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1Transplant and Stem Cell Immunobiology Lab (TSI), University Heart Center Hamburg, 2CVRC, University Hospital Hamburg, 3Department of CT Surgery, Stanford University School of Medicine
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Hua, X., Deuse, T., Tang-Quan, K. R., Robbins, R. C., Reichenspurner, H., Schrepfer, S. Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of Obliterative Airway Disease. J. Vis. Exp. (35), e1437, doi:10.3791/1437 (2010).
闭塞性气道疾病(OAD)主要的并发症是肺移植后,限制长期生存(1-7)。
为了研究的病理生理,治疗和预防OAD的不同的动物模型,在啮齿类动物的气管移植已开发(1-7)。在这里,我们使用两个气管移植,异位和原位模型建立的模型,并展示自己的优点和局限性。
对于异位模型,捐赠者的气管进入收件人的大网膜包裹,而捐助者的气管原位模型是在结束对端吻合吻合。
在这两种模式的闭塞性病变的组织学类似临床的OAD的发展已经证明(1-7)。
本视频演示了如何同时执行,异位以及小鼠原位气管移植技术,比较OAD的发展过程中都使用的组织学模型。
供体的制备
收件人:异位移植
收件人:原位移植

图1:捐助者的气管。
1A:捐助者的气管就地配制后。
1B:删剪捐助气管。
1C:捐助者气管后explantation。

图2:异位模型。
2A:移植是在大网膜的中心位置。
2B:移植是用一个单一的缝合两端固定。
2C:移植到大网膜包裹,并用一个单一的缝合固定。

图3:原位模型。
3A:移植收件人气管缺陷和后壁之间的中间人,是在连续运行时装吻合。
3B:使用单一缝合前壁完成。

图4:切片。
4A:回收后28天在H + E站异位移植气管ining(15X)。请注意100%管腔闭塞。
4B:恢复原位移植气管后60天在H + E染色(15X)。最大实现管腔闭塞,约45%。
| 异位气管移植模型 | 原位气管移植模型 | |
| 优势 | +容易执行 +完整的气道阻塞的管腔闭塞后28天 +无由OAD的动物的身体感情 | +物理通风的嫁接 +吸入药品监督管理局 +强免疫反应,如同种异体IgM抗体生产 +胸椎的生理环境 +气管气管吻合模仿临床 |
| 缺点 | - 没有移植气管的通风 - 没有评价吸入病原体的可能 - 抑制纤毛清除率和保留分泌物 - 腹膜微环境,而不是胸环境 | - 手术必要的培训 - 管腔闭塞管腔闭塞的应用程序。经过60天的45% - 动物可能发展的OAD的症状 |
表1:异位和原位气管移植的优点和缺点。
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小鼠可在不同的transgeneic和淘汰赛模式,因此适合研究的OAD(4)有关的机械问题。
在此视频中显示的气管移植两种型号,可作为可靠的模型研究OAD的发展。
然而,每一个模型演示的优势和局限。
异位气管移植是很容易执行,并不需要特殊的手术训练(3,5) 。异位移植后,管腔闭塞将出现快速,完整的气道阻塞出现后28天(3,4,6)。动物身体的影响OAD的发展,因为他们不依赖于生物体异位移植气管。
缺点是缺乏移植气管(7,6)的通风,因此它是不可能的评估吸入病原体的影响(3,7)。由于粘液纤毛清除功能的抑制和保留分泌物的结果可能不同于在临床上的OAD(7)看到的生理反应。腹膜微环境的不同,这也可能导致改变结果(3)从胸环境。
要执行原位气管移植手术训练是必要的,移植气管管腔闭塞,出现后60天,而不是在异位模型(3,7)28天。此外,取得最大管腔闭塞的应用程序。 45%,而不是在异位模型(3,7)的100%。然而,在原位模型,获得生理通风和吸入药物管理(3)。如同种异体IgM抗体生产的免疫反应,已被证明在这个模型中要远远强于异位模型(3)。气管气管吻合口和本网站的反应是在门诊进行吻合(7)相媲美。
每个模型的优点和限制显示在表1中详细。
综上所述,本视频显示,这两个异位以及原位在小鼠气管移植技术可以重现性好,可靠的模型用于研究的OAD。
但是,该模型应根据研究的基本问题上慎重选择。
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宋佳Schrepfer已收到由德意志研究联合会(DFG)(SCHR992/3-1)的研究补助金。]
所有的动物都收到符合实验动物保健的原则“的人文关怀,对动物的实验是在由国家医学研究和指南学会出版的”实验动物的关心和使用规定的准则和法规美国国立卫生研究院(美国国立卫生出版物85-23研究院,1985年修订)。
所有动物均来自查尔斯河实验室(德国Sulzfeld,),并保持在汉堡大学医院的Eppendorf的动物保健设施。动物标准的议员和水自由采食。
作者感谢克里斯蒂安Pahrmann(实验室管理器)。