The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

Automatic Translation

This translation into Hebrew was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages

 JoVE Application Notes

רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

Robert S. Plumb

Pharmaceutical Business Operations, Waters Corporation

 

Sign in to register to receive emails with product information.

Abstract: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

כימות של רמות זכר אנליטי בכל מטריצה ​​מורכבת דורש גלאי סלקטיבי מאוד ספציפיים. Xevo ווטרס ™ tq-S היא מופע חדש גבוה טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה, מצויד בטכנולוגיה חדשה ™ StepWave, המאפשר רמות חסרות תקדים של רגישות איכות רפאים.

זיהוי של עקבות רמות (pg / mL) של analytes כגון תרופות, מטבוליטים, מזהמים או רעלים מטריצות מורכבות כגון פלזמה, דם, או מוצרי מזון ממלא תפקיד חיוני בהבטחת התרופה ובטיחות מזון. כאשר פעלו ניטור התגובה מרובות, או MRM, מצב, LC / MS / MS הוכיחה להיות בטכניקה של בחירה עם סלקטיביות וספציפיות חריגים, ורגישות.

כאשר הרגישות ספקטרומטריית מסה של מערכת איזון בין האות מ יון (ים) של עניין את האות מהרעש רקע לא רצויים (יחס אות לרעש), את הרגישות הכללית תלויה יעילות של מכשיר הדגימה יון במקור יונים אופטיקה ההעברה. דגימה יון היא איזון עדין בין בעל פתח גדול מספיק על מנת למקסם את הדגימה של יוני במקור electrospray, אך לא גדול מדי כדי לסכן את ואקום הכוללת במערכת. עם זאת, תהליך הדגימה מקור שואבת לא רק יונים טעונים, אך מינים נייטרלי לתוך האזור ספקטרומטר מסה ואקום. אלה חייבים קודם להיות מופרדים מן יונים טעונים. תהליך זה מבוצע במדריך יון המקורי שבו יונים הראשון להיכנס לתוך MS, מושגת בדרך כלל על ידי מערכת hexapole סוג.

חדש ווטרס Xevo ™ tq-S ספקטרומטר מסה מצויד StepWave רומן ™ מדריך יון. מדריך זה יון מספק נתיב לקזז דרך אשר הרצוי יונים יכול לנסוע דרך מטען אלקטרוסטטי. לא רצויות, תרכובות רקע נייטרלי טעונים אינם מסוגלים לעשות את זה דרך השביל יון לקזז, והם מותשים לבזבז. זה תהליך חדש למקסימום את יעילות הדגימה יון, מה שמוביל לרמות נמוכות יותר של רגישות.

הנה, זה יהיה הפגינו כיצד טכנולוגיה tq-StepWave Xevo יכול להגדיל את הרגישות לניתוח חשיפה נמוכה תרופות מטבוליטים שלהם בפלסמה דגימות דם.

Protocol: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

Xevo tq-S רגישות עבור bioanalysis של תרופות חשיפה נמוכה פלזמה

  1. בסדרה של שש תרכובות פרמצבטיות (איור 1), כי כאשר במינון לבני אדם יש ריכוז נמוך במחזור מערכתית, היו מומס ומדולל לתוך הפלזמה בטווח pg / mL 0.1-100.
  2. תרופות היעד חולצו מן הפלזמה באמצעות מיצוי שלב מוצק עם אואזיס ® SPE. הדגימות שחולצו היו אז מחדש תלויה מתנול / מים פתרונות.
  3. דגימות חילוץ הופרדו chromatographically באמצעות ACQUITY UPLC ® System עם ביה UPLC ACQUITY אתיל בריג'ט היברידי C18, 2.1 x 50 מ"מ, 1.7 טור מיקרומטר ו שיפוע שלב התהפכה מעל 2 דקות.
  4. הניתוח בוצע על MS ספקטרומטר Xevo ™ tq-S המוניים פעלו electrospray יון חיובי במצב MRM, עם רכישת סימולטני של הנתונים סריקה מלאה. רגישות זו UPLC חדש / MS / MS מערכת זו בהשוואה לזו המתקבלת ספקטרומטר מסה דומה עם מדריך hexapole יון קונבנציונאלי, כמו גם עם אחרים במקביל quadrupole MS מערכות.

תוצאות עבור נציג bioanalysis של תרופות חשיפה נמוכה פלזמה

הרגישות של מערכת UPLC / MS / MS עם יון StepWave מדריך הושווה להנחות את יון קונבנציונאלי באמצעות תרכובות מודל התרופות הראו כי רגישות המערכת היה פי 10 מזה של מערכת רגילה. רמות הכוללת של רגישות שהושגו במשך שש תרכובות מודל התרופות מפורטים (איור 1 ולוח 1). רמת התגובה על תקן pg / mL 5 של Fluticasone או propionate היה נחוש בדעתו להיות 574 עם מערכת קונבנציונאלי 12053 עם מערכת StepWave מאופשר חדש (איור 2).

איור 1
איור 1: שישה מתחמים מודל התרופות ששימשו בניסוי זה.

טבלה 1
טבלה 1: רמות תגובה מוגברת שהושגו במשך שש תרכובות מודל התרופות כאשר מדריך יון StepWave היה בהשוואה להנחות את יון קונבנציונאלי.

איור 2
איור 2: רמת התגובה תקן pg / mL 5 של Fluticasone או propionate היה נחוש בדעתו להיות 574 עם מערכת קונבנציונאלי 12053 עם StepWave מאופשר החדש של המערכת.

Discussion: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

Xevo חדש tq-S-MS עם StepWave הטכנולוגיה מגדילה באופן משמעותי את הרגישות של מערכת UPLC / MS / MS. היכולת להשיג רמות נמוכות מאוד של רגישות מאפשרת תרכובות להתגלות מטריצות מורכבות כגון פלזמה ו בסרום ברמות נמוכות מאוד. רמות נמוכות של זיהוי המוענקת על ידי tq-S Xevo MS עם StepWave הטכנולוגיה מאפשרת לשלב חיסול פרמוקוקינטיים של תרופות המועמד שייקבע בצורה מדויקת יותר, שיפור איכות הנתונים הן והערכה בטיחות.

Disclosures: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

כותב המאמר הזה הוא עובד של ווטרס Corporation.

Acknowledgements: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

פול ריינוויל, ווטרס Corporation, מילפורד, תואר שני בארה"ב

Materials: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

Name Company Catalog Number Comments
Xevo TQ-S Mass Spectrometer Waters More information available at http://www.waters.com Mass Spectrometer
ACQUITY UPLC System Waters More information available at http://www.waters.com Chromatography System
ACQUITY UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 m Column Waters More information available at http://www.waters.com Chromatography Column
Oasis Sample Extraction Products Waters More information available at http://www.waters.com Solid Phase Extraction

Ask the Author: רגישות גבוהה חדש טנדם quadrupole ספקטרומטר מסה על ניתוח כמותי LC / MS / MS של תרופות חשיפה נמוכה - פרסומת

1 Comment

I liked this video. But I would like to see tissue preparation to proteomics analysis by LC/MS/MS. Preferencially brain sample and membrane receptors proteomics.
Thanks

1

Reply

Posted by: Ulisses A.November 8, 2012, 4:53 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Waiting
simple hit counter