The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Department of Biomedical Engineering, McGill University
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Perrault, C. M., Qasaimeh, M. A., Juncker, D. The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing. J. Vis. Exp. (28), e1418, doi:10.3791/1418 (2009).
マイクロ流体デバイスは、アッセイは、サンプルの微量を使用して実行されるように、最近、細胞の微小環境を制御するために使用されています。マイクロフルイディクスは、一般的に導入し、限られたボリューム内で、細胞の場合で培養可能なサンプルに、その使用を制限する閉じたマイクロチャネルに関連付けられています。一方、システムをmicropipettingと特にシンク、ソース、もう一つとして1つのピペットの行為プッシュプルのセットアップを使用して、局所的に細胞と表面を灌流するために使用されているが、フローの閉じ込めは、三次元では困難である。また、ピペットは壊れやすいと位置に困難であり、したがって、スタティック設定だけで使用されます。
マイクロプローブ(MFP)は、クローズドマイクロ流体チャネルの建設によって課されると代わりにマイクロ流体システムにサンプルを囲むの、マイクロ流体の流れを直接試料に配信できる、とMFPを使用して、サンプル全体でスキャンされた制約を回避することができます。 。注入と吸引開口部は、隙間に注入されたマイクロジェットが周囲の液体の流体力によって閉じ込めと完全に他の開口部に戻って吸引されるように互いのメートル数十内に位置しています。マイクロジェットは、基板表面全体にフラッシュされ、ローカライズされた堆積/表面全体にプローブを走査することによって広い範囲で使用可能な試薬の配信のための精密なツールを提供することができます。このビデオでは、マイクロ流体プローブ1(MFP)を提示する。我々は、MFPをアセンブルする方法を詳細に説明し、倒立顕微鏡上にそれをマウントして、基板表面からの相対位置を合わせ、そして最終的にバッファーに浸漬基板表面を処理するためにそれを使用する方法を示します。
1。プローブヘッド(ビデオには示されていないプロセス)の微細加工
2。 MFPの組立
3。セットアップMFPの
4。 MFPの操作
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それは、試薬と基質の異なるタイプで使用するための(ⅱ)適応、(i)は携帯電話であり、それは(iii)の広い範囲で動作させることができるので、マイクロ流体プローブ(MFP)は、汎用性があります。
不要な泡が気泡を避けるために、フローの中断につながることができる、すべてのコンポーネントは、アセンブリの前に液体で満たされる必要があります。プローブと表面との間の隙間はわずか数マイクロメートルである、まだメサは数百マイクロメートル幅で、センチメートルの範囲内の距離はスキャンされます。したがって、スキャンした表面の水平度とMFPメサと基板の間に並列処理の両方は、細心の注意を払って調整する必要があります。最後に、吸引と注入の間の比率は、MFPと基板との間の隙間に注入される試薬のすべてを捕捉するのに十分な大きさである必要があります。
MFPは、生理的緩衝液に浸漬組織や個々のセルを処理する、または表面にエッチングパターンにするために、温和な条件下でタンパク質をパターニング表面のために使用することができます。
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この作品は、フォンデルシェルシュシュールラ自然らレテクノロジーズケベック、イノベーションと健康研究(CIHR)のカナダの協会のためのカナダのfundationによって賄われていた。
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| microfluidic connectors | Upchurch Scientific | Micro- and Nano-tight fittings and sleeves | |
| 2-component manual dispenser | Conprotec Inc. | DM400 | To dispense and mix PDMS mixture |
| LabVIEW | National Instruments | Version 8.0 | |
| Mechanical Convection Oven | VWR international | 1330FM | |
| Glass syringes | Hamilton Co | ||
| Capillary tubing | Polymicro Technologies | ||
| Plasma Chamber | Tegal Corporation | Plasmaline 415 | |
| Inverted Microscope | Nikon Instruments | TE2000-E | |
| Syringe pumps | Cetoni | neMESYS | |
| Sylgard 184 | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | |
| Camera | Photometrics | QuantEM 512SC | |
| Microscope stage | |||
| Microfluidic probe holder goniometers | Melles Griot | 07GON504 | |
| Linear stage | Applied Scientific Instrumentation | LS-50 | For z-control of the MFP |
| Manual linear stage | Newport Corp. | 443-4 Series | For x- and y- axis control of the MFP |
| Microscope stage | Applied Scientific Instrumentation | PZ-2000 | With x-, y- and z- control |