The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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1University Heart Center Hamburg, Transplant and Stem Cell Immunobiology Lab (TSI), University Hospital Hamburg, 2Stanford University School of Medicine
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Stubbendorff, M., Deuse, T., Hammel, A., Robbins, R. C., Reichenspurner, H., Schrepfer, S. Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy. J. Vis. Exp. (46), e1989, doi:10.3791/1989 (2010).
पुरानी अस्वीकृति के अनुसंधान मॉडल प्रत्यारोपण vasculopathy (TVP) के विकास के दौरान pathobiological और pathophysiological प्रक्रियाओं की जांच के लिए आवश्यक हैं.
सामान्य रूप से उपयोग किए जाने वाले हृदय पुरानी अस्वीकृति अध्ययन के लिए पशु मॉडल heterotopic हृदय प्रत्यारोपण प्रयोगशाला में rodents प्रदर्शन मॉडल है. यह मॉडल प्रयोगों में व्यापक रूप से प्रयोग किया जाता है ओनो और Lindsey (3) के बाद से उनकी तकनीक प्रकाशित. रक्त वाहिकाओं में निष्कर्षों का विश्लेषण करने के लिए, हृदय के लिए sectioned हो गया है और सभी जहाजों के लिए मापा जा.
एक अन्य विधि हृदय questionings में जीर्ण अस्वीकृति की जांच महाधमनी प्रत्यारोपण (1, 2) मॉडल है. Orthotopic महाधमनी प्रत्यारोपण मॉडल में, महाधमनी आसानी histologically मूल्यांकन किया जा सकता है (2). PVG के लिए - ACI मॉडल CAV पढ़ाई के लिए विशेष रूप से उपयोगी है, के बाद से तीव्र संवहनी अस्वीकृति एक प्रमुख confounding कारक है और cyclosporin एक उपचार (सीएसए) CAV के विकास को रोकने नहीं है, हम क्या नैदानिक सेटिंग में मिल समान (4 नहीं है ). सीएसए के 7 दिन की अवधि के इस मॉडल में आवश्यक है तीव्र अस्वीकृति को रोकने और TVP के विकास के साथ दीर्घकालिक अस्तित्व हासिल है.
यह मॉडल भी तीव्र सेलुलर और xenogeneic मॉडल (5) में मीडिया परिगलन अस्वीकृति की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
लगभग 250-300g वजन चूहे चार्ल्स नदी (Sandhofer Weg 7, डी - Sulzfeld 97,633) से खरीदा जाता है.
प्रत्यारोपण दाताओं के रूप में PVG चूहों, और प्राप्तकर्ताओं के रूप में ACI चूहों का उपयोग कर प्रदर्शन कर रहे हैं.
चूहे पारंपरिक शर्तों खिलाया मानक चूहे चाउ और पानी विज्ञापन libidum के तहत रखे जाते हैं.
सभी शल्य चिकित्सा उपकरणों से पहले निष्फल कर रहे हैं उपयोग करने के लिए.
दाता की तैयारी:
Isoflurane के साथ चूहे (2,5-3%) एक प्रेरण कक्ष का उपयोग anesthetize.
प्राप्तकर्ता:
Isoflurane के साथ चूहे (2,5-3%) एक प्रेरण कक्ष का उपयोग anesthetize. शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के दौरान शरीर का तापमान बनाए रखा है.
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कई कारणों के लिए हम orthotopic महाधमनी प्रत्यारोपण मॉडल एक और अधिक सटीक TVP के heterotopic हृदय प्रत्यारोपण मॉडल की तुलना में विकास की जांच रास्ता मिल गया:
सर्जिकल तकनीक के बारे में, महाधमनी प्रत्यारोपण मॉडल एक आसानी से संभव विधि का प्रतीक हैं, केवल अंत करने के लिए अंत के सम्मिलन की सिद्धि की आवश्यकता है, जबकि heterotopic हृदय प्रत्यारोपण मॉडल एस सर्जन के कौशल के लिए एक और अधिक जटिल और त्रुटि प्रवण चुनौती माना जा सकता है दो प्रमुख जहाजों पर अंत करने के लिए पक्ष सम्मिलन की आवश्यकता होती है.
और histological नमूनों के विश्लेषण और माप काफी प्रत्यारोपण vasculopathy के बाद से कई छोटे हृदय आकार और संविधान में एक विशाल विविधता है जो उद्देश्य को पाने में अन्वेषक बाधा सकता दिखाने वाहिकाओं के अन्वेषण के बजाय एक एकमात्र परिभाषित व्यास का एक ही बर्तन में जांच की जा सकती है मदद की है और विश्वसनीय परिणाम. प्राप्तकर्ता के वक्ष महाधमनी सामान्य नियंत्रण के रूप में सेवा, व्यास और morphological रूप में तुलना की एक आसान और विश्वसनीय वस्तु की पेशकश कर सकते हैं, जबकि heterotopic हृदय प्रत्यारोपण मॉडल में यह पेरी या दौरे एक महान interindividual परिवर्तनशीलता अंतर्निहित जहाजों की तुलना करने के लिए मुश्किल है.
इन निष्कर्षों के अलावा, महाधमनी allografts के रूप में विघटनकारी histological परिवर्तन है कि लागू शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं से परिणाम कर सकते हैं करने के लिए प्रवण नहीं हैं. फाइब्रोसिस या infarctions में होते हैं और संभवतः heterotopic हृदय प्रत्यारोपण के ऊतकों और एम्बेडेड वाहिकाओं को प्रभावित हो सकता है, उन्हें मूल्यांकन के लिए अनुपयुक्त प्रतिपादन.
इसके आकार और संविधान के कारण, महाधमनी संवहनी दीवार के तीन परतों, जैसे गाढ़ा intimal उमड़ना की डिग्री में myocyte परिगलन में से हर एक के भीतर एक रूपिम, जैव रासायनिक और आणविक remodeling के सरल और सटीक जांच करने के लिए एक आदर्श का विषय है मीडिया या साइटोकिन्स और वृद्धि कारकों की वृद्धि हुई संश्लेषण.
प्रतिरक्षा एक महाधमनी allograft द्वारा उत्पन्न प्रतिक्रिया वास्तव में प्रत्यारोपण में पुरानी परिवर्तन ट्रिगर करने के लिए पर्याप्त है, लेकिन तीव्र अस्वीकृति एपिसोड (2) को प्रेरित करने के लिए अपर्याप्त था पाया. भ्रष्टाचार के इस मध्यवर्ती प्रतिरक्षाजनकता के लिए धन्यवाद, कोई प्रत्यारोपण तीव्र अस्वीकृति और CSA के साथ कोई प्रारंभिक immunosuppressive उपचार आवश्यक है करने के लिए खो दिया है. मॉडल के इस प्रकार अक्सर heterotopic हृदय प्रत्यारोपण (2, 4) में देखा प्रभाव या रोगनिरोधी प्रतिरक्षादमन द्वारा मिलावट के बिना पुरानी allograft vasculopathy पर दवाओं की प्रारंभिक प्रभाव की जांच करने के लिए सक्षम बनाता है.
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ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
लेखकों उसे histological काम के लिए Christiane Pahrmann धन्यवाद.
अनुदान
सोनिया Schrepfer ड्यूश Forschungsgemeinschaft (DFG) (/ SCHR992 1 3 और SCHR992/4-1) से एक शोध अनुदान प्राप्त हुआ है.]
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical microscope (magnification 25x) | |||
| Isoflurane | |||
| shaver | |||
| Provo-Iodine | |||
| ice cold 0.9% saline | |||
| prewarmed 0.9% sterile saleine | |||
| eye ointment | |||
| glove | |||
| microsurgical scissirs | |||
| forceps | |||
| clamps | |||
| 8-0 suture (prolene) | |||
| 6-0 suture (prolene) | |||
| 5-0 suture (prolene) | |||
| Carprofen | |||
| Metamizol | |||
| Q-tips |
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ReplyPosted by: PD Dr.D.BailSeptember 5, 2011, 10:19 AM