النظامية والمحلية تسليم المخدرات لعلاج أمراض الجهاز العصبي المركزي في المجموعات القوارض

Serwer, L., Hashizume, R., Ozawa, T., James, C. D. Systemic and Local Drug Delivery for Treating Diseases of the Central Nervous System in Rodent Models. J. Vis. Exp. (42), e1992, doi:10.3791/1992 (2010).

اختبار دقيق قبل السريرية للنظام العصبي المركزي (CNS) المداواة يتضمن النظر في طرق الإدارة وكيل biodistribution في تقييم فعالية العلاج. بين التصنيفين الرئيسية للإدارة ، ويفضل كثير من الأحيان المحلية مقابل النظامية ، ونهج التسليم النظامية نظرا لسهولة الإدارة. ومع ذلك ، قد يؤدي إلى تسليم النظامية تركيز الدواء الأمثل يتحقق في الجهاز العصبي المركزي ، وتؤدي إلى استنتاجات خاطئة بشأن فعالية عامل. الطرق المحلية تسليم المخدرات هي أكثر الغازية ، ولكن قد يكون ضروريا لتحقيق مستويات الدواء العلاجية الجهاز العصبي المركزي. هنا ، علينا أن نظهر الأسلوب السليم لمدة ثلاث طرق لتقديم الأدوية الجهازية : الحقن في الوريد ، وحقن داخل الصفاق ، وبالتزقيم عن طريق الفم. بالإضافة إلى ذلك ، نعرض طريقة لتسليم المحلي إلى الدماغ : الحمل محسنة التسليم (CED). يتم تضمين استخدام المركبات التي تحمل علامات fluorescently عن التصوير في الجسم الحي ، والتحقق من الدواء المناسب. وتعرض الأساليب باستخدام نماذج الفئران ، ولكن يمكن بسهولة أن تتكيف لاستخدامها في الفئران.

1. طرق التسليم النظامية

على الرغم من التسليم النظامية من الأدوية ليست هي الأسلوب الأكثر كفاءة لتحقيق تركيزات عالية المخدرات في الجهاز العصبي المركزي والتسليم النظامية هي مريحة ومقبولة بشكل جيد من قبل المرضى. هنا ، سوف نظهر الإجراءات المناسبة لمدة ثلاثة تستخدم بشكل روتيني نهج الإدارة النظامية : الحقن في الوريد ، وحقن داخل الصفاق ، وبالتزقيم عن طريق الفم.

ألف حقنة وريدية (الذيل حقن الوريد)

1. قبل البدء في الإجراء ، يجب تسجيل وزن الجسم كل الماوس. كما هو الحال مع جميع الدراسات قبل السريرية ، ينبغي مراقبة وزن الجسم بشكل منتظم (مرتين في الأسبوع أو أكثر) لتقييم إمكانية سمية الدواء. ينبغي حقن ما لا يزيد عن 1 ٪ من وزن جسم الفأر في حجم في وقت واحد. على سبيل المثال ، ينبغي أن لا يزيد عن حقن السوائل في 0.2mL ماوس 20G. ويجب تعقيم كل سوائل حقن في الوريد عن طريق الأسلوب المناسب.
2. يجب أن تكون درجة حرارة الماوس لمدة 5-10 دقائق باستخدام وسادة التدفئة أو مصباح الحرارة لتمدد الأوردة الذيل. إذا باستخدام مصباح الحرارة ، ورصد الماوس في جميع الأوقات لتجنب ارتفاع الحرارة.
3. يتم نقل الماوس لجهاز القابضة التي يقيد الماوس بينما تسمح بالوصول إلى الوريد الذيل (انظر الفيديو). في ذيل الفأر هناك أربع سفن مرئية : السفن على الجانبين الظهرية والجانبية والأوردة ، والسفينة على الجانب البطني هو الشريان. للوصول إلى الوريد الذيل ، ويقام ذيل الفأر في النقطة الأكثر القاصية ، وتناوب 90 درجة بحيث الوريد تواجه صعودا. يتم تنظيف موقع الحقن مع مسحة الكحول ويتم إدخال حقنة الانسولين 28g ، جنبا مشطوف تصل ، في هذا السياق (انظر الفيديو). إذا تم وضعها بشكل صحيح الإبرة في الوريد ، فإنه ينبغي أن تتحرك بحرية ودون ضغوط. حقن الدواء ببطء حتى مع الضغط على 5-10 ثواني. إذا نفطة يظهر على الذيل ، والتوقف عن طريق الحقن ، وهذا يدل على أن الإبرة لم يعد في الوريد.
4. بعد الحقن ، وتطبيق ضغط لطيف على موقع الحقن حتى يتوقف النزيف. هذا يستغرق عادة 30-60 ثانية. رصد الماوس لمدة 5-10 دقائق بعد الحقن لضمان أنه لا يوجد أي نزيف آخر.

حقن داخل الصفاق B.

1. قبل البدء في عملية الحقن ، ينبغي تحميل المخدرات في محقنة موصولة إلى إبرة 28g. تأكد من أن هناك مساحة في حقنة الظهر لجذب الغواص قبل الحقن (على سبيل المثال ، إذا كان عن طريق الحقن 200μL ، تأكد من أن القدرة الحقنة 300μL أو أكبر).
2. إزالة الماوس من القفص بواسطة ذيله ووضعه على سطح مركب ، بحيث الماوس لديه شيء لقبضة. غطاء قفص وعادة ما يكفي. السماح للماوس على امتداد جسمها ثم استخدام الخاص غير المهيمنة اليد ، فهم الجلد في الجزء الخلفي من الماوس ، مع الحرص على قرصة خفيفة الجلد قدر الإمكان بين الإبهام والأصابع مؤشر والمتوسطة (انظر الفيديو). بدوره الماوس فوق بحيث البطن من الفأر تواجه صعودا. إذا كان الماوس يمكن ان تتحرك بحرية رئيسها ، والإفراج عن قبضة وحاول مرة أخرى ، وذلك لتجنب التعرض للعض خلال الحقن.
3. مع يدك المهيمنة ، التقط حقنة وادخال الإبرة بزاوية 30 درجة في الربع السفلي الأيمن من الماوس (انظر الفيديو). وعقد الماوس مقلوب قليلا يساعد على تحريك الأجهزة بعيدا عن موقع الحقن. للتأكد من أن الإبرة في الفضاء داخل الصفاق ، والتراجع على المكبس المحاقن. إذا أي سائل أو دم يظهر في المحاقن ، ثم الإبرة ليست في الفضاء داخل الصفاق ، وينبغي إزالتها. إذا لم يستنشق السائل إلى المحقنة ، ثم حقن محتويات الحقنة مع الضغط حتى على 1-5 ثانية ، والإفراج عن الماوس.
4. رصد الماوس لمدة 5-10 دقائق بعد الحقن للتأكد من أن الماوس يعود إلى مستويات النشاط العادي.

جيم الفم بالتزقيم

1. قبل البدء في عملية الحقن ، وسجل وزن الماوس. حجم الأقصى التي يمكن أن تقدمها بالتزقيم الفم 10ML لكل كيلوغرام من وزن الجسم. على سبيل المثال ، فإن الحد الأقصى لحجم ماوس 20G يكون 200μL. محاولة لضخ كميات أكبر قد يؤدي إلى ارتداد ، والتي تسبب عدم اكتمال تسليم المخدرات. إذا كان ذلك ضروريا لإدارة كميات أكبر مما هو مذكور أعلاه ، قد يكون ما يصل الى تديرها ثلاث جرعات على مدى 24 ساعة.
2. لتجنب ثقب المريء ، وأنه من المهم لقياس طول الإبرة بالتزقيم لكل الماوس. عقد غيض الكرة 18G إبرة مقوسة بالتزقيم في الضلع الأخير من الماوس ، ثم وضع علامة على طول الحافة رأس الفأر باستخدام علامة دائمة (انظر الفيديو). خلال أنبوب تغذية ، وسوف تكون هذه العلامة نقطة توقف عند إدراج الإبرة في الفم من الفأرة.
3. كبح الماوس باستخدام قبضة اليد نفسها لحقن داخل الصفاق. ادخال الإبرة بالتزقيم في الفم ، وعلى اللسان ، وأدفاNCE الإبرة من خلال البلعوم. لا تدخل الإبرة الماضي علامة التوقف. وينبغي أن الإبرة بسلاسة دون أي ضغط (انظر الفيديو). إذا واجهت ضغوطا ، ووقف وسحب الإبرة لتجنب حقن السوائل في الرئتين.
4. مع الإبرة في المكان ، أكثر من كساد الغطاس 1-5 ثواني ثم قم بإزالة الإبرة في نفس الزاوية التي تم إدراجها. رصد الماوس لمدة 5-10 دقائق ، مع إيلاء اهتمام وثيق للأي علامات ضيق التنفس والتي قد تدل على أن السائل قد دخل الرئتين.

2. التسليم المحلية

الحادة الحراري المدعم التسليم

ألف دقق البناء

قنية الجزر CED المقاوم للقوارض غير متاحة تجاريا بعد. هنا فإننا سوف يبرهن على وجود طريقة لبناء قنية التي تم تكييفها من أسلوب وصف لأول مرة من قبل Krauze آخرون (Krauze 2005).

• قنية في ثلاثة أجزاء (الشكل 1) : 100uM أنابيب قطرها السيليكا التي من خلالها تدفق infusate وإبرة معدنية صلبة للحصول على الدعم الهيكلي ، ومرنا تفلون أنابيب لتحميل infusate.
• للحصول على إبرة معدنية صلبة ، واستخدام لهب مكشوف لإذابة البلاستيك على قسطرة الرابع Surflo (24G مرود) واستخدام ملاقط إزالة الإبرة المعدنية. ويمكن تجاهل بقية القسطرة. قطع طول أنابيب السيليكا (OD 0.163mm) ، أطول قليلا من الإبرة المعدنية ، وذلك باستخدام شفرة حلاقة واحدة الحافة. دور أنابيب السيليكا في قطرة صغيرة من cyanoacrylate لاصقة سريع المفعول إلى (على سبيل المثال Krazy الغراء) ، مع الحرص على عدم الحصول على أي الغراء على طرفي الأنبوب. إدراج أنبوب السيليكا في إبرة معدنية والسماح جافة لمدة 5 دقائق.
• مرة واحدة جافة ، يجب أن تكون أنابيب السيليكا الملصقة بحزم الإبرة. وينبغي أن يقص طرفي السيليكا بحيث 2mm ويبرز من أنابيب السيليكا من نهاية وأشار من إبر ويبرز من 3mm أنابيب من السيليكا نهاية المسطحة (انظر الفيديو).
• قطع جزء من الطول 20 تفلون أنابيب في الطول. لفة الإبرة المعدنية في قطرة صغيرة من مادة لاصقة ، مع الحرص على عدم مرة أخرى للحصول على الغراء على طرفي الأنبوب السيليكا لأن هذا سوف تسد قنية. ادخال الإبرة في تفلون أنابيب إلى عمق 1cm. اسمحوا جافة لمدة 1 دقيقة. باستخدام مسدس الغراء ، وتطبيق قطرة من الصمغ الساخن إلى المشترك بين الإبرة المعدنية والأنابيب تفلون (انظر الفيديو). ضمان تغطية كاملة مشتركة من جميع الاطراف والسماح جافة على الأقل 1 ساعة. ويمكن إجراء Cannulas تصل إلى أسبوع مقدما وتخزينها في درجة حرارة الغرفة.

باء تسريب الداخلي

• الى اعداد منطقة العمليات الجراحية ، يجب رش جميع الأسطح بمطهر ، مثل حل الكلورهكسيدين 2 ٪. يجب ارتداء القفازات الجراحية المعقمة أثناء العملية. ثم تتم تغطية الأسطح مع الستائر ماصة. ينبغي وضع الإمدادات التالية في مجال العمليات الجراحية :
  • سادة التدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم الماوس
  • صغيرين أطباق بتري ، واحدة تحتوي على 3 ٪ فوق أكسيد الهيدروجين ، واحدة تحتوي على الكلورهكسيدين 2 ٪
  • شاش معقم والقطن مسحات
  • المتاح المشارط معقمة (رقم 21)
  • 22g الإبر المعقمة
  • الماوس التجسيمي الإطار
  • تسيطر معدل ضخ حقنة
  • تعقيمها الماوس دباسة الجلد ، والدبابيس ، ومزيل التيلة
• لانشاء وقنية CED ، نعلق حقنة 1mL للأنابيب من التفلون باستخدام مجموعة من محولات المحاقن البلاستيكية. يجب اضافته للقنية إلى الإطار التجسيمي بحيث يكون عموديا على سطح الجراحية (انظر الفيديو). لتطهير قنية ، وملء محقنة 1mL مع الايثانول 70 ٪ وخفض المكبس لتشغيل الايثانول من خلال قنية. كرر هذه العملية باستخدام المياه المالحة عقيمة ، وتحقق من وجود أي تسرب حول المفاصل قنية. لتطهير السطح الخارجي للقنية ، تمسح برفق مع الايثانول 70 ٪ مسح.
• سد قنية مع المالحة عقيمة وسحب ثم مرة أخرى على حقنة بحيث يتم رسم فقاعة الهواء الصغيرة في قنية. هذا وسوف فقاعة الهواء فصل infusate من المياه المالحة في قنية. ثم ، backload الخاص infusate (انظر الفيديو). الاتصال المحقنة إلى ضخ حقنة ورئيس ضخ عن طريق تشغيل لفترة وجيزة قنية.
• انخفض رزين الماوس باستخدام حقن مخدر وإعداد الجلد ينظف عدة مرات (50-10 ثوان) مع قطعة من الشاش المعقم في حل الكلورهكسيدين 2 ٪. ينبغي أن يطبق مرهم عيني على الماوس للحفاظ على رطوبة كافية أثناء الإجراء. باستخدام مشرط معقم ، وخلق شق السهمي على طول وسط الجمجمة ، ما يقرب من 1.5cm طويلة (انظر الفيديو). ثم يتم تنظيف سطح الجمجمة باستخدام قطعة قطن مبللة في محلول بيروكسيد الهيدروجين 3 ٪. الحرص على تجنب الحصول على بيروكسيد الهيدروجين في أعين من الفأرة. ينبغي للخطوط الدرز من الجمجمة يكون واضحا في هذه النقطة : إذا لم تكن مرئية ، مسحة بلطف الجمجمة مع الابنبوي مسحة القطن غارقة في 3 ٪ بيروكسيد الهيدروجين الحل.
• تحديد bregma (الشكل 2) ومن ثم قياس 2mm وإلى اليمين و1MM الخلفي لهذا الهيكل لتحديد موقع الحقن في الوريد. استخدام إبر معقمة 22g ، وخلق بلطف ثقب في الجمجمة في هذه النقطة التواء الإبرة ضد الجمجمة (انظر الفيديو). تجنب إجبار الإبرة الهبوطي أمام الجمجمة.
• عند هذه النقطة ، يجب وضع الماوس في الإطار التجسيمي وتبدأ في تلقي استنشاق مخدر (انظر الفيديو). إدارة مخدر عند مستوى منخفض (1 ٪) ، وترصد بدقة الماوس لإجراء تغييرات في معدل التنفس ، وضبط مخدر وفقا لذلك.
• موقف قنية خلال ثقب في الجمجمة ومن ثم انخفاض 3mm تحت سطح الجمجمة. بدء التسريب ، وذلك باستخدام النسب التالية وفترات :

  0.1 ميكرولتر / دقيقة لمدة 5 دقائق
  0.2 ميكرولتر / دقيقة لمدة 5 دقائق
  0.5 ميكرولتر / دقيقة لمدة 5 دقائق
  0.8 ميكرولتر / دقيقة 7.5 دقيقة
  OFF لمدة 1 دقيقة

• في نهاية التسريب ، إزالة ببطء قنية والمسحة الجمجمة مع بيروكسيد الهيدروجين 3 ٪. تطبيق الشمع معقمة لثقب العظام (انظر الفيديو). باستخدام الملقط ، واستخلاص الجلد معا خلال الجمجمة والأساسية لإغلاقه. وينبغي أن تدار البوبرينورفين لتخفيف الألم بعد الجراحة.
• رصد الماوس بعد العملية حتى يستعيد وعيه والتنقل. بسبب طول الإجراءات ، فإنه قد يستغرق فترة تصل الى ساعة لالماوس لاستعادة النشاط الكامل. خلال هذا الوقت مكان القفص الماوس على وسادة تدفئة لتجنب انخفاض حرارة الجسم ، وليس لمنزل الماوس يتعافى مع الفئران نشطة أخرى.
• يجب إزالة المواد الغذائية الجلد أسبوع واحد بعد الجراحة.

C. في التصوير فيفو

ولا يمكن تصوير infusate Fluorescently ذات العلامات التالية CED الإدارة ، ويمكن رصد التغيرات في كثافة إشارة فضلا عن موقع الإشارة. عادة ، فمن الأفضل أن ننتظر 2-3 بعد ساعات من ضخ للصورة ، وذلك للسماح للماوس على التعافي من التسريب.

• للتخدير أثناء التصوير ، واستخدام مستوى منخفض من مخدر استنشاقه. موقف الماوس ، حتى الجانب الظهري ، وذلك في مركز التصوير (على سبيل المثال ، IVIS ومينا ، العلوم الحياتية الفرجار ، ألاميدا ، كاليفورنيا). باستخدام الإعداد المناسب لتصفية ثر التي يتم تصويرها ، والحصول على صورة ما. لCED ، ينبغي أن يكون التسريب الناجحة تظهر معظم المواد في الدماغ قرب موقع التسريب (الشكل 3).

3. ممثل النتائج

وعدم وجود رد فعل سلبي على ادارة العلاج مؤشرا هاما على نجاح الحقن. على سبيل المثال ، وبعد حقن الوريد الذيل ينبغي أن يكون هناك أي تغيير في المظهر (على سبيل المثال ، وحجم ولون) من الذيل. ومن شأن فقاعة أو نفطة بعد حقن الوريد ذيل تشير تحت الجلد ، وليس عن طريق الوريد ، وتقديم العلاج. لحقن داخل الصفاق ، قد نتوء على الجلد أو تغير لونها من البطن تشير الحقن تحت الجلد أو تلف الهياكل الداخلية. بالتزقيم في الفم ، جاهد ماوس مع التنفس أو السعال قد يشير إلى أنه تم حقن السوائل في الرئتين ، وليس في المعدة.

لCED ، عصبية وظيفة مهمة لتقييم الادارة الناجحة للعلاج. قد يكون تلقى فأر أن نستعرض المضبوطات أو فالج ضخ غير لائق. إذا تم استخدام infusate الفلورسنت ، ويمكن في مجال التصوير فيفو تطبيقها لتقييم الادارة الناجحة (الشكل 3). إذا لم تكن مترجمة infusate الى موقع الحقن ، وكان التسريب لم تكن ناجحة.

الشكل 1 : قنية CED والجراحي مجموعة المتابعة. العناصر الأساسية لتسليم الحراري محسنة الجراحية انشاء ترد. ويرد مضخة microinfusion (A) إلى قنية تسريب (B ، كما هو موضح في أعلى الموسع). ويستخدم الإطار التجسيمي (C) لتحديد موضع التحقيق. هذه الصورة لا تشمل التدفئة والمعدات المستخدمة أيضا التخدير أثناء العملية.

الشكل 2 : خطوط ماوس خياطة الجمجمة. يمكن أن يكون موجودا في موقع الحقن CED (النجم الاحمر) عن طريق تحديد تقاطع الخيوط السهمي والإكليل (وbregma) وقياس ثم 2mm والجانبي والخلفي من 1MM bregma.

الشكل 3 : النتائج ممثل من دائرة الهندسة المدنية الناجحة. لىوقد غرست posomes المسمى مع صبغة حمراء بعيدة الفلورسنت في مخ الفأر والتقط بواسطة CED سواء في فيفو وفيفو السابقين. والتسريب الناجحة تظهر إشارة الفلورسنت المترجمة إلى موقع التسريب سواء في الجسم الحي (A) وخارج الجسم الحي (B). وينبغي أن تكون مترجمة إشارة إلى نصف الكرة الأرضية التي غرست دون تسرب في نصف الكرة الأرضية المقابل.

الشكل 4 : صورة ممثل CED الناجحة في الدماغ الجرذ. وقد غرست الليبوزومات Fluorescently المسمى في الدماغ الفئران. في الفئران ، ويمكن أكسب بقدر 20μL. ويمكن التحقق منها زيادة سماكة الجمجمة الفئران وعمق الحقن يمنع التصوير في الجسم الحي ، ولكن الصحيح مكان الحقن بواسطة التصوير فيفو السابقين من تشريح الدماغ.

يجب تقييمها قبل السريرية لفعالية أي وكيل علاجية تأخذ بعين الاعتبار الخصائص الدوائية وكيل والنسيج المستهدف من الفائدة. في حين أن الأساليب المنهجية في الإدارة العامة أكثر سطحية وأكثر تحملا من قبل المرضى ، والانتقائية في حاجز الدم في الدماغ غالبا ما يستلزم التسليم المحلي من العلاج لعلاج مرض الجهاز العصبي المركزي. هنا ، لقد أثبتنا أسلوب واحد من التسليم المباشر للدماغ : CED. الأشكال الأخرى للتسليم المحلي إلى الدماغ وتشمل الإدارة المباشرة للالسائل النخاعي ، intratumoral حقن البلعة ، والحقن البطيني. عن هذه الأساليب ، الإنتشارية العلاجية من المهم للغاية ، مع الحد من انتشار سوء منطقة التغطية لبضعة ملليمترات من موقع الحقن (جاين 1989 ، بوبو 1994). في المقابل ، CED يستخدم الضغط الايجابي لزيادة مجال توزيع المخدرات (بوبو 1994) ، في حين لا تزال مواتية لاستهداف المنشآت العلاجية تشريحي عصبي معين. في المختبر لدينا ، لقد نجحنا في تنفيذ CED في الدماغ وكذلك في putamen المذنبة في القوارض (الشكل 4).

أصبحت القدرة على إجراء CED في نماذج القوارض متزايد الأهمية في تكوين الجمعيات مع الاهتمام المتزايد في تعظيم الكفاءة العلاجية عند علاج مختلف أنواع مرض الجهاز العصبي المركزي. ويمكن استخدام CED لتقديم مجموعة متنوعة من العوامل ، بما في ذلك تنقية البروتينات والعقاقير جزيء صغير ، والفيروسات (جيل 2003 ، ديجين 2003 ، Szerlip 2007). مجموعة من الأمراض التي يمكن علاجها مع CED يشمل سرطانات الجهاز العصبي المركزي (ياماشيتا 2007) وكذلك الأمراض العصبية مثل مرض باركنسون (جيل 2003). والبحوث مستمرة في توسيع دائرة الهندسة المدنية ، وضرورة التصوير في الجسم الحي من CED تدار العلاج هو زيادة مماثلة. في حين أظهر التصوير فلوري هنا سيكون من المحتمل أن لا تكون مرئية من خلال الجمجمة البشرية ، وتوظيف أساليب أخرى شاركت في ضخ عوامل التباين التصوير بالرنين المغناطيسي (ديكنسون 2008) وجذب الاهتمام لتقييم تطبيق لرصد infusates في المرضى الذين يعانون من أمراض الجهاز العصبي المركزي.

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي أثبتت هنا الحيوان UCSF الرعاية المؤسسية واللجنة الاستخدام.

NS65819 (CDJ ، TO) ، NS049720 (CDJ) ، CA097257 (CDJ ، TO) ، CIRM DR1 - 01426
نود أن نشكر راكيل سانتوس لتقديم المساعدة التقنية.

1. Bobo, R.H., Laske, D.W., Akbasak, A., Morrison, P.F., Dedrick, R.L., Oldfield, E.H. Convection-enhanced delivery of macromolecules in the brain. Proc. Natl. Acad. Sci. 91, 2076-2080 (1994).
2. Degen, J.W., Walbridge, S., Vortmeyer, A.O., Oldfield, E.H., Lonser, R.R. Safety and efficacy of convection-enhanced delivery of gemcitabine or carboplatin in a malignant glioma model in rats. J Neurosurg, 99, 893-898 (2003).
3. Dickinson, P.J., LeCouteur, R.A., Higgins, R.J., Bringas, J.R., Roberts, B., Larson, R.F., Yamashita, Y., Krauze, M.T., Noble, C.O., Drummond, D.C., Kirpotin, D.B., Park, J.W., Berger, M.S., Bankiewicz, K.S. Canine model of convection-enhanced delivery of liposomes containing CPT-11 monitored with real-time magnentic resonance imaging: laboratory investigation. J Neurosurg, 108, 989-998 (2008).
4. Gill, S.S., Patel, N.K., Hotton, G.R., O'Sullivan, K., McCarter, R., Bunnage, M., Brooks, D.J., Svendsen, C.N., Heywood, P. Direct brain infusion of glial cell line-derived neurotrophic factor in Parkinson disease. Nature Medicine, 9, 589-595 (2003).
5. Jain, R.K. Delivery of novel therapeutic agents in tumors: physiological barriers and strategies. J Natl Cancer Inst., 81, 570-576 (1989).
6. Krauze, M.T. Saito, R. Noble, C.O., Tamas, M., Bringas, J., Park, J.W., Berger, M.S., Bankiewicz, K. Reflux-free cannula for convection-enhanced high-speed delivery of therapeutic agents. J Neurosurg, 103, 923-929 (2005).
7. Krauze, M.T., Vandenberg, S.R., Yamashita, Y., Saito, R., Forsayeth, J., Noble, C.O., Park, J.W., Bankiewicz, K. Safety of real-time convection-enhanced delivery of liposomes to primate brain: a long-term retrospective. Exp Neurol, 210, 638-644 (2008).
8. Murad, G.J., Walbridge, S., Morrison, P.F., Garmestani, K., Degen, J.W., Brechbiel, M.W., Oldfield, E.H., Lonser, R.R. Real-time, image-guided, convection-enhanced delivery of interleukin 13 bound to pseudomonas exotoxin. Clin Cancer Res,. 12, 3145-3151(2006).
9. Ozawa, T. and James, C.D. Human Brain Tumor Cell and Tumor Tissue Transplantation Models, in CNS Cancer: Models, Markers, Prognostic Factors, Targets, and Therapeutic Approaches (Van Meir E, ed.), pp. 147-162, Humana Press-Springer, New York, NY, 2009.
10. Szerlip, N.J., Walbridge, S., Yang, L., Morrison, P.F., Degen, J.W., Jarrell, S.T., Kouri, J., Kerr, P.B., Kotin, R., Oldfield, E.H., Lonser, R.R., Real-time imaging of convection-enhanced delivery of viruses and virus-sized particles. J Neurosurg, 107, 560-567 (2007).
11. UCSF IACUC Standard Procedures http://www.iacuc.ucsf.edu/Policies/awStandardProcedures.asp Accessed January 8, 2010.
12. Yamashita, Y., Krauze, M.T., Kawaguchi, T., Noble, C.O., Drummond, D.C., Park, J.W., Bankiewicz, K.S. Convection-enhanced delivery of a topoisomerase I inhibitor (nanoliposomal topotecan) and a topoisomerase II inhibitor (pegylated liposomal doxorubicin) in intracranial brain tumor xenografts. Neuro Oncol, 9,20-28 (2007).

0 Comments

You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.