Neutrófilos Son Indispensables Para La Movilización De Células Madre Hematopoyéticas Inducida Por Interleucina-8 En Ratones

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11983913

El CXC quimioquinas Interleucina-8 (IL-8/CXCL8) induce la rápida movilización de células progenitoras hematopoyéticas (HPCs). Anteriormente hemos mostrado que movilización podría evitarse completamente en ratones por el tratamiento previo con anticuerpos contra la beta2-integrinas LFA-1 (CD11a) neutralizantes. Además, HPCs murinos no expresa LFA-1, indicando que la movilización requiere una población de células accesorias. Aquí mostramos que células polimorfonucleares (PMN) sirven como reguladores claves en la movilización de HPC inducida por IL-8. El papel de PMNs fue estudiado en ratones prestados neutropénicos por administración de una única inyección de anticuerpos Antineutrófilo. Se observó neutropenia absoluta hasta 3-5 días con una neutrofilia de rebote en el día 7. La capacidad de movilización inducida por IL-8 se redujo significativamente durante la fase neutropénica, reapareció con la repetición de los PMNs y aumentó proporcionalmente la fase neutrofílica. En ratones neutropénicos, la capacidad de movilización inducida por IL-8 fue restaurada por la infusión de PMNs purificados pero no por la infusión de células mononucleares. Circulación Metaloproteinasa gelatinasa B (MMP-9) los niveles eran perceptibles solamente en neutropénicos animales tratados con PMNs en combinación con la IL-8, mostrando que PMN activado in vivo es necesario para la restauración de la movilización. Sin embargo, IL-8-inducida de la movilización no fue afectada en ratones deficientes MMP-9, indicando que el MMP-9 no es indispensable para la movilización. Estos datos demuestran que la movilización inducida por IL-8 de HPCs requiere la activación in vivo de PMNs de circulación.

Mejora De La Movilización De Células Madre De G-CSF-inducida Por Anticuerpos Contra La Beta 2 Integrinas LFA-1 Y Mac-1

Blood. Jul, 2002  |  Pubmed ID: 12070044

El leucocito de integrinas beta 2 función de antígeno-1 (LFA-1, CD11a) y antígeno de macrófago-1 (Mac-1, CD11b) se han divulgado para desempeñar un papel en la fijación de las células CD34(+) a las células estromales de la médula ósea. Cuando se administra antes de la interleucina-8 (IL-8), anticuerpos anti-LFA-1 prevenir totalmente la movilización de IL-8-inducida de células madre hematopoyéticas en ratones. Aquí, hemos estudiado el papel de anticuerpos anti-beta 2 integrina factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF)-inducida de la movilización de células progenitoras hematopoyéticas. Administración de anticuerpos contra la cadena alfa de LFA-1 o contra la cadena alfa de Mac-1 seguida de inyecciones diarias de G-CSF durante más de 1 día dio lugar a una mejora significativa de la movilización de células progenitoras hematopoyéticas en comparación con movilización inducida por el G-CSF sólo. Además, el número de finales (día 28) guijarro área células in vitro fue significativamente mayor después de la movilización con anticuerpos anti-LFA-1 seguido por 5 microg G-CSF durante 5 días que con G-CSF sólo (119 +/-34 días contra 17 +/-14 días), indicando la movilización de repoblación de las células madre. Tratamiento previo con anticuerpos contra bloqueo molécula 1 de adhesión intercelular (ICAM-1; CD54), un ligando de LFA-1 y Mac-1, no produjo un efecto en la movilización de G-CSF-inducida, sugiriendo que el efecto de mejorar requiere una interacción de las integrinas beta 2 y uno de sus otros ligandos. No se observó mejora de movilización en ratones de LFA-1-deficientes (CD11a), indicando que las células activadas expresando LFA-1 median el efecto sinérgico, en lugar de adhesión LFA-1-mediada.

Generación in Vitro De Células De Vástago Hematopoyéticas Repoblamiento a Largo Plazo Por Fibroblast Growth Factor-1

Developmental Cell. Feb, 2003  |  Pubmed ID: 12586067

Se desconoce el papel de factores de crecimiento del fibroblasto y sus receptores (FGFRs) en la regulación de las células madre hematopoyéticas normales. Aquí se muestra que, en la médula ósea de ratón, a largo plazo de las células de vástago repoblamiento se encuentran exclusivamente en la fracción FGFR(+) de la célula. Durante la diferenciación hacia progenitores comprometidos, células muestran pérdida de expresión de FGFR. Prolongar el cultivo de células en medio libre de suero suplementado con sólo FGF-1 dio lugar a la robusta expansión del multilineage, transplantable en serie, a largo plazo repoblación de las células madre hematopoyéticas de la médula. Así, hemos identificado un simple método para generar grandes cantidades de engrafting rápidamente las células madre que no han sido manipuladas genéticamente. Nuestros resultados muestran que las propiedades multipotential de células madre depende de señalización a través de receptores FGF y que FGF-1 juega un papel importante en la homeostasis de células madre hematopoyéticas.

Quimioterapia Antes Del Trasplante De Médula ósea Autóloga Deteriora Injerto a Largo Plazo En Ratones

Experimental Hematology. Jun, 2003  |  Pubmed ID: 12829029

Trasplante de médula ósea autóloga en pacientes con cáncer a menudo va precedido de múltiples ciclos de quimioterapia. En este estudio, se evaluó en un modelo de ratón si las células madre fueron afectadas por la quimioterapia previa.

Reduce La Movilización De Células Madre En Los Ratones Que Recibieron Antibiótico Modulación De La Flora Intestinal: Participación De Endotoxinas Como Cofactores En La Movilización

Blood. Jan, 2004  |  Pubmed ID: 12969972

Puesto que las endotoxinas son potentes inductores de la movilización de células madre, la hipótesis de que su presencia en el intestino puede desempeñar un papel en la movilización de cytokine-inducida. Para hacer frente a esta posibilidad, de que hemos añadido la ciprofloxacina y la polimixina B para el agua potable ratones Balb/c se movilizan con interleucina-8 (IL-8), factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) o ligando flt3 (FL). El rendimiento de la formación de colonias unidades de (colonias UFC) se redujo significativamente en todos los ratones tratados con estos antibióticos en comparación con controles (IL-8: 192 +/-61 contra 290 + /-64, P <. 05; G-CSF: 1925 + /-1216 vs 3371 + /-1214, P <. 05; FL: 562 +/-213 contra 1068 +/-528, P <. 05). Tratamiento con ciprofloxacina había eliminado sólo bacterias aerobias gramnegativas de las heces sin efecto sobre la movilización. Polimixina B tratamiento no produjo en descontaminación pero redujo significativamente el número de células progenitoras hematopoyéticas movilizados (HPCs) muy probablemente debido a la capacidad de unión de la endotoxina de polimixina B. Más del 90% de la flora gastrointestinal consiste de bacterias anaerobias. Eliminación de la flora anaerobia por metronidazol condujo a un número significativamente menor de HPCs movilizados en comparación con controles (IL-8: 55 +/-66 contra 538 +/-216, P <. 05). Libre de gérmenes OF1 ratones mostraron una movilización significativamente reducida en comparación con sus controles de tipo salvaje (IL-8 controles: 378 + /-182, germen de la IL-8 gratis: 157 +-53, P <. 05). Finalmente, se realizaron experimentos de reconstitución agregando Escherichia coli derivados endotoxinas al agua potable de ratones descontaminados. Esto dio lugar a una restauración parcial de la movilización inducida por IL-8 (67 + /-28 contra 190 +/-98.1, P <. 01). Nuestros resultados indican que endotoxinas servir como cofactores en movilización cytokine-inducida. Modificación de los contenidos de la endotoxina por el tratamiento antibiótico puede afectar el rendimiento de cytokine-inducida de la movilización.

El Equilibrio Entre La Inmunosupresión, La Ablación De Células Madre, Competencia Y Engraftment

Blood. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15033883

Análisis De La Célula De Vástago: Algo Viejo, Algo Nuevo, Algo Prestado

Stem Cells (Dayton, Ohio). 2004  |  Pubmed ID: 15579638

Numerosos ensayos hay que medir la función de las células madre. En este artículo, se revisan detalladamente la historia y el futuro de ensayos existentes de células madre. Las células madre hematopoyéticas (HSCs) son históricamente los más estudiados, pero nuevos avances en la investigación con células madre, incluyendo la demanda de la plasticidad de la célula de vástago, han causado controversias relacionado con cuestiones técnicas, así como a la semántica. Investigación con células madre requiere definiciones adecuadas y utilización de células madre ensayos, especialmente desde la investigación sobre no-HSCs que carecen de ensayos de la célula de vástago sólido, está evolucionando rápidamente. Estos campos de emergentes pueden beneficiarse de lo que se ha aprendido de HSC ensayos: más importante, que el verdadero potencial de las células madre sólo puede ser evaluado de forma retroactiva. Esto también se refiere a los avances en la investigación HSC, al limitar el número de en células manipulados por vitro se trasplantan. Los resultados más conflictivos ocurren cuando las células expresan características de células madre en un ensayo pero no en otro. ¿Debemos ajustar nuestra definición de una célula madre? ¿Si es así, Cuándo decidimos en un reclamo de la actividad de la célula de vástago para justificarse? Por lo tanto recomendamos el uso de múltiples ensayos de células madre, preferentemente al menos un ensayo in vivo. Estos ensayos deben medir la funcionalidad de la población de la supuesta célula de vástago.

Problemas De Funcionamiento De Células Madre Hematopoyéticas Después Del Trasplante Del Serial Y Durante El Envejecimiento Normal

Stem Cells (Dayton, Ohio). 2005  |  Pubmed ID: 15625125

Las células madre somáticas adultas poseen amplia capacidad de autorrenovación, como su función principal es reponer los tejidos envejecidos y funcionalmente deteriorados. Previamente hemos demostrado que la piscina de células madre en breve ratones DBA/2 (D2) se reduce durante el envejecimiento, en contraste con el duraderos ratones C57BL/6 (B6). Esto sugiere la existencia de un reloj mitótico genéticamente determinada en células madre, que posiblemente limita el envejecimiento del organismo. En el estudio divulgado aquí, las células de la médula no fraccionada (BM) o altamente purificada de las células Lin(-)Sca-1(+)c-kit(+) (LSK) fueron trasplantadas en serie en ratones D2 y B6 letalmente irradiados. En ambas cepas, trasplante serial resultó en una pérdida sustancial de la actividad de la célula de vástago. Sin embargo, como se estima que en los ratones de B6, el número máximo de doblajes de la población de células primitivas es aproximadamente 30, en D2 ratones esto sólo es aproximadamente 20, dando por resultado una 1,000-fold diferencia en expansión potencial, independientemente de si toda la médula ósea o purificadas células madre hematopoyéticas (HSCs) fueron trasplantadas. Curiosamente, destinatarios reconstituidos con células en serie trasplantadas del BM eran capaces de aceptar un injerto recién aislado sin ningún condicionamiento más. Finalmente, demostramos que mientras que el trasplante de BM células en jóvenes sanos, nonconditioned, B6 destinatarios no conduce al injerto, las células jóvenes de BM engraft y proporcionar la reconstitución del multilineage en ratones de edad evidenciándose. Nuestros datos establecen claramente la importancia de un programa intrínseco, controlado genéticamente asociado con terapia celular deteriorada funcionamiento durante el envejecimiento.

Hematopoyesis a Través De Interacciones Entre CD27 Y CD70 Modula La Activación Inmune

Nature Immunology. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15723067

La diferenciación de células madre hematopoyéticas en linajes de células maduras de la sangre es estrictamente regulada. Aquí divulgamos que CD27, que se expresa en tallo y temprana células progenitoras de médula ósea, puede ser importante en este proceso. Eliminación de CD27 aumentó el potencial de formación de colonias mieloide de tallo y primeras células progenitoras y mayor capacidad linfoide de reconstitutive B, en experimentos de trasplante competitivo. Por el contrario, estimulación de células progenitoras CD27(+) con CD70, el único ligando para CD27, inhibió potencial formadoras de colonias in vitro y consecuencia de linfocitos in vivo. Pues CD70 se expresa sólo en las células inmunes activadas, sugerimos que CD27 disparo en primeras células progenitoras proporciona una señal de retroalimentación negativa a la diferenciación del leucocito durante la activación inmune.

Identificación De Loci De Rasgos Cuantitativos Regulación Hematopoyética Parámetros En Ratones B6AKRF2

British Journal of Haematology. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16371023

El sistema hematopoyético es un complejo tejido organizado con una estructura jerárquica. Identificación de vías de organización dentro del sistema hematopoyético es relevante para una mejor comprensión de la hematopoyesis en salud y enfermedad. Hemos analizado numerosos parámetros hematopoyéticas en dos paneles de un total de 157 ratones genéticamente distintas de B6AKRF2, derivado de un cruzan entre ratones AKR y C57Bl/6, variedades conocidas difieran en varios rasgos de la célula de vástago. El principal objetivo de nuestro estudio fue evaluar la medida en que diversos parámetros hematopoyéticas, tales como números de células madre, células progenitoras ciclismo, número de movilización y neutrófilo de células progenitoras en sangre y médula ósea es coregulated. Los genotipos de estos ratones fueron utilizados para buscar lugares geométricos genéticos que regulan estos parámetros. Encontramos loci de rasgos cuantitativos significativos (QTL) asociados con el número de células madre (CAFC-35) en la médula ósea y el número de neutrófilos en la sangre. Sin embargo, mayoría de parámetros hematopoyéticas parece ser controlados por factores (epigenéticos) no hereditarios, o por múltiples QTLs. Nuestro estudio revela diferencias llamativas en la estructura de la jerarquía hematopoyética entre ratones individuales. Sorprendentemente, tamaño de piscina células madre y progenitoras y tasa de proliferación, así como un recuento sanguíneo periférico se regula todo independientemente.

Serpina1 Es Un Potente Inhibidor De La Movilización De Células Madre Hematopoyéticas Inducida Por IL-8

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16432201

Aquí, Divulgamos que cytokine-inducida (factor estimulante de colonias de granulocitos y IL-8) células madre hematopoyéticas (HSC) y movilización de la célula (HPC) de progenitoras hematopoyéticas se inhibe completamente después de la irradiación total del cuerpo de dosis baja (0.5 Gy) (TBI). Porque neutrófilos granulares proteasas son mediadores reglamentarios en la movilización de HSC/HPC cytokine-inducida, considerábamos un posible papel de los inhibidores de la proteasa en la inducción de la movilización de HSC/HPC. Médula ósea (Mo) extracelulares extractos obtenidos de fémur murino después 0,5 Gy de TBI contenía un inhibidor de la elastasa. También, después de una dosis baja TBI, ambas concentraciones de mRNA y proteína de Serpina1 fueron aumentados en los extractos del BM, en comparación con los extractos obtenidos de los controles. La actividad inhibitoria de extractos de BM de ratones irradiados se revirtió por la adición de un Ab dirigido contra Serpina1. Para profundizar el estudio un posible papel en vivo de Serpina1 en la movilización de HSC/HPC, administramos Serpina1 antes de la inyección de IL-8. Esta administración dio lugar a una casi completa inhibición de movilización de HSC/HPC, mientras que Serpina1 inactivadas por calor no tuvo ningún efecto. Estos resultados indican que dosis bajas TBI inhibe la movilización de HSC/HPC cytokine-inducida e induce Serpina1 en el BM. Porque la administración exógena de Serpina1 inhibe la movilización, proponemos que la Serpina1 inducida por radiación es responsable de la inhibición de la movilización de HSC/HPC. También, presumimos que la movilización de HSC/HPC cytokine-inducida está determinado por un equilibrio crítico entre las proteasas de serina e inhibidores de la proteasa de serina.

Fibroblast Growth Factor-1 Y -2 Preservan La Capacidad a Largo Plazo De Repoblamiento De Células Madre Hematopoyéticas En Culturas Sin Suero

Stem Cells (Dayton, Ohio). Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16527900

En este estudio demostramos que extendida cultura de médula ósea de ratón no fraccionada células (BM), en medio sin suero, complementadas con factor de crecimiento fibroblástico (FGF) -1, FGF-2, o FGF-1 + 2 conserva a largo plazo las células madre hematopoyéticas (HSCs) de repoblación. Usando análisis de repoblación competitivo, altos niveles de actividad de la célula de vástago eran perceptibles en 1, 3 y 5 semanas después de la iniciación de la cultura. FGFs como factores de crecimiento solos ha podido apoyar a cultivos de células de Lin(-)Sca-1(+)c-Kit(+)(LSK) altamente purificadas. Sin embargo, cocultures de células de CD45.1 LSK purificadas con toda BM CD45.2 células proporcionan altos niveles de CD45.1 quimerismo después del trasplante, mostrando esa actividad HSC originada de células LSK. Posteriormente, probamos el potencial reconfiguración de células cultivadas en FGF-1 + 2 con la adición de moléculas estimulantes de actuar temprano, factor de células madre, Interleucina-11 + Flt3 ligando. La adición de estos factores de crecimiento dio lugar a una fuerte respuesta mitogénica, inducir la diferenciación rápida y reemplazar de tal modo totalmente conservación de células madre de FGF-dependiente. Lo importante es que, aunque la actividad HSC normalmente se pierde rápidamente después de cultura a corto plazo in vitro, nuestro protocolo actual nos permite mantener potencial de repoblación de la célula de vástago por períodos de hasta 5 semanas.

Un Papel Limitado Para P21Cip1/Waf1 En Mantener El Funcionamiento Normal De Células Madre Hematopoyéticas

Stem Cells (Dayton, Ohio). Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17170062

Varios estudios han sugerido que la p21 de inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (CDK) desempeña un papel crucial en la regulación del tamaño de piscina madre y progenitoras hematopoyético. Para permitir la evaluación del funcionamiento de la célula de vástago largo plazo in vivo, que nos hemos retrocruzas un alelo nulo p21 ratones C57BL/6 (B6), el más comúnmente usadas cepa de ratón en la investigación de células madre hematopoyéticas. En diversos estudios in vitro, la supresión homocigoto del alelo p21 no afectó el número de células hematopoyéticas en ratones de B6. Además, la capacidad competitiva de la repoblación no fue diferente entre la deficiencia de p21 y salvaje-tipo células madre de los jóvenes y de ratones (20 meses). Estos resultados demuestran que p21 no es esencial para la regulación del número de células madre en estado estacionario. Cuando estrés proliferativo se aplicó en células deficientes p21 por trasplante serial de 1.500 células Lin(-)Sca-1(+)c-kit(+) (LSK), otra vez no perjudican fue observado en frecuencia de la célula (CAFC) área-formación de adoquines y repoblación capacidad competitiva. Sin embargo, cuando se trasplantaron células de médula ósea de los ratones que recibieron 2 Gy de irradiación, p21 deficiencia resultó en una reducción de más de cuatro veces en el índice de repoblación competitivo. Finalmente, no encontramos diferencias importantes en el estado del ciclo celular y génica global patrones de expresión entre las células LSK de ratones deficientes en p21 y salvaje. Nuestros resultados indican que el fondo de los ratones utilizados para estudiar la función de un gen por modificación genética puede determinar el resultado. En conjunto, nuestros datos no apoyan la noción que p21 es esencial para la función de la célula de vástago durante hematopoyesis de estado estacionario, pero puede ser relativamente más importante bajo condiciones de estrés celular.

Movilización De Células Madre Y Progenitoras Hematopoyéticas En Ratones

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2008  |  Pubmed ID: 18370290

Modelos animales han contribuido significativamente a nuestra comprensión de los mecanismos de madre hematopoyética y la movilización de la célula (HSPC) del progenitor. Tales modelos sugieren que los cambios en la interacción entre la HSPC y el microambiental hematopoyético 'nicho' (componentes celulares y extracelulares) son fundamentales para el proceso. La creciente disponibilidad de proteínas recombinantes (factores de crecimiento, citoquinas y quimioquinas), anticuerpos, drogas (agonistas y antagonistas) y animales genéticamente modificados y mutante seguirán modelos [gene knock-in (KI) y knock-out (KO)] para agregar a las herramientas disponibles para mejor comprender y manipular los procesos de movilización.

Ensayos in Vitro De Células Formadoras De Zona De Adoquines, LTC-IC Y UFC-C

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2008  |  Pubmed ID: 18370297

Varios ensayos existen esa medida la función de stemcells hematopoyéticas (HSCs). En este capítulo, se describen ensayos in vitro que miden la frecuencia de los progenitores (formadoras de colonias unidad en la cultura; CFU-C), las células madre (células iniciadoras del cultivo a largo plazo; LTC-IC), o ambos (ensayo de células formadoras de área empedradas; CAFC). Estos ensayos medir el potencial de la población celular retrospectivamente, es decir, en el momento que su actividad es evidente cuando la célula madre ya a menudo no es detectable. Aunque los análisis de CAFC y LTC-IC in vitro han demostrado correlacionar con la actividad in vivo, ensayos in vivo de trasplante, donde se puede demostrar que las células poseen la capacidad de repoblar indefinidamente todos los linajes de sangre, son la prueba definitiva para la actividad HSC. Sin embargo, estos ensayos in vitro proporcionan un método excelente para pantalla para la actividad de la célula de vástago de una población de células de madre putativa o para evaluar el efecto de un tratamiento de HSCs.

Células Madre Hematopoyéticas Quietud: Otro Papel Para P53

Cell Stem Cell. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19128788

p53, a veces se denomina el "guardián del genoma," ayuda a regula la senescencia, reparación de daño de la DNA, apoptosis y detención del ciclo celular. Agregar a esta lista, en este número de célula madre, Liu et al (2009) muestran p53 también juega un papel en la regulación hematopoyética tallo quietud de la célula.

Aislamiento Y Caracterización De Células Humanas De La Glándula Salival Para El Trasplante De Células Madre Reducir Hiposalivación Inducida Por Radiación

Radiotherapy and Oncology : Journal of the European Society for Therapeutic Radiology and Oncology. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19625095

Recientemente, hemos demostrado que el trasplante de células c-Kit(+) 100-300 aislados de salispheres cultivadas mejora el daño de la radiación en las glándulas salivales murinas. El objetivo de este estudio es optimizar y traducir estos resultados de ratones al hombre.

Injerto De Médula Syngeneic No Es Más Eficiente Después Del Trasplante Intrafemoral Que Después De La Administración Intravenosa Tradicional

Experimental Hematology. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20643182

Las células madre hematopoyéticas son elementos claves para la continua producción de células sanguíneas maduras. El éxito del trasplante clínico de células madre podría mejorarse cuando puede aumentarse el número de células madre que engraft después del trasplante. Aquí, hemos investigado en un modelo murino de syngeneic si engraftment y reconstitución pueden mejorarse mediante trasplante directamente en la médula ósea.

BMI1 Colabora Con BCR-ABL En La Transformación Leucémica De Células CD34 + Humanas

Blood. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20724541

La principal limitación para el desarrollo de terapias curativas contra el cáncer ha sido una comprensión incompleta de los mecanismos moleculares que conducir la progresión del cáncer. Modelos humanos para estudiar el desarrollo y progresión de la leucemia mieloide crónica (LMC) no han sido establecidos. A continuación, os mostramos que BMI1 colabora con BCR-ABL en la inducción de una fatal leucemia en ratones nonobese inmunodeficiencia combinada grave diabéticos trasplantados con células CD34(+) humanas transduced dentro de 4 a 5 meses. Las leucemias eran transplantables en recipientes secundarios con una latencia acortada de 8 a 12 semanas. Análisis clonal reveló que los clones similares iniciaron leucemia en ratones primarias y secundarias. In vivo, transformación fue sesgado hacia una crisis blástica linfoide, y se pudieran establecer in vitro, mieloides y linfoides culturas a largo plazo, se renueva a sí misma. Retroviral introducción de BMI1 en células CD34(+) de fase crónica primarias de pacientes con LMC había elevado su capacidad proliferativa y propiedades de auto-renovación. Así, nuestros datos identifican BMI1 como una potencial diana terapéutica en la LMC.

Regeneración De Las Glándulas Salivales Irradiadas Con Marcador De Células Que Expresan Las Células

Radiotherapy and Oncology : Journal of the European Society for Therapeutic Radiology and Oncology. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21719134

Terapia de células madre podría ser una manera potencial para reducir hiposalivación inducida por radiación y mejorar la calidad de vida de la paciente. Sin embargo, la identificación y purificación de células de la glándula salival no se han logrado. Este estudio pretende caracterizar mejor la población de células madre/progenitoras con potencial regenerativo que residen en la glándula salival de ratón.

Pantalla Genética Identifica MicroRNA Racimo 99b/let-7e/125a Como Regulador De Las Células Hematopoyéticas Primitivas

Blood. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22123844

Rasgos (HSPC) de la célula de vástago/progenitoras hematopoyéticas difieren entre cepas de ratón genéticamente distintas. Por ejemplo, ratones DBA/2 tienen una frecuencia más alta de la HSPC en comparación con los ratones C57BL/6. Realizamos una pantalla genética para micro-ARN que se expresa diferencialmente entre LSK, LS(-)K(+), eritroides y células mieloides aisladas de ratones C57BL/6 y DBA/2. Este análisis identificó 131 micro-RNAs que fueron expresados diferencialmente entre tipos de células y 15 que fueron expresados diferencialmente entre cepas de ratón. De especial interés fue un clúster evolutivo miR conservado ubicado en cromosoma 17 que consiste en de miR-99b, let-7e y miR-125a. Todos los miembros del grupo fueron más altamente expresados en LSKs y regula sobre diferenciación. Además, estos microRNAs superior fueron expresados en células DBA/2 en comparación con las células C57BL/6 y así se correlacionó con la frecuencia de la HSPC. Para caracterizar funcionalmente estos microRNAs, sobreexpresa la miR-agrupación entera 99b/let-7e/125a y miR-125a solo en las células del BM de ratones C57BL/6. Sobreexpresión de la miR-cluster o miR-125a dramáticamente día-35 CAFC actividad creciente y causó fenotipos severos hematopoyéticos al trasplante. Demostramos que un solo miembro del miR-cluster, es decir, miR-125a, es responsable de la mayoría de los efectos de la sobreexpresión de clúster miR observados. Finalmente, realizamos matrices de expresión génica del genoma e identificado genes diana de candidato a través del cual miR-125a puede modular el destino de la HSPC.

La Combinación De ácido Valproico Y Litio Retrasa La Diferenciación De Las Células Madre/progenitoras Hematopoyéticas

Blood. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22327222

A pesar de aumentar los conocimientos sobre la regulación de la madre/progenitoras hematopoyéticas celular (HSPC) autorrenovación y diferenciación, control in vitro de células madre sino decisiones ha sido difícil. La capacidad de inhibir el compromiso de la HSPC en la cultura puede ser de beneficio a los protocolos de terapia celular. Pequeñas moléculas pueden servir como herramientas para manipular las decisiones de destino celular. Aquí, probamos dos moléculas pequeñas, ácido valproico (VPA) y litio (Li) para inhibir la diferenciación. HSPCs expuestos a VPA y Li durante la inducción de diferenciación de la cultura conservan un fenotipo de células inmaduras, proporcionado protección radiológica letalmente irradiados destinatarios y mayor potencial de repoblamiento en vivo. Efectos de desdiferenciación de VPA y Li fueron observados también en el nivel de compromiso de progenitores, donde VPA reactivado replating actividad de las células de la CMP y GMP. Además, VPA y Li sinérgicamente conserva la expresión de genes relacionados con la célula de vástago y reprime genes implicados en la diferenciación. Genes diana fueron colectivamente co-regulated durante la diferenciación hematopoyética normal. Además, redes del factor de transcripción se identificaron como posibles reguladores primarios. Nuestros resultados demuestran que la combinación de VPA y Li potentemente retrasa la diferenciación a nivel molecular como el biológico y proporcionar evidencia para sugerir que proyección combinatoria de compuestos químicos puede descubrir posibles efectos aditivos/sinérgico para modular las decisiones de destino de la célula de vástago.