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Articles by Yana Izenshtein in JoVE

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N -连接糖链的糖蛋白在哺乳动物细胞中的脉冲大通分析


JoVE 1899 4/27/2010

Department of Cell Research and Immunology, George Wise Faculty of Life Sciences, Tel Aviv University

我们描述了一种通过改变早期的生活后,其在哺乳动物细胞中合成的糖蛋白的N -连接聚糖分析方法。这是通过分析代谢标记聚糖,从糖蛋白和高效液相色谱法检查酶的释放脉冲追逐。

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糖蛋白糖依赖传递到读书的上调 EDEM1 绕道。

N-连低聚糖前体的甘露糖残渣修整是严格要求的糖蛋白内质网 (ER)-相关的退化 (读书)。在本文中,我们展示奇怪的是,过度表达的 ER 退化提高 α-甘露糖苷酶样蛋白 1 (EDEM1) 或其上调由 IRE1,如发生在未折叠的蛋白应答,重写这一要求并呈现不必要 ER 甘露糖苷酶的表达我。此外缺乏碳水化合物识别域大部分 EDEM1 缺失突变体加速读书,送 XTP3 B 和 OS9 的基板。EDEM1 高效表达也加速退化的突变体 nonglycosylated 基板。经蛋白酶体抑制 EDEM1 集中读书底物 pericentriolar ER 派生质量控制室 (ERQC),以及凡呃我和读书机械组件本地化,正如我们在这里,显示包括 OS9 的甘露糖苷酶。我们建议新生的糖蛋白通常可以分开从 EDEM1 和 calnexin 复性周期,由甘露糖修整终止条件可重新读书脱离。高 EDEM1 级别阻止糖蛋白释放和糖的互动不再是必需的取消否则为强制性读书时间修整和加速退化为靶向的甘露。

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