Submit
Browse  

The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

1, 2, 2, 2

1Department of Anesthesiology, Perioperative and Pain Medicine, Children's Hospital Boston and Harvard Medical School, 2Department of Anesthesiology, Perioperative and Pain Medicine, Children’s Hospital Boston

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 50.16.36.153, User IP: 50.16.36.153, User IP Hex: 839918745

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

Sill, B., Alpatov, I. V., Pacak, C. A., Cowan, D. B. Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart. J. Vis. Exp. (28), e1139, doi:10.3791/1139 (2009).

Abstract: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

جراحة القوارض غالبا ما يشكل عنصرا هاما في تقييم جدوى الأنسجة هندسيا. يمكن تنفيذ مجموعة واسعة من العمليات الجراحية في الفئران المختبرية المشتركة أو الفئران ، وهذه كثيرا ما يكون بمثابة خطوة وسيطة بين التجارب بين كبار مقاعد البدلاء والكبيرة التجارب على الحيوانات أو التجارب على الانسان. بالنظر إلى أن القوارض توفير نظام النموذج المعمول بها ، فعالة من حيث التكلفة ، وذات الصلة من الناحية الفسيولوجية ، والتي لاختبار تركيبات جديدة من المواد السقالات والخلايا ، فهي مناسبة تماما وخاصة القلب والأوعية الدموية للدراسات هندسة الأنسجة. في الوقت الحاضر ، ونحن تصف إجراء جراحة القلب المفتوح لزراعة الأنسجة المهندسة التي تحتوي على خلايا مولدة للعضل السلف في الأذينية البطينية (AV) تلم قلب الفئران. وتهدف هذه الغرسات لإنشاء قناة الكهربائية بين الأذين الأيمن والبطين الأيمن مع الهدف النهائي المتمثل في توفير العلاج البديل لزرع جهاز تنظيم ضربات القلب التقليدية في طب الأطفال المرضى مع كتلة القلب الكامل [1]. يتم زرع الأنسجة المهندسة في الأخدود - AV عن طريق بضع الصدر. لأغراضنا ، لويس لتخدير الفئران والتهوية جراحية للحفاظ على الضغط الهوائي الإيجابي أثناء إجراء العمليات الجراحية ومعقمة. يتم تنفيذ هذا النهج إلى القلب من قبل بضع الصدر الحق من خلال شق انتيرو - الجانبية في ال 5

Protocol: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

الجزء 1 : تحريض التخدير العام

  1. A 200-250 ز الفئران لويس هو تخدير مع الكيتامين ملغم / كغم من 50 و 4 ملغم / كغم زيلازين حقنه بإبرة G 30 في تجويف داخل الصفاق. يتم قص الجزء العلوي من البطن والصدر الحق في إزالة الشعر ، وموقع شق تنظيفها مع الايثانول 70 ٪ وبعد ذلك ، بوفيدون اليود محلول مطهر موضعي.
  2. هو intubated الحيوان endotracheally باستخدام قسطرة الوريد 16 G متصلا بجهاز التنفس الحيوانات الصغيرة (جهاز هارفارد). يتم توصيل جهاز التنفس الاصطناعي لالمرذاذ لتوريد 0،5-1،0 ٪ Isoflurane (باكستر) مختلطة مع الأكسجين 100 ٪ للحفاظ على التخدير العام. يتم ضبط معدل التنفس وحجم المد والجزر وفقا لوزن الجسم من الفئران. يتم وضع الحيوان على وسادة تدفئة (هود الحرارية لوحة) للحفاظ على درجة حرارة الجسم أثناء العملية الجراحية.
  3. لرصد معدل ضربات القلب وتشبع الأوكسجين في جميع أنحاء العملية الجراحية جهاز pulsoximeter (Nellcor) يتم قص على واحد من أطرافه الخلفية.

الجزء 2 : بضع الصدر وزرع الأنسجة المهندسة

  1. مستعدة للموقع الجراحي مع اللف الجراحية العقيمة التي تعقد في مكان مع منشفة المشابك.
  2. يتم إجراء شق من الاطراف انتيرو على الجدار الجانبي من الصدر حق ، فوق مساحة 5 الوربية ال. يتم الوصول إلى المناطق الداخلية من الصدر عبر الفضاء في 5 الوربية عشر ويتوضع a مبعاد الصغيرة (Roboz) لزيادة العرض.
  3. هو قطع تأمور فقط فوق ملحق الأذين الأيمن والبطين الأيمن من القاعدة باتجاه قمة القلب. بعد ذلك ، يتم التعرف على الأخدود AV ومازحت برفق طبقة epicardial المتاخمة للمثلث aorto - الأذين البطين إربا.
  4. يتم وضع 7-0 Prolene خياطة (Ethicon) من خلال الكتف القاعدية من البطين الأيمن. A 2 × 2 × 2 قطعة يتم تشريح مم من بناء الأنسجة المهندسة وضعه داخل الأخدود ، وتعادل AV برفق إلى أسفل مع خياطة Prolene.
  5. يتم فحص الميداني للجراحة لوقف نزيف وضعت اثنين الغرز Vicryl 4-0 (Ethicon) بين العلوي والسفلي الوربية الفضاء لإغلاق القفص الصدري.
  6. غير المحفورة أي استرواح الواضح من خلال توسيع الرئتين عن طريق جهاز التنفس.
  7. ثم يتم إغلاق جدار الصدر في الطبقات.

الجزء 3 : الاسترداد

  1. في حين أن الحيوان للشفاء من عملية جراحية ، وتسللوا الى موقع شق مع 5 مل من 0.25 ٪ [2] بوبيفاكايين.
  2. هو extubated الحيوان التالية الفطام من التنفس الاصطناعي ويتم إرجاعها إلى قفص مع الفراش مرة جديدة أنها مستيقظا تماما والقصية. ويدير لاحقا الفئران 0.01 ملغم / كغم البوبرينورفين تسكين تحت الجلد كل 12 ساعة لمدة 3 أيام.

الجزء 4 : نتائج الممثل

إذا أجريت بشكل صحيح ، ووصف العمليات الجراحية زرع الأنسجة المهندسة في الأخدود - AV من القلب (الشكل 1) النتائج في استرداد أكثر من 90 ٪ من الحيوانات.

الشكل 1
الشكل 1. صورة لقلب يتعرض تبين موقع زرع أنسجة هندسيا.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

لتحقيق نتيجة إيجابية لعملية جراحية ، من الأهمية بمكان intubate صحيح وتهوية جراحية الحيوان. إذا كان مخدرا ببساطة الفئران ، وسمحت للتنفس من تلقاء أنفسهم ، وسوف تنهار حتما كلا الرئتين ، بينما يتم فتح القفص الصدري بسبب الجنبة شيوعا في القوارض. قبل أن يغلق في الصدر ، أي استرواح يتعين القضاء عليها كليا ، وتوسيع الرئتين تماما للحد من انخماص. وإلا فإن الفطام من التنفس والانتعاش لن تنجح وسوف تصبح بفرط الحيوان و / أو ميتة [3]. إزالة الأنسجة epicardial داخل أخدود AV غير المحتمل أن تكون خطرة ويمكن أن تؤدي إلى نزيف وريدي ضخمة من الأذين الأيمن بسبب الطبيعة الحساسة للجدار الفئران الأذيني. في حين وضع خياطة Prolene في الخطوة 2.4 ، فمن الضروري أن تكون على علم وتجنب فروع epicardial التاجية. وينبغي أن يظل الحيوان الحارة على وسادة البند خلال فترة النقاهة أو درجة حرارة الجسم سينخفض ​​بشكل مفاجئ.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها المؤسسات ورعاية الحيوان اللجنة استخدم في مستشفى بوسطن للأطفال ق.

Acknowledgements: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

ويدعم هذا العمل عن طريق المنح البحثية من المعاهد الوطنية للصحة (HL068915 ؛ HL088206) والمساهمات للصندوق التوصيل القلب في مستشفى بوسطن للأطفال.

Materials: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

Name Type Company Catalog Number Comments
7x4 Thermo Pad 4/box Equipment Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada MODEL 704R
Inspira ASV Ventilator Equipment Harvard Apparatus
Handheld Pulse Oximeter Equipment Nellcor N20PA
Retractor Equipment Roboz Surgical Instruments Co. RS-6514
Isoflurane (Forane) Reagent Baxter Internationl Inc. 1001936040
Ketamine HCl Reagent Hospira Inc. RL-0065
Xylazine (AnaSed) Reagent Lloyd, Inc. LB15705A
Buprenorphine HCL Inject Reagent Bedford Laboratories Div-BUP-P00
Bupivacaine 0.25% Reagent Hospira Inc.

References: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

  1. Choi, Y.H., et al., Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol, 2006. 169(1): p. 72-85.
  2. Shin, J.W., et al., Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg, 2008. 107(5): p. 1587-91.
  3. Horstick, G., et al., Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol, 1999. 276(2 Pt 2): p. H472-9.

Ask the Author: زرع الأنسجة المهندسة في قلب فأر

2 Comments

Dear Sir/Madam,
This video is not working.
Thanks

1

Reply

Posted by: AnonymousDecember 5, 2009, 11:28 AM

Sorry about that. This was fixed.

1.1

Reply

Posted by: AnonymousDecember 5, 2009, 11:48 AM

Thanks a lot

1.1.1

Reply

Posted by: AnonymousDecember 7, 2009, 10:34 PM

I would like to request permission to download this video....I find this very interesting & useful

2

Reply

Posted by: Janarthan April 30, 2010, 12:49 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter