochine. Qui, ci mostra che particelle beta-glucani attenuano la produzione di citochine in risposta alla stimolazione dei TLR; Questa attività inibitoria di beta-glucano è mediata da Dectin-1 e non richiede l'interiorizzazione delle particelle. A livello molecolare, beta-glucano soppresso l'attivazione TLR-mediata NF-kappaB, che può essere responsabile per la diminuita capacità di microglia per la produzione di citochine in risposta alla stimolazione dei TLR. Nel complesso, questi risultati suggeriscono che beta-glucani possono essere utilizzati per prevenire o trattare l'attivazione della microglia eccessivo durante condizioni infiammatorie croniche.
HIV Entry Nucleare: Chiarimenti
HIV-1 e altri lentiviruses ha l'insolita capacità di infettare le cellule nondividing, ma il meccanismo che attraversano una membrana nucleare intatta è misterioso. Lavori recenti, tra cui un nuovo studio (Lee, K.; Ambrogio, Z.; Martin, T.D.; Oztop, I.; Mulky, A.; Julias, J.G.; Vandergraaff, N.; Baumann, J.G.; Wang, R.; Yuen, W. et al. Flexible uso di importazione nucleare percorsi da HIV-1. Cellula ospite Microbe2010, 7, 221-233) conferma che le proteine del capside virale gioca un ruolo chiave nel nucleare entrata HIV-1 sia in cellule divisorie e nondividing. L'identificazione di mutazioni che alterano la dipendenza del virus su host cell nucleoporins le proteine del capside virale rappresenta un importante progresso in questa fase del ciclo di vita del virus mal capita.
Inibizione Della Piccolo-molecola Dell'infezione Da Virus Dell'immunodeficienza Umana Tipo 1 Di Destabilizzazione Di Capside Del Virus
Virus dell'immunodeficienza umana di tipo 1 (HIV-1) infezione dipende il corretto smontaggio del capside virale, o "uncoating," nelle cellule bersaglio. Il capside di HIV-1 è costituito da un complesso multimerica conico della proteina del capside virale (CA) disposto in un reticolo esagonale. Mutazioni in CA che destabilizzano il risultato del capside virale in alterato infezione a causa di difetti nella trascrizione d'inversione nelle cellule bersaglio. Descriviamo qui il meccanismo di azione di un inibitore di piccola molecola HIV-1, PF-3450074 (PF74), quali obiettivi CA. PF74 agisce in una fase precoce dell'infezione da HIV-1 e inibisce la trascrizione d'inversione nelle cellule bersaglio. Mostriamo che PF74 si lega specificamente alle particelle di HIV-1 e le sostituzioni in CA che conferiscono resistenza alla mescola impediscono l'associazione. Una singola mutazione puntiforme in CA che stabilizza il nucleo di HIV-1 conferito anche forte resistenza al virus senza inibizione associazione composto. Trattamento di particelle di HIV-1 o nuclei purificati con PF74 destabilizzato le proteine del capside virale in vitro. Inoltre, il composto indotta la rapida dissoluzione del capside di HIV-1 nelle cellule bersaglio. PF74 attività antivirale è stato promosso dall'associazione dell'host proteina cyclophilin A per il capside di HIV-1 e PF74 e ciclosporina esposto antagonismo reciproco. I nostri dati suggeriscono che la PF74 attiva precoce dell'HIV-1 virale nelle cellule bersaglio, quindi imitando l'attività del fattore di restrizione retrovirus TRIM5α. Questo studio evidenzia virale come un passaggio nel ciclo di vita dell'HIV-1 che è suscettibile di piccola molecola intervento.
Rhesus TRIM5α Sconvolge Il Capside Di HIV-1 Presso L'inter-hexamer Interfacce
TRIM proteine giocano un ruolo importante nella difesa immunitaria innata contro l'infezione retrovirale, tra cui il virus dell'immunodeficienza umana di tipo-1 (HIV-1). Macaco Rhesus TRIM5α (TRIM5α(rh)) obiettivi il capside di HIV-1 e blocca l'infezione in una fase iniziale di postadesione, prima della trascrizione d'inversione. Studi hanno dimostrato che associazione di TRIM5α per le proteine del capside assemblato è essenziale per restrizione e richiede il coiled-coil e B30.2/SPRY domini, ma il meccanismo molecolare di restrizione non è pienamente compresa. In questo studio, abbiamo studiato, di cryoEM combinato con mutagenesi e reticolazione chimica, le interazioni dirette tra HIV-1 del capside proteico (CA) assembly e purificata TRIM5α(rh) contenenti domini coiled-coil e SPRY (CC-SPRY(rh)). Associazione di concentrazione-dipendente di CC-SPRY(rh) agli assembly CA è stata osservata, mentre in condizioni equivalenti la proteina umana ha fatto non legano. Importante, CC-SPRY(rh), ma non la controparte umana, perturbato CA tubi in maniera non casuale, rilasciando frammenti di protofilamenti costituiti esameri CA senza dissociazione nei monomeri. Inoltre, tale distruzione strutturale è stato impedito da inter-hexamer reticolazione con P207C/T216C mutante CA con ponti disolfuro all'interfaccia trimero CTD-CTD delle assemblee del capside, ma non da intra-hexamer reticolazione tramite A14C/E45C all'interfaccia NTD-NTD. Lo stesso effetto di perturbazione da TRIM5α(rh) sulle interfacce inter-hexamer si è verificato anche con purificati intatti nuclei di HIV-1. Questi risultati forniscono informazioni riguardanti quanto TRIM5α sconvolge il core del virione e dimostrano che i danni strutturali del capside virale da TRIM5α sono probabilmente uno dei componenti importanti del meccanismo di restrizione TRIM5α-mediata dell'HIV-1.
