The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health, Johns Hopkins University
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Das, S., Garver, L., Dimopoulos, G. Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae). J. Vis. Exp. (5), e221, doi:10.3791/221 (2007).
このプロトコルは、昆虫館での蚊の飼育について説明します。昆虫館のお部屋は12時間で、℃、〜80％湿度28で保持されます。昼/夜サイクル。この手順では、蚊のケージ10％滅菌ショ糖溶液、ペーパータオル、ビーカー、ワットマン濾紙、ガラスフィーダー、ヒトの血液や血清、水浴、パラフィルム、蒸留水、きれいなプラスチックトレイ、蚊の食べ物を（説明する必要があります以下）、成人を収集するトレー、真空、及び収集チャンバーをカバーするために蚊帳。
モスキート食べ物：
ブラッド：
動物またはヒトの血液は、背面蚊に使用することができます。新鮮な血液が注射器で採取し、血液の各10 mlのCPD（抗凝固）の1mlを含む滅菌15ミリリットルファルコンチューブに入れ、その後穏やかに混合し、5分間2000rpmで、室温で遠心分離する。上清を他の血液細胞（例えばWBC）を含むバフィーコートを除去するために世話をして、破棄されます。 RBCペレットをピペッティングによりRPMI培地の等量に懸濁し、そしてさらにこの培地で3回洗浄する。最終洗浄後、ペレット化赤血球はRPMI培地の等量に再懸濁させ、4℃（8-10日間保持することができます）で保存。ちょうど授乳する前に、RBCは（RPMIで）セルダウンペレットに（5分間2000rpmで）遠心分離され、パックされたRBCは40％のヘマトクリットを取得するために血清（O +ヒト血清）中に再懸濁されている。血液を37℃で常に送りのために保持されている必要があります。
1日目：
3日目：
4日目：
デイズ5 - 8：
DAYS 9〜12：
13日目 - 15：
3日間 - サナギは、次の2の成人に現れるが許可されています。食品は、慎重に大人のエスケープを避けるためにネットを除去することによって幼虫/蛹に毎日与えられます。
16日目：
17日目 - 21：
注 ：蚊飼育法と異なるラボで多少のバラツキができる各種の方法があるかもしれません。
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| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Food A | Aquaricare | Grounded fish food. A small pinch needs to be added. | ||
| Food B | Purina | Grounded cat food. A small pinch needs to be added. | ||
| Food C | Purina | Cat food. Two tablets needs to be added | ||
| RBC | prepared red blood cells: 40% hematocrit in human serum | |||
| RPMI | Medium | |||
| CPD | anticoagulant | |||
| serum | O+ human serum | |||
| Mosquito feeder | ||||
| parafilm | ||||
| Anopheles gambiae | mosquitos | |||
| 10% sucrose | mosquito food | |||
| insectary |
1. Bangs, M. J., Soelarto, T., Barodji., Wicaksana, B. P. and Boewono, D. T.. 2002. Colonization of Anopheles maculatus from Central Java, Indonesia. J Am Mosq Control Assoc. 18(4):359-63.
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8. Stobart, R. H. 1971. Factors affecting the control of body volume in the larvae of the mosquitoes Aedes aegypti and Aedes detritus. Edw. J. Exp. Boil. 54: 67-82.
For your information, there are four larval instars/stages not three as mentioned in the section Late Stage Larvae.
An alternative to collecting adult mosquitoes by sucking is to pick the pupae into a cup with water and place the cup in the adult cage. This does not require an advanced apparatus or the work of mouth aspirating. Also, there is no risk of the pupae escaping as with adults. The disadvantage of picking pupae is that it has to be done on a daily basis, but with good planning of the feeding it is possible to avoid picking the main bulk of the pupae on weekends.
Olle Terenius, University of California, Irvine, USA
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ReplyPosted by: AnonymousMarch 13, 2008, 3:46 PM