The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Turkish was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE General

Bayan A. aegypti Sivrisinek içine dsRNA enjeksiyon

1, 1, 2

1Department of Molecular Biology and Biochemistry, University of California, Irvine (UCI), 2Department of Molecular Biology and Biochemistry, Department of Microbiology and Molecular Genetics, University of California, Irvine (UCI)

You must be subscribed to JoVE to access this content.

This article is a part of   JoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.

Recommend JoVE to Your Librarian

Current Access Through Your IP Address

You do not have access to any JoVE content through your current IP address.

IP: 54.234.126.92, User IP: 54.234.126.92, User IP Hex: 921337436

Current Access Through Your Registered Email Address

You aren't signed into JoVE. If your institution subscribes to JoVE, please or create an account with your institutional email address to access this content.

 

Video Article Chapters

Cite this Article: Bayan A. aegypti Sivrisinek içine dsRNA enjeksiyon

Luna, B. M., Juhn, J., James, A. A. Injection of dsRNA into Female A. aegypti Mosquitos. J. Vis. Exp. (5), e215, doi:10.3791/215 (2007).

Abstract: Bayan A. aegypti Sivrisinek içine dsRNA enjeksiyon

Ters genetik yaklaşımlar sivrisinek vektör patojenler için hangi genlerin altta ya direncini belirlemek için son derece yararlı olduğu kanıtlanmıştır. Bu video protokolü James laboratuar tarafından dsRNA kadın dang virüs limanı A. aegypti sivrisinek, içine enjekte etmek için kullanılan bir yöntem gösteriyor. , Enjeksiyon iğneleri kalibre, enjeksiyon kurulum manipüle ve toraks içine enjekte dsRNA tekniği gösterilmiştir.

Protocol: Bayan A. aegypti Sivrisinek içine dsRNA enjeksiyon

  1. Cam kılcal tüpler çekerek mikroenjeksiyon iğneler olun. Biz bir iğne çektirme, Sutter Enstrüman CO (Model P-2000) kullanın. İğne çektirmesi programın özellikleri şunlardır:

    ısı: 275
    Fil: 3
    vel: 37
    del: 250
    pul: 125

  2. Iğneler bilinen bir su hacmi (örneğin, 1 ul) yükleyin ve ince bir sharpie elle ölçek işareti.
  3. Sivrisinekler için bir enjeksiyon sonrası fincan kadar ayarlayın. İlk olarak 1000 ul pipet ucu kapalı dışarıdaki ucu kesilir. Sonra, bir fincan yan tarafına bir delik ve fincanda pipet kalan kısmını takın. Net veya kapak fincan üstüne koyun.
  4. Iki strafor kutulara buz ile doldurun. Place stereomicroscope altında buz kutusu # 1 ve buz üzerinde bir cam Dürbün yerleştirin.
  5. CO 2 ve buz kutusu # 2 yetişkin ile fincan yetişkin sivrisinek anestezisi.
  6. DsRNA enjeksiyon için iğne hazırlayın. (Enjeksiyon blok aşağıdaki açıklamayı görmek için), enjeksiyon blok plastik hortum dsRNA ile dolu iğne koyun.
  7. Fincan saat camı forseps ile bir anestezi sivrisinek hareket ettirin. Sivrisinek manikür enjeksiyon iğne ucu kırın. Bu sivrisinek atın.
  8. Enjeksiyon için iğne sivrisinek toraks içine eklenir. Serbest elinizle "dinlenme pozisyonu", "enjeksiyon pozisyonu" enjektörü valf ayarlamak ve piston dsRNA, istenilen miktarda enjekte edilmiş kadar sıkıştırabilirsiniz.
  9. Enjeksiyon sonrası kabına yerleştirin sivrisinek enjekte etti.

Enjeksiyon bloğu kurmak

  1. Bir kül engellemek için, 50 ml şırınga Fix.
  2. Şırınganın sonuna kadar en az 2 hava çıkışları ile ayarlanabilir bir 1-yollu vana takın.
  3. Hava geçirmez bir plastik hortum, 1 hava prize takın.
  4. Hortumun ucunu bir mikropipet adaptörü takın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures: Bayan A. aegypti Sivrisinek içine dsRNA enjeksiyon

Ask the Author: Bayan A. aegypti Sivrisinek içine dsRNA enjeksiyon

0 Comments

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter