閉塞性気道疾患の発生研究のモデルとして使用されるマウスにおける異所性と同所性気管移植

1. 雄BALB / cマウス（8-12週）はチャールズリバー研究所（Sulzfeld、ドイツ）から購入されています。マウスは通常の条件、飼育、標準のマウスの食物と水を自由の下に収容されています。
2. 2％のIsofluranは麻酔に使用されます。

ドナーの調製

1. 腹部の毛を剃るとbetaisodonaを使用して領域を消毒する。
2. 顕微鏡視野の下で、喉頭のレベルから胸骨に正中頸部切開を行います。
3. 気管のクリアな視界を得るために皮下脂肪とストラップの筋肉を取り外します。
4. 食道、神経、動脈、及び結合組織のように、あらゆる周囲の組織から気管を細かく分析。
5. 全体気管を（喉頭から分岐まで）を取り外します。
6. 冷たい生理食塩水で移植をフラッシュし、4でグラフト℃にて保存してください。
7. ドナーは、気管の収穫後の頚椎脱臼により安楽死されています。

RECIPIENT：異種移植

1. 切開部位周辺の広いマージンで腹部の毛を剃るとbetaisodona（betadine）を用いて3回はアルコールが続くエリアを消毒する。目が乾燥から角膜を防ぐために、眼軟膏の製品で潤滑する必要があります。
2. 中央開腹を行い、滅菌、moistured手袋の中に腸を置きます。
3. 慎重に大網を広げる。中央に移植片を置き、8から0（Prolene、エチコン、ドイツ）を使用して単一の縫合糸でそれを凝視する。
4. 完全に大網を移植をカバーし、一つの縫合8から0（Prolene、エチコン、ドイツ）と移植片を修正。
5. 腹部に戻して腸を再配置し、閉鎖する前に暖かい、滅菌生理食塩水で洗い流してください。
6. 2層でクローズアップ - 筋肉と皮膚のための7から0 Vicrylための7から0 Proleneを使用して連続的なパターンと腹壁と皮膚の層。

RECIPIENT：同所移植

1. 切開部位周辺の広いマージンで腹部の毛を剃るとbetaisodona（betadine）を用いて3回はアルコールが続くエリアを消毒する。目が乾燥から角膜を防ぐために、眼軟膏の製品で潤滑する必要があります。
2. 全体喉頭複雑を視覚化するためにストラップの筋肉を分ける。
3. 慎重に、周囲の組織から気管を解剖反回神経を維持するように注意してください。
4. 輪状軟骨から尾側気管3つのリングを分ける。動物は気管切開を介して生理的な呼吸を維持します。
5. 受信者のほか、移植片のクリーン気管エッジを確認してください。
6. 移植片は、解剖学的極性を維持するために欠陥気管と志向受信者との間に介在している。
7. 吻合する遠位（縦隔）気管とドナーの移植片は（Prolene、エチコン、ドイツ）8から0を使用する。吻合の後面は、連続運転方式で実行されます。前面は中断ステッチを使用して完了します。
8. 気道からの分泌物を除去する。
9. 近位吻合は、遠位のものと同じ方法で完了します。
10. 気道と十分な、自発呼吸の整合性を確認してください。
11. ストラップの筋肉を再配置し、連続的なパターンで6から0縫合（Vicryl、エチコン、ドイツ）を使用して皮下組織と皮膚の層を閉じます。
12. 受信者のために注射麻酔を使用して、そのため動物は気管を介して生理的な呼吸を保持します。それぞれプロポフォール、メデトミジンとフェンタニルの75/1/0.2 mg / kgの組み合わせは、、マウスでIP麻酔に使用されます。

図1：ドナー気管。
1A：調製後のin situドナー気管。
1B：摘出ドナー気管。
1C：植後のドナー気管。

図2：異所性モデル。
2A：移植片は、大網の中心に位置しています。
2B：移植片は、単一の縫合糸の両端に固定されている。
2C：移植片を大網に包まれ、一針の縫合で固定されている。

図3：同所性モデル。
3A：移植片がレシピエント気管欠陥と後壁との間に介在され、連続的な実行方法で吻合される。
3B：前壁が単一の縫合糸を使用して完了する。

図4：組織学。
4A：H + E STAで28日後に回収された異所性移植気管ining（15倍）。 100パーセント内腔の閉塞に注意してください。
4Bは：H + E染色（15倍）で60日後に同所性移植気管を回復した。最大達成管腔閉塞は約45％です。

表1：異所性と同所性気管移植の長所と短所。

マウスは別のtransgeneicとノックアウトモデルで提供され、OAD（4）に関連する機械的な問題を研究することが適しています。
このビデオに示されている気管移植の両方のモデルは、OADの開発を研究するための信頼性の高いモデルとして使用することができます。
しかし、各モデルには長所と限界を示しています。

異所性気管移植が容易に実行できますし、特別な外科研修（3、5）を必要としません。異所移植後は、内腔の閉塞は迅速かつ完全な気道閉塞（3、4、6）28日後に表示されるを発生します。それらの生物が異所性移植気管に依存しないので、動物は、物理的に、OAD開発の影響を受けません。

欠点は、移植気管の通気の不足（7,6）であり、したがってそれは、吸入病原体の影響（3、7）を評価することはできません。粘液線毛クリアランスの阻害と剰余分泌物に起因する結果が臨床OAD（7）に見られる生理的な反応とは異なる場合があります。腹膜微小環境はまた、カスタマイズされた検索結果（3）につながる可能性のある胸部環境とは異なります。

同所性気管移植手術のトレーニングを実行するには、60日ではなく、異機種の28日間（3、7）の後に表示される移植気管の必要と内腔の閉塞です。また、達成した最大の内腔の閉塞は、アプリです。 45パーセントの代わりに異所性モデル（3,7）の100％。しかし、同所性モデルでは、生理的な換気が得られ、吸入薬の投与は（3）が可能です。このようなalloreactive IgM抗体の産生などの免疫応答は、異所性モデル（3）よりも、このモデルでははるかに強いことが示されている。気管 - 気管吻合とこのサイトの反応は、クリニック（7）で行わ吻合と、より比較可能である。

各モデルの利点と限界を表1に詳細に示されています。

要約すると、このビデオは両方、マウスにおける異所だけでなく、同​​所性気管移植の技術がOADを研究するために、再現性と信頼性の高いモデルとして使用できることを示しています。

しかし、モデルは、研究の基本的な質問に応じて慎重に選択する必要があります。