I Neutrofili Sono Indispensabili Per La Mobilizzazione Di Cellule Staminali Ematopoietiche Indotte Da Interleukin-8 Nei Topi

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11983913

Il CXC chemokine interleukin-8 (IL-8/CXCL8) induce la rapida mobilizzazione delle cellule progenitrici ematopoietiche (HPC). In precedenza vi abbiamo mostrato che mobilitazione potrebbe essere evitata completamente nei topi dal pretrattamento con neutralizzando gli anticorpi contro la beta2 integrina LFA-1 (CD11a). Inoltre, HPC murino non esprimono LFA-1, che indica che la mobilitazione richiede una popolazione di cellule accessorio. Qui vi mostriamo che le cellule polimorfonucleate (PMN) servono come regolatori chiave nella mobilitazione di IL-8 indotta HPC. Il ruolo di PMN è stato studiato nei topi restituiti neutropenici con la somministrazione di una singola iniezione di anticorpi antineutrofili. È stata osservata neutropenia assoluta fino a 3-5 giorni con un rimbalzo neutrofilia a giorno 7. La capacità di mobilitazione indotta da IL-8 è stato ridotto in modo significativo durante la fase neutropenica, riapparve con recidiva di PMN ed è stata aumentata proporzionalmente durante la fase neutrofila. Nei topi neutropenici, la capacità di mobilitazione indotta da IL-8 è stata restaurata dall'infusione di PMN purificata, ma non da infusione di cellule mononucleate. Circolanti metalloproteinase gelatinasi B (MMP-9) livelli erano rilevabili solo in neutropenici animali trattati con PMN in combinazione con IL-8, mostrando che in vivo PMN attivati sono necessari per il restauro della mobilitazione. Tuttavia, IL-8 indotta mobilitazione non è stata influenzata in topi deficienti-MMP-9, che indica che la MMP-9 non è indispensabile per la mobilitazione. Questi dati dimostrano che la mobilizzazione indotta da IL-8 dell'HPC richiede l'attivazione in vivo di PMN in circolazione.

Valorizzazione Della Mobilitazione Delle Cellule Staminali Di G-CSF-indotta Dagli Anticorpi Contro La Beta 2 Integrine LFA-1 E Mac-1

Blood. Jul, 2002  |  Pubmed ID: 12070044

Il leucocita integrine beta 2 funzione antigene-1 (LFA-1, CD11a) e macrofagi antigen-1 (Mac-1, CD11b) sono stati segnalati a svolgere un ruolo nell'allegato di cellule CD34(+) cellule stromali del midollo osseo. Quando somministrato prima dell'interleuchina-8 (IL-8), anticorpi anti-LFA-1 impediscono completamente la mobilizzazione di cellule staminali ematopoietiche nei topi IL-8 indotta. Qui, abbiamo studiato il ruolo degli anticorpi dell'integrina anti-beta 2 nel colony-stimulating factor di granulociti (G-CSF)-indotta di mobilizzazione delle cellule progenitrici ematopoietiche. Somministrazione di anticorpi contro la catena alfa del LFA-1 o contro la catena alfa di Mac-1 seguito da iniezioni quotidiane di G-CSF per più di 1 giorno ha portato a un miglioramento significativo della mobilizzazione di cellule progenitrici ematopoietiche quando confrontato con mobilizzazione indotta da solo G-CSF. Inoltre, il numero di fine (giorno 28) acciottolato zona formando cellule in vitro era significativamente più alto dopo mobilizzazione con anticorpi anti-LFA-1 seguito da 5 microg G-CSF per 5 giorni più con G-CSF da solo (119 + /-34 giorni vs 17 + 14 giorni), che indica la mobilizzazione delle cellule staminali di ripopolamento. Pretrattamento con blocco anti-molecola di adesione intercellulare-1 (ICAM-1; CD54), un ligando LFA-1 e Mac-1, non si traducesse in un effetto sulla mobilizzazione indotta da G-CSF, suggerendo che l'effetto di rafforzare necessaria un'interazione tra le integrine beta 2 e uno di loro altri leganti. Valorizzazione di mobilitazione non è stata osservata nei topi carenti LFA-1 (CD11a), che indica che le cellule attivate che esprimono LFA-1 mediano l'effetto sinergico, anziché adesione LFA-1-mediata.

In Vitro Generazione Di Lungo Termine Ripopolamento Di Cellule Staminali Ematopoietiche Da Fibroblast Growth Factor-1

Developmental Cell. Feb, 2003  |  Pubmed ID: 12586067

Il ruolo dei fattori di crescita dei fibroblasti e loro recettori (FGFRs) nella regolazione delle cellule staminali emopoietiche normali è sconosciuto. Qui ci mostrano che, nel midollo osseo di topo, ripopolante a lungo termine le cellule staminali si trovano esclusivamente nella frazione cella FGFR(+). Durante la differenziazione verso progenitori impegnate, cellule staminali mostrano perdita di espressione di FGFR. Prolungata coltura di midollo osseo, cellule in serum-free medium supplementato con solo FGF-1 ha provocate robusta espansione di multilineage, serialmente trapiantabili, a lungo termine ripopolamento di cellule staminali ematopoietiche. Così, abbiamo identificato un metodo semplice per generare grandi numeri di incul rapidamente le cellule staminali che non sono state manipolate geneticamente. I nostri risultati mostrano che le proprietà multipotenziale di cellule staminali sono dipendenti di segnalazione attraverso i recettori FGF e che FGF-1 svolge un ruolo importante nell'omeostasi delle cellule staminali ematopoietiche.

Chemioterapia Prima Del Trapianto Di Midollo Osseo Autologo Altera Attecchimento a Lungo Termine in Topi

Experimental Hematology. Jun, 2003  |  Pubmed ID: 12829029

Trapianto di midollo osseo autologo in pazienti affetti da cancro è spesso preceduto da ripetuti cicli di chemioterapia. In questo studio, abbiamo valutato in un modello del mouse se le cellule staminali sono state colpite dalla chemioterapia preventiva.

Ridotta Mobilizzazione Di Cellule Staminali Nei Topi Ricevono Antibiotici Modulazione Della Flora Intestinale: Coinvolgimento Di Endotossine Come Cofattori in Mobilitazione

Blood. Jan, 2004  |  Pubmed ID: 12969972

Poiché endotossine sono potenti induttori di mobilizzazione delle cellule staminali, abbiamo ipotizzato che la loro presenza nell'intestino può giocare un ruolo nella mobilitazione di cytokine-induced. Per affrontare questa possibilità di che abbiamo aggiunto ciprofloxacina e polimixina B per l'acqua potabile topi Balb/c mobilitato con interleuchina-8 (IL-8), colony-stimulating factor di granulociti (G-CSF) o flt3 ligand (FL). Il rendimento delle formanti unità (CFU) è stato significativamente ridotto in tutti i topi trattati con questi antibiotici rispetto ai controlli (IL-8:192 + 61 vs 290 + 64, P <. 05; G-CSF: 1925 + 1216 vs 3371 + /-1214, P <. 05; FL: 562 + 213 vs 1068 + 528, P <. 05). Il trattamento con ciprofloxacina eliminato solo batteri aerobi Gram-negativi da feci senza effetto sulla mobilitazione. Trattamento di polimixina B non ha risultato in decontaminazione, ma ha ridotto significativamente il numero di cellule progenitrici ematopoietiche mobilitato (HPC) molto probabilmente a causa della capacità legante di endotossina di polimixina B. Più del 90% della flora gastrointestinale è costituito da batteri anaerobici. Eliminazione della flora anaerobica di metronidazolo ha condotto ad un numero significativamente ridotto di HPC mobilitata rispetto ai controlli (IL-8:55 + 66 vs 538 + 216, P <. 05). Germ-free di1 topi ha mostrato una mobilitazione significativamente ridotta rispetto ai loro controlli wild-type (IL-8 controlli: 378 + 182, germe di IL-8 gratis: 157 + /-53, P <. 05). Infine, abbiamo eseguito esperimenti di ricostituzione aggiungendo Escherichia coli-derivato endotossine per l'acqua potabile di topi decontaminati. Ciò ha provocato in parziale restauro della mobilizzazione indotta da IL-8 (67 + 28 vs 190 + 98,1, P <. 01). I nostri risultati indicano che le endotossine servono come cofattori nella mobilitazione di cytokine-induced. Modifica del tenore endotossine da trattamento antibiotico può influenzare il rendimento del cytokine-induced mobilitazione.

L'equilibrio Tra La Soppressione Immunitaria, L'ablazione Delle Cellule Staminali, Concorrenza E Attecchimento

Blood. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15033883

Analisi Delle Cellule Staminali: Qualcosa Di Vecchio, Qualcosa Di Nuovo, Qualcosa in Prestito

Stem Cells (Dayton, Ohio). 2004  |  Pubmed ID: 15579638

Numerosi saggi esistano che misurano la funzione delle cellule staminali. In questo articolo esaminiamo in dettaglio la storia e il futuro dei dosaggi di cellule staminali già esistenti. Cellule staminali ematopoietiche (HSCs) sono storicamente la più ben studiata, ma nuovi sviluppi nella ricerca sulle cellule staminali, tra cui l'attestazione della plasticità delle cellule staminali, hanno causato controversie relative a questioni tecniche, come pure alla semantica. Ricerca della cellula formativa richiede definizioni corrette e utilizzazione delle cellule staminali dosaggi, soprattutto perché la ricerca sul non-HSCs che dosaggi di solido sulle cellule staminali, la mancanza è in rapida evoluzione. Queste emergenti campi possono trarre beneficio da ciò che è stato appreso da HSC dosaggi: più importante, che il vero potenziale delle cellule staminali può essere valutato solo a posteriori. Ciò si riferisce anche ai nuovi sviluppi nella ricerca HSC, quando limitando il numero di in manipolato in vitro le cellule staminali vengono trapiantate. I risultati più contrastanti si verificano quando le cellule esprimono caratteristiche delle cellule staminali in un saggio, ma non in un altro. Noi dovremmo regolare la nostra definizione di una cellula staminale? Se è così, quando si decide un'attestazione di attività delle cellule staminali per essere giustificato? Si consiglia pertanto utilizzando più saggi sulle cellule staminali, preferibilmente almeno un test in vivo. Questi dosaggi dovrebbero misurare la funzionalità della popolazione putativo della cellula formativa.

Alterato Funzionamento Di Cellule Staminali Ematopoietiche Dopo Trapianto Seriale E Durante Il Normale Invecchiamento

Stem Cells (Dayton, Ohio). 2005  |  Pubmed ID: 15625125

Le cellule staminali somatiche adulte possiedono ampie capacità di auto-rinnovamento, come il loro ruolo primario è quello di ricostituire i tessuti invecchiati e funzionalmente compromessa. In precedenza abbiamo dimostrato che il pool di cellule staminali nei topi DBA/2 (D2) di breve durata è ridotto durante l'invecchiamento, in contrasto con la longevi topi C57BL/6 (B6). Ciò suggerisce l'esistenza di un orologio mitotico geneticamente determinato operanti in cellule staminali, che probabilmente limita organismal invecchiamento. Nello studio riportato qui, le celle non frazionata del midollo osseo (BM) o Lin(-)Sca-1(+)c-kit(+) (TSS) altamente purificato in serie sono stati trapiantati in topi irradiati lethally D2 e B6. In entrambi i ceppi, trapianto seriale ha provocato una perdita sostanziale dell'attività delle cellule staminali. Tuttavia, come si stima che nei topi B6, il numero massimo di raddoppi di popolazione di cellule primitive è circa 30, D2 topi in solo circa 20, risultante in una 1,000-fold differenza di espansione potenziale, indipendentemente dal fatto se l'intero midollo osseo o purificate le cellule staminali ematopoietiche (HSCs) sono state trapiantate. È interessante notare che, i destinatari ricostituiti con cellule BM serialmente trapiantate erano in grado di accettare un innesto appena isolato senza alcun ulteriore condizionamento. Infine, vi mostriamo che considerando che il trapianto di BM cells in giovani sani, nonconditioned, B6 destinatari non conducono all'attecchimento, giovani cellule BM Raft e fornire multilineare ricostituzione nei topi di età nonirradiated. I nostri dati stabiliscono chiaramente la rilevanza di un programma intrinseco, geneticamente controllato associato con compromissione delle cellule staminali funzionamento durante l'invecchiamento.

Attivazione Immunitaria Modula Ematopoiesi Attraverso Interazioni Tra CD27 E CD70

Nature Immunology. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15723067

La differenziazione delle cellule staminali ematopoietiche in lignaggi maturi delle cellule del sangue è strettamente regolamentata. Qui riportiamo che CD27, che è espresso sulle staminali e cellule progenitrici precoce nel midollo osseo, può essere importante in questo processo. Eliminazione di CD27 aumentato il potenziale formanti mieloide del gambo e presto le cellule progenitrici e migliorato la capacità di reconstitutive linfoide B in esperimenti di trapianto competitivo. Al contrario, la stimolazione di cellule progenitrici CD27(+) con CD70, l'unico legante per CD27, inibito formanti potenziale in vitro ed escrescenza dei linfociti in vivo. CD70 è espresso soltanto sulle cellule immunitarie attivate, suggeriamo che CD27 innescando su cellule progenitrici primi fornisce un segnale di feedback negativo alla differenziazione dei leucociti durante l'attivazione immunitaria.

Identificazione Di Loci Quantitative Trait Regolazione Parametri Ematopoietica Nei Topi B6AKRF2

British Journal of Haematology. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16371023

Il sistema ematopoietica è un tessuto complesso organizzato con una struttura gerarchica. Identificazione di percorsi organizzativi all'interno del sistema ematopoietica è rilevante per una migliore comprensione dell'emopoiesi nella salute e nella malattia. Noi abbiamo analizzato numerosi parametri ematopoietica in due pannelli di un totale di 157 geneticamente distinti B6AKRF2 topi, derivata da un re tra AKR e C57Bl/6 topi, ceppi noti differiscono in vari tratti delle cellule staminali. L'obiettivo principale del nostro studio era di valutare la misura in cui vari parametri ematopoietica, quali numeri di cellule staminali, cellule progenitrici in bicicletta, sono coregulated progenitor cell numeri di mobilitazione e neutrofili nel sangue e midollo osseo. I genotipi di questi topi sono stati utilizzati per la ricerca di loci genetici che regolano questi parametri. Abbiamo trovato loci significativo tratto quantitativo (QTL) associati al numero di cellule staminali (CAFC-35) nel midollo osseo e il numero dei neutrofili nel sangue. Tuttavia, la maggior parte dei parametri ematopoietica sembravano essere controllato da fattori non ereditari (epigenetici), o da più QTL. Il nostro studio rivela vistose differenze nella struttura della gerarchia ematopoietica tra singoli topi. Sorprendentemente, dimensioni del pool di cellule staminali e progenitrici e tasso di proliferazione, così come conta delle cellule del sangue periferico è regolamentati tutti indipendentemente.

Serpina1 è Un Potente Inibitore Della Mobilitazione Di IL-8-indotta Delle Cellule Staminali Ematopoietiche

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16432201

Qui, segnaliamo che indotta da citochine (granulociti colony-stimulating factor e IL-8) cellule staminali ematopoietiche (HSC) e mobilizzazione (HPC) cellule progenitrici ematopoietiche è completamente inibito dopo irradiazione total-body di basse dosi (0,5 Gy) (TBI). Perché neutrofilo proteasi granulare sono mediatori normativi nella mobilitazione di cytokine-induced HSC/HPC, abbiamo considerato un possibile ruolo degli inibitori di proteasi nell'induzione della mobilitazione HSC/HPC. Midollo osseo (BM) extracellulari estratti che sono stati ottenuti da femori murini dopo 0,5 Gy di TBI conteneva un inibitore dell'elastasi. Inoltre, dopo la basso-dose TBI, entrambi concentrazioni di mRNA e proteina Serpina1 sono state aumentate negli estratti di BM, confrontati con gli estratti che sono stati ottenuti da controlli. L'attività inibitoria in estratti di BM di topi irradiati è stato invertito tramite l'aggiunta di un Ab diretto contro Serpina1. Per studiare ulteriormente un possibile ruolo in vivo di Serpina1 nella mobilitazione HSC/HPC, abbiamo somministrato Serpina1 prima iniezione di IL-8. Questa amministrazione ha determinato un'inibizione quasi completa della mobilitazione HSC/HPC, mentre Serpina1 inattivati a caldo non aveva alcun effetto. Questi risultati indicano che la basso-dose TBI inibisce la mobilizzazione di cytokine-induced HSC/HPC e induce Serpina1 il BM. Perché la somministrazione esogena di Serpina1 inibisce la mobilizzazione, proponiamo che Serpina1 indotta da radiazioni è responsabile per l'inibizione della mobilizzazione HSC/HPC. Inoltre, ipotizziamo che mobilizzazione HSC/HPC cytokine-indotta è determinata da un equilibrio critico tra serina proteasi e inibitori della proteasi Serina.

Fibroblast Growth Factor-1 E -2 Conservare Capacità Ripopolante a Lungo Termine Di Cellule Staminali Ematopoietiche in Serum-free Culture

Stem Cells (Dayton, Ohio). Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16527900

In questo studio dimostriamo che estesa cultura del midollo osseo di topo non frazionata cellule (BM), in mezzo senza siero, completata solo con fattore di crescita dei fibroblasti (FGF) -1, FGF-2, o FGF-1 + 2 preserva a lungo termine ripopolamento di cellule staminali ematopoietiche (HSCs). Utilizzando dosaggi di ripopolamento competitivo, alti livelli di attività delle cellule staminali erano rilevabili a 1, 3 e 5 settimane dopo l'avvio della cultura. FGFs come fattori di crescita singoli non è riusciti a sostenere colture di cellule Lin(-)Sca-1(+)c-Kit(+)(LSK) altamente purificate. Tuttavia, cocultures delle cellule CD45.1 LSK purificate con cellule BM CD45.2 intere fornito livelli elevati di chimerismo CD45.1 dopo trapianto, mostrando che l'attività HSC originato da cellule LSK. Successivamente, abbiamo testato il ricostituzione potenziale delle cellule coltivate in FGF-1 + 2 con l'aggiunta di inizio effetto stimolatorio molecole, stem cell factor, interleuchina-11 + Flt3 ligand. L'aggiunta di questi fattori di crescita ha provocato una forte risposta mitogeni, inducendo la differenziazione rapida e quindi completamente l'override di conservazione delle cellule staminali FGF-dipendente. Importante, anche se l'attività HSC è in genere rapidamente perso dopo coltura a breve termine in vitro, nostro attuale protocollo ci permette sostenere il potenziale di ripopolazione delle cellule staminali per periodi fino a 5 settimane.

Un Ruolo Limitato Per P21Cip1/Waf1 Nel Mantenimento Delle Cellule Staminali Emopoietiche Normale Funzionamento

Stem Cells (Dayton, Ohio). Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17170062

Diversi studi hanno suggerito che la p21 inibitore della chinasi ciclina-dipendenti (CDK) svolge un ruolo cruciale nella regolazione della dimensione del pool staminali e progenitrici ematopoietiche. Per consentire la valutazione del funzionamento delle cellule staminali a lungo termine in vivo, che noi abbiamo creare un allele null p21 a topi C57BL/6 (B6), i più comunemente usati ceppo mouse nella ricerca sulle cellule staminali ematopoietiche. In vari saggi in vitro, la delezione omozigote dell'allele p21 non ha interessato il numero di cellule ematopoietiche nei topi B6. Inoltre, la capacità competitiva di ripopolamento non era diversa tra cellule staminali p21-carenti e selvaggio-tipo da topi (20 mesi) sia giovani che anziani. Questi risultati mostrano che p21 non è essenziale per la regolazione del numero di cellule staminali in regime stazionario. Quando lo stress proliferativo è stato applicato sulle cellule staminali p21-carenti da seriale trapianto di cellule Lin(-)Sca-1(+)c-kit(+) (TSS) 1.500, ancora nessun effetto dannoso era osservato sulla frequenza di cella (CAFC) zona formando acciottolato e ripopolare la capacità competitiva. Tuttavia, quando le cellule del midollo osseo di topi che hanno ricevuto 2 Gy di irradiazione sono state trapiantate, p21 deficit ha provocato una riduzione più che quadruplicata in indice di ripopolamento competitivo. Infine, non abbiamo trovato grandi differenze nello stato del ciclo cellulare e genica globale pattern di espressione tra cellule LSK da topi p21-carenti e wild-type. I nostri risultati indicano che il background dei topi utilizzati per studiare la funzione di un gene di modificazione genetica può determinare il risultato. Cumulativamente, i nostri dati non riescono a sostenere il concetto che p21 è essenziale per la funzione delle cellule staminali durante ematopoiesi stazionario, ma può essere relativamente più importante in condizioni di stress cellulare.

Mobilizzazione Delle Cellule Staminali E Progenitrici Ematopoietiche Nei Topi

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2008  |  Pubmed ID: 18370290

Modelli animali hanno aggiunto in modo significativo alla nostra comprensione dei meccanismi comprendono di staminali ematopoietiche e mobilizzazione (HSPC) cellule progenitrici. Tali modelli suggeriscono che i cambiamenti nell'interazione tra il HSPC ed ematopoietica microenvironmental 'nicchia' (componenti cellulari ed extracellulari) sono fondamentali per il processo. La crescente disponibilità di proteine ricombinanti (fattori di crescita, citochine, chemiochine), anticorpi, farmaci (agonisti ed antagonisti) e animali geneticamente modificati e mutanti modelli [gene knock-in (KI) e knock-out (KO)] continuano ad aggiungere agli strumenti disponibili per meglio comprendere e manipolare i processi di mobilitazione.

Saggi in Vitro Per Ciottoli Che Formano Zona Celle, LTC-IC E CFU-C

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2008  |  Pubmed ID: 18370297

Vari dosaggi esistono che misura la funzione di stemcells ematopoietiche (HSCs). In questo capitolo, saggi in vitro sono descritti che misura la frequenza di progenitori (unità formanti colonia in cultura; CFU-C), le cellule staminali (cellule avvio di cultura a lungo termine; LTC-IC), o entrambi (analisi delle cellule che formano zona acciottolato; CAFC). Questi dosaggi misurano il potenziale di una popolazione cellulare prova a posteriori, cioè, al momento la sua attività è evidente quando la cellula formativa stessa spesso non è più rilevabile. Sebbene la LTC-IC in vitro e CAFC dosaggi hanno dimostrati di correlare con attività in vivo, dosaggi di trapianto in vivo, dove si può dimostrare che le cellule possiedono la capacità di ripopolare a tempo indeterminato tutti i lignaggi di sangue, sono la prova definitiva per l'attività HSC. Tuttavia, questi saggi in vitro forniscono un metodo eccellente per schermo per l'attività delle cellule staminali di una popolazione di cellule staminali putativo o l'effetto di un determinato trattamento su HSCs di screening.

Cellule Staminali Ematopoietiche Quiescenza: Ancora Un Altro Ruolo Di P53

Cell Stem Cell. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19128788

p53, a volte indicato come il "guardiano del genoma," aiuta a regola la senescenza, riparazione danni del DNA, apoptosi e arresto del ciclo cellulare. Aggiungendo a questa lista, in questo numero di Cell Stem Cell, Liu et al (2009) mostrano che p53 inoltre svolge un ruolo nella regolazione ematopoietiche staminali quiescenza cellulare.

Isolamento E Caratterizzazione Di Cellule Delle Ghiandole Salivari Umane Per Trapianto Di Cellule Staminali Per Ridurre Hyposalivation Indotta Da Radiazioni

Radiotherapy and Oncology : Journal of the European Society for Therapeutic Radiology and Oncology. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19625095

Recentemente, abbiamo dimostrato che il trapianto di 100-300 c-Kit(+) cellule staminali isolate da salispheres colta migliora danni da radiazione nelle ghiandole salivari murine. Lo scopo di questo studio è quello di ottimizzare e tradurre queste scoperte dai topi all'uomo.

Attecchimento Del Midollo Osseo Carlo Non è Più Efficiente Dopo Trapianto Intrafemoral Che Dopo Somministrazione Endovenosa Tradizionale

Experimental Hematology. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20643182

Cellule staminali ematopoietiche sono elementi chiave per la produzione di tutta la vita delle cellule mature del sangue. Il successo del trapianto di cellule staminali clinica può essere migliorato quando il numero di cellule staminali che Raft dopo il trapianto può essere aumentato. Qui, abbiamo indagato in un modello murino di Carlo se attecchimento e ricostituzione può essere migliorate da trapianto direttamente nel midollo osseo.

BMI1 Collabora Con BCR-ABL in Leucemici Trasformazione Delle Cellule Umane CD34 +

Blood. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20724541

La limitazione principale per lo sviluppo di terapie antitumorali curativo è stata incompleta comprensione dei meccanismi molecolari alla guida di progressione del cancro. Modelli umani per studiare lo sviluppo e la progressione della leucemia mieloide cronica (CML) non sono state stabilite. Qui, ci mostra che BMI1 collabora con BCR-ABL a indurre una leucemia fatale nei topi nonobese diabetico/grave immunodeficienza combinata trapiantati con cellule trasdotte di CD34(+) umane entro 4-5 mesi. Le leucemie sono trapiantabili in destinatari secondari con una latenza ridotta di 8-12 settimane. Analisi clonale ha rivelato che simili cloni avviato leucemia nei topi primari e secondari. In vivo, la trasformazione è stata sbilanciata verso una crisi blastica linfoide, e colture in vitro, mieloide, nonché linfoidi a lungo termine, autorinnovabile ha potevano essere stabiliti. Retrovirale introduzione di BMI1 in cellule primarie di CD34(+) fase cronica nei pazienti CML elevata loro capacità proliferativa e le proprietà di auto-rinnovamento. Così, i nostri dati per identificare BMI1 come un potenziale target terapeutico in CML.

Rigenerazione Delle Ghiandole Salivari Irradiate Con Marcatore Delle Cellule Staminali Che Esprimono Le Cellule

Radiotherapy and Oncology : Journal of the European Society for Therapeutic Radiology and Oncology. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21719134

Terapia della cellula formativa potrebbe essere un modo potenziale per ridurre hyposalivation indotta da radiazioni e migliorare la qualità della vita. Tuttavia, l'identificazione e la purificazione delle cellule staminali delle ghiandole salivari sono non stati compiuti. Questo studio mira a meglio caratterizzare la popolazione di cellule staminali/progenitrici con potenziale rigenerativo che risiedono nella ghiandola salivare del mouse.

Schermo Genetico Identifica MicroRNA Cluster 99b/let-7e/125a Come Regolatore Delle Cellule Ematopoietiche Primitive

Blood. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22123844

Tratti (HSPC) di cellule staminali emopoietiche/progenitrici differiscono tra i ceppi di topo geneticamente distinte. Per esempio, mouse DBA/2 hanno una maggiore frequenza HSPC rispetto ai topi C57BL/6. Abbiamo eseguito una schermata genetica per micro-RNA differenzialmente espressi tra LSK, LS(-)K(+), eritroide e mieloide cellule isolate da topi C57BL/6 e DBA/2. Questa analisi identificato 131 micro-RNA che era differenzialmente espressi tra i tipi di cella e 15 che erano differenzialmente espressi tra ceppi di topo. Di particolare interesse era un ammasso di miR conservata evolutiva situato sul cromosoma 17 che consiste di miR-99b, let-7e e miR-125a. Tutti i membri del cluster erano più altamente espressa in LSKs e down-regolamentati sulla differenziazione. Inoltre, questi microRNA era più alto espresso nelle cellule DBA/2 confrontato con C57BL/6 celle e quindi correlato con frequenza HSPC. Per caratterizzare funzionalmente questi microRNA, abbiamo overexpressed l'intero cluster miR 99b/let-7e/125a e miR-125a solo nelle cellule BM da topi C57BL/6. Sovraespressione della miR-cluster o miR-125a drammaticamente aumentata attività CAFC giorno-35 e causato gravi fenotipi ematopoietici al trapianto. Abbiamo dimostrato che un singolo membro del cluster miR-, vale a dire miR-125a, è responsabile per la maggior parte degli effetti osservati del cluster miR sovraespressione. Infine, abbiamo eseguito matrici di espressione genica di genome-wide e identificati geni bersaglio attraverso cui miR-125a può modulare destino HSPC.

La Combinazione Di Acido Valproico E Litio Ritarda La Differenziazione Delle Cellule Staminali/progenitrici Ematopoietiche

Blood. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22327222

Nonostante la crescente conoscenza sulla regolamentazione delle staminali/progenitrici ematopoietiche cella (HSPC) auto-rinnovamento e differenziazione, controllo in vitro delle decisioni del destino delle cellule staminali è stato difficile. La capacità di inibire impegno HSPC nella cultura può essere di beneficio per protocolli di terapia cellulare. Piccole molecole possono servire come strumenti per manipolare le decisioni del destino delle cellule. Qui, abbiamo testato due piccole molecole, acido valproico (VPA) e litio (Li) per inibire la differenziazione. HSPCs esposti al VPA e Li durante la cultura che inducono differenziazione conservato un fenotipo delle cellule immature, fornito di radioprotezione a destinatari lethally irradiati e maggiore potenziale ripopolante in vivo. Anti-Differentiation effetti di VPA e Li sono stati osservati anche a livello dei progenitori impegnate, dove VPA riattivato attività replating delle cellule CMP e GMP. Inoltre, VPA e Li sinergicamente conservata espressione di geni correlati a cellule staminali e represso geni coinvolti nella differenziazione. Geni bersaglio erano collettivamente co durante la normale differenziazione ematopoietiche. Inoltre, reti di fattore di trascrizione sono stati identificati come possibili regolatori primari. I nostri risultati dimostrano che la combinazione di VPA e Li potentemente ritarda la differenziazione a livello molecolare e il biologico e presentare le prove che suggeriscono che lo screening combinatorio di composti chimici può scoprire possibili effetti sinergici/additivi per modulare le decisioni del destino delle cellule staminali.