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Articles by Xiaoting Meng in JoVE

 JoVE Bioengineering

Electric Field-gesteuerte gerichtete Wanderung von neuralen Vorläuferzellen in 2D-und 3D-Umgebungen


JoVE 3453 2/16/2012

1School of Dentistry, Cardiff Institute of Tissue Engineering & Repair, Cardiff University, 2Shandong Qianfoshan Hospital, Shandong University School of Medicine, 3Dermatology and Ophthalmology Research, Institute for Regenerative Cures, University of California at Davis

Dieses Protokoll zeigt Methoden verwendet werden, um 2D-und 3D-Umgebungen in speziell angefertigten electrotactic Kammern einzurichten, die Zellen verfolgen können

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PI3K Vermittelte Electrotaxis Der Embryonalen Und Adulten Neuronalen Vorläuferzellen in Anwesenheit Von Wachstumsfaktoren

Richtige Führung der Migration der neuronalen Vorläuferzellen (NPCs) ist wesentlich für die Entwicklung und Reparatur von dem zentralen Nervensystem (ZNS). Elektrisches Feld (EF)-geführte Migration, Electrotaxis, wurde in vielen Zelltypen beobachtet. Wir berichten hier, dass in angewandter EFs physiologischen Größenordnung embryonalen und adulten NPCs markierte Electrotaxis, zeigen die ist abhängig von der PI3K/Akt-Signalweg. Die Electrotaxis wurde auch von ex-Vivo-Untersuchung belegt, die transplantierten NPCs Richtungen in Richtung Kathode in organotypische Rückenmark Segment Modell nach Behandlung mit EFs migriert. Genetische Störung oder pharmakologische Hemmung der Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K) beeinträchtigt Electrotaxis, während EF Belichtung Akt Phosphorylierung Wachstumsfaktor-abhängigen Weise erhöht und höhere Phosphatidylinositol-3,4,5-Trisphosphate (PIP3). EF Behandlungen induziert auch asymmetrischen Umverteilung von PIP3, Wachstumsfaktor-Rezeptoren und Aktin-Zytoskelett. Electrotaxis in sowohl embryonalen und adulten NPCs erfordert epidermalen Wachstumsfaktor (EGF) und Fibroblasten-Wachstumsfaktor (FGF). Unsere Ergebnisse zeigen die Bedeutung des PI3K/Akt-Signalweges in gesteuerte Migration von NPCs, die angetrieben von EFs und Wachstumsfaktoren und markieren Sie das Potenzial der EFs zur Anleitung von verschiedenen NPC-Populationen in CNS-Reparatur-Therapien zu verbessern.

Magnetischer Nanopartikel Der Kopten Als MRI Kontrastmittel Für Transplantierte Neurale Stammzellen-Erkennung

Neuraler Stammzellen (NSCs) weisen Merkmale, die sie geeignete Kandidaten für Stammzell-Ersatz-Therapie und Rückenmark Wiederaufbau machen. Magnetresonanztomographie (MRT) bietet das Potenzial, Zellen in-vivo verwenden innovative Ansätze zum Handy-Kennzeichnung zu verfolgen und die Bilderfassung. In dieser Studie wurden die Experimente, die Beladung von magnetischen Kopten hohlen Nanopartikeln (NPs Kopten) in neurale Stammzellen zu optimieren und entsprechende MRI-Parameter definieren durchgeführt. Sowohl Zelle Entwicklungsfähigkeit und Multipotenz Analyse zeigte, dass die Kopten NPs bei einer Konzentration von 16 µg ml(-1) reduziert T2 Entspannung Mal in beschrifteten Ratte NSCs, Herstellung von größeren Kontrast auf Spin-Echo-Akquisitionen bei 4,7 T, aber hatte keine Auswirkungen auf die Zellviabilität und möglichen in-vitro-Differenzierung im Vergleich zu Kontrollen. Nach Optimierung der Nanopartikel laden Konzentrationen und beschriftete Zelle Zahlen für MRI-Nachweis, wurden geladenen Kopten NSCs in organotypische Rückenmark Scheiben übertragen. Die Ergebnisse zeigten, dass MRI effizient niedrige Zahlen der Kopten-beschrifteten NSCs mit der verbesserten Bildkontrast erkennen könnte. Unsere Studie gezeigt, dass MRI der Aufgepfropfte NSCs mit Kopten NPs beschriftet ein nützliches Tool ist, organotypische Rückenmark Segment Modelle bewerten und potenzielle Anwendungen in anderen biologischen Systemen hat.

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