[Clonage Et L'Expression Des Divers Deletants Du Gène Gsalpha Dans Escherichia Coli]

Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi / Zhongguo Bing Li Sheng Li Xue Hui = Journal of Experimental Hematology / Chinese Association of Pathophysiology. Dec, 2000  |  Pubmed ID: 12578660

Mutation du gène Gsalpha a été découvert dans des tumeurs humaines. Dans nos études précédentes, trois nouveaux deletants du gène Gsalpha, Gsalpha L-1(500 bp), Gsalpha L-2(300 bp) et Gsalpha L-3(200 bp) et wild type Gsalpha-4(1 200 bp) ont été trouvés dans des lignées de cellules de la leucémie humaine et détectés dans les cellules leucémiques provenant de patients atteints de leucémie aiguë. Afin d'étudier la construction, la fonction et la signification biologique de la deletants, les plasmides de Gsalpha-4 Gsalpha L-1, Gsalpha L-2 et sauvages ont été transformés en e. coli DH5 amplifiés par PCR et clonés dans pET22b(+) de vecteur d'expression et ensuite transformés en e. coli, respectivement. Par conséquent, des niveaux plus élevés d'expression de trois recombinants ont été obtenues sous forme d'inclusions. Les résultats suggèrent que ces isoformes de Gsalpha ont un cadre de lecture du gène et peuvent être exprimées in vitro. Les données de jettent les bases pour étudier la relation entre le gène Gsalpha de la leucémogenèse.

Mammifères Suppresseur De Sec4 Modulant L'effet Inhibiteur Du Rab15 Au Cours De L'endocytose Précoce

The Journal of Biological Chemistry. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12105226

Rab15 est un roman Rab endocytose qui contrecarre l'effet stimulateur de Rab5-GTP sur trafic endocytose précoce. Rab15 peut interférer avec la fonction Rab5 directement par séquestration effecteurs Rab5 ou indirectement par l'intermédiaire de roman définit des interactions de l'effecteur. Pour faire la différence entre ces possibilités, nous avons étudié les propriétés de liaison d'effecteur des Rab15. Rab15 n'interagit pas directement avec les effecteurs Rab5 rabex-5 et 5-rabaptin dans un essai de liaison de deux-hybride de levure. Plutôt mammifère suppresseur de Sec4 (Mss4) a été identifié comme un partenaire de liaison pour Rab15. MSS4 lie préférentiellement le PIB lié (T22N) et de nucléotides libres (N121I) Rab15, conforme au rôle proposé de Mss4 comme un chaperon qui stabilise sortie Rabs dans leur forme dépourvue de nucléotides. Analyse mutationnelle du Rab15 indique que la lysine à la position 48 (K48Q) est importante pour la liaison de Rab15 PIB pour Mss4. De plus, la mutation K48Q réplique le phénotype inhibiteur de type sauvage Rab15 sur l'endocytose des récepteurs dans les cellules HeLa et homotypiques endosome fusion in vitro sans modifier la quantité relative de récepteur de la transferrine associée à la surface de cellules. Ensemble, ces résultats indiquent un nouveau rôle pour Mss4 comme effecteur pour Rab15 dans le trafic de l'endocytose précoce.

Transport Transdermique Améliorée Par électroporation à L'aide De Lipides Anioniques

Journal of Controlled Release : Official Journal of the Controlled Release Society. Aug, 2002  |  Pubmed ID: 12175752

Administration de médicament transdermique est une approche intéressante pour le traitement local ou systémique en médecine. Dans la dernière décennie, méthodes d'administration transdermique active différentes ont étudié plus loin comme livraison liposome cationique et favorisée par électroporation. À la lumière d'obtenir un effet synergique des lipides et électroporation, une nouvelle méthode d'utilisation des lipides anioniques pour améliorer le transport transdermique de molécules sous l'électroporation est rapportée ici. Épiderme porcine dépouillé de chaleur a été utilisé pour la mesure de transport transdermique à l'aide d'un appareil de diffusion verticale in vitro. Vésicules lipidiques ont été préparés à l'aide d'un mélange de ratio 1:1 mole de 1, 2-dioléoyl-3-phosphatidylglycérol (DOPG) et de 1, 2-dioléoyl-3-phosphatidylcholine (DOPC). Lorsque les lipides sont mixtes avec (mais pas encapsulation) la molécule cible de transport, le transport induite par électroporation à travers épiderme porcine a augmenté par rapport à celui sans les lipides. La mise en valeur dans les transports dépendait de la taille et la charge de la molécule transportée. Le bleu de méthylène (MB), de la protoporphyrine IX (PpIX) et diméthyl-protoporphyrine IX (DM-PpIX) servaient de molécules cibles petites et FITC-dextrans (4 à 155 kDa) ont été utilisés comme molécules importantes dans nos études. Amélioration des transports, à des degrés divers, a été observée pour toutes les trois petites molécules (poids moléculaire < 1 kDa), en présence de vésicules DOPG:DOPC. dans le cas de grosses molécules, transport de lipides améliorés a observé seulement pour le dextran 4 kDa et non pour les plus grandes (m &gt; 10 kDa). Neutre ou lipides cationiques seuls n'ont pas augmenté le transport transdermique dans les conditions d'électroporation, nous avons utilisé.

Modulation De La Piscine Facilement Diffusable Auprès De L'émetteur Et De L'excitation-sécrétion De Couplage Par Activité Et Par La Sérotonine à Aplysia Synapses Sensori-motrices Dans La Culture

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Dec, 2002  |  Pubmed ID: 12486160

À court terme dépression homosynaptique et facilitation hétérosynaptique de libération des transmetteurs de neurones sensoriels mécanorécepteurs de Aplysia participent à accoutumance et sensibilisation, respectivement, des réflexes défensifs de retrait. Nous avons examiné si la transmission synaptique est réglementée dans ces formes de plasticité au moyen de changements dans la taille de la piscine d'émetteur disponible pour diffusion immédiate [la piscine facilement libérable (RRP)] ou à l'efficacité de la libération d'un pool d'immuable. À l'aide des synapses sensori-motrices formés en culture cellulaire, nous avons estimé le nombre de quanta d'émetteur dans le PRT de la version asynchrone de neurotransmetteur générée par l'application d'une solution hypertonique de baignade. Nos expériences indiquent que le transmetteur libéré par les potentiels d'action et de solution hypertonique vient d'un même pool. Le RRP a été réduit après la dépression homosynaptique de l'EPSP par stimulation de basses fréquences et a augmenté après la facilitation de l'EPSP par application de la sérotonine endogène émetteur facilitateur (5-HT) après la dépression homosynaptique. Toutefois, même si les changements fractionnaires dans le PRT et le PPSE sont semblables pour la dépression synaptique et la facilitation lors de la dépression a été induite par une stimulation répétée hypertonique, les changements dans le RPEB étaient significativement plus élevés que les changements dans le PRT lors de la dépression a été induite par une stimulation électrique répétée. Ces observations indiquent que la dépression homosynaptique et restauration de transmission déprimée par la 5-HT sont causées par des changements dans la quantité d'émetteur disponible pour diffusion immédiate et dans les processus impliqués dans l'accouplement du potentiel d'action pour la libération des transmetteurs.

L'augmentation Du Plasminogène Activateur Inhibiteur Type-1 Expression Par La Stimulation Des Activateurs Pour Récepteurs Activés Par Les Proliférateurs De Peroxysomes Dans Les Cellules Endothéliales Humaines

Chinese Medical Sciences Journal = Chung-kuo I Hsüeh K'o Hsüeh Tsa Chih / Chinese Academy of Medical Sciences. Jun, 2002  |  Pubmed ID: 12906165

[corrigé] Pour étudier l'effet des récepteurs activés par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR) activateurs sur plasminogène activateur inhibiteur type-1 (PAI-1) expression ombilical humain veine des cellules endothéliales et le mécanisme possible.

L'activation Des Alpha Du Récepteur Activé Par Les Proliférateurs Des Peroxysomes Dans Les Cellules Endothéliales Humaines Augmente L'expression Du Plasminogène Activateur Inhibiteur Type-1

Chinese Medical Journal. Jan, 2003  |  Pubmed ID: 12667383

Pour étudier l'effet des activateurs (PPARs) les récepteurs activés par les proliférateurs des peroxysomes sur inhibiteur 1 de l'activateur du plasminogène (PAI-1) expression dans ombilical humain cellules endothéliales de la veine et élucider un mécanisme possible.

Les Fonctions Du Système Ubiquitine Protéasome Comme Une Contrainte Inhibitrice Sur Le Renforcement Des Synaptic

Current Biology : CB. May, 2003  |  Pubmed ID: 12781127

Longue durée des formes de plasticité synaptique a été démontré que de dépendre de l&#39;évolution de l&#39;expression des gènes. Bien que de nombreuses études ont mis l&#39;accent sur la régulation de la transcription et la traduction lors de l&#39;apprentissage lié à la plasticité synaptique, la dégradation des protéines régulée fournit un autre moyen de communes de modifier la composition macromoléculaire des cellules.

Changements Dans La Piscine Facilement Diffusable Auprès De L'émetteur Et L'efficacité De La Libération Induite Par Haute-fréquence Tirait Sur Les Synapses Sensori-motrices Aplysia Culture

Journal of Neurophysiology. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 14645384

La transmission synaptique dans les synapses de neurone moteur neurone sensitif d'Aplysia, comme la transmission aux nombreuses synapses de vertébrés et d'invertébrés, augmente après une courte rafale de stimulation à haute fréquence (HFS), un phénomène de potentialisation post-tétanique (PTP). PTP est généralement attribuable à une augmentation de la libération des transmetteurs des neurones présynaptiques. Nous avons examiné si les changements dans le pool facilement Diffusable auprès de l'émetteur (RRP) contribuent à la potentialisation qui suit HFS. Nous avons comparé les variations des potentiels post-synaptiques excitateurs (PPSE) a évoqué avec les potentiels d'action aux changements dans le PRT, selon les estimations de la sortie de l'émetteur asynchrone induite par une solution hypertonique. Les changements dans le PPSE ont été corrélés avec les changements dans le PRT, mais les changements mis en correspondance quantitativement qu'à des connexions dont la force synaptique initiale était supérieure à la médiane de toutes les expériences. Liaisons plus faibles, l'augmentation dans le PRT était insuffisante pour tenir compte de la PTP. Plus faibles connexions sorti en premier lieu une fraction plus petite du RRP avec chaque EPSP que plus forte, et cette fraction augmente à des connexions plus faibles après HFS. En outre, la sortie de l'émetteur initial en réponse à une solution hypertonique a été accélérée après HFS, indiquant que l'augmentation de l'efficacité de la libération ne se limitait pas à un couplage excitation-sécrétion. Modulation du RRP et de l'efficacité de la libération ainsi tous deux contribuent à l'amélioration de la libération des transmetteurs de HFS.

ApTrkl, Un Récepteur Trk-like, La Sérotonine Et De La Médiation à Charge ERK Activation Et Facilitation à Long Terme Dans Les Neurones Sensoriels Chez L&#39;aplysie

Neuron. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15541318

La famille Trk des récepteurs tyrosine kinases joue un rôle dans la plasticité synaptique et dans la mémoire du comportement chez les mammifères. Ici, nous rapportons la découverte d&#39;un récepteur Trk-like, ApTrkl, chez l&#39;aplysie. Nous montrons qu&#39;il est exprimé dans les neurones sensoriels, le locus de la facilitation synaptique, qui est un modèle cellulaire pour la formation de la mémoire. La sérotonine, le neurotransmetteur de facilitation, active ApTrkl, qui, à son tour, conduit à l&#39;activation de ERK. Enfin, inhiber l&#39;activation de la ApTrkl K252a Trk inhibiteur ou à l&#39;aide d&#39;inhiber ARNdb blocs ApTrkl l&#39;activation médiée par la sérotonine de ERK dans le corps cellulaire, ainsi que la cellule à l&#39;échelle à long terme de facilitation induite par la 5-HT application à la cellule du corps. Ainsi, la transactivation de l&#39;ApTrkl récepteur tyrosine kinase par la sérotonine est une étape essentielle dans les événements biochimiques conduisant à long terme de facilitation chez l&#39;aplysie.

Synapse à La Signalisation Noyau Au Cours De Long Terme Plasticité Synaptique; Un Rôle Pour La Voie Classique D&#39;importation Nucléaire Actif

Neuron. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15603742

L&#39;exigence pour la transcription au cours de longue durée indique que la plasticité des signaux générés au niveau de la synapse doivent être transportés vers le noyau. Nous avons cherché à savoir si l&#39;actif classique voie nucléaire importation médiateur transport intracellulaire du signal rétrograde dans les neurones sensoriels et les neurones chez l&#39;aplysie rongeurs hippocampe. Nous avons constaté que importines se localiser au niveau distales des processus neuronaux, y compris les compartiments synaptiques, où ils sont bien placés pour servir de médiateur synapse à la signalisation noyau. Dans l&#39;aplysie, des stimuli connus pour produire la facilitation de longue durée, mais pas de courte durée déclenché importine translocation nucléaire. Dans les neurones hippocampiques, l&#39;activation des récepteurs NMDA, mais pas la dépolarisation induite importine translocation nucléaire. Nous avons également démontré que la LTP-induisant des stimuli recruté activement import nucléaire dans des tranches d&#39;hippocampe. En collaboration avec notre constatation selon laquelle la facilitation à long terme de l&#39;aplysie sensori-motrices nécessaires synapses actives import nucléaire, nos résultats indiquent que la régulation de la voie d&#39;import nucléaire actif joue un rôle crucial dans le transport de signaux générés synaptique dans le noyau en cours d&#39;apprentissage liés à des formes de plasticité .

Rôle Du Ras/PKCzeta/MEK/ERK1/2 Signalisation En Angiotensine II Induite Par Le Muscle Lisse Vasculaire La Prolifération Cellulaire

Regulatory Peptides. May, 2005  |  Pubmed ID: 15721486

Le rôle de la protéine kinase C (PKC) et de son cross-talk avec la kinase de signal-réglée extracellulaire (ERK) cascade en angiotensine II (AngII)-ont incité le muscle lisse vasculaire (CMLV) de cellule prolifération ne sont toujours pas claires. Dans cette étude, la voie de la PKC d'AngII d'activer ERK1/2 et d'induire la prolifération cellulaire a été étudiée dans les cellules musculaires lisses aortiques de rat. La prolifération des CMLV a été testée par la [3 H]-dosage de l'incorporation de thymidine. PKCzeta phosphorylée et non-phosphorylés ERK1/2, Elk-1, et mitogène-ERK-activating kinase (MEK) ont été estimés par l'analyse par Western blot. Les interactions entre les molécules de signalisation ont été examinées par immunoprécipitation. La prolifération des CMLV et l'activation de ERK1/2 et le facteur de transcription nucléaire induite par AngII Elk-1 étaient toutes diminuées par l'inhibiteur de PKC non-spécifiques (staurosporine) et de PKCzeta Pseudo-substrat inhibiteur (PS-PKCzeta). Transfection de Ras négative dominante dans les CMLV diminue la phosphorylation induit par AngII PKCzeta et ERK1/2. AngII stimulée par l'association des PKCzeta avec Ras. AngII-induit la phosphorylation de MEK est inhibée par l'inhibiteur de Pseudo-substrat PKCzeta et le complexe PKCzeta-MEK a été détecté par immunoprécipitation. Ces résultats suggèrent que l'isoforme PKCzeta est impliqué dans la prolifération des CMLV et Elk-1 activation. AngII peut activer ERK1/2 par voie Ras/PKCzeta/MEK, qui peut être un des voies de transduction de signal important dans la prolifération des CMLV induite par AngII.

Étude De Diagnostic Et De Suivi Des Carotides Fistules Caverneuses Avec échographie-Doppler Couleur : Analyse De 33 Cas

Journal of Ultrasound in Medicine : Official Journal of the American Institute of Ultrasound in Medicine. Jun, 2005  |  Pubmed ID: 15914677

Le but de cette étude était d'observer les caractéristiques de l'image et les variations hémodynamiques des fistules carotido-thrombose du sinus caverneux (CCP) et d'évaluer l'efficacité du traitement interventionnel de CCP par échographie Doppler couleur (CDU).

Évaluation De La Qualité Des ECR Sur L'effet De La Béta-élémène, Un Ingrédient D'une Herbe Chinoise, Contre Les Tumeurs Malignes

Contemporary Clinical Trials. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16243588

Afin d'évaluer la qualité des essais contrôlés randomisés (ECR) pour les injections élémène, un ingrédient de la plante chinoise Curcuma wenyujin, pour les tumeurs malignes, employé couramment dans la pratique clinique en Chine.

Analyse Clinique Et Moléculaire D'une Famille Chinoise De Quatre Générations Avec Induite Par L'aminoglycoside Et Une Perte Auditive Non Syndromique Associée Mitochondriales ARNr 12 S C1494T Mutation

Biochemical and Biophysical Research Communications. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16380089

Nous rapportons ici la caractérisation clinique et génétique moléculaire d'une famille chinoise de quatre générations avec induite par l'aminoside et surdité non syndromique. Cinq des neuf membres de la famille matrilinéaires avait une perte auditive induite par l'aminoside. Ces membres de la famille matrilinéaires exposées de sévérité variable et configuration audiométrique de déficience auditive, bien qu'ils partagent certaines caractéristiques communes : bilatérale et ayant une déficience auditive neurosensorielle. Le séquençage de l'ADN mitochondrial (ADNmt) dans le pedigree identifié 16 variantes et le homoplasmiques 12 s ARNr C1494T mutation, qui a été associée à une perte auditive dans l'autre grande famille chinoise. En effet, la présence de la mutation C1494T dans ces pedigrees pas génétiquement liés fortement affectée par une déficience auditive a indiqué que cette mutation est impliquée dans la pathogénie d'induite par l'aminoside et surdité non syndromique. Cependant, la pénétrance incomplète de la perte auditive a indiqué que la mutation de C1494T lui-même n'est pas suffisante pour produire un phénotype clinique mais exige la participation de facteurs de modificateur d'expression phénotypique. Ces variantes de l'ADNmt, ne montrant aucune conservation évolutive, ne peuvent avoir un potentiel en modifiant le rôle dans la pathogenèse de la mutation C1494T. Cependant, il semble que fond nucléaire contribuent à la variabilité phénotypique des membres de la famille matrilinéaires dans cette famille. En outre, les aminosides modulent l'expressivité et la pénétrance de la surdité associée à la mutation de C1494T dans cette famille.

Formation Des Synapses Et Localisation Des ARNm Dans Les Neurones Cultivés Aplysie

Neuron. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16446139

localisation et la traduction d&#39;ARNm réglementé de fournir un moyen de restreindre l&#39;expression des gènes dans l&#39;espace intérieur des neurones pendant le guidage des axones et à long terme la plasticité synaptique. Ici, nous montrons que la formation des synapses modifie spécifiquement la localisation de l&#39;ARNm codant sensorin, un neurotransmetteur peptidique avec la neurotrophine-comme des propriétés. Dans les neurones sensoriels, l&#39;aplysie isolés qui ne font pas des synapses chimiques, de l&#39;ARNm sensorin est diffuse répartis dans neurites distales. En cas de contact avec un neurone cible du moteur, de l&#39;ARNm sensorin concentre rapidement au niveau des synapses. Cette répartition se produit seulement en présence d&#39;une cible du neurone moteur et est parallèle à la distribution de la protéine sensorin. Protéines de réduction de l&#39;ARNm sensorin, mais pas avec ARNdb inhibe la formation des synapses. Nos résultats indiquent que la formation des synapses peuvent altérer localisation des ARNm dans les neurones individuels. Ils suggèrent en outre que la traduction d&#39;un ARNm spécifique localisé, codant le neuropeptide sensorin, est nécessaire pour la formation des synapses entre les neurones sensoriels et moteurs.

Spécificité Isoform De La Translocation De PKC Dans Neurones Vivants Aplysie Sensorielles Et D&#39;un Rôle Pour Ca2 +-dépendante PKC APL Je Dans L&#39;induction De L&#39;intermédiaire Terme De Facilitation

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16928874

La protéine kinase C (PKC) sont des effecteurs importants de plasticité synaptique. Dans l&#39;aplysie, il ya deux grandes phorbol ester activés PKC, Ca2 + activé par la PKC Apl I et Ca2 +-indépendante PKC Apl II. Fonctionnelle Apl II, mais puis-je pas apl, dans les neurones sensoriels est nécessaire pour une forme de facilitation à court terme induite au niveau des synapses sensori-motrices par la sérotonine émetteur de facilitation (5-HT). Parce PKC sont activés par translocation du cytoplasme de la membrane, on utilise PKC marquées par fluorescence pour déterminer l&#39;isoforme de type cellulaire et la spécificité de la translocation de neurones aplysie vie. Dans les cellules Sf9, de faibles niveaux de diacylglycérol translocation Apl II, mais pas moi APL, qui a besoin de calcium pour la translocation à de faibles concentrations de diacylglycérol. En conséquence, l&#39;application de la 5-HT à l&#39;aplysie neurones sensoriels en l&#39;absence de translocation neuronale Apl II, mais puis-je pas apl, compatible avec le rôle de Apl II en facilitation à court terme. Cette translocation est observée dans les neurones sensoriels, mais pas dans les neurones moteurs. Apl I translocation seulement si la 5-HT est couplé à feu dans le neurone sensoriel; cuisson seule est inefficace. Parce combiné 5-HT et de tir sont nécessaires pour l&#39;induction d&#39;un type de moyen terme de facilitation à ces synapses, nous avons demandé si cette forme de plasticité synaptique implique l&#39;activation de Apl I. Nous rapportons ici que dominant négatif Apl I, mais pas Apl II, blocs à moyen terme de facilitation. Ainsi, différentes isoformes de la PKC translocation dans des conditions différentes de médiation types distincts de la plasticité synaptique: Ca 2 +-indépendante Apl II est impliqué dans facilitation à court terme, et Ca2 +-dépendante Apl je contribue à moyen terme de facilitation.

L'adiponectine Module Carnitine Palmitoyltransférase-1 à AMPK Signalisation Cascade Dans Les Cardiomyocytes De Rat

Regulatory Peptides. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17109977

L'adiponectine, une hormone polypeptide dérivé adipocytaire, joue un rôle important dans la régulation d'oxydation des acides gras. bêta d'acides gras fournit la majeure partie de l'énergie cardiaque et carnitine palmitoyltransférase (CPT) -1 sert un régulateur clé au cours de ce processus. Afin de caractériser les effets potentiels de l'adiponectine sur CPT-1, nous avons incubé rat néonatal cardiomyocytes avec adiponectine globulaire (gAd). Les résultats ont montré que gAd a favorisé l'expression d'ARNm et l'activité de la CPT-1. La voie de signal sous-jacents impliquée dans cet effet modulatrice a été étudiée plus loin. Inhibition de AMP-activated protein kinase (AMPK) avec l'adénine 9-bêta-d-arabinofuranoside (AraA) complètement abrogée gAd-mediated AMPK et la phosphorylation du coenzyme A carboxylase (ACC) et supprimé la promotion de l'activité de la CPT-1. gAd a aussi induit la phosphorylation de p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) et le récepteur activé par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR)-alpha, qui a été inhibée par l'AraA. SB202190, un inhibiteur de la p38MAPK, bloqué gAd-stimule la phosphorylation de PPAR-alpha. Lorsque l'AMPK et/ou p38MAPK est inhibée, gAd-enhanced expression de l'ARNm de la CPT-1 a été partiellement réduite. En conclusion, notre étude suggère que l'activation de l'AMPK cascade de signalisation participe à l'effet de la promotion de gAd le CPT-1.

Rescellage D'électroporation De Porcin épiderme à L'aide De Phospholipides Et Poloxamères

International Journal of Pharmaceutics. May, 2007  |  Pubmed ID: 17267148

Le rescellage d'épiderme porcine après que électroporation est l'objet d'une enquête. Épiderme porcine a été soumis à l'électroporation (30 impulsions à 100 V, 1 ms et à 1 Hz) dans un appareil de diffusion verticale, en présence de dimyristoylphosphatidylserine 2 mg/ml, pour produire un État perméable de longue durée. Fermeture traitements incluent l'incubation en 0,0625 à 0,25 mM poloxamer 188 (P188), ou l'incorporation des phosphatidylcholines (PC) ou des lipides cationiques avec des impulsions supplémentaires. La reprise de la résistance électrique des échantillons épiderme après que électroporation avec ou sans traitements de fermeture a été suivie. Les transports de carboxyfluorescéine et le glucose ont été mesurées au cours du processus de récupération. P188 et le PC ont été efficaces dans réapposition de sceau sur le plan de la conductance électrique et transport, avec P188 réagir plus rapidement et complètement. P188 médiation lipidique échange entre particules lipidiques de couche cornée a été mesurée par transfert d'énergie de fluorescence par résonance (FRET). Réorganisation de lipides facilitée par P188 et PC est suggérée pour être un mécanisme important de fermeture des dommages d'électroporation.

Les Astrocytes Induit Par L'hypoxie Favorisent La Migration Des Cellules Progénitrices Neurales Via Facteur Endothélial Vasculaire, Stem Cell Factor, Facteur-1alpha Stromales Dérivées Et Monocyte Chemoattractant Protein-1 Upregulation in Vitro

Clinical and Experimental Pharmacology & Physiology. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17581219

1. La présente étude visait à examiner si et comment les astrocytes induit par l'hypoxie de rat affectent la migration des cellules progénitrices neurales (PNJ) et à étudier l'expression patterns of certaines chimiokines, comme facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF), stem cell factor (SCF), dérivés du stroma facteur-1alpha (SDF-1alpha), fractalkine et monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) dans les astrocytes induit par l'hypoxie et de leur contribution à la migration de NPC in vitro. 2. Costar Transwell inserts ont été utilisées pour l'analyse de chimiotactisme et quantifié les changements dans les chimiokines ARNm pour entre 0 h et posthypoxia 24h ont été testés à l'aide de l'analyse quantitative en temps réel de la transcriptase inverse-polymérase PCR (RT-PCR). Les résultats ont montré que le chimiotactisme des astrocytes, des cellules exposées à une hypoxie pendant 18 h atteint une valeur de crête, tandis que le chimiotactisme des astrocytes exposés à une hypoxie pendant 24 h a commencé à diminuer par rapport à ceux exposés à une hypoxie pour 18 h. hypoxie surexprimés chemokine VEGF, SCF, SDF-1alpha et MCP-1 expression dans une fonction du temps mais l'expression fractalkine réprimés dans les astrocytes. En outre, les points dans le temps des expressions pic de VEGF, SCF, SDF-1alpha et MCP-1 ont été semblables au point de temps de migration maximale de NPC. 3. Les inhibiteurs qui bloquent la liaison des chimiokines spécifiques à ses récepteurs ont été utilisées pour analyser la contribution de la chimiokine aux migrations de NPC. Lorsque le VEGF, SCF, SDF-1alpha et MCP-1 ont été chacun inhibé indépendamment, migration de NPC a été réduite. Quand ils sont ensemble inhibées, migration NPC inhibait évidemment comparativement à des cultures le contrôle et monobloc, ce qui implique que l'effet migrateur des astrocytes induit par l'hypoxie est synergique par plusieurs chimiokines. 4. En conclusion, nous avons démontré la manière dépendante du temps de la promotion de migration NPC par les astrocytes induit par l'hypoxie. Nous fournissons également preuve que des facteurs solubles, tels que le VEGF, SCF, SDF-1alpha et MCP-1, libéré des astrocytes, dirigent la migration des PNJ dans des conditions hypoxiques. Étant donné que les astrocytes ont été activés à toutes les maladies d'hypoxie-ischémie, ces résultats indiquent un rôle important pour les astrocytes dans la direction de NPC substitutive dans le système nerveux central.

Dotation Des Ressources Humaines Et Le Service Fonctions De Services De Santé Des Organismes Communautaires En Chine

Annals of Family Medicine. Sep-Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18779546

Nous rapportons une étude sur l&#39;état de développement de la dotation des ressources humaines et des fonctions de service des services de santé communautaires (SHC) en Chine et proposent des recommandations pour améliorer les CHS dans le futur.

Importin Médiée Par Transport Rétrograde De CREB2 De Processus Distaux à L&#39;Nucleus Dans Les Neurones

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18957537

Les signaux reçus au niveau des synapses des neurones distales doivent être acheminées vers le noyau pour amorcer les changements dans la transcription qui sous-tendent de longue durée plasticité synaptique. La présence de importine transporteurs nucléaires et de certains facteurs de transcription au niveau des synapses soulève la possibilité que importines directement transporter des facteurs de transcription de la synapse au noyau pour moduler l&#39;expression des gènes. Ici, nous montrons que cyclique élément de réponse AMP contraignant facteur de transcription protein 2 (CREB2) / activation 4 (ATF4), un répresseur transcriptionnel qui module à long terme la plasticité synaptique et la mémoire, se localise dans les dendrites distales des neurones hippocampiques et rongeurs neurites de l&#39;aplysie sensorielle neurones (SNS) et se lie à certaines isoformes alpha Importin. La liaison de CREB2 à l&#39;alpha importine est nécessaire pour son transport depuis les dendrites distales au soma et sa translocation dans le noyau. CREB2 s&#39;accumule dans le noyau lors de dépression à long terme (LTD), mais pas potentialisation à long terme des synapses hippocampiques rongeurs, et pendant LTD mais pas à long terme de facilitation (LTF) de l&#39;aplysie synapses sensori-motrices. Time-lapse microscopie CREB2 étiqueté avec une protéine fluorescente photoconvertible révèle en outre le transport rétrograde de CREB2 de neurites distales vers le noyau de l&#39;aplysie SN au cours phénylalanine-méthionine-arginine-phénylalanine-amide (FMRFamide) induite par LTD. Ensemble, nos résultats indiquent que CREB2 est un roman de fret importine alpha qui se diffuse à partir des sites distaux synaptiques dans le noyau après des stimuli qui induisent LTD de synapses neuronales.

Phases Temporelles De L&#39;activité-dépendante Plasticité Et De La Mémoire Sont Médiés Par Routage Compartimenté De MAPK Dans Les Neurones Sensoriels Chez L&#39;aplysie

Neuron. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19146817

Une forme dépendant de l&#39;activité de la mémoire intermédiaire (AD-ITM) pour la sensibilisation est induite dans aplysie par un choc sur la queue unique qui donne lieu à des changements plastique (AD-ITF) dans la queue neurones sensoriels (SNS) via l&#39;interaction de cuisson potentiel d&#39;action dans le SN couplé à la libération de sérotonine dans le SNC. Dépendant de l&#39;activité à long terme de facilitation (AD-LTF, durable&gt; 24 heures) nécessite la synthèse des protéines dépend mitogen-activated protein kinase persistante (MAPK) activation et la translocation vers le noyau SN. Nous allons maintenant montrer que l&#39;induction de la phase antérieure temporelle (AD-ITM et AD-ITF), qui est la traduction et la transcription indépendant, nécessite l&#39;activation d&#39;une cascade de signalisation distincte roman fragmentaire qui relie seconds messagers, MAPK et PKC dans une voie unifiée dans SN queue. Depuis deux AD-ITM et AD-LTM besoin d&#39;activité MAPK, ces résultats suggèrent que la route collectives présynaptique SN de la circulation de l&#39;information moléculaire pour compartiments subcellulaires distincts lors de l&#39;induction de l&#39;activité-dépendants des souvenirs durables.

ID2 Favorise La Croissance Invasive Du MCF-7 Et SKOV-3 Cellules Par Un Nouveau Mécanisme Indépendant De Dimérisation à Des Facteurs Fondamentaux D'hélice-boucle-hélice

BMC Cancer. 2009  |  Pubmed ID: 19257909

Inhibiteur de la différenciation 2 (Id2) est un facteur critique pour la prolifération cellulaire et la différenciation du développement normal des vertébrés. La plupart de la fonction biologique de Id2 a été attribuée à son motif hélice-boucle-hélice. Surexpression de Id2 est fréquemment observée dans les tumeurs humaines différentes, mais son rôle d'invasion potentielle dans les cellules tumorales est contesté. L'étude visait à révéler le rôle de Id2 dans le potentiel d'invasion en mal envahissante et les œstrogènes alpha du récepteur (ERalpha)-MCF-7 et SKOV-3 cellules du cancer.

Différentielle Induction De LRP16 Par Alpha Du Récepteur Des Oestrogènes Liés Et Unliganded Dans Les Cellules De Carcinome Ovarien De SKOV3

The Journal of Endocrinology. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19403568

Auparavant, nous avons étudié l'effet d'induction de l'expression LRP16 par les œstrogènes (17beta-oestradiol, E(2)) et mis en place un mécanisme de feed-forward qui a activé l'estrogène receptor alpha (ERalpha) transactivation dans les cellules de cancer épithélial œstrogène-dépendantes. LRP16 est requis pour ERalpha transduction de signalisation en fonctionnant comme un co-activateur ERalpha. Dans cette étude, nous avons démontré que l'expression de LRP16 était positivement en E (2)-cellules réactif BG-1 cancer de l'ovaire, mais a été diminuée dans les cellules de cancer de l'ovaire SKOV3 résistants aux œstrogènes. Antagoniste des oestrogènes pur ICI 182 780 n'a rien LRP16 expression dans la cellule SKOV3. L'aboutissent ERalpha surexprimés LRP16 expression et l'activité de promoteur LRP16 accrue dans les cellules SKOV3 ; Toutefois, cette induction a été bloquée par la stimulation de l'oestrogène. Les résultats de l'expérience d'immunoprécipitation de la chromatine a révélé un fort recrutement de l'aboutissent ERalpha au promoteur de LRP16 en l'absence de œstrogènes ; Cependant, ERalpha a été libéré dans une large mesure l'ADN lors de la stimulation d'e. Modulation au niveau d'expression de LRP16 n'a pas significativement changé le taux de prolifération des cellules SKOV3 et la réactivité de la croissance des cellules d'e. Des cellules de précipitation de LRP16 par l'interférence d'ARN dans SKOV3 oestrogène nettement atténué réponse élément dépendant ERalpha activité de gène de journaliste et E (2)-induit l'expression de c-Myc. Notre étude suggère un nouveau mécanisme de résistance d'oestrogène du cancer de l'ovaire par laquelle voie de signalisation réprimés oestrogène antagonise transduction signalisation activée par œstrogènes.

FHL2 Interagit Avec Et Agit Comme Un Répresseur Fonctionnel De Id2 Dans Les Cellules De Neuroblastome Humain

Nucleic Acids Research. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19417068

Inhibiteur de la différenciation 2 (Id2) est un inhibiteur naturel des base hélice-boucle-hélice facteurs de transcription. Bien que Id2 est bien connu pour prévenir la différenciation et de promouvoir la tumorigenèse et la progression du cycle cellulaire, les événements moléculaires qui régulent l'activité Id2 restent à explorer. Ici, nous avons identifié que quatre-et-demi LIM seule protéine 2 (FHL2) est un roman répresseur fonctionnel de Id2. En outre, nous avons démontré que FHL2 peuvent interagir directement avec tous les membres de la famille des Id (Id1-4) via une structure de boucle-hélice N-terminal conservée dans les protéines de l'Id. FHL2 antagonise l'effet inhibiteur des protéines Id sur la protéine basique de l'hélice-boucle-hélice E47-mediated transcription, qui a été abrogée par la mutation de la suppression des ID qui ont perturbé leur interaction avec FHL2. Nous avons également montré un caractère concurrentiel entre FHL2 et E47 pour liaison Id2, auquel cas FHL2 empêche la formation de l'hétérodimère Id2-E47, ainsi libérer E47 à l'ADN et la restauration de son activité transcriptionnelle. Expression de FHL2 a été remarquablement régulée durant la différenciation induite par l'acide rétinoïque des cellules de neuroblastome, au cours de laquelle l'expression de Id2 est opposée à celle. L'expression ectopique FHL2 dans les cellules de neuroblastome nettement réduit la transcription et cycle cellulaire promotion de fonctions d'Id2. Au total, ces résultats indiquent que FHL2 est un répresseur important de l'activité oncogénique de Id2 dans les cellules de neuroblastome.

Synapse Et De Stimulation De Spécifique Traduction Locale à Long Terme Au Cours De La Plasticité Neuronale

Science (New York, N.Y.). Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19443737

Mémoire à long terme et la plasticité synaptique nécessitent des changements dans l&#39;expression des gènes et pourtant peut se produire d&#39;une manière spécifique à la synapse. L&#39;ARN messager localisation et la traduction réglementé au niveau des synapses sont donc essentiels pour établir la spécificité des synapses. En utilisant des cellules vivantes de la microscopie photoconvertible journalistes protéines fluorescentes traductionnelles, nous avons visualisé directement traduction locale au niveau des synapses au cours facilitation à long terme de l&#39;aplysie synapses sensori-motrices. Traduction de la journaliste requise de multiples applications de la sérotonine, spatialement était limitée à synapses stimulées, était relevé de notes et de relance spécifique, et s&#39;est produite lors de facilitation à long terme, mais pas pendant la dépression à long terme des synapses sensori-motrices. Régulation de la traduction ne s&#39;est produite en présence d&#39;une synapse chimique et de calcium requise de signalisation dans le neurone moteur postsynaptique. Ainsi, traduction locale très régulée se produit au niveau des synapses au cours plasticité à long terme et nécessite trans-synaptiques signaux.

Taux De Mutation De Base-substitution De Chromosome Y Humain Mesuré Par Séquençage Direct Dans Un Enracinement Profond Pedigree

Current Biology : CB. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19716302

Il est important pour de nombreux aspects de la génétique médicale et de l'évolution humaine de comprendre le principaux processus de mutation humaine. Dans le passé, les estimations des taux de mutation ont généralement été déduites des observations phénotypiques ou comparaisons de séquences homologues chez les espèces étroitement apparentées. Ici, nous appliquons la nouvelle technologie de séquençage pour mesurer directement une mutation rate, celle des substitutions de base sur le chromosome Y humain. Les chromosomes Y des deux individus séparés par 13 générations étaient flux triés et séquencé par séquençage jumelé-fin Illumina (Solexa) à une profondeur moyenne de x 11 ou x 20, respectivement. Des mutations de candidat ont été examinées plus par séquençage capillaire dans la lignée cellulaire et sanguin ADN des donateurs et membres supplémentaires de la famille. Douze des mutations ont été confirmées dans environ 10,15 Mb ; huit d'entre eux se sont produits in vitro et quatre in vivo. Ces derniers pourraient être placés dans des positions différentes sur le pedigree et conduits à une mesure de mutation-taux de 3.0 10(-8) mutations/nucléotides/génération x (95 % CI: 8,9 x 10(-9) - 7,0 x 10(-8)), conformes aux estimations de 2,3 x 10(-8) - x 6,3 10(-8) mutations/nucléotides/génération pour la même région provenant des comparaisons de homme-chimpanzé publiées selon les temps de génération / intermédiaires supposés.

Kératine 18 Atténue Estrogen Receptor Alpha-mediated Signalisation Par Séquestration De LRP16 Dans Le Cytoplasme

BMC Cell Biology. 2009  |  Pubmed ID: 20035625

Oncogenèse dans le cancer du sein est souvent associée à l'activation du alpha(ERalpha) récepteur oestrogène excessif et la surexpression de ses coactivateurs. LRP16 est un gène cible de ERalpha et un co-activateur ERalpha et joue un rôle crucial dans l'activation de ERalpha et la prolifération des cellules de cancer du sein MCF-7. Toutefois, le règlement de la disponibilité fonctionnelle de cette protéine coactivateur n'est pas encore clair.

Inhibition De L'acide Hyaluronique Synthase-3 Diminue Sous-cutanée Croissance De Cancer Du Côlon Chez La Souris

Diseases of the Colon and Rectum. Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20305449

Acide hyaluronique et hyaluronan synthases ont été impliqués dans la progression du cancer. Acide hyaluronique synthase-3 est régulée dans les cellules de cancer du côlon métastatique (SW620), et son expression intervient dans la croissance cellulaire in vitro. Nous avons émis l'hypothèse que l'inhibition de l'acide hyaluronique synthase-3 aurait diminuer la formation de tumeurs ou modifier le modèle de métastases dans des modèles murins de la croissance du cancer du côlon.

Reprogrammation Cellulaire Contrôlée Est Possible à L'aide De Micro-ARN ?

Ageing Research Reviews. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20601195

Puisqu'une technique a été signalée pour générer des cellules souches pluripotentes induites (CISP), divers groupes dans le monde entier ont reprogrammé humaines et souris des cellules somatiques dans le CISP en utilisant un éventail de techniques et de gènes de pluripotence. Progrès dans la recherche de l'iPSC a ouvert une nouvelle avenue dans la médecine régénérative autologue, par lequel les cellules pluripotentes spécifiques à un patient pourraient potentiellement provenir de cellules somatiques adultes. Toutefois, plusieurs limites interdisant actuellement leur utilisation dans des milieux cliniques, y compris le système de largage de l'ADN viral et à la surexpression exogène des gènes de la pluripotence. Nouvelles stratégies sont donc nécessaires pour assurer la production sûre et efficace du CISP et guider leur différenciation dans les lignées désirées pour réparer le tissu endommagé et traiter la maladie. Nous présentons ici un aperçu des recherches récentes en reprogrammation cellulaire. Nous nous concentrons sur la faisabilité des stratégies axées sur les micro-ARN pour la reprogrammation de cellules somatiques dans les cellules souches pluripotentes, évitant ainsi la nécessité d'introduire des virus ou l'ADN dans les cellules du donneur, et donc atténuer les risques associés à des techniques de reprogrammation. À la lumière les rôles essentiels des microARN dans le maintien de l'état pluripotentes et dans la régulation de spécification de la lignée des lymphocytes et des modifications épigénétiques de la chromatine, nous discutons également le rôle potentiel des microARN comme candidats pour la reprogrammation cellulaire contrôlée et l'induction de la conversion de destin cellulaire au-delà de lignées sans retour à un État pluripotent. Poursuivre les recherches sur les micro-ARN impliqués dans la reprogrammation iPSC et leur rôle potentiel dans la reprogrammation cellulaire contrôlée ajoutera une nouvelle dimension à notre compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans la reprogrammation cellulaire.

Induction Acclimatée Révèle La Multipotentialité De Kératinocytes D'indifférenciées Humains Adultes

Cellular Reprogramming. Jun, 2010  |  Pubmed ID: 20698770

Il a été démontré que plusieurs types de cellules souches somatiques ont la capacité remarquable à se différencier en d'autres types de tissus. Cependant, la promesse des cellules souches des kératinocytes semble mince pour générer des tissus nonepidermal. À l'aide de notre stratégie d'induction acclimatation récemment développés, nous démontrons la multipotentialité des adultes humains indifférenciés kératinocytes (UKs). Le UKs ont été isolé de la couche basale de prépuce humain adulte et cultivées dans un milieu Epilife, qui permet la croissance de seulement les kératinocytes de kératine-positif, favorise la prolifération élevée de UKs et empêche leur différenciation. Induction de l'UKs par sérum ou lineage-commis de produire seul moyen différenciés de cellules épidermiques. Par conséquent, sérum ou lignée-commis moyen a été ajouté à Epilife s'acclimater UKs à différencier d'autres types de cellules. Contre toute attente, acclimatation de sérum peut induire UKs pour produire un grand nombre de cellules musculaires lisses et moins des adipocytes et neurocytes dans les 3 semaines. En revanche, sauf pour les cellules épidermiques terminalement différenciées, acclimatation engagée peut induire UKs différencier exclusivement dans les lignées des adipocytes, myogènes ou neurogènes. Ces données indiquent que UKs humains représentent un roman cellules souches multipotentes et suggèrent qu'ils peuvent fournir une source de cellules accessibles, thérapeutique prometteuse pour la médecine régénérative.

L'évaluation Des Catéchines Qui Contiennent Une Portion Galloyl Que Potentiels Inhibiteurs D'intégrase Du VIH-1

Clinical Immunology (Orlando, Fla.). Dec, 2010  |  Pubmed ID: 20832370

Les quatre catéchines avec la portion de galloyl, y compris la catéchine gallate (CG), le gallate d'Epigallocatechin (EGCG), gallocatéchine gallate (GCG) et l'épicatéchine gallate (ECG), ont été trouvés pour inhiber l'intégrase du VIH-1 effectivement tel que déterminé par notre méthode ELISA. Dans notre étude d'accueil, il est proposé que, lorsque l'intégrase du VIH-1 ne se combine pas avec l'ADN du virus, la quatre catéchine peut lier à Tyr143 et Gln148, altérant ainsi la flexibilité de la boucle (Gly140-Gly149), qui pourrait conduire à une inhibition de l'activité d'intégrase du VIH-1. En outre, après avoir combiné intégrase du VIH-1 avec l'ADN du virus, les quatre catéchines peut se coincer entre l'intégrase et virus ADN, par conséquent, perturber cette interaction. Ainsi, les quatre catéchines peuvent réduire l'activité de l'intégrase du VIH-1 en perturbant son interaction avec l'ADN du virus. Les quatre catéchines ont un effet inhibiteur hautement coopératif (IC₅₀ = 0,1 μmol/L). Notre étude suggère que les catéchines avec la portion de galloyl pourraient être une nouvelle et efficace classe d'inhibiteurs d'intégrase du VIH-1.

LRP16 S'intègre Dans Le Complexe De Transcription NF-κB Et Est Nécessaire Pour Son Activation Fonctionnelle

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21483817

Facteur nucléaire κB (NF-κB)-voies de médiation ont été largement impliqués dans la progression tumorale, le développement et la survie cellulaire. Bien que les événements moléculaires de la détermination de la translocation de NF-κB du cytoplasme au noyau ont été largement documentés, les mécanismes de régulation de l'activité de NF-κB à l'intérieur du noyau sont encore mal compris. Étant un membre spécial de macro protéines domaine, LRP16 a déjà été identifiée comme un co-activateur de récepteur d'oestrogène et récepteur d'androgène et comme un interacteur de coactivateur NF-κB UXT. Ici, nous avons étudié le rôle régulateur du LRP16 sur l'activation de NF-κB.

Corrélation Phénotype-génotype 295 Sujets Sourds Chinois Avec Des Mutations Bialléliques Causal Dans Le Gène GJB2

Genetic Testing and Molecular Biomarkers. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21488715

Le gène codant la connexine 26 (GJB2) est le principal gène pour atteinte de surdité neurosensorielle non syndromique (NSSHI). Plus de 100 mutations dans ce gène ont été signalées à être liés à la déficience auditive (HI), de légère à la surdité profonde. Pour estimer avec précision l'impact des mutations de GJB2 dans la population chinoise, une étude transversale a été réalisée pour analyser les données auditives des patients chinois atteints de NSSHI.

Dédifférenciation D'homme En Phase Terminale Différenciation Des Kératinocytes Dans Leurs Cellules De Précurseur Induites Par Le Facteur De Croissance Basique Des Fibroblastes

Biological & Pharmaceutical Bulletin. 2011  |  Pubmed ID: 21720010

Reprogrammation de cellules différenciées vers les cellules souches peut-être avoir des applications à long terme dans la recherche sur les cellules souches et la médecine régénérative. Nous présentons ici la dédifférenciation de kératinocytes épidermiques humains dans leurs cellules de précurseur in vitro avec le facteur de croissance basique des fibroblastes (bFGF) mais l'intervention de gène pas externe. Après incubation des kératinocytes humains de différenciation en phase terminale, certains des kératinocytes survivants est revenue d'un différenciées à un État dédifférenciée, comme en témoigne la réexpression de marqueurs biologiques des cellules souches de kératinocytes natif (nKSCs), y compris les β 1-intégrine, CK19 et CK14. En outre, ces dédifférenciation dérivé KSCs (dKSCs) ont montré une aptitude pour la formation de colonies élevées en corrélation avec l'analyse de cycle de cellules montrant une accumulation marquée dans les phases S, acquis une distribution régionale similaire de 6 α intégrine et CD71 expression au niveau ultrastructural et avait une capacité de prolifération accrue en libérant la télomérase de sites nucléolaires nucléoplasmique distribution. Toutefois, si l'on compare le dKSCs avec nKSCs, 2 points semble remarquables: (1) la proportion de transit amplifier les cellules de dKSCs traités avec bFGF est beaucoup plus élevée que dans les nKSCs et (2) régionales différences existent dans la localisation subcellulaire de la télomérase dans nKSCs et dKSCs. La plupart nKSCs a montré une concentration de nucléole proéminente d'expression de la télomérase humaine de la transcriptase inverse, alors que la plupart des dKSCs montrent une distribution intranucléaire plus diffuse de la télomérase ou signal même appauvrissement à nucléoles par rapport au nucléoplasme général. Ces résultats indiquent que bFGF pouvait induire les différenciation terminale kératinocytes épidermiques pour convertir leurs cellules précurseurs, qui propose une nouvelle approche pour produire des cellules souches saines résiduelles pour la cicatrisation et la régénération.

Catéchines Contenant Une Portion De Galloyl Comme Potentiels Composés Anti-VIH-1

Drug Discovery Today. Jun, 2012  |  Pubmed ID: 22414543

Les catéchines contenant des fractions de galloyl sont composés antioxydants naturels importants. Dans cet article, nous passons en revue les multiples mécanismes par lequel catéchines contenant une portion de galloyl peuvent cibler des protéines clés pour inhiber la transmission sexuelle du VIH-1, ainsi que fusion VIH-1, la transcriptase inverse du VIH-1, l'intégrase du VIH-1 et protéase du VIH-1. En outre, catéchines avec une portion de galloyl peuvent médier facteurs cellule hôte tels que l'oxyde nitrique synthase, facteur nucléaire-κB et caséine kinase II d'inhiber l'infection à VIH-1. Le plus important effet inhibiteur bloque gp120 liant pour les cellules humaines isolées de lymphocytes T CD4 +. Les mécanismes multiples qui sous-tendent l'activité anti-VIH de catéchines galloyl contenant prédisent que ces catéchines pourraient servir de thérapies alternatives dans le traitement de l'infection par le VIH.

Infusion De Cellules Souches Mésenchymateuses Améliore L'hyperglycémie Chez Les Rats Diabétiques De Type 2: Identification D'un Nouveau Rôle Dans L'amélioration De La Sensibilité à L'insuline

Diabetes. Jun, 2012  |  Pubmed ID: 22618776

Infusion de cellules souches mésenchymateuses (CSM) s'est avérée effectivement plus faible taux de glycémie chez les personnes diabétiques, mais les mécanismes impliqués ne pouvaient être suffisamment expliqué par leur rôle potentiel en favorisant la régénération de l'îlot. Par conséquent, nous avons supposé que MSCs infusées pourraient aussi contribuer à l'amélioration de la résistance à l'insuline des tissus cibles périphériques de l'insuline. Pour vérifier l'hypothèse, nous induit un modèle de rat diabétique par administration riche en matières grasses alimentation/streptozotocine (STZ), infusion de MSC effectuée pendant la phase précoce (7 jours) ou de la phase tardive (21 jours) après l'injection de STZ, puis évalué les effets thérapeutiques de la perfusion de MSC et explore les possibles mécanismes impliqués. Infusion de CSM amélioré l'hyperglycémie chez les rats diabétiques de type 2 (T2D). Infusion de MSCs durant la phase initiale non seulement favorisé la fonction cellulaire β mais également améliorée résistance à l'insuline, alors que la perfusion dans la phase tardive simplement amélioré l'insulino-résistance. Infusion de MSCs a entraîné une augmentation de l'expression de GLUT4 et une élévation du substrat de récepteur phosphorylé l'insuline 1 (IRS-1) et Akt (protéine kinase B) dans les tissus cibles de l'insuline. Il s'agit du premier rapport du traitement MSC améliorant la sensibilité à l'insuline au T2D. Ces données indiquent que plusieurs rôles et mécanismes sont impliqués dans l'efficacité de MSCs dans améliorer l'hyperglycémie dans T2D.

Effets De Kisspeptin1 Sur L'activité électrique Du Extrahypothalamic De La Population De Neurones De La Gonadolibérine Dans Medaka (Oryzias Latipes)

PloS One. 2012  |  Pubmed ID: 22649563

Kisspeptin (produit du gène kiss1) est le plus puissant activateur connu de l'axe hypothalamo-hypophyso-gonadique. Kiss1 tant les récepteurs kisspeptin sont fortement exprimés dans l'hypothalamus chez les vertébrés, et de faibles doses de kisspeptin ont un effet stimulant robuste et durable sur la cadence de tir de potentiel d'action du hypophysiotropiques gonadotropin releasing hormone-1 (GnRH1) neurones chez les souris. Les poissons ont plusieurs populations de neurones GnRH distingués par leur localisation dans le cerveau et le gène de la GnRH qu'elles expriment. Neurones de gnrh3 situés dans le terminal nerf (TN) associé à l'ampoule olfactive sont neuromodulatrices et ne jouent pas un rôle direct dans la régulation de la fonction hypophyso-gonadique. Dans poisson medaka, l'activité électrique des neurones de la TN-GnRH3 est modulée par des signaux visuels de leurs congénères et est censée agir comme un émetteur d'informations de l'environnement extérieur au système nerveux central. TN-GnRH3 neurones jouent également un rôle dans la motivation sexuelle et États d'excitation, ce qui les rend une importante population de neurones à l'étude pour la coordination de la compréhension de comportements complexes. Nous avons étudié le rôle de kisspeptin dans la régulation de l'activité électrique des neurones de la TN-GnRH3 chez le médaka adulte. À l'aide d'électrophysiologie dans une préparation de cerveau intact, nous montrent qu'un traitement relativement brève avec 100 nM de kisspeptin a un effet stimulateur de longue durée sur l'activité électrique du extrahypothalamic de la population de neurones GnRH. Analyse de la relation dose-effet suggère une gamme relativement étroite activational de ce neuropeptide. En outre, bloquant le potentiel d'action de tir à la tétrodotoxine et bloquant la transmission synaptique avec une faible solution de Mg(2+) de Ca(2+)/haut inhibe l'action stimulatrice de kisspeptin sur l'activité électrique, ce qui indique que kisspeptin agit indirectement par régulation synaptique pour exciter les neurones TN-GnRH3. Nos résultats fournissent une nouvelle perspective sur des fonctions plus larges de kisspeptin dans le système nerveux central, par le biais de son règlement d'une population d'extrahypothalamic de neurones GnRH impliquées dans plusieurs fonctions neuromodulatrices.

SGEF Est Surexprimé Dans Le Cancer De La Prostate Et Contribue à La Progression Du Cancer De La Prostate

Oncology Reports. Jul, 2012  |  Pubmed ID: 22824926

Le but de cette étude était d'étudier les rôles possibles du SH3 contenant guanine nucleotide exchange facteur (SG) dans le cancer de la prostate humain. Des données expérimentales ont montré que SGEF était surexprimé dans les spécimens et les cellules de cancer de la prostate humain. La réduction de l'expression de SGEF par un siARN ciblant SGEF androgéno-indépendant C4-2 et cellules C4-2 b supprimé tant d'ancrage-dépendants et indépendants de mouillage de la croissance. En outre, l'androgène récepteurs (AR) antagoniste bicalutamide a encore renforcé cette action inhibitrice due à la suppression de la transactivation de AR élevée après précipitation de SGEF. Collectivement, nos résultats fournissent la première démonstration que SGEF est un roman de progression du cancer de la prostate humain et du développement.

Une Analyse Facile Et Précise Pour Quantifier Les Micro-ARN Par Une Approche Optimisée De La RT-qPCR

PloS One. 2012  |  Pubmed ID: 23071657

Les patrons d'expression spatio-temporelle de microARN (miARN) sont importants pour la vérification de leur fonction prévue. RT-qPCR est la technique acceptée pour la quantification des miRNA expression ; Cependant, épingle RT-PCR et poly (T)-test de l'adaptateur, les deux méthodes le plus souvent utilisés, ne sont pas très commode dans la pratique et ont une faible spécificité, respectivement.

Analyse Des Multiples Facteurs De Risque De Récidive D'AVC Nondisabling

Journal of the National Medical Association. Jul-Aug, 2012  |  Pubmed ID: 23092047

Récidive d'AVC est l'une des complications graves d'ischémique transitoire (ait) et accident vasculaire cérébral ischémique mineur (MIS), qui sont collectivement désignées comme AVC nondisabling. Toutefois, l'association entre les facteurs de risque multiples et les nondisabling AVC n'a pas été pleinement étudiée. Ici, nous visait à identifier les facteurs de risque prédicatives TIA et MIS afin d'éviter la récidive d'AVC nondisabling.

L'idée D'un Nouveau Gène De La Surdité : Un Grand Non-syndromique Chinois Plaidoirie Famille Perte Liée Au DFNA4

Journal of Genetics and Genomics = Yi Chuan Xue Bao. Dec, 2012  |  Pubmed ID: 23273769

Bases Génétiques De La Déficience Auditive Liée à Y

American Journal of Human Genetics. Feb, 2013  |  Pubmed ID: 23352258

Un seul caractère mendélien a été localisé sur le chromosome Y humain : déficience auditive liée à Y. On ne connaît pas la base moléculaire de ce trouble. Ici, nous rapportons la caractérisation détaillée du chromosome Y de DFNY1 et sa comparaison avec un chromosome Y étroitement lié d'une branche pas affecté de la famille. Le chromosome DFNY1 porte un réarrangement complex, notamment le dédoublement de plusieurs segments non contigus du chromosome Y et l'insertion de ∼160 kb d'ADN du chromosome 1, dans la région de péricentrique de Yp. Ce segment du chromosome 1 est dérivé entièrement dans un locus de déficience auditive connu, DFNA49. Nous suggérons qu'une troisième copie d'un ou plusieurs gènes du segment partagé du chromosome 1 peut-être être responsable du phénotype de la perte d'audition.

Fabrication Mésenchymateuses Stromales Cellules Pour La Phase I Essais Cliniques

Cytotherapy. Apr, 2013  |  Pubmed ID: 23480951

Cellules stromales mésenchymateuses (CSM) sont les cellules souches multipotentes capables de différencier en adipocytes, les ostéoblastes et les chondroblastes comme sécrétant une vaste gamme de médiateurs solubles. Cela rend potentiellement MSCs importants médiateurs d'une variété d'applications thérapeutiques. Ils sont activement en cours d'évaluation pour fins immunomodulatrices comme graft - versus - host disease et maladie de Crohn maladie ainsi que les applications régénératives tels que les accidents vasculaires cérébraux et insuffisance cardiaque. Nous rapportons notre procédé de génération MSCs cliniques de qualité ainsi que des suggestions recueillies à partir de l'expérience dans notre établissement de bonnes pratiques de fabrication dans la fabrication.

Mise En Culture Sur Gelée Extrait Retards Mesenchymal Stem Cell Sénescence De Wharton Par P53 Et P16INK4a/pRb Pathways

PloS One. 2013  |  Pubmed ID: 23516461

Cellules souches mésenchymateuses (CSM) tenir grand potentiel thérapeutique. Cependant, MSCs subissent une sénescence de réplication au cours du processus d'expansion in vitro. Gelée de Wharton du cordon ombilical humain recèle un grand nombre de MSCs. Dans cette étude, nous avons émis l'hypothèse que Wharton gelée serait bénéfique pour l'expansion in vitro de l'extrait de gelée de MSCs. Wharton (WJEs), qui se compose principalement de la matrice extracellulaire et des cytokines, a été préparée comme substrat du revêtement. MSCs humaines ont été isolées et cultivées sur des plaques de revêtement WJE. Bien que la capacité de prolifération des cellules n'était pas augmentée par WJE dans la culture de la première phase, une croissance en phase tardive culture a été réduite clairement, suggérant que la sénescence réplicative de MSCs a été efficacement ralentie par WJE. Cela a été confirmé par la β-galactosidase coloration et télomères mesures de longueur de MSCs dans la culture de la phase tardive. En outre, la possibilité d'une diminution de la différenciation de MSCs après culture à long terme a été largement améliorée par WJE. Espèces réactives de l'oxygène (ROS), p53 et l'expression de p16INK4a/pRb a augmenté avec le passage. L'analyse au niveau moléculaire a révélé que culture axée sur le WJE supprime efficacement le renforcement de la ROS intracellulaire, p53 et p16INK4a/pRb dans MSCs. Ces données ont démontré que WJE fourni un micro-environnement idéal pour MSCs culture expansion in vitro préservée MSC propriétés en retardant la sénescence MSCs et a permis un grand nombre de MSCs à obtenir pour la recherche fondamentale et cliniques thérapies.