Translate this page to:
Japanese
In JoVE (1)
Other Publications (8)
- Ecotoxicology and Environmental Safety
- Molecular Pharmacology
- Toxicological Sciences : an Official Journal of the Society of Toxicology
- Differentiation; Research in Biological Diversity
- Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists
- Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists
- Molecular and Cellular Endocrinology
- Biology of Reproduction
Automatic Translation
This translation into Japanese was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Vatsal Mehta in JoVE
JoVE General
ハイスループットその場でハイブリダイゼーション法
ここで、我々は、効率的な高スループットを記述
Other articles by Vatsal Mehta on PubMed
毒性研究フタル酸ジエチル淡水魚 Cirrhina Mrigala 上の。
フタル酸ジエチル (DEP) は、可塑剤、線香やアフターシェーブ ローションの香水バインダーとして基本、エアゾール スプレーの洗剤として使用されます。それ淡水と海洋生態系の汚染物質として知られています。したがって、研究、淡水魚、Cirrhina mrigala DEP の有毒な影響を決定するために設計されました。魚が扱われた 25、50、75、100 ppm (w/v) DEP 溶存アセトンでの LC50 を決定します。肯定的なコントロールはアセトンでのみ扱われました。50 %72 H で 50 ppm 処理魚死亡率と 100% 死亡の 75 および 100 ppm の 24 時間以内に観察されました。唯一の 10 ％ 死亡 72 h と生き残るために続けて残りの魚以内を示した 25 ppm 投与。存続の魚 25 ppm DEP の 3 日間水 (III 群) のすべての変更を一度毎日治療されました。脱塩素水でネガティブ コントロールとして維持された 1 つグループ (グループ化) と他のグループ アセトン 1 日 1 回 3 日間水のすべての変更を受け、肯定的な制御として (II 群) が使用されました。魚が冷たい麻酔、氷のブロック上で死亡し、肝臓、筋肉、脳のサンプルを入手する解剖;氷冷生理食塩水で 10% 乳剤の調製脳と筋肉のアセチルコリンエステラーゼ (AchE) 活性を測定しました。肝アスパラギン酸 (AST) そしてアラニンアミノ (ALT) と肝臓、筋肉コハク酸脱水素酵素 (SDH) アルカリと酸リン酸 （ALP と ACP） を測定しました。肝臓および筋肉 ACP の大幅な増加と ALP DEP 扱われる魚の正と負のコントロールとの比較であった。筋の SDH の大幅な増加と肝臓があった alt キー (ALT) DEP 扱わ魚に比べて正と負のコントロールと。脳の痛みレベルは DEP 扱われる魚の正と負のコントロールに比べて有意に低下しました。DEP 特定の肝臓及び筋の酵素の活性に重要な変更をもたらすことが示唆されました。これら酵素活性の変化長期的な影響を継続的に DEP の低用量で、水生環境にさらされているがあります。
ゼブラフィッシュ ARNT1 同族体の同定: 2,378 マウスにおけるダイオキシン毒性発展途上のゼブラフィッシュでは、ARNT1 が必要です。
2,378 マウスにおけるダイオキシン (TCDD) 発達毒性研究するモデルとして、ゼブラフィッシュ) を使用するには、どの蛋白質の毒性を媒介に関与しているを知ることが不可欠です。前作 zfAHR2 下流の応答を仲介する TCDD バインドする受容体として特定しました。ZfARNT2b 機能的ヘテロダイマー zfAHR2 in vitro で形成することができますが、zfarnt2 null 変異体 TCDD 発生毒性のエンドポイントに対する保護その zfARNT2b はゼブラフィッシュ胚における TCDD レスポンスを媒介する生理的ダイマー化パートナー zfAHR2 をすることはできませんを示す表示されません。現在の研究の目的は、代替のダイマー化パートナー TCDD 発生毒性を仲介する機能可能性があります zfAHR2 を識別するためにだった。ゼブラフィッシュ ゲノム シーケンスを検索およびポリメラーゼ連鎖反応による急速な増幅 cdna を用いた手法は、代替の mRNA スプライシング バリエーション ARNT1 のゼブラフィッシュ相同のように検出されたように見える 3 つの形態の cDNA を終了します。ZfARNT1 タンパク質の in vitro 解析の zfARNT1、zfARNT1b、zfARNT1c、2 つの最長のフォームは、zfAHR2 と機能的なヘテロ形成できますを示します。ただし、最短フォーム、zfARNT1a、zfAHR2 と in vitro で動作しないと思われます。ZfAHR2 生体内で zfARNT1 の 5' 端に対して対象と morpholino と zfARNT1 タンパク質機能どうかを決定するには、(zfarnt1 MO) が使用されました。Zfarnt1 MO TCDD 治療前に、の注入は、zfCYP1A mRNA および蛋白の誘導が大幅に減少します。さらに、zfarnt1 morphants TCDD 誘発心嚢浮腫に対する完全な保護を示すし、血流の低下とこれらの応答を仲介する zfARNT1 蛋白質の役割を実証 TCDD による顎顔面奇形に対する部分的な保護を示します。
2,378 マウスにおけるダイオキシン暴露ゼブラフィッシュの開発心臓弁形成を防ぎます。
心血管系奇形人間で観察の最も一般的な先天性出生欠陥の一つです。欠陥心臓弁の正常な血液の流れを混乱させます。ゼブラフィッシュ環境汚染物質による発達過程が効果を勉強のための卓越した実験モデルです。前の研究はその 2,378-マウスにおけるダイオキシン (TCDD) で心の血液の逆流の原因し、バルブの障害のいくつかのフォームを示唆胚のゼブラフィッシュ末梢血流が減少を示した。これをテストするには、我々 弁関数と構造体への TCDD 曝露ゼブラフィッシュの開発を検討するのにビデオ顕微鏡を使用しました。TCDD 曝露血液逆流房室 (AV) と bulboventricular (BV) 接合で製作。車両ジメチルスルホキシドにさらされる胚を制御する著しく対照的で、ダイオキシンにさらされる胚成熟心として弁尖を形成するために失敗しました。また、TCDD 曝露が正常な成長と流出路のこの部分の開発を防止に TCDD の球部動脈の初期形成をブロックしていないに対し、発見します。TCDD は AV と BV の接合部における血管内皮細胞の局在を変え、Mrna bmp4 と通常 nascent バルブと関連付けられている notch1b のローカライズの発現変化します。一緒に取られて、我々 の結果は TCDD 推定弁場所の初期の仕様を防ぐできませんが、TCDD 曝露バルブ開発、血液逆流につながる、失敗する発展途上のゼブラフィッシュにおける循環の深刻な変化を生成することを示しています。
前立腺肥大のシグナリングアリール炭化水素受容体の潜在的な防御機構（AHR）
アリール炭化水素受容体（AHR）が最高のダイオキシンなどの環境汚染物質に毒性反応を媒介するその役割のために知られている進化的に保存されたリガンド活性化転写因子である。しかし、AHRシグナリングはまた、通常の開発と疾患の進行の過程に積極的に参加者として浮上している。ここでは、良性前立腺肥大症（BPH）に特に重点を置いて、前立腺の開発や病気のプロセスにおけるAHRシグナル伝達の役割を確認します。不適切なAHRの活性化最近、ヒトにおける症候性BPHのリスクの減少に関連付けられていると前立腺の開発を損なうとげっ歯類でのシグナリング内分泌を混乱させることが示されている。我々は、前立腺や他の組織におけるAHRの活性化に知られている生理的応答を強調表示し、それが症候性BPHから保護するために大人のヒト前立腺に作用する可能性があることにより、潜在的なメカニズムを説明します。
胎児マウス下部尿生殖路の高分解能分子アトラス
下部尿生殖路（LUT）で、上皮 - 間質相互作用は、男女ともに男性では前立腺と精嚢の開発、女性の膣と子宮開発、尿道開発に不可欠である。孤立したLUT間質および上皮の遺伝子発現プロファイリングは、LUT開発のメカニズムを解明しましたが、このような研究は、それぞれの組織コンパートメント内に含まれる異種と病気に定義された細胞亜集団によって混同されています。我々は、17日後の性交、胎児マウスのLUTの高分解能分子アトラスを合成するin situハイブリダイゼーションに使用されます。我々は、16間質および上皮8つのサブコンパートメントにこれらの組織を細分化、精嚢、射精管、前立腺、尿道、膣の選択的細胞集団をマークしたmRNAを同定した。これらの結果は、LUTの遺伝子発現パターンをマッピングするための強力なツールを提供し、また我々が以前に気づいていなかったそのうちのLUT開発のメカニズムの役割を果たしている可能性が以前に未知のサブコンパートメントを明らかにした。
開発雄マウス下部尿生殖路におけるWntとR-spondin遺伝子発現のアトラス
前立腺の開発はβ-カテニンシグナル伝達に影響を受けますが、それはそれらが合成されている場所、関与しているβ-カテニンの活性化、およびそれらのmRNAの存在量がアンドロゲンに影響されるかどうかは不明です。我々はトランスジェニックレポーターマウスの下部尿生殖路（LUT）におけるWnt /β-カテニン応答β-ガラクトシダーゼ活性を同定したが、β-ガラクトシダーゼ活性は、我々が調べた4マウス系統間で異なっていた。我々は、Wntは、R-spondins（Rspos、β-カテニンシグナル伝達のコアクチベーター）、β-カテニン応答のmRNAと、野生型胎児の男性、胎児の女性におけるアンドロゲン受容体応答mRNAのパターンを比較するためにin situハイブリダイゼーションに使用される、と新生児の男性のLUT。ほとんどのWntとRSPOのmRNAは前立腺の開発中にLUTに存在していた。性的二形の発現パターンは、Wnt /β-カテニン応答性遺伝子、およびWnt2b、Wnt4、Wnt7a、Wnt9b、Wnt10b、Wnt11、Wnt16、およびRspo3のmRNAが観察された。これらの結果は、この経路は前立腺管の開発中にアンドロゲンに直接または間接的に反応するかもしれないという考えを支持する、胎児のLUTにおけるWnt /β-カテニンシグナル伝達の性差を明らかにした。
魚ダイオキシンの生殖・発生毒性
2,378-マウスにおけるダイオキシン (TCDD やダイオキシン） はグローバル環境汚染物質とアリール炭化水素受容体 (AHR) を調査するため、原型のリガンド-毒性を介する。TCDD の環境曝露は、魚、鳥、哺乳類の生殖発生毒性の結果します。生態毒物学的関連性とダイオキシン様 AHR アゴニストへの暴露によるヒトの健康リスクを解決するのには脊椎動物モデル毒性研究の生物学的組織のさまざまなレベルで、生殖・発生副作用を評価し、効果の異なるレベルの適切な統合的な相関を確立できる必要です。ここでは野生における TCDD の生殖・発生毒性説明種の魚し、どのように TCDD 毒性を調査するためにゼブラフィッシュ モデルを用いた AHR シグナルを特徴付けるようになりました要約魚とどのようにダイオキシン様化学物質をよりよく理解する毒性を誘発します。このような研究 AHR リガンド野生の魚の集団にもたらすリスク評価、生態学的関連性の高い生物と人間の両方を統合するためのプラットフォームを提供するリスクを予測するために使用できることを提案します。
プロスタグランジンF2alphaの低用量の反復子宮内輸液後ウシ黄体における遺伝子発現のパターン
自然な黄体退行は、非妊娠子宮によって解放プロスタグランジンF2alpha（PGF）の複数のパルスが含まれます。本研究ではPGF複数の低用量パルス以下の5つの異なる経路から18遺伝子の発現を調べた。発情周期の9日目の牛は、0.25 mlのリン酸塩の4つの子宮内注入は、6時間間隔で生理食塩水（PBS）またはPGF（0.25 mlのPBSでは0.5 mg PGF）バッファリングされた。黄体生検は30分ごとにPBSまたはPGF注入した後に採取した。 4つの治療グループがありました; 4XPGFは、（n = 5、4 PGF注入）、コントロール（4 PBS注入n = 5）で、2XPGF - 非退縮した（n = 5; PGF-PBS-PGF-PBS、治療後のない回帰PGF-PBS-PGF-PBS;治療後の回帰））、および（n = 5の2XPGFは、退縮した。予想通り、最初のPGFパルスは6月、FOS、NR4A1、およびEGR1即時型初期遺伝子のmRNAを増加したが、、ステロイド（STAR）と血管新生（VEGFA）経路のために予期せず増加したmRNAが。第二PGFパルスは、即時早期遺伝子、免疫系の活性化（IL1B、FAS、FASLG、IL8）に関連する遺伝子を誘導した。しかし、VEGFAとSTARのmRNAは、第PGF注入によって減少した。 3番目と4番目のPGFパルスの後、遺伝子発現のはっきりluteolyticパターンは、ステロイドと血管新生経路の阻害が顕著であった。PGFの免疫系の活性化と生産のための経路の誘導があった、一方。 PGF誘起遺伝子発現のパターンは、最初のPGFパルスの後黄体退行（2X-非退縮）宛てではないCLで同等であったが、2番目のPGFパルスの後非常に異なっていた。初期PGFパルスが多くの経路のmRNAを誘導するもののしたがって、PGFの二番目とそれ以降のパルスは、黄体退行の結果、その遺伝子発現の異なるパターンを設定するには、表示されます。
