Traqueotomía: Un método para el trasplante de células madre para el pulmón

Pre-operatorio

1. Receptor de ratón y células de donantes
2. Plataforma de funcionamiento con un hilo de sutura y la cinta
3. 1cc jeringa
4. 23G aguja
5. Anestesia: avertina 25 mg / ml (alternativamente ketamina 9 mg / ml y xylazin 1 mg / ml)
6. Cortapelos con cuchilla # 40
7. Guantes estériles
8. Torundas con alcohol
9. Yodo
10. Esterilizar los instrumentos quirúrgicos
11. Sutura hilo
12. Catéter de 22G
13. 200 ul pipeta (estéril)
14. Esterilizar pipetas
15. Ungüento antibiótico pegamento
16. Sharpie contenedor

Operatorio

Técnicas de asepsia se utilizan en este procedimiento.

1. Pesar del ratón.
2. Inyección intraperitoneal de anestésico (250 mg / kg avertina o, alternativamente, la ketamina 90 mg / kg y xilacina 10 mg / kg) en dosis suficientes para permitir la respiración espontánea, sino que aportan quirúrgica-la concentración de la anestesia. Para la cirugía para comenzar la pizca dedo fue utilizado como un indicador de un dolor profundo, sin respuesta del animal anestesiado.
3. Coloque el ratón con los incisivos escondido en hilo de sutura y la cola para estabilizar la cinta.
4. Broche para el cabello con una cuchilla # 40 clipper.
5. Cambie los guantes (continuar con guantes estériles).
6. Desinfectar con alcohol dos veces antes de la incisión de la piel.
7. Esterilizar la zona con un yodóforo.
8. Utilizando instrumentos estériles hacer una pequeña incisión (<1 cm) en paralelo a la tráquea.
9. Cuidadosamente tejido separado del cartílago.
10. Un empate se inserta debajo de la tráquea.
11. Levante suavemente hacia arriba y atar insertar la aguja en la tráquea expuestos.
12. Se retira la aguja e introduzca el tubo sin problemas, sin embargo, rápidamente, hasta que se sienta una ligera resistencia.
13. Pipeta de células (hasta 50 microlitros de volumen) directamente en el catéter.
14. Inmediatamente retire el tubo y la corbata, mientras que la liberación del ratón de aparatos de maniobra.
15. Si es necesario aplique un lado del ratón en posición vertical (vertical), aferrándose las patas anteriores y se mueven suavemente.
16. Cerrar la herida con una sutura o pegamento con antibióticos.

Post-operatorio

1. Mantenga caliente del ratón.
2. La buprenorfina (0,05 mg / kg) se debe administrar como analgesia postoperatoria cada 12 horas durante las primeras 24 horas después del procedimiento.