The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
Authors
The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
This translation into Arabic was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
1Department of Physical Electronics, Faculty of Engineering, Tel Aviv University, 2Department of Biomedical Engineering, Washington University in St. Louis, 3Department of Biological Sciences, University of Illinois, 4Department of Cell Research and Immunology, Tel Aviv University
This article is a part of JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.
Recommend JoVE to Your LibrarianCurrent Access Through Your IP Address
You do not have access to any JoVE content through your current IP address.
IP: 50.16.17.90, User IP: 50.16.17.90, User IP Hex: 839913818
Current Access Through Your Registered Email Address
You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please sign in or create an account with your institutional email address to access this content.
Danielli, A., Porat, N., Ehrlich, M., Arie, A. Rapid Homogeneous Detection of Biological Assays Using Magnetic Modulation Biosensing System. J. Vis. Exp. (40), e1935, doi:10.3791/1935 (2010).
IL - 8 مقايسة :
MMB النظام :
ممثل النتائج :
قدم الفحص البصري من الخرز المجمعة فرق واضح بين التفاعل مع الهدف والتفاعل من دون هدف. في ردود الفعل على كل شيء مع هذا الهدف ، شكلت الخرز واحد ، التجميعية الكثيفة التي انتقلت من وإلى شعاع الليزر بطريقة توحد. ومع ذلك ، في رد فعل كل ذلك من دون هدف ، كانت حبات أقل مجمعة وحركتهم كان أقل توحيد (انظر الشكل 1).
الشكل 1 : التفتيش البصري المناعية الساندويتش "(أ) دون هدف IL - 8 (ب) والهدف IL - 8.
وتعرض على مدار الساعة التشكيل قطب (الصفراء) وإشارة الناتج PMT (أرجواني) ، في حين كشف 0.48 بيكو غرام IL - 8 المستهدفة في الشكل 1 (أ). تردد التحوير لكل قطب هو في 2 هرتز. لكن ، وكما كان متوقعا من الناحية النظرية ، عند حبات تمرير شعاع ليزر ، ويكشف PMT ضوء الفلورسنت وهناك قمة في انتاج التيار الكهربائي PMT. لذلك ، تردد هو الإستخلاص في 4 هرتز. عندما يتم تغذية إشارة PMT وعلى مدار الساعة ، تضاعف التعديل (في 4 هرتز) للقفل في مكبر للصوت ، في مرحلة حساسة للكشف عن بالكشف عن التزامن والنتائج مع الجهد العالي (انظر الشكل 2).
الشكل 2 : (أ) على مدار الساعة التشكيل (الأصفر) ، وإشارة PMT (أرجواني) عند الكشف 0.48 بيكو غرام IL - 8 المستهدفة. (ب) وتأمين التيار الكهربائي أدى إلى مكبر للصوت على اثنين من يمسح مختلفة.
لم القفل في مكبر للصوت لا يكشف عن أي إشارة عندما تم اختبار عينة السيطرة. هذه الحقيقة ، جنبا إلى جنب مع الفرق البصرية في التجميع تشير إلى أن نظام MMB يمكن تحديد واضح لوجود IL - 8 المستهدفة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
باختصار ، لقد أظهرنا أنه يمكن استخدام هذا النظام MMB للكشف عن وجود IL - 8 هدف في تركيزات منخفضة (0.5 بيكو غرام هو الحد من الكشف عن فحوصات دقيقة بيو برو خلوى الصفيف [3،4]). لا يقتصر على قدرة النظام على IL - 8 ، ويمكن استخدامها للكشف عن البروتينات الأخرى. مزايا نظام MMB هي القدرة على كشف الهدف بسرعة ودون أي خطوة الانفصال أو الغسيل. وبالتالي ، تسهل عملية الكشف ويسمح استخدام هذا النظام في التطبيقات الميدانية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
وأيد هذا العمل جزئيا من صندوق هورويتز إيشايا.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set | Bio-Rad | 171-B5008M | |
| Recombinant human IL-8 target | Thermo Fisher Scientific, Inc. | R202625 | |
| Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8 | BD Biosciences | 554718 | |
| Streptavidin coupled fluorescent protein | Bio-Rad | Streptavidin PE |
2
ReplyPosted by: Michael TuAugust 19, 2010, 2:26 PM