The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Department of Molecular Biology and Biochemistry, University of California, Irvine (UCI)
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Davis, J., Crampton, S. P., Hughes, C. C. Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC). J. Vis. Exp. (3), e183, doi:10.3791/183 (2007).
Angiogenesis एक जटिल बहु कदम प्रक्रिया है, जहां angiogenic stimuli करने के लिए प्रतिक्रिया में, नए जहाजों मौजूदा vasculature से बनाया जाता है है. इन चरणों में शामिल हैं: तहखाने झिल्ली प्रसार और प्रवास endothelial कोशिकाओं (अंकुरण) (ईसी) बाह्य मैट्रिक्स, डोरियों, लुमेन गठन, सम्मिलन, और एक नया तहखाने झिल्ली के गठन में चुनाव आयोग के संरेखण में की गिरावट. इन विट्रो assays में कई करने के लिए इस प्रक्रिया का अध्ययन किया गया विकसित किया है, लेकिन अधिकांश केवल angiogenesis के कुछ चरणों की नकल, और आकृति विज्ञान के वाहिकाओं अक्सर vivo में जहाजों समान नहीं है. यहाँ हम का प्रदर्शन इन विट्रो angiogenesis परख है कि मानव नाल की शिरा चुनाव आयोग और fibroblasts इस्तेमाल में अनुकूलित. यह मॉडल angiogenesis की कुंजी प्रारंभिक चरणों के सभी का स्मरण दिलाता है, और महत्वपूर्ण बात वाहिकाओं पेटेंट कहनेवाला polarized चुनाव आयोग द्वारा घिरा lumens प्रदर्शित करते हैं. वेसल्स आसानी से चरण विपरीत और समय चूक माइक्रोस्कोपी द्वारा मनाया जा सकता है, और बहाव के अनुप्रयोगों के लिए शुद्ध रूप में बरामद.
प्रक्रिया
नोट: Endothelial कोशिकाओं (unactivated) एक cobblestone भूमिका है. Endothelial कोशिकाओं अलगाव के बाद कभी कभी सही (लंबे और नुकीले) सक्रिय है, के एक जोड़े के बाद गुजरता है वे आम तौर पर एक unactive राज्य में लौटने.
सफाई
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.1% Collagenase | 10ml per cord, warmed to 37°C | ||
| Tissue culture flasks | T75, one per cord. | ||
| Hanks medium | |||
| scissors | sterile | ||
| beaker | sterile | ||
| 50 ml tubes |
may you tell me wath kind of collagenase do you use? thank you!
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ReplyPosted by: loryMay 16, 2008, 5:47 AM