Misurazione della pressione sanguigna nei topi mediante pressione del volume di registrazione, una coda-bracciale Metodo

Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. Measuring Blood Pressure in Mice using Volume Pressure Recording, a Tail-cuff Method. J. Vis. Exp. (27), e1291, doi:10.3791/1291 (2009).

1. Attrezzature di set-up
   1. Selezionare un'area in laboratorio dove la temperatura ambiente sia pari o superiore a 20 ° C.
   2. Evitare luoghi vicino a prese d'aria condizionata e / o forte rumore.
   3. Evitare di esporre l'animale a odori che possono causare irritazione e / o stress, come profumo, acqua di colonia, prodotti chimici e detergenti.
   4. Accendere il controller CODA.
   5. Accendere il riscaldamento e la piattaforma a livello 3. Se la temperatura ambiente è superiore ai 25 ° C, inizia in merito ai livelli 1 o 2.
   6. Test di diagnostica del controller
      1. Aprire il software CODA.
      2. Selezionare il dispositivo CODA cliccando su di esso.
      3. Clicca su "Dispositivo di prova selezionati".
      4. Selezionare i polsini e canali per testare e fare clic su "Test".
      5. Dopo che il test è stato completato, chiudere la finestra di test del dispositivo.
2. Software di set-up
   1. La gestione del personale e Animali
      1. La gestione del personale
         1. Selezionare Strumenti> Gestisci personale.
         2. Clicca su "Ricercatore 1" per cambiare il nome.
         3. Clicca sulle righe successive per aggiungere ricercatori supplementari.
         4. Clicca su "Scheda tecnici" per modificare o aggiungere tecnici.
         5. Clicca su "Scheda Campioni" al nome dell'animale per una facile identificazione e per selezionare il tipo di animale, ratto o topo.
         6. Clicca su "Scheda Animali" di modificare il tipo di animale e la sensibilità.
   2. Esperimento nuovo
      1. Selezionare File> Nuovo Esperimento>
      2. Iniziare un nuovo esperimento
         1. Immettere il nome esperimento.
         2. Selezionare il Ricercatore chiave.
         3. Selezionare una data di inizio e cliccare su "Avanti".
      3. Sessione Informazioni di base
         1. Inserisci il nome della sessione
         2. Impostare "Cicli Acclimatazione" a 5. Se si preferisce non includere i cicli di acclimatazione, impostato a zero. Per assistere con acclimatando l'animale al titolare e polsini, aggiungere cicli addizionali per il vostro esperimento e simula per 5 giorni consecutivi.
         3. Impostare "Numero dei set" a 1.
         4. Impostare "Time Between Imposta" a 30 secondi per più insiemi
         5. Impostare "Cicli per Set" per 20 cicli.
         6. Impostare "Time Between Cicli" a 5 secondi e fare clic su "Avanti".
   3. Selezione del campione
      1. 1. Selezionare il campione dalla piscina campione e assegnarlo al primo canale disponibile e fare clic su "Avanti".
      2. Parametri per la sessione
         1. Impostare "Pressione massima occlusione" a 250mmHg.
         2. Impostare "Tempo deflazione" a 20 secondi per topi, 15 secondi per i ratti.
         3. Impostare "Volume minimo" per 15ul.
         4. Impostare "Stile di visualizzazione" ad un canale per ogni grafico.
         5. I ricercatori aggiungono ulteriori e tecnici e fare clic su "Avanti".
      3. Sessione Script
         1. Rivedere lo script di sessione e fare clic su "Avanti".
         2. Non selezionare Fine fino al completamento della sezione di preparazione degli animali.
3. Preparazione degli animali
   1. Animal Set-up
      1. Animal Holder
         1. Per allenarsi e migliorare acclimatazione animale, aggiungere cicli addizionali per il vostro esperimento e simula per cinque giorni consecutivi. È inoltre possibile assistere con acclimatazione, ponendo l'animale nel supporto per 15 minuti per 3 giorni consecutivi prima dello studio vero e proprio.
         2. Luogo ogni animale in un supporto da far salire l'animale per la coda e delicatamente mettendo l'animale nella parte posteriore del titolare che si affaccia sul lato aperto del cono. Nota: le dimensioni di animali in relazione alle dimensioni del supporto selezionato. L'animale deve essere in grado di entrare liberamente titolare.
         3. Attentamente fissare il portello posteriore al titolare ruotando il cappuccio rosso vite sul portellone posteriore. Si deve prestare attenzione per evitare di pizzicare la coda o le altre parti del corpo e garantendo i portellone posteriore.
         4. Far scorrere il cono verso il portellone posteriore, limitando il movimento dell'animale. Il cono di naso dovrebbe essere in grado di limitare l'animale da girarsi mentre all'interno del supporto.
         5. Posizionare il supporto sulla piattaforma del riscaldamento nella posizione designata. Se il test lo stesso gruppo di animali per un periodo di tempo, assicurarsi di ruotare la posizione di titolare sulla piattaforma riscaldamento per migliorare la coerenza e la precisione delle vostre misure BP. Permettere agli animali di almeno 5 minuti per ambientarsi al titolare.
         6. Non toccare o maneggiare l'animale mentre all'interno del supporto. Il contatto aumento potrebbe irritare l'animale.
         7. Non lasciare mai l'animale nei supporti incustodito.
      2. Bracciale Placement
         Filo la coda attraverso il "Cuff occlusione." Place questo bracciale più vicino possibile alla base della coda il più possibile senza forzare.
         1. Fissare il "tubo Cuff occlusione" nella tacca sulla parte posteriore superiore del supporto.
         2. Filo la coda attraverso il "Cuff VPR", collocandolo all'interno di 2mm dal "Cuff occlusione".
         3. Fissare il "tubo Cuff VPR" nella tacca sulla parte posteriore superiore del supporto.
         4. Fissare le manette al controllore CODA.
      3. Temperatura animali
         1. Permettere agli animali di almeno 5 minuti per termoregolazione.
         2. Registrare la temperatura dell'animale spesso con un termometro a infrarossi. La temperatura animale deve essere 32 a 35 ° C.
4. Esperimento
   1. Iniziare Esperimento
      1. Fare clic su "Fine" e l'esperimento avrà inizio immediatamente.
   2. Esperimento fine
      1. Animale
         1. Rimuovere immediatamente l'animale dal polsini e supporto.
         2. Rispedire l'animale verso la loro gabbia dopo la "semplice relazione di sintesi della sessione" viene visualizzato.
      2. Raccolta dei dati
         1. Dopo il completamento del ciclo dei cicli accettati saranno automaticamente visualizzati in formato foglio di calcolo all'interno dell'applicazione CODA, fare clic sul pulsante "Esporta in Excel".
         2. Selezionare la cartella in cui inserire il file, il nome del file e fare clic su "Salva".
         3. Aprire l'applicazione di Excel e cliccare su "Apri".
         4. Visualizza tutti i tipi di file per visualizzare il file ". Csv salvato", fare clic sul file.
      3. Elaborazione Dati
         1. Ci sono diversi modi per elaborare i dati all'interno del file di Excel. Una pratica comune è quella di ottenere la media e deviazione standard.
         2. Eliminare le misure se la deviazione standard è maggiore di 30.
         3. Inoltre, i cicli respinta può essere visualizzato e l'intero database possono essere facilmente esportati in Excel. Consultare il manuale utente per ulteriori informazioni.

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