The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Dutch was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Children's Hospital, Harvard Stem Cell Institute, Harvard Medical School
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
Current Access Through Your Registered Email Address
LeBlanc, J., Venezia Bowman, T., Zon, L. Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (2), e159, doi:10.3791/159 (2007).
Hematopoietische stamcellen (HSC) zijn een zeldzame populatie van pluripotente cellen die al het bloed gedifferentieerde lijnen gedurende de gehele levensduur van een organisme te handhaven. De functionele definitie van een HSC is een getransplanteerd cel die het vermogen om te herstellen al het bloed lineages van een bestraald ontvanger op lange termijn heeft. Deze benaming is opgericht door tientallen jaren van baanbrekende werk in zoogdieren systemen. Met behulp van hematopoietische stamceltransplantatie (HCT) en omgekeerde genetische manipulaties in de muis, zijn de onderliggende regelgeving factoren van HSC biologie begint te worden onthuld, maar zijn nog steeds grotendeels onder-onderzocht. Onlangs heeft de zebravis ontpopt als een krachtig genetisch model om gewervelde hematopoiesis studeren. Tot vaststelling van HCT in de zebravis zal kunnen wetenschappers de grootschalige genetische en chemische screening methodologieën beschikbaar in zebravis om nieuwe mechanismen die ten grondslag liggen aan HSC regelgeving onthullen gebruiken. In dit artikel tonen we een methode om HCT uit te voeren bij volwassen zebravissen. We tonen de dissectie en voorbereiding van de zebravis hele nier merg, de site van de volwassen hematopoiese in de zebravis en de introductie van deze donor cellen in de circulatie van bestraalde ontvanger vis via intracardiale injectie. Daarnaast beschrijven we de post-transplantatie zorg van de vis in een "ICU" om hun gezondheid op lange termijn te verhogen. In het algemeen, zachte verzorging van de vissen voor, tijdens en na de transplantatie is cruciaal voor het aantal vissen dat meer dan een maand na de procedure, die essentieel is voor de beoordeling van de lange termijn (<3 maanden), innesteling zal overleven toenemen. De experimentele gegevens die worden gebruikt om dit protocol te stellen, zal elders worden gepubliceerd. De oprichting van dit protocol zal zorgen voor de fusie van grootschalige zebravis genetica en biologie transplantatie.
Bestraling
Nier dissectie
Perifere bloed extractie
Injectie
Vis ICU - post-injectie
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.