Translate this page to:
French
In JoVE (1)
Other Publications (8)
- Ecotoxicology and Environmental Safety
- Molecular Pharmacology
- Toxicological Sciences : an Official Journal of the Society of Toxicology
- Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists
- Molecular and Cellular Endocrinology
- Differentiation; Research in Biological Diversity
- Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists
- Biology of Reproduction
Automatic Translation
This translation into French was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Vatsal Mehta in JoVE
JoVE General
Un débit élevé In situ pour caractériser les modes d'expression d'ARNm dans les fœtus de souris tractus urogénital
Ici, nous décrivons un débit à haute efficacité
Other articles by Vatsal Mehta on PubMed
Étude De La Toxicité Du Phtalate De Diéthyle Sur Les Poissons D'eau Douce Cirrhina Mrigala
Phtalate de diéthyle (DEP) est utilisé comme plastifiant, un détergent à base, dans des aérosols, comme liant dans les bâtonnets d'encens et lotions après-rasage parfum. Il est connu pour être un contaminant des écosystèmes d'eau douce et marins. Par conséquent, une étude a été conçue pour déterminer les effets toxiques des DEP sur un poisson d'eau douce, Cirrhina mrigala. Le poisson a été traité avec 25, 50, 75, et 100 ppm (p/v) DEP dissous dans l'acétone afin de déterminer la CL50. Contrôles positifs ont été traités avec de l'acétone uniquement. Il y avait 100 % de mortalité observée dans les 24 heures à 75 et 100 ppm et 50 % de mortalité chez les poissons de 50ppm traitée dans les 72 h. Ceux traités à 25 ppm a montré la seule mortalité de 10 % dans les 72 h et d'autres poissons ont continué à survivre. Les poissons survivants ont été traités avec 25 ppm DEP une fois par jour pendant 3 jours à chaque changement d'eau (groupe III). Un groupe a été maintenu comme témoin négatif dans l'eau déchlorée (groupe I) et l'autre groupe a reçu de l'acétone, une fois par jour pendant 3 jours à chaque changement d'eau et a été utilisée comme témoin positif (groupe II). Poissons tués par narcose froide sur un bloc de glace et disséqués pour obtenir le foie, les muscles et les échantillons de cerveau ; On a préparé des homogénats de 10 % dans une solution saline glacée. Activité de l'acétylcholinestérase (AchE) cerveau et des muscles a été mesurée. Hépatique aspartate (AST) et d'alanine aminotransférase (ALT) et de foie et de muscle succinate déshydrogénase (SDH) alcalin et acide phosphate (ACP et ALP) ont été mesurés. Il y avait une augmentation significative dans le foie et le muscle ACP et ALP chez les poissons traités DEP par rapport aux témoins positifs et négatifs. Il y avait une augmentation significative dans les muscles SDH et foie ALT (ALT) chez les poissons traités DEP par rapport aux témoins positifs et négatifs. Niveau de mal au cerveau diminue significativement chez les poissons traités DEP par rapport aux témoins positifs et négatifs. Ces résultats indiquent que le DEP apporte d'importants changements dans l'activité de certaines enzymes du foie et des muscles. Ces altérations de l'activité enzymatique peuvent avoir des effets à long terme qui sont constamment exposés à de faibles doses de DEP dans le milieu aquatique.
Identification Du Poisson-zèbre ARNT1 Homologues: 2 378 Tétrachlorodibenzo-p-dioxine Toxicité Dans Le Poisson-zèbre En Développement Requiert ARNT1
Pour utiliser le poisson zèbre (Danio rerio) comme modèle pour étudier la toxicité développementale de la-tétrachlorodibenzo-p-dioxine (TCDD), il est essentiel de savoir quelles protéines sont impliquées dans la médiation de toxicité. Les travaux précédents a identifié zfAHR2 comme le récepteur, qui lie la TCDD médiation réponses en aval. Bien que les zfARNT2b peuvent se former un hétérodimère fonctionnel avec zfAHR2 in vitro, zfarnt2 mutants nuls ne montrent aucune protection contre les points de terminaison de la toxicité développementale de la TCDD, démontrant que zfARNT2b ne peut pas être le partenaire de dimérisation physiologique pour zfAHR2 médiation réponses à la TCDD dans des embryons de poisson-zèbre. La présente étude visait à identifier un partenaire de dimérisation de rechange pour zfAHR2 qui peut fonctionner pour atténuer la toxicité développementale de la TCDD. Par la recherche de poisson-zèbre séquence génomique et utilisant l'amplification rapide axée sur la réaction en chaîne de polymérase du cDNA termine technique, trois formes de cDNA qui semblent être des variantes d'épissage alternatif ARNm d'un homologue du poisson-zèbre de ARNT1 ont été détectés. Analyse des protéines zfARNT1 in vitro montre que les deux formes plus longues de zfARNT1, zfARNT1b et zfARNT1c, peuvent former des hétérodimères fonctionnel avec zfAHR2. Cependant, la forme la plus courte, zfARNT1a, semble être non fonctionnel avec zfAHR2 in vitro. Pour déterminer si les fonctions des protéines un zfARNT1 avec zfAHR2 in vivo, un morpholino ciblé contre l'extrémité 5' de zfARNT1 (zfarnt1-MO) est utilisé. Injection de la zfarnt1-MO avant le traitement de la TCDD diminue de manière significative l'induction de zfCYP1A ARNm et de protéines. En outre, zfarnt1 morphants montrent une protection complète contre le œdème péricardique induite par la TCDD et montrent qu'une protection partielle contre la diminution du débit sanguin et des malformations cranio-faciales causées par la TCDD, démontrant le rôle des protéines de zfARNT1 dans la médiation de ces réponses.
Exposition De 2 378 Tétrachlorodibenzo-p-dioxine Empêche La Formation De La Valvule Cardiaque Dans Le Développement De Poisson-zèbre
Les malformations cardiovasculaires sont parmi les plus communs congénitales malformations congénitales observées chez les humains. Défauts de valves cardiaques perturbent la circulation sanguine normale. Poisson zèbre sont un remarquable modèle expérimental pour étudier les effets des contaminants environnementaux sur les processus de développement. Recherches antérieures ont montré que la-tétrachlorodibenzo-p-dioxine (TCDD) provoque la régurgitation de sang dans le cœur et réduit le débit sanguin périphérique chez le poisson zèbre embryonnaire, ce qui suggère une forme quelconque de défaillance de la soupape. Pour tester ceci, que nous avons utilisé la microscopie vidéo d'examiner le fonctionnement des valves et la structure dans le développement des poissons zèbres exposés à la TCDD. Exposition à la TCDD produit régurgitation de sang à l'auriculo-ventriculaire (AV) et bulboventricular (BV) jonctions. Contrairement aux embryons exposés à la diméthylsulfoxyde véhicule de contrôle, embryons exposés à la TCDD a échoué à former des folioles de soupape comme le cœur est arrivée à échéance. En outre, alors que le TCDD n'a pas bloqué la formation initiale du bulbe artériel, nous avons trouvé qu'exposition TCDD a empêché la croissance normale et le développement de cette partie des voies de sortie. TCDD modifié la localisation des cellules endothéliales au niveau des jonctions AV et BV et modifiait l'expression localisée des mRNAs bmp4 et notch1b normalement associés à des vannes naissantes. Globalement, nos résultats démontrent que, bien que TCDD n'empêche pas la spécification initiale des lieux présumés vanne, exposition à la TCDD produit graves altérations dans le développement de soupape, conduisant à la régurgitation de sang et de ne pas la circulation dans le poisson-zèbre en voie de développement.
Atlas De L'expression Génique Wnt Et R-spondine Dans Le Tractus Souris Homme Développement Basse Génito-urinaire
De la prostate développement est influencé par β-caténine, mais il est difficile de savoir quels β-caténine activateurs sont impliqués, où ils sont synthétisés, et si leur abondance de l'ARNm est influencée par les androgènes. Nous avons identifié WNT / β-caténine sensible β-galactosidase dans la partie inférieure du tractus urogénital (LUT) de souris transgéniques journaliste, mais β-galactosidase activité différait entre les quatre souches de souris que nous avons examinés. On utilise l'hybridation in situ à comparer les modèles de Wnts, r-spondines (Rspos, des co-activateurs de β-caténine), β-caténine réagissant à ARNm, et un androgène récepteur réagissant ARNm de type foetal mâle sauvage, femelle foetal, et LUT néonatale masculine. La plupart des ARNm Wnt et RSPO étaient présents dans LUT au cours du développement de la prostate. Profils d'expression sexuellement dimorphes ont été observés pour WNT / β-caténine sensible gènes, et pour Wnt2b, Wnt4, Wnt7a, Wnt9b, Wnt10b, Wnt11, Wnt16, et Rspo3 ARNm. Ces résultats révèlent des différences sexuelles dans la signalisation Wnt / β-caténine dans LUT fœtale, soutenant l'idée que cette voie peut être directement ou indirectement sensibles aux androgènes au cours de la prostate canalaire développement.
Toxicité De La Reproduction Et Du Développement De Dioxine Dans Les Poissons
La-tétrachlorodibenzo-p-dioxine (TCDD ou dioxine) est un contaminant de l'environnement mondial et le ligand prototypique pour enquêter sur le récepteur d'hydrocarbures aryliques (AHR)-médiation de toxicité. L'exposition environnementale au TCDD résulte dans le développementale et la reproduction toxicité chez les poissons, les oiseaux et les mammifères. Pour résoudre la pertinence écotoxicologiques et les risques pour la santé humaine posés par l'exposition à la dioxine agonistes des AHR, besoin d'un modèle de vertébrés permet étudie à différents niveaux d'organisation biologique, évalue les effets indésirables de reproduction et le développement et établit des corrélations intégratives appropriées entre les différents niveaux d'effets de toxicité. Nous décrivons ici la toxicité de reproduction et le développementale de la TCDD dans feral espèces de poissons et de résumer comment à l'aide du modèle de poisson-zèbre pour étudier la toxicité de la TCDD nous a permis de caractériser la signalisation de la procréation assistée induire une toxicité chez les poissons et de mieux comprendre comment dioxine des produits chimiques. Nous proposons que ces études peuvent être utilisées pour prédire les risques que les ligands de l'AHR présentent pour les populations de poissons sauvages et fournissent une plate-forme pour l'intégration des évaluations des risques pour les organismes écologiques pertinentes et les humains.
Potentiels Mécanismes De Protection De Récepteur Aryle-hydrocarbone (AHR) De Signalisation En Hyperplasie Bénigne De La Prostate
Le récepteur aryl-hydrocarbone (AHR) est un facteur de transcription ligand évolutivement conservées activé mieux connu pour son rôle dans la médiation des réponses toxiques à de type dioxine des contaminants environnementaux. Cependant, la procréation assistée de signalisation est également apparu comme un participant actif dans les processus de développement normal et progression de la maladie. Ici, nous passons en revue le rôle de la procréation assistée de signalisation dans le développement de la prostate et les processus pathologiques, avec un accent particulier sur l'hyperplasie bénigne de la prostate (HBP). Inapproprié d'activation sur la procréation assistée a été récemment associée à une diminution du risque de l'HBP symptomatique chez l'homme et a été montré pour entraver le développement de la prostate et de perturber la signalisation du système endocrinien chez les rongeurs. Nous mettons en évidence les réactions physiologiques connus à l'activation de la procréation assistée de la prostate et d'autres tissus et de discuter des mécanismes possibles par lesquels il peut agir de la prostate humain adulte pour se protéger contre l'HBP symptomatique.
Un Atlas Haute Résolution Moléculaire De La Parcelle De Fœtus De Souris Basse Génito-urinaire
Épithélium-stroma interactions dans la partie inférieure du tractus urogénital (LUT) sont partie intégrante du développement des vésicules séminales de la prostate et chez les hommes, le développement du vagin et l'utérus chez les femmes, et le développement urétral chez les deux sexes. Profilage de l'expression génique du stroma et l'épithélium isolé LUT a démêlé les mécanismes de développement LUT, mais ces études sont confondus par la cellule hétérogène et mal défini des sous-populations contenues dans chaque compartiment de tissu. Nous avons utilisé l'hybridation in situ pour synthétiser une haute résolution moléculaire atlas de 17 jours post-coït LUT fœtus de souris. Nous avons identifié les ARNm que les populations cellulaires sélectifs marque de la vésicule séminale, canal éjaculateur, de la prostate, l'urètre et du vagin, de subdiviser ces tissus en 16 stromales et épithéliales 8 sous-compartiments. Ces résultats constituent un outil puissant pour la cartographie des schémas LUT d'expression de gènes et révèlent aussi non caractérisée sous-compartiments qui peuvent jouer un rôle dans le développement mécanistes LUT dont nous avions conscience auparavant.
Modes D'expression Génétique Dans Le Corps Jaune Bovin Suite Répétée Intra-utérins Infusions De Faibles Doses De Prostaglandine F2alpha
Lutéolyse naturel implique de multiples impulsions de la prostaglandine F2alpha (PGF) publiées par l'utérus non gravide. Cette étude a examiné l'expression de 18 gènes à partir de 5 voies distinctes suivantes multiples à faible dose des impulsions de PGF. Vaches sur Jour 9 du cycle oestral a reçu quatre injections intra-utérins avec 0,25 ml de phosphate (PBS) ou PGF (0,5 mg PGF de 0,25 ml de PBS) à des intervalles de 6. Une biopsie lutéale a été recueilli 30 minutes après chaque perfusion PBS ou PGF. Il y avait quatre groupes de traitement: témoin (n = 5; 4 perfusions PBS), 4XPGF (n = 5; 4 perfusions PGF), les 2XPGF non-régressé (n = 5; PGF-PBS-PGF PBS; pas de régression après les traitements ), et 2XPGF-régressé (n = 5; PGF-PBS-PGF PBS; de régression après les traitements). Comme on s'y attendait, d'abord PGF impulsion accrue d'ARNm des gènes précoces immédiats JUN, FOS, NR4A1, et EGR1, mais, de façon inattendue ARNm a également augmenté pour stéroïdogène (STAR) et angiogéniques (VEGFA) voies. Deuxième PGF impulsion induite gènes précoces immédiats et les gènes liés à l'activation du système immunitaire (IL1B, SAF, FASLG, IL8). Cependant, l'ARNm de VEGFA et STAR ont diminué par la perfusion PGF seconde. Après impulsions PGF troisième et quatrième, un motif distinctement lutéolytique de l'expression génique est évidente à l'inhibition de voies stéroïdogènes et angiogénique; que, il est induction de voies pour l'activation du système immunitaire et la production de PGF. Le profil d'expression génique induite par la PGF a été similaire dans CL pas destiné à la lutéolyse (2X-non-régression) après l'impulsion première, mais PGF était très distincte après la deuxième impulsion PGF. Ainsi, bien que l'impulsion initiale PGF induit l'ARNm pour de nombreuses voies, les deuxièmes impulsions et plus tard de PGF semblent définir le profil distinct de l'expression génique qui entraîne la lutéolyse.
