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Angst, M. S., Tingle, M., Phillips, N. G., Carvalho, B. Determining heat and mechanical pain threshold in inflamed skin of human subjects. J. Vis. Exp. (23), e1092, doi:10.3791/1092 (2009).
हीट दर्द Thermostimulator TSA II का प्रयोग कर परीक्षण
1. परिचय
यह प्रक्रिया TSA द्वितीय, एक वाणिज्यिक उपलब्ध थर्मामीटरों संवेदी विश्लेषक है कि एक thermode (MEDOC उन्नत मेडिकल सिस्टम्स, डरहम, नेकां) के साथ त्वचा के लिए गर्मी उत्तेजनाओं उद्धार का उपयोग करता है. एक केंद्रीय इकाई उत्पन्न करता है और पहुंचाता thermode करने के लिए संकेत है. यह संकेत स्वामित्व आमतौर पर एक केंद्रीय इकाई से जुड़े लैपटॉप पर संग्रहित सॉफ्टवेयर के द्वारा नियंत्रित है. इसके अलावा केंद्रीय इकाई से जुड़ा हुआ है हाथ से आयोजित एक नियंत्रण है कि thermode के एक अध्ययन का विषय हीटिंग रोकने के लिए अनुमति देता है.
सात अनुक्रमिक और समान गर्मी उत्तेजनाओं, 30 के अंतर उत्तेजना अंतराल के साथ वितरित कर रहे हैं. बेसल thermode तापमान एक आरामदायक 35 º सी. पर सेट कर दिया जाता है दर है जिस पर thermode गरमा रही है 1 पर सेट है º सी / एस, जबकि दर है जिस पर यह नीचे ठंडा 10 डिग्री सेल्सियस / एस पर सेट है अधिकतम thermode तापमान 52 º सी. पर सेट कर दिया जाता है
2. तैयारी और प्रशिक्षण विषय
गर्मी दर्द उन्हें परीक्षण एक reclining कुर्सी में आराम से सीट है कि सिर, हाथ और पैर के लिए पर्याप्त सहायता प्रदान करता है के लिए विषयों को तैयार करने के लिए. कुर्सी भी जांच शरीर साइटों के लिए आसान पहुँच की अनुमति चाहिए.
परीक्षण सुविधा एक आरामदायक कमरे के तापमान पर होना चाहिए, और कोई व्याकुलता के साथ एक काफी और तटस्थ वातावरण प्रदान करते हैं.
प्रयोग शुरू करने से पहले, सभी प्रतिभागियों को अच्छी तरह से गर्मी दर्द परीक्षण के सभी पहलुओं में प्रशिक्षित किया जाना चाहिए. प्रशिक्षण जगह प्रयोग से पहले किसी भी समय ले सकते हैं.
अध्ययन विषयों और जांचकर्ताओं के बीच सहभागिता डेटा इकट्ठा करने के लिए आवश्यक उन के लिए सीमित होना चाहिए. मज़ाक कर रहा है और छोटी सी बात है क्योंकि वे डेटा स्थिरता समझौता हो सकता है हतोत्साहित कर रहे हैं. अध्ययन विषयों को सूचित किया जाता है कि बातचीत जानबूझकर कुछ हद तक monotonic है और प्रयोगों के दौरान तटस्थ किया जाएगा.
निर्देशों को स्पष्ट, सरल और सुसंगत रखें. जोर कि दर्द व्यक्तिपरक है, और वहाँ कोई सही या गलत जवाब कर रहे हैं. यह सबसे महत्वपूर्ण है के अनुरूप होना. जा रहा है "के बारे में दर्दनाक हो" और के बीच बिंदु के रूप में गर्मी दर्द दहलीज को परिभाषित "बस दर्दनाक बन गया."
यह महत्वपूर्ण है कि एक विषय ठीक से जानता है कि क्या एक परीक्षण सत्र के दौरान उम्मीद के लिए. कोई भी "आश्चर्य" कम संगत डेटा में परिणाम है, क्योंकि ऐसे चिंता के रूप में confounders उत्पन्न हो सकता है हो सकता है. उदाहरण के लिए, अगर सात गर्मी दर्द उत्तेजनाओं गर्मी दर्द सीमा निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है, इस विषय यह पता होना चाहिए.
किसी भी समय, विषय thermode एक हाथ से आयोजित नियंत्रण बटन धकेलने के द्वारा किसी भी hotter हो रही से नहीं रोक सकता. नियंत्रण में होने के नाते एक विषय की चिंता को कम करने और डेटा को और अधिक विश्वसनीय बनाने जाएगा.
प्रशिक्षण सत्र के लिए एक एक अध्ययन विषय के प्रदर्शन न्यायाधीश करने का अवसर प्रदान करता है. यह सबसे अच्छा हो सकता है दो से चार चक्र के दौरान परीक्षण विषयों ट्रेन तो उनके व्यक्तिगत दर्द थ्रेसहोल्ड 0.8 की तुलना में अधिक डिग्री सेल्सियस, और आदर्श में अधिक नहीं 0.6 से अधिक ° सी पिछले दो चक्रों के बीच परीक्षण के हिसाब से बदलती सकता है विषय है जो के लिए लगातार प्रदर्शन करने में विफल आम तौर पर अध्ययन से बाहर रखा गया है.
3. दर्द थ्रेसहोल्ड निर्धारण
दर्द दहलीज परीक्षण चक्र शुरू करने के विषय की त्वचा पर thermode के स्थान निशान. इस प्रयोग में एक ही सूजन त्वचा microdialysis के लिए इस्तेमाल किया घाव दर्द परीक्षण के जवाब में जारी जैव रसायनों के बारे में जानने के लिए दर्द के लिए परीक्षण किया जाएगा.
फिर चिह्नित त्वचा क्षेत्र पर thermode रखकर प्रत्येक चक्र आरंभ करें. संभव के रूप में निकटता के रूप में निशान के साथ thermode की स्थिति मैच. त्वचा और thermode के बीच तापमान 35 से संतुलित करने के लिए अनुमति दें डिग्री सेल्सियस - एक तापमान है कि सुरक्षित रूप से कोई दर्द का कारण होगा. यह 5 सेकंड के बारे में लेने के लिए और कंप्यूटर स्क्रीन पर 35 ° C के पढ़ने के द्वारा संकेत किया जाएगा.
शुरुआत से पहले, हाथ से आयोजित अधीन नियंत्रण दे.
निरंतर और कोमल दबाव का प्रयोग विषय की त्वचा के साथ पूर्ण संपर्क में परीक्षण के दौरान thermode की पूरी सतह रखना.
अब पूर्व क्रमादेशित परीक्षण एल्गोरिथ्म शुरू. thermode 1 पर हीटिंग शुरू होगा ° सी / एस विषय अनुभवों दर्द के रूप में जल्दी, वे हाथ से आयोजित की युक्ति दबाएँ हूँ.
हाथ से आयोजित की युक्ति पर बटन प्रेस के बाद, thermode तापमान के कारण दर्द स्वचालित रूप से पंजीकृत हो जाएगा 10 ° सी. सी / 35 की अपनी आधारभूत तापमान नीचे एस ° दर पर कम शुरू कर देंगे
तापमान जांच 30 s के लिए स्वचालित रूप से 35 ° C पर रखा जाना पहले यह 1 पर फिर से बढ़ शुरू होता है ° / सी एस, जब तक फिर से एक विषय हाथ से आयोजित की युक्ति के बटन धक्का. बस से पहले thermode तापमान के बारे में फिर से वृद्धि है, विषय है कि यह होने वाला है याद दिलाना. इस विषय ध्यान केंद्रित रखेंगे.
इस अनुक्रम तक सात तापमान रिकॉर्डिंग पंजीकृत किया गया है दोहराया जाएगा. इन Tempe के औसत का परिकलनrature रीडिंग, यह गर्मी दर्द दहलीज है.
Punctuated दबाव जांच के साथ यांत्रिक दर्द परीक्षण
1. परिचय
हम कस्टम बनाया कैलिब्रेटेड punctuated दबाव जांच का उपयोग करते हैं, क्योंकि वे पारंपरिक रूप से इस्तेमाल किया और व्यावसायिक रूप से उपलब्ध वॉन फ्रे बाल की तुलना में अधिक संगत परिणाम प्रदान करते हैं. जांच समान बेलनाकार स्टेनलेस स्टील (240 सुक्ष्ममापी व्यास) तारों विभिन्न वजन के तांबे की छड़ पर घुड़सवार (1, 2, 4, 8, 16, 32, 49, 64, और 81 ग्राम) है कि एक व्यापक भीतर आसानी से ले जाने के बने होते हैं हाथ एल्यूमीनियम ट्यूब का आयोजन किया.
ही सामान्य प्रयोगात्मक गर्मी दर्द परीक्षण के लिए उल्लिखित शर्तों यांत्रिक दर्द परीक्षण के लिए लागू होते हैं. विषयों अच्छी तरह से तैयार और प्रशिक्षित किया जाना चाहिए. यह विशेष रूप से विषयों को आश्वस्त करने के लिए महत्वपूर्ण है कि जांच को कुंद कर रहे हैं और त्वचा पंचर नहीं होगा. यह विषयों को आराम और संगत डेटा प्रदान करने में मदद करेगा.
2. यांत्रिक दर्द थ्रेसहोल्ड निर्धारण
यांत्रिक दर्द सीमा निर्धारित करने के लिए, पहले लंबरूप प्रयोगात्मक सूजन घाव के केंद्र में त्वचा lightest जांच की इस्पात तार टिप लागू होते हैं.
हाथ से आयोजित एल्यूमीनियम ट्यूब तो इसे छू बिना त्वचा की दिशा में उतारा है. इस तरह, एल्यूमीनियम ट्यूब के अंदर तांबे की छड़ी के पूरे वजन इस्पात तार की नोक पर टिकी हुई है.
अध्ययन विषय तो यह इंगित करता है कि जांच "हाँ" या कह दर्द का कारण बनता है "नहीं."
यदि विषय जवाब "नहीं," तो या तो एक ही जांच या अगले भारी जांच अगले इस्तेमाल किया जाएगा. इस एल्गोरिथ्म एक आरोही उत्तेजना अनुक्रम कहा जाता है. बेतरतीब ढंग से निर्धारित है कि क्या अगले जांच भारी या एक ही वजन के. यह एक एल्गोरिथ्म के लिए अंधा विषय रखेंगे.
जब तक एक विषय "हाँ." पहली विक्षेपन बिंदु के रूप में इस श्रृंखला में पिछले दो जांच के औसत वजन दर्ज की गई है जवाब आरोही अनुक्रम में जांच का लागू करें.
विषय जवाब के बाद "हाँ," उतरते उत्तेजना अनुक्रम का उपयोग शुरू हो, और या तो एक लाइटर या पहले के रूप में एक ही जांच जांच का उपयोग करें. बेतरतीब ढंग से निर्धारित है कि अगले जांच हल्का या एक ही वजन के. यह एक एल्गोरिथ्म के लिए अंधा विषय रखेंगे.
एक उतरते अनुक्रम में जांच लागू जब तक विषय जवाब "नहीं." इस क्रम में पिछले दो जांच के औसत वजन का दूसरा विक्षेपन बिंदु का गठन.
जब विषय जवाब "नहीं," एक आरोही उत्तेजना अनुक्रम वापस स्विच. आरोही और दृश्यों उतरते तक सात विक्षेपन अंक दर्ज कर रहे हैं के बीच वैकल्पिक. इन सात अंक के औसत यांत्रिक दर्द दहलीज है.
यह वीडियो और मानव स्वयंसेवकों की सूजन त्वचा में यांत्रिक दर्द दहलीज गर्मी का आकलन करने के लिए एल्गोरिदम को दर्शाता है. दर्द की धारणा व्यक्तिपरक है. पर्याप्त दर्द डेटा के संग्रह एक उपयुक्त परीक्षण सुविधा (उदाहरण के शांत और आरामदायक) में निर्मित डेटा की गुणवत्ता नियंत्रण (परीक्षण - पुनर्परीक्षण विश्वसनीयता) उपाय, एक मानकीकृत अध्ययन प्रोटोकॉल के लिए सख्त पालन, और कारकों के बचाव के साथ अध्ययन में प्रतिभागियों के गहन प्रशिक्षण की आवश्यकता है (जैसे तनाव, चिंता,). दर्द संवेदनशीलता पर विश्वसनीय व्यक्तिपरक डेटा, एक एनाल्जेसिक दवा के प्रशासन और nociceptive मध्यस्थों के स्थानीय रिहाई जैसे यंत्रवत डेटा के संग्रह के रूप में इस तरह के हस्तक्षेप के साथ जोड़ा दर्द के तंत्र में बहुमूल्य अंतर्दृष्टि प्रदान करते हैं, और रोकने के लिए या यह attenuate मतलब है.
Angst MS, Clark JD. Comment on Koltzenburg et al.: Differential sensitivity of three experimental pain models in detecting the analgesic effects of transdermal fentanyl and buprenorphine. Pain 2006;126:165-74. Pain 2007;128:292-4.
Angst MS, Clark JD, Carvalho B, Tingle M, Schmelz M, Yeomans DC. Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation, and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study. Pain 2008.
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