Имплантация Engineered ткани в сердце крысы

Часть 1: Индукция общей анестезии

1. 200-250 г Льюис крысы под наркозом с 50 мг / кг кетамина и 4 мг / кг Ксилазин вводят иглу 30 G в внутрибрюшинного полости. Верхней части живота и правой груди, обрезаются для удаления волос и разреза тщательно очищены с 70% этанола, а затем повидон-йод раствор для наружного применения антисептика.
2. Животное интубированных endotracheally использованием 16 G внутривенный катетер подключен к небольшой респиратор животных (Harvard аппарат). Респиратор связан с испарителем на поставку 0,5 до 1,0% изофлюрана (Baxter), смешанного с 100% кислорода для поддержания общей анестезии. Скорость дыхания и дыхательный объем регулируется в зависимости от массы тела крысы. Животное помещают на грелку (Hood Термо-Pad) для поддержания температуры тела во время хирургического вмешательства.
3. Для контроля частоты сердечных сокращений и насыщения кислородом всей хирургической процедуры, пульсоксиметр устройства (Nellcor) обрезается на одну из задних конечностей.

Часть 2: Торакотомия и спроектирован имплантации ткани

1. Хирургических сайт подготовлен при стерильных хирургических драпировки, которая удерживается на месте с полотенцем зажимов.
2. Разрез делается из передне-боковой для боковой стенке правой груди, чуть выше ^5-го межреберья. Интерьер грудь можно получить через ^5-го межреберья и небольшой втягивающим (Roboz) находится в положении максимального зрения.
3. Перикарда режется чуть выше приложением правое предсердие и правый желудочек от основания к верхушке сердца. После этого паз А.В., была идентифицирована и эпикарда слое, прилегающем к аорто-предсердно-желудочковой треугольник мягко дразнили друг от друга.
4. 7-0 Prolene шва (Ethicon) помещается через базальную плечо правого желудочка. 2 х 2 х 2 мм кусок рассечена от инженерии построить ткани и располагаются в пределах паз А.В. и аккуратно связали с Prolene шва.
5. Операционного поля проверяется на наличие кровотечения и две 4-0 Викрил швов (Ethicon) помещаются между верхней и нижней межреберье для закрытия грудную клетку.
6. Любое очевидное пневмоторакс добывается путем расширения легких путем искусственной вентиляции легких.
7. Грудной клетки затем закрывается в слоях.

Часть 3: восстановление

1. В то время как животное оправится от операции, разрез сайт проникли с 5 мл 0,25% бупивакаина ^[2].
2. Животное экстубацию следующие отлучение от респиратора и возвращается в клетку со свежей постельные принадлежности, когда он будет окончательно проснулся и грудных. Крыса в дальнейшем вводят 0,01 мг / кг Бупренорфин обезболивания подкожно каждые 12 часов в течение 3 дней.

Часть 4: Представитель результаты

Если выполнены должным образом, описанный хирургической имплантации инженерии тканей в AV-паз сердца (рис. 1) приводит к более чем 90% восстановления животных.

Рисунок 1. Фотографию подвергается сердце показывает месте имплантации инженерных ткани.

Для благоприятного исхода хирургического вмешательства, очень важно правильно интубации и вентиляции invasively животного. Если крыса просто седативные и позволили самостоятельно дышать, обоих легких неизбежно крушение в то время как грудная клетка открыта в связи с общим плевры у грызунов. Перед закрытием груди, любая пневмоторакс должна быть полностью устранены, и легкие полностью расширены, чтобы уменьшить ателектаза. В противном случае, отлучение от респиратора, и восстановление будет неудачной и животных станет гиперкапнической и / или гипоксическим ^[3]. Удаление эпикардиальных ткани в паз А.В. является потенциально опасным и может привести к массивным кровотечением венозного из правого предсердия из-за деликатного характера крысы предсердий стене. При размещении Prolene шва в шаге 2.4, важно знать и избежать эпикардиальных коронарных ветвей. Животное должно быть теплым на заголовке площадку во время восстановительного периода или ее температура тела резко упадет.